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一种新型快速检出分枝杆菌变色液体培养基的评价
结核病的早期发现主要靠实验室诊断,涂片抗酸染色(或荧光染色)找抗酸杆菌阳性率低(10%~20%);常用的固体培养基阳性率虽可达40%。但时间长。尽管BACTEC 460TB检测系统能快速检出分枝杆菌,但其仪器及试剂价格昂贵、且有放射性污染[1]。近年来,变色液体培养基在国外应用的越来越广泛[2]。我们将一种新型的分枝杆菌快速变色液体培养基与改良罗-琼(Lowenstein-Jensen,L-J)培养基进行了比较研究,现将结果报道如下。 一、材料 1.标准菌株:人型结核分枝杆菌、浅黄色分枝杆菌、草分枝杆菌、戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、胞内分枝杆菌、马耳摩分枝杆菌、爱知分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、偶发分枝杆菌、副偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟亚种、龟分枝杆菌脓肿亚种、耻垢分枝杆菌、次要分枝杆菌、非洲分枝杆菌、胃分枝杆菌、不产色分枝杆菌、金色分枝杆菌、新金色分枝杆菌、鸟分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、卡介苗和蟾蜍分枝杆菌由我们研究所保藏。 2.标本:141份临床标本,其中139份痰、1份伤口脓性分泌物和1份支气管肺泡灌洗液。 3. 快速变色液体培养基:由深圳市怡百世生物技术有限公司提供。其主要成分为磷酸盐缓冲液、谷氨酸钠、多种维生素、多种微量元素、甘油、马血清、变色剂以及甲氧苄氨嘧啶、氨苄青霉素、多粘菌素B、两性霉素B和萘啶酸等多种抗生素。 4. 改良罗-琼(L-J)培养基:按照文献[1]配制。 二、方法 1.取对数生长期的标准人型结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌于含10%吐温80磨菌瓶中,磨菌混匀,用无菌磷酸盐缓冲液调其浊度为No1 MacFarland单位,再用无菌磷酸盐缓冲液作1∶10系列稀释,各分别接种100 μl于变色液体培养基和改良L-J培养基,37℃培养。当培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀时,取少量液体涂片,进行金胺O荧光染色证实为分枝杆菌。 2. 标本处理:标本经2~4倍体积的4%NaOH消化20 min,离心10 min,沉淀经无菌磷酸盐缓冲液洗涤2次,再加入400 μl无菌磷酸盐缓冲液,混匀后,分别取200 μl接种于变色液体培养基和改良L-J培养基,37℃培养。 3.结果观察与报告:变色培养基接种后,每24 h观察1次,2周后每周观察3次,若培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀,经荧光染色证实有分枝杆菌时,报告分枝杆菌生长阳性。改良L-J培养基接种后3 d、7d观察结果,以后每周观察1次。8周未见液体培养基变紫红色或底层有紫色颗粒沉淀,固体培养基上未见菌落,报告分枝杆菌培养阴性。
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消化性溃疡内镜快速病原体诊断与内镜快速治疗
目的:探索内镜快速诊出消化生溃疡的病原菌并同内镜针对病因的快速治疗效果和根除率.方法:内镜快速诊治消化性溃疡的一次完成法,首选胃窦黏膜内和溃疡白厚苔的活检.测l min尿素酶(one minrteureasetest,1 minUT),黏膜涂片快速中性红染色检出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp),海曼螺杆菌(Helicobacterheilmannil,Hh)及白苔中的真菌(fungi)等病原菌(etiologicmicrobes),在内镜诊察胃腔黏膜病变的2-3 min内,消化性溃疡(peptic ulcer,PU)病原体(microorganism)感染信息就已确诊.针对病因的内镜快速治疗:(1)胃窦、体、底黏膜内注射3联或5联抑菌治疗;(2)溃疡边缘内的抑酸、促溃疡愈合及杀真菌的黏膜内注射治疗.两种局部治疗皆7 d,1次,直到PU愈合为内镜S期,HP,Hh,fungi清除为止.全身系统治疗:(1)国际PPI,三联或四联bid×7 d口服;(2)静脉三联3-5 d;(3)对fungi性PU(ketoconazole 200 mg,qd×10 d口服);(4)巩固治疗,于7d后进行(omeprazole20mg or ranetidine300mg,qn×4wk口服),停止一切治疗1 mo后内镜复查,以判定病原菌的根除率.用内镜诊治一次完成法共诊治PU 1284例为研究对象.结果:按快速诊出PU病原菌及局部用药分为4组:Hp性PU,EGF组,(n=100);Hp性PU,用复方L-谷氨组(n=1082)Hh性PU组(n=70);Fungi-Hp双重感染性PU组(n=32).各组第1次均经内镜快速检出病原菌及针对病原同内镜治疗.对病原体胃窦、体、底黏膜内注射三联或五联抑菌治疗以及在溃疡周围黏膜内注射抑酸、抑菌、促溃疡愈合的三联治疗,皆7d/次.至PU愈合为内镜瘢痕治愈期(scarring stage,S).结果为PU平均2 wk治愈,愈合质量100%达内镜S期,病原菌根除率高达90.6-95.7%.复发率低到1.4-9.4%.结论:内镜快速检出消化性溃疡的病原菌并同内镜针对PU病原和促PU快速愈合的胃黏膜内局部抑菌、抑酸、促PU愈合的三联、五联剂等诊治PU技术,他是国内外目前治疗PU的理想的好办法.显示出PU治愈快,仅10 d左右,愈合质量高,使PU 100%达到内镜S期,病原菌根除率高达90.6-95.7%,而PU的年复发率降低到1.4-94%等国际高水平.
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做好群体伤救护的组织管理,有效提高抢救效率和抢救成功率
我院是城市中心镇医院,地处城区和高速公路汇接点,对于处理各种交通事故具有便利的条件.为了做好群体伤救护的组织管理,有效减少死亡和伤残率,有效提高救治率,我院成立专题课目研究组,对急诊科在2002年1月~2005年1月间接收31批群体伤伤员105例的救护组织管理经验进行初步的总结和分析.对采用常规检诊法和采用快速检诊法的两种救护方案进行比较,认为后一种方案具有预检导诊时间短,容易组织实施等特点,是一种较好的群体伤救护方法.群体伤是指突然发生的交通事故、工伤、自然灾害、爆炸以及群体斗殴等引起的大宗伤员伤亡,其特点是发生突然、时间急、伤员多,伤情复杂、抢救难度大、社会影响大等.在发生群体伤时,对群体伤伤员抢救成功与否,不仅检验医院的急救能力,更重要的是反映了医院对群体伤员救护组织管理是否严密[1、2].针对常规的预检导诊方法存在耗时较长的缺陷,我们对群体伤伤员在常规的预检导诊基础上进行了改进,对救护组织管理进行了探讨,采用快速检诊法,即按检诊分类-抢救观察-分流后送为一体的救护方案,充分合理发挥护理人员力量,保证救治工作顺利开展,提高了抢救效率和抢救成功率.
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我国东北地区患者血培养阳性病原菌的分布及其耐药性分析
菌血症和败血症为主的血行性感染具有低发生率,高危险性的特点[1].虽然广谱抗菌药物广泛用于临床,但血行性感染的病死率并无明显的下降,美国血行性感染病死率高达14%-63%,明确病原菌后采用针对性治疗,可降至5%-17%[2-4].国内虽未见系统血行性感染的临床研究报道.但及时快速检诊导致血液感染病原菌,了解菌群分布和耐药性分布及其变迁,对于在感染早期合理经验用药有重要的意义.
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检测花斑癣菌的两种方法比较
花斑癣是糠秕马拉色菌引起的浅部真菌病[1,2].在临床检测技术上,大多采用刮取法取材,10%KOH涂片直接镜检,虽能快速检出真菌,但阳性率较低,特别对皮损表面皮屑少的患者,用刀片刮取法不容易取到病原菌,故检测率更低,对指导临床用药带来一定困难.
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聚凝胺配血法快速检出抗-C抗体1例
患者由于输血、移植、妊娠等原因产生不完全抗体,当再次输入带有对应抗原的血液时,可发生抗原抗体反应,引起输血反应.应用聚凝胺配血方法,可有效地检出相关抗体,并解决患者急需输血的配血困难.笔者应用聚凝胺方法配血,发现1例抗-C抗体所致的配血不合,现报告如下.
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尿沉渣镜检快速诊断尿路感染
诊断尿路感染通常是采用细菌培养的方法,由于所需时间长,检出率低,直接影响临床诊断用药.为此,我们在日常工作中利用尿沉渣镜检,快速检菌计数方法,对尿路感染的诊断方法做了一些探讨,现报告哪下:
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免疫荧光微菌落法快速检出痢疾杆菌的试验
免疫微菌落染色法快速诊断霍乱弧菌,国内报道认为是一项简易的敏感性特异性好的新技术,而在一些地区推广使用,但由于该方法使用的是非特异性美兰染色,样品中的各种固形物质及粪便颗粒等亦被不同程度的着色,以及检测样品培养时间长时,部分需氧菌形成的菌膜与微菌落易相混等[1],而存在非特异性问题等.
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聚凝胺法快速检出抗-E所致配血不合1例