白术、黄芪糖复合物对IEC-6细胞迁移钾通道影响的研究

目的:上皮细胞迁移是胃肠黏膜损伤修复的重要环节,观察白术、黄芪糖复合物对小肠上皮IEC-6细胞迁移多胺信号通路钾通道相关指标的影响,为探讨益气健脾中药白术、黄芪胃肠黏膜损伤修复机制提供参考.方法:划痕法复制细胞迁移模型;非损伤微测法检测细胞K+外流;Westem Blot法检测Kv1.1蛋白表达;HE染色观察细胞形态;透射电镜观察细胞超微结构.结果:白术、黄芪糖复合物具有以下作用:50μg/nl均可促进细胞迁移;100μg/ml均能增加细胞K+外流;白术(50μg/ml)、黄芪(100μg/nl)糖复合物能提高钾通道蛋白Kv1.1蛋白表达;200μg/ml剂量均能逆转钾通道抑制剂4-氨基比啶(4-AP)所致的细胞迁移抑制;100、200μg/ml剂量均能改善4-AP所致的Kv1.1蛋白表达抑制和细胞空泡化.结论:白术、黄芪促进胃肠黏膜损伤修复的作用与其影响小肠上皮细胞迁移多胺信号通路钾通道相关指标有关.

金鸡菊对大鼠主动脉的舒张作用及钾通道机制

目的:研究金鸡菊(Coreopsis tinctoria Nuff.)乙醇提取物对离体血管平滑肌张力影响,同时探讨其作用机制.方法:采用大鼠离体胸主动脉灌流,应用金鸡菊提取物(0.25、0.50、0.75和1.00 mg/ml)记录张力变化,观测其对Sprague Dawley (SD)大鼠离体胸主动脉环的作用,L-NAME及不同钾通道阻滞剂的影响.结果:金鸡菊提取物0.50～1.00 mg/ml对氯化钾(60 mmmol/L)和苯肾上腺素(0.3 μmol/L)预收缩的血管环具有浓度依赖的舒张作用,对内皮完整和去内皮血管环舒张作用无差异,该舒张作用为非内皮依赖性.在KCl预收缩基础上,加入一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME,100 μmol/L)和内向整流钾通道阻断剂钾通道阻断剂氯化钡(BaCh,30 μmol/L)均不能抑制金鸡菊提取物提取物的舒血管效应,非选择性钾通道阻断剂(TEA,10mmol/L)、电压依赖性钾通道阻断剂四氨基吡啶(4-AP,1 mmol/L)、ATP敏感钾通道阻断剂(Gli,10 μmol/L)及大电导激活钾通道阻断剂(IbTX,100 nmol/L)能抑制金鸡菊提取物提取物对血管的舒张作用.结论:金鸡菊提取物提取物舒张血管的作用具有浓度依赖性,其作用机制可能与激活KATP、BKca和Kv有关.

钾及钾通道在免疫中的作用

钾离子是机体内环境的重要的阳离子之一,钾通道是钾离子转移至细胞外的主要途径,此二者不仅参与维持机体生理功能的作用,而且对机体免疫亦有调节作用.钾离子和钾通道参与了多种免疫细胞的活化及细胞的凋亡.在T细胞介导的自身免疫性疾病中,钾通道表达异常,选择性阻滞钾通道可以减缓疾病的发生发展.电压门控性钾通道已经成为治疗自身免疫性疾病的新靶点.

淋巴细胞膜钾通道及其功能

离子通道在淋巴细胞活化过程中发挥重要作用.钾通道是淋巴细胞膜上的一类重要离子通道,分为2类:电压门控钾通道(Kv)和钙激活的钾通道(KCa).Kv有3个亚型:n,n'和l型.KCa可分为2类:小电导KCa和中电导KCa°Kv是维持细胞静息膜电位的主要承担者.Kv和KCa对Ca2+信号具有重要的调节作用,从而分别在细胞活化的启动和维持阶段发挥主要作用.Kv通过和蛋白激酶的偶联参与了胞内激活信号转导过程.另外,Kv和氯通道共同作用调节细胞容积.对钾通道的深入研究将有助于新型免疫调节剂的研制.

人类ether-à-go-go相关基因通道的动力学分析和分析机制

探讨在电生理记录的过程中,由人类ether-à-go-go相关基因(HERG)编码的通道应分析的通道动力学参数及机制.使用双电极电压钳技术,记录表达于爪蟾卵母细胞的HERG通道,编制不同的刺激脉冲分析各动力学参数. 结果显示:(1)HERG通道在去极化脉冲下由于存在快失活而呈内向整流性.激活曲线可通过拟合去极化脉冲及随之的尾电流峰值而得到.激活的时间依赖性可通过拟合去极化不同时程与相应的尾电流峰值而得到.(2)HERG的去激活的I-V(电流-电压)关系曲线仍呈明显的内向整流性,尾电流的衰减路径用双指数方程拟合可得到快和慢两个时间常数.(3)HERG通道的失活呈电压依赖性,分别用两个不同的三脉冲程序,可得到通道的失活曲线以及去除失活后近乎线性的I-V关系.因此虽然HERG通道动力学复杂,仍可设计不同脉冲程序对其通道动力学间接进行分析,为HERG的分子位点作用研究提供基础.

线粒体ATP敏感性钾通道与心肌保护的研究进展

缺血预处理对心肌的保护作用强大,但其机制复杂,涉及许多信号转导途径.目前认为线粒体ATP敏感性钾通道是其终末效应器.是细胞的一种重要离子通道,其结构复杂,功能多样,在细胞的生理、病理生理过程中起着重要作用.线粒体ATP敏感性钾通道的心肌保护机制主要涉及减轻缺血细胞钙超载,减轻自由基损伤,减少细胞凋亡及减轻远期心室重构.就线粒体ATP敏感性钾通道的结构及其心肌保护机制作一综述.

ATP敏感性钾通道对狗的冠状动脉的调节

目的探讨冠状动脉震颤发生的条件及和ATP敏感性钾通道的关系.方法用优降糖诱发冠状动脉震颤后分别用尼可的尔、硝酸甘油观察两药对震颤的影响.结果优降糖3mg/kg可诱发冠状动脉震颤,且此现象在细小的动脉表达得更为强烈;震颤不能被硝酸甘油抑制,但可被尼可的尔终止.结论 ATP敏感性钾通道的阻滞可发生冠状动脉的震颤,且在细小动脉中尤为突出,当内皮细胞产生NO减少时震颤也将增强.

超极化停搏对体外循环中心肌细胞膜微粘度变化的影响

目的比较超极化停搏和去极化停搏对体外循环(CPB)中心肌细胞膜流动性变化的影响,评价超极化停搏液的心肌保护作用. 方法根据随机数字表法将72只家猫均分为3组,每组24只.对照组:不阻断上、下腔静脉和主动脉,仅行并行循环180分钟;去极化停搏组:阻断主动脉60分钟,再灌注90分钟,心脏停搏液使用St.Thomas液(K+16mmol/L);超极化停搏组:心脏停搏液使用含吡那地尔的St.Thomas液(K+5mmol/L),其余处理与去极化停搏组相同.应用荧光偏振法测定心肌细胞膜的微粘度(η),以η的倒数表示心肌细胞膜流动性. 结果去极化停搏组主动脉阻断期间心肌细胞膜η值明显上升,且于再灌注期间进一步升高;超极化停搏组主动脉阻断期间亦呈升高趋势,但各时间点η值均明显低于去极化停搏组(P＜0.01). 结论超极化停搏比去极化停搏能更有效地维持CPB中缺血-再灌注心肌细胞膜的流动性,从而起到更好的心肌保护作用.

中药复方VIS抑制急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞凋亡

目的 研究中药复方VIS的不同配比对急性高眼压大鼠视网膜凋亡相关分子Bcl-2/Bax表达的影响,以及其组成成分DSX对视网膜神经节细胞外向钾电流的调控,探讨其视神经保护的可能机制.方法 利用前房灌注生理盐水的方法急性升高大鼠眼内压,接着使用不同配比比例的VIS及LG、DSX灌胃7d,利用免疫组化方法检测凋亡相关基因的表达,再选取其组成成分DSX利用全细胞膜片钳技术观察其对急性分离的正常大鼠视网膜神经节细胞的电压门控外向钾电流的作用.将细胞膜电位钳制在-70mV,然后给予一系列400ms的去极化脉冲,以10 mV的递增使细胞去极化到+20 mV,从而诱导出外向钾电流.结果 前房急性灌注生理盐水7d造成视网膜凋亡相关基因Bcl-2/Bax比值的下调,不同配比的VIS呈不同程度地下调促凋亡基因Bax,促进凋亡抑制基因Bcl-2的表达,因而提高Bcl-2/Bax比值.同时胞外施加的DSX对大鼠RGC的外向钾电流的电流幅度呈电压依赖性压抑.结论 急性眼内压升高引起视网膜内在凋亡途径的启动,中药复方VIS能够有效地抑制神经节细胞的凋亡,其组成成分DSX可逆地压抑大鼠视网膜神经节细胞外向钾电流,这可能是灯盏细辛对高眼压引起的视野丢失、视网膜神经节细胞损伤保护作用的机制之一.

糖尿病大鼠视网膜动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾离子通道开放概率及其亚基蛋白表达

目的 观察糖尿病(DM)大鼠视网膜动脉平滑肌细胞(RVSMCs)大电导钙离子激活钾离子(BK)通道开放概率及其亚基蛋白表达.方法 8～12周龄健康雄性Spraque-Dawley大鼠50只随机分为正常对照组、DM模型组,分别为10、40只.DM模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立DM模型,正常对照组大鼠腹腔注射等剂量0.9％生理盐水作为对照.采用酶消化法分离大鼠RVSMCs.应用膜片钳实验技术记录两组大鼠RVSMCs的BK通道电流特征,计算总开放概率(NP0).采用蛋白免疫印迹法测定两组大鼠RVSMCs的BK通道亚基蛋白表达.结果 与正常对照组比较,DM模型组大鼠RVSMCs的BK通道NP0明显增高,差异有统计学意义(t=4.260,P＜0.05).与正常对照组比较,DM模型组大鼠RVSMCs的BK通道α亚基蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(t=10.126,P＞0.05);β1亚基蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(t=5.146,P＜0.05).结论 DM大鼠RVSMCs的BK通道NP0增加,β1亚基蛋白表达升高.

高糖对体外培养的视网膜 Müller细胞膜离子通道的影响

目的观察在高浓度葡萄糖条件下,体外培养的兔视网膜Müller细胞的钙依赖性钾(KCa)通道的变化. 方法高浓度葡萄糖条件下体外培养兔视网膜Müller细胞,并用免疫组织化学染色及透射电镜鉴定培养的Müller细胞,采用膜片钳方法观察不同时间高糖条件下视网膜Müller细胞KCa通道的变化. 结果高糖对体外培养的Müller细胞KCa通道有阻滞作用,其阻滞作用呈时间依赖性. 结论高浓度葡萄糖可能通过阻滞KCa通道而降低 Müller细胞的生物学功能.

人胎盘血管钾通道研究进展

对细胞正常生物功能有重要作用的钾通道已成为细胞电生理学研究的热点，然而胎盘组织上关于钾通道的相关研究还比较少，这可能就导致一些妊娠并发症没有被归为“通道病”。其它器官的血管研究中发现钾通道的功能状态可能与平滑肌细胞和内皮细胞关系密切，在胎儿胎盘循环中也可能存在此现象。本文主要通过胎盘血管钾通道的表达和功能与其它组织的基本对照概括正常妊娠和病理妊娠中胎盘血管钾通道的表达和功能的研究进展。

钾通道与妊娠期高血压疾病关系的研究进展

妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders complicating pregnancy,HDCP)是妊娠期产妇常见的疾病,发病病因迄今不明,死亡率不断上升.近些年来,其关键原因包括胎盘缺血缺氧、小动脉痉挛、免疫缺陷等因素.研究发现,HDCP患者平滑肌细胞膜静电位增大,钾外流减少促进钙内流增加,故细胞膜上的钾通道的转运功能主要决定细胞内外的钾离子平衡[1].因此本文阐述了血管平滑肌钾通道与HDCP关系的研究成果.

H2S对离子通道的作用研究进展

自上世纪末一氧化氮(nitric oxide,NO)被发现为参与人体正常生理功能以及多种疾病发生发展过程的重要气体信号分子以来,一氧化碳(carbon monoxide,CO)和硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)也相继被确认为新的气体信号分子家族成员.

活性氧与耳蜗钾通道的研究进展

活性氧(氧自由基)学说是机体衰老的主要机制之一,活性氧在衰老进程中所起作用得到重视.本文主要针对年龄相关性听力下降发病机制中的活性氧与耳蜗钾通道相互影响的研究进展进行综述.

突触前受体的药理学研究进展

综述了突触前受体存在的证据、分类、调节和临床意义.突触前受体按不同的分类方法可分为突触前自调受体和旁调受体;抑制性和易化性突触前受体;G-蛋白偶联型和离子通道型突触前受体.突触前受体调节递质释放的机制,可能与钙通道、钾通道及囊泡释放复合物的调节有关.通过研制合适的突触前受体的激动剂或拮抗剂,适度调节神经末梢递质的释放,可达到控制或治疗多种疾病(如高血压、精神疾患、阿尔茨海默病、心肌缺血等)的目的.

小电导钙激活钾通道与其调控因素研究进展

小电导钙激活钾通道(small conductance calcium-activated potassium channel,SK channel)为钙激活钾通道的一种[1.2],广泛分布于人体多种组织,如中枢与外周神经、骨骼肌、平滑肌、腺体等.近年对SK通道在心肌细胞、血管平滑肌细胞上的表达与功能的研究已成为新的热点.对SK通道的调控可能成为治疗某些疾病的新途径.本文对SK通道的基本性质与相关激酶对它的调控,以及SK通道对心房颤动(atrial fibrillation,Af)形成的影响研究进展作一综述.

钙激活钾通道(Maxik)的表达变化在血管老化中的意义

心血管疾病是成胁老年人生命健康的主要疾病.在发达国家,心血管疾病排在死亡原因的首位,而衰老是心血管疾病的主要危险因素.我国老年人已达一亿四千多万,占总入口的10%以上,衰老相关的疾病尤其是心血管疾病严重影响着他们的健康和生活质量.对于机体及血管老化的机制国内外学者进行了许多研究,认为与基因突变、细胞凋亡、代谢失衡及糖基化衰老等多种因素有关,但仍未有一种学说能完整阐明血管衰老的机制.近年来,离子通道成为了防治心血管疾病的研究热点,其中由于钙激活钾通道(Maxik,BKCa,S101)在调节血管张力方面起了重要作用,因而成为了热点中的热点.本文就这一通道的组成特性,作用及衰老过程中通道的表达变化做一综述.

内皮素-1对正常血压和高血压病人肠系膜血管平滑肌钙激活钾通道影响的对比研究(摘要)

中枢神经元钙激活钾通道的研究进展与缺血性脑损伤

钾通道广泛分布于生物体各种可兴奋细胞中,在中枢神经系统内存在多种类型的钾通道.其中由神经元细胞浆内Ca2+浓度和动作电位决定其通道开放和关闭的一类钾通道称为钙激活钾通道(Kca能通道).在许多神经元中,动作电位的产生可导致Ca2+内流,从而激活Kca通道,产生钙激活钾电流(IKca).自1975年Meech等首次在神经细胞上证实了IKca的存在后,先后在多种细胞上发现了一大类电导值不等,电压依赖性不同的Kca通道.神经元表达多种Kca通道,在调节神经元兴奋性,放电频率和膜振荡中起重要作用[1].因此,对钙激活性钾通道结构和功能认识的不断深入,必将促进对脑损伤发病机制的进一步阐明,从而为脑血管疾病的防治开拓更有效的途径.