一测多评法测定穿心莲及其制剂中内酯类成分

目的 建立穿心莲及其制剂消炎利胆片的一测多评定量测定方法.方法 在建立穿心莲4种主要内酯类成分同步测定方法的基础上,测定新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯与穿心莲内酯的相对校正因子,考察其重现性,并在穿心莲药材及消炎利胆片中加以应用；同时采用外标法测定其中4种内酯类成分的量,并比较计算值与实测值的差异.结果 用一测多评法对39批穿心莲药材和30批消炎利胆片中4种内酯类成分进行测定,药材测定计算值与实测值(外标法)相对误差＜5％,消炎利胆片测定计算值与实测值(外标法)相对误差＜8％.结论 同步测定穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的一测多评法可用于穿心莲药材及消炎利胆片的质量控制.

Box-Behnken效应面法优化穿心莲内酯-PLGA微球处方研究

目的 采用Box-Behnken实验设计方法,对穿心莲内酯微球处方进行优化.方法 以聚乳酸羟基乙酸(PLGA)为药物载体,采用溶剂挥发法制备穿心莲内酯微球.分别以PLGA质量浓度、聚乙烯醇(PVA)质量浓度、油水相体积比为考察对象,以载药量和包封率为评价指标,采用Box-Behnken效应曲面法筛选穿心莲内酯微球的佳处方.结果 穿心莲内酯微球的优处方为PLGA为0.20 g/mL,PVA为18 mg/mL,油水相体积比为1∶90 (0.011),所得微球的载药量为(47.21±2.36)％,包封率为(90.15±3.48)％,与模型预测值接近.结论 Box-Behnken实验设计可用于穿心莲内酯微球的处方优化筛选.

基于质量源于设计(QbD)理念优化穿心莲内酯固体脂质纳米粒

目的 基于质量源于设计(QbD)理念优化穿心莲内酯(And)固体脂质纳米粒(And-SLNs).方法 采用热熔乳化-高压均质法制备And-SLNs.以And-SLNs的包封率、粒径分布为评价指标,首先应用Plackett-Burman实验设计筛选出对And-SLNs性质影响显著的处方和工艺变量,然后对筛选出的变量应用Box-Behnken效应面法进一步优化.采用Malvem粒度仪测定And-SLNs的粒径分布和Zeta电位,透射电镜考察其形态;并考察And-SLNs的体外释药行为.结果 And-SLNs的包封率为(91.4±3.7)％,粒径为(258.4±42.1)nm,Zeta电位为(-36.1±3.4)mV,透射电镜显示And-SLNs粒径均一,呈球状分布,48 h累积释放度为52.4％.结论 在And-SLNs开发过程中应用QbD理念优化是可行的.

穿琥宁在7种输液中的稳定性考察

穿琥宁(脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯单钾盐,potassium dehydroandrographolide succinate,PDS)是以穿心莲内酯为原料的半合成药物,具有抗炎解热作用,对病毒性肺炎、病毒性上感及急性细菌性痢疾等有较好疗效[1].

薄层扫描法测定穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量

采用薄层扫描法测定了15 批穿心莲商品药材中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量,并进行了比较.结果脱水穿心莲内酯高于穿心莲内酯的占26.7%,穿心莲内酯高于脱水穿心莲内酯的占53.3%,两者含量差异在±10%以内的占20.0%.

穿心莲内酯的研究进展

穿心莲内酯为二萜内酯类化合物,结构复杂,人工合成困难,国内均从植物中提取.提取分离方法有醇提法、水提法、微波和超声波辅助提取法.其具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病等多种药理作用.利用Micllael加成、羟基上的反应、分子内环化、分子内酯环化等反应进行结构修饰取得了新的研究进展.随着对其药理作用及其机制以及结构修饰的深入研究,将极大地促进穿心莲内酯类新药的研究和开发.

HPLC法测定清火栀麦胶囊中脱水穿心莲内酯

清火栀麦胶囊由穿心莲、栀子、麦冬3味中药制成的胶囊剂,具有清热解毒、凉血消肿之功效,主要用于咽喉肿痛、发热、耳痛、目赤.该制剂收载于<中华人民共和国卫生部药品标准>中药成方制剂第16册,但标准中没有定量测定项目.为有效控制该药品的质量,本实验对方中主药穿心莲中的主要成分脱水穿心莲内酯采用反相高效液相色谱法进行测定.本方法操作简便、准确、重现性好,可作为清火栀麦胶囊的定量测定方法.

超临界状态下压力对穿心莲内酯萃取结晶的影响

目的利用超临界CO2萃取结晶技术纯化穿心莲内酯.方法采用系统观察法考察了超临界CO2萃取结晶分离对穿心莲内酯晶体形态、纯度、结晶量的影响,并采用扫描电镜、HPLC法分析结果.结果穿心莲内酯晶体形态随压力的升高而变细、变短;随着压力的升高,晶体纯度提高,结晶量增加.结论超临界CO2能萃取并同步高效结晶分离穿心莲内酯,为开发高质量中药活性成分提供一条捷径.

穿心莲内酯-羟丙基-β-环糊精包合物的鉴定和热力学稳定性研究

目的 制备和鉴定穿心莲内酯-羟丙基-β-环糊精包合物,并考察穿心莲内酯和羟丙基-β-环糊精之间的包合摩尔比及包合过程的热力学常数.方法 采用冷冻干燥法制备穿心莲内酯-羟丙基-β-环糊精包合物,采用差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射(XRD)和红外光谱法(IR)对包合物进行鉴定,通过表观溶解度法考察包合物中主客分子之间的包合摩尔比及包合过程的热力学常数.结果 25、35、45 C下穿心莲内酯和羟丙基-β-环糊精能形成1:1摩尔比包合物,相溶解度图呈AL型,包合过程为放热反应.结论 穿心莲内酯-羟丙基-β-环糊精包合物能显著增大药物的溶解度.

HPLC-ELSD法测定穿心莲片中穿心莲内酯

穿心莲片是穿心莲提取浸膏制得薄膜衣片,具有清热解毒、凉血消肿之功效,临床用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮等.其活性成分主要是以穿心莲内酯为代表的二萜内酯类化合物及其葡萄糖衍生物[1,2].穿心莲内酯的测定方法有分光光度法、薄层扫描法、HPLC-UV法[3～5]等.本实验采用HPLC-ELSD法测定穿心莲片中穿心莲内酯,结果表明该法简便、精确，是一种检测穿心莲制剂中穿心莲内酯的有效方法.

大鼠在体肠吸收穿心莲内酯的特征研究

目的 为探讨穿心莲内酯生物利用度低的原因,考察穿心莲内酯肠道吸收特性,肝肠循环和肠道酶代谢特点.方法 采用大鼠在体肠灌流模型.运用HPLC法测定肠灌流液、胆汁以及经肠道酶降解后样品中穿心莲内酯的量.结果 穿心莲内酯在不同肠段的吸收率,以十二指肠高,达40%,而在结肠低,仅有10%.穿心莲内酯在十二指肠灌流液中的生物降解显著(1 h降解约50%),在回肠、结肠中则几乎无降解反应.穿心莲内酯有胆汁排泄,其排泄量为灌流药物总量的0.76%.结论 穿心莲内酯在大鼠肠道的吸收较差,而在十二指肠中吸收表现较好是由于存在较强的肠道酶代谢作用.同时,穿心莲内酯存在明显的肝肠循环.穿心莲内酯生物利用度低的原因与肠吸收差、肠道酶代谢作用强和肝肠循环有关.

UPLC-Q-TOF-MS筛选穿心莲中亲和Caco-2细胞的活性成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术筛选穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分.方法 利用Caco-2细胞进行药物摄取结合药物吸收转运实验共同筛选穿心莲的亲和活性成分,采用UPLC-Q-TOF-MS测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分.结果 从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基脱水穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3-去氧脱水穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9)和1种未知成分.结论 结合UPLC-Q-TOF-MS技术建立的筛选穿心莲中与Caco-2细胞亲和活性成分的方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

穿心莲药物对辐射损伤效应影响的初步研究

目的 探讨市售穿心莲药物制剂对辐射损伤的影响.方法 采用高效液相色谱法分析市售的穿心莲注射液和穿心莲内酯滴丸两种不同剂型药物中穿心莲内酯含量;体外实验采用乳腺癌细胞系(MCF-7和MDA-MB-231)研究穿心莲药物对γ射线照射后乳腺癌细胞生存率的影响;体内实验采用C57 BL/6鼠研究穿心莲药物对5.0 Gy和9.0 Gy的γ射线照射后的小鼠的辐射损伤的影响.结果 穿心莲注射液和穿心莲内酯滴丸的穿心莲内酯含量分别为0.214 mg/ml和5.82 mg/粒;两种药物都上调了体外培养的乳腺癌细胞的放射敏感性;对5.0 Gy照射的C57 BL/6鼠的造血系统表现出一定保护作用,但是对9.0 Gy照射的C57 BL/6鼠则表现出辐射损伤协同作用.结论 穿心莲药物在不同照射剂量下可对辐射损伤既表现出保护又表现出协同损伤的双向作用.

HPLC法测定复方双花片中绿原酸、咖啡酸、连翘苷、穿心莲内酯和木犀草素

目的 建立同时测定复方双花片中绿原酸、咖啡酸、连翘苷、穿心莲内酯和木犀草素的方法 .方法 采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈–0.4%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长切换0~16 min(327 nm)、16~30 min(228 nm);体积流量:1.0 mL/min;柱温:30℃,进样量:10μL.结果 绿原酸、咖啡酸、连翘苷、穿心莲内酯和木犀草素在161.6~1616.0 ng(r=1.0000)、12.48~124.80 ng(r=0.9999)、14.30~143.04 ng(r=0.9998)、13.48~134.80 ng(r=1.0000)、8.72~87.20 ng(r=1.0000)线性关系良好;平均回收率分别为101.15%、98.72%、101.42%、99.15%、98.76%,RSD值分别为1.83%、2.58%、1.69%、1.20%、1.96%.结论 该方法 操作简单,专属性强,为更好地评价复方双花片质量提供了参考.

穿心莲内酯原料中有关物质和稳定性研究

目的 建立RP-HPLC法测定穿心莲内酯中有关物质,并对穿心莲内酯原料进行不同影响因素的稳定性考察,了解影响其稳定性的具体因素.方法 采用反相高效液相色谱法,菲罗门Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长为224 nm,柱温为30℃,体积流量为1.0 mL/min,流动相为乙腈-甲醇-水梯度洗脱.考察穿心莲内酯原料药在不同pH值、氧化、高温、高湿、强光照条件下的稳定性.结果 穿心莲内酯及其3个有关物质得到了很好地分离,所建立的有关物质方法经验证,表明专属性、重复性及稳定性均良好.穿心莲内酯固体状态较为稳定；在溶液状态对氧化和pH 3～5条件较为稳定,在碱性介质、高温、光照条件下均不稳定.结论 该方法可以很好地用于穿心莲内酯的质量控制,穿心莲内酯在溶液状态下总体稳定性较差,该结果为穿心莲内酯及其相关制剂研究提供一定参考.

穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用

目的 探讨穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及其作用机制.方法 采用噻唑蓝比色(MTT)法分析穿心莲内酯对RAW264.7细胞活力的影响.通过脂多糖处理RAW264.7细胞24 h建立细胞炎症模型,造模前1 h用穿心莲内酯2.5、5、10、20μmol/L预处理.荧光定量PCR法检测RAW264.7细胞内相关抗氧化应激酶基因和iNOS水平.穿心莲内酯单独处理RAW264.7细胞24 h,Western blotting法检测Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白和Keap1、Nrf2、HO-1蛋白水平.免疫荧光检测转录因子Nrf2在胞质及核内的分布情况.结果 与对照组比较,穿心莲内酯剂量相关性地抑制RAW264.7细胞活力,差异具有统计学意义(P<0.05、0.01、0.001).穿心莲内酯显著抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞的iNOS水平(P<0.001),增加相关抗氧化酶基因HO-1、NQO1 mRNA水平.穿心莲内酯抑制Keap1表达,增加Nrf2和HO-1蛋白水平的表达.结论 穿心莲内酯可抑制脂多糖诱导的炎症反应,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路从而调控抗氧化酶HO-1、NQO1 mRNA表达水平相关.

多皱补骨脂不同提取物对大鼠自主活动性和提高的迷宫行为的作用/穿心莲内酯对雄性大鼠的生殖毒性和抗生育特性研究——对睾丸和附睾尾中精子的影响

固态穿心莲内酯的降解

穿心莲内酯干预异丙肾诱导的心力衰竭小鼠的效应及其机制研究

[目的]评价穿心莲内酯干预过量异丙肾上腺素(ISO)致心力衰竭小鼠的药效,运用网络药理学的方法预测其作用靶点并验证.[方法]制备过量盐酸异丙肾上腺素诱导的心力衰竭小鼠模型,随机分为空白组、模型组、穿心莲内酯组、地高辛组.通过心脏超声、形态学与病理分析,评价各组小鼠心功能.采用生物信息学分析工具(BAT-MAN-TCM)预测药物靶点,运用实时荧光定量PCR法检测候选靶点mRNA水平.[结果]与空白组比较,模型组小鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)和舒张早期二尖瓣血流速度与舒张晚期二尖瓣血流速度比值(E/A)显著降低(P＜0.05),左室收缩末内径(LVIDs)显著增大(P＜0.05),心肌细胞肥大,伴有血窦扩张和结缔组织增生,心肌组织羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR,HMG-CoA还原酶)基因表达显著上调(P＜0.05).与模型组相比,穿心莲内酯组小鼠EF、FS和E/A显著升高(P＜0.05),LVIDs显著降低(P＜0.01),心肌细胞肥大减轻,心肌组织HMGCR基因表达显著下调(P＜0.05).[结论]穿心莲内酯可以改善过量异丙肾上腺素诱导的心力衰竭,其机制可能与抑制HMG-CoA还原酶、调节胆固醇合成有关.

HPLC法测定清感穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

[目的]建立清感穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法.[方法]采用高效液相色谱法:色谱柱为资生堂CAPCELL, PAK C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇:水(52:48);检测波长:254nm;流速:l.0ml/min;柱温:40℃.[结果]穿心莲内酯在0.2～3μg(r=0.9999)、脱水穿心莲内酯在0.2～3μg(r=0.9999)范围内线性关系良好.穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的平均回收率分别为99.45%(HSD=0.19%,n=6),99.57%(RSD=0.19%,n=6).[结论]该方法简便、准确、重复性好,可用于该制剂中有效成分的含量测定.