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红景天苷对Aβ1～40所致阿尔茨海默病模型大鼠认知功能改善作用及机制探讨
目的:研究红景天苷对Aβ1～40海马内注射所致阿尔茨海默病( Alzheimer's disease,AD)模型大鼠的治疗作用并探讨其可能的影响机制.方法:Aβ1～40海马内注射制备AD大鼠模型,术后用不同剂量红景天苷(25,50,75 mg·kg-1)灌胃治疗,每日1次,共21 d.建模成功后,经Morris水迷宫评测大鼠学习记忆能力,并分别测定大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核转录因子κB(NF-κB)及糖基化终末产物受体(RAGE)蛋白表达.结果:AD大鼠在定位航行试验中逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,学习记忆力受损,海马组织SOD活性明显降低,MDA含量明显增高,NF-κB,iNOS及RAGE蛋白表达明显上调.红景天苷50,75 mg·kg-1组大鼠的学习记忆受损得到显著改善(P＜0.01).与模型组相比,红景天苷50 mg·kg-1组SOD活性上调,MDA含量降低,NF-κB,iNOS及RAGE的表达均得到有效抑制(P＜0.01).结论:红景天苷可能通过综合抗氧化应激效应起到治疗阿尔茨海默病的作用.
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活性跟踪法研究地骨皮中抑制NF-κB的化学成分
传统中药地骨皮常用于治疗许多与炎症相关的疾病.该研究目的是确定地骨皮中抑制核转录因子NF-κB(炎症关键调控子)的活性成分.对不同溶剂的地骨皮提取物进行体外抑制NF-κB的活性试验,结果发现乙酸乙酯提取物与甲醇提取物表现出较强的抑制活性.通过活性跟踪分离纯化,获得4种酚酰胺类化合物,分别为:反-对羟基肉桂酰酪胺(1)、反-阿魏酰酪胺(2)、反-咖啡酰酪胺(3)与二氢咖啡酰酪胺(4).它们对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的NF-κB活性的抑制率差异非常显著,抑制率大小为3 ＞4＞ 2≈1.推测反-咖啡酰酪胺为关键活性成分,其IC50为18.41 μmol·L-1.通过构效关系分析说明,反-咖啡酰酪胺C-3位的羟基可能是与NF-κB结合的高亲合位点,而且C-7,8位双键介导了苯环、羰基的πT电子共轭作用,从而形成独特的平面空间构型,有助于抗炎分子与靶标蛋白的空间契合.由此推断,含有α,β-不饱和酮及苯环的迈克尔受体结构与邻二酚羟基共同决定了化合物3的生物活性.
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补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠TNF-α和NF-κB的影响
目的 观察补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠前炎症因子之一的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核转录因子κB(NF-κB)的影响.方法 将大鼠分为5组:生理盐水对照组、哮喘组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组.ELISA法检测和比较各组大鼠血清中TNF-α的浓度,免疫组化法检测和比较各组大鼠肺组织NF-κB的活性.结果 仙灵脾和黄芪可有效减少哮喘大鼠TNF-α的生成,抑制NF-κB的活性,中药低、中、高剂量组间比较,差异无显著性.结论 在哮喘发作期和缓解期给予仙灵脾和黄芪,可有效减少前炎症因子TNF-α的生成,抑制NF-κB的活性,抑制炎症的发展.
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穴位贴敷对过敏性鼻炎模型大鼠鼻黏膜组织TLR-NF-κB信号通路的影响
目的 探讨穴位贴敷疗法治疗过敏性鼻炎的可能作用机制.方法 40只Wistar大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组、丙酸氟替卡松组、穴位贴敷组,每组10只.除对照组外其余各组应用鸡卵白蛋白腹腔注射、滴鼻和雾化建立过敏性鼻炎大鼠模型.造模后模型组大鼠每侧鼻孔5μl生理盐水滴鼻;穴位贴敷组大鼠在其双侧“肺俞”、“脾俞”、“肾俞”处贴敷0.5cm ×0.5cm的膏药2h后取下;丙酸氟替卡松组大鼠每侧鼻孔丙酸氟替卡松鼻腔喷雾剂5μ1滴鼻.各组大鼠均隔日1次,共7次.采用HE染色法观察鼻黏膜形态,并计数嗜酸性粒细胞数;实时定量PCR法检测鼻黏膜组织中toll样受体4(TLR4)和核转录因子κB (NF-κB) mRNA表达情况;免疫组织化学法检测鼻黏膜组织TLR4、NF-κB蛋白表达. 结果 HE染色显示模型组大鼠鼻黏膜破坏明显,大量嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润;鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数、TLR4和NF-κB mRNA及蛋白表达均较正常组升高(P＜0.05);丙酸氟替卡松组和穴位贴敷组大鼠鼻黏膜嗜酸性粒细胞数、TLR4和NF-κB mRNA及蛋白表达量均较模型组降低(P＜0.05),且穴位贴敷组较丙酸氟替卡松组降低更明显(P＜0.05).结论 穴位贴敷可能通过对大鼠鼻黏膜TLR-NF-κB通路的调节,改善鼻黏膜炎性症状,从而治疗过敏性鼻炎.
关键词： 过敏性鼻炎 穴位贴敷 Toll样受体 核转录因子κB TLR-NF-κB通路 -
增龄进程淋巴细胞核转录因子κB相关基因表达及淫羊藿总黄酮的调控作用
目的 研究增龄进程中大鼠淋巴细胞中核转录因子κB(NF-κB)信号通路跨膜受体的mRNA水平差异表达特征,以及淫羊藿总黄酮(EF)对其的干预效应. 方法 将SD大鼠随机分为3天、4月龄、10月龄、18月龄、27月龄、27月+EF,以大鼠脾脏分离的淋巴细胞为研究对象,定制NF-κB信号通路基因芯片,分别检测各组NF-κB信号通路上游跨膜受体mRNA水平的整体表达特征及差异,并观察EF对NF-κB相关基因的干预效应. 结果 Tgfbr2、Tlr7、Ripk2出生3天表达低,4或10个月达峰值,之后渐低,至27个月降至低,EF干预后Ripk2变化较明显,接近10个月水平;Tnfrsf1a与Tlr2在3天时达峰,4个月骤然降低,而后在10、18、27个月均维持在一相近的水平,但经EF作用后有显著升高;Tnfrsf5自3天至18个月逐渐升高,但至27个月骤然下降,EF作用后略有回升;Madh4表达比较特殊,在4个月高,10个月低,18个月显著升高,至27个月再次降低,EF干预后略有提高,但变化不明显;Tnfrsf10b、Il1r1、Tlr1、Tlr4在增龄进程中的变化不明显. 结论 淫羊藿总黄酮的提前干预可对增龄进程淋巴细胞NF-κB信号通路跨膜受体基因mRNA表达产生一定的良性影响,尤其是对Ripk2的作用为显著,这可能是EF作用的重要靶点之一.
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EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中调控核转录因子κB活性研究
为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)的致瘤机制,对鼻咽癌细胞中LMP1通过核转录因子κB(NFκB)介导的信号传导途径在鼻咽癌变中的意义进行了研究.利用LMP1受四环素衍生物强力霉素诱导表达的鼻咽癌细胞Tet-on-LMP1 HNE2,通过NFκB报道基因分析法、凝胶迁移率分析(EMSA)及细胞集落形成率等方法,结合硫代磷酸反义寡核苷酸阻断技术,证实LMP1增强鼻咽癌细胞NFκB的DNA结合活性和反式激活活性,这种增强的活性可被LMP1及NFκB p65硫代磷酸反义寡核苷酸阻断,而NFκB p50仅阻断DNA结合活性,对反式激活活性无影响.同时,LMP1及NFκB p65硫代磷酸反义寡核苷酸可部分逆转鼻咽癌细胞的恶性表型,而反义p50这种效应不显著.这些结果表明,LMP1在鼻咽癌中通过NFκB信号传导途径可能参与了鼻咽癌变,NFκB p65可能是主要的效应者.
关键词： 潜伏膜蛋白1(LMP1) 核转录因子κB 鼻咽癌 -
炎症介导TLR4/NF-kB通路在过敏性鼻炎患者中的表达和作用
目的 探讨炎症介导TLR4/NF-κB信号通路在过敏性鼻炎患者中的表达变化及临床意义.方法 选取2016年3月至2017年5月本院就诊的60例过敏性鼻炎患者(观察组)给予糖皮质激素治疗,同期选取30例健康体检者为对照组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者糖皮质激素治疗前后血清中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-5、IL-12、IL-13、IL-33、TLR4和NF-κB的表达.结果 与对照组相比,观察组中的TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-5、IL-13、IL-33、TLR4和NF-κB的表达显著升高,IL-12水平显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).与糖皮质激素治疗前相比,治疗后观察组患者血清内TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-5、IL-13、IL-33、TLR4和NF-κB的表达显著降低,IL-12水平显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 过敏性鼻炎患者血清中TNF-α、IL-Iβ、IL-4、IL-5、IL-13、IL-33、TLR4和NF-κB呈高表达状态,IL-12水平呈低表达;给予过敏性鼻炎患者糖皮质激素治疗可有效缓解患者临床症状,具有一定的治疗作用.
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血清PSA、TNF-α、NF-κB联合检测对前列腺癌患者的诊断价值
目的 探讨前列腺特异性抗原(PSA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子κB(NF-κB)联合检测对前列腺癌患者的诊断价值.方法 选取2015年10月至2017年11月我院收治的110例前列腺癌(PCa)患者作为研究对象.选取同期到医院就诊的80例前列腺增生(BPH)患者作为BPH组,选取同期健康体检者50例作为对照组.比较三组研究对象的总前列腺特异性抗原(tPSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、游离前列腺特异性抗原/总前列腺特异性抗原(f/tPSA)、TNF-α、NF-κB水平及诊断学指标.结果 相比于对照组,PCa组和BPH组tPSA、fPSA、TNF-α、NF-κB水平显著增高,f/t显著降低(P＜0.05);相比于BPH组,PCa组tPSA、fPSA、TNF-α、NF-κB水平显著增高,f/t显著降低(P＜0.05).在不同分化程度的PCa患者中,f/tPSA差异均无统计学意义(P ＞0.05);PCa中分化组和低分化组血清NF-κB、TNF-α水平显著高于高分化组(P＜0.05),低分化组血清NF-κB、TNF-α水平显著高于中分化组(P＜0.05).在单项检测中,以TNF-α的灵敏度(84.2％)、特异性(88.1％)及准确度(86.3％)高(P＜0.05).三项指标联合检测的灵敏度(92.3％)、特异性(90.5％)及准确度(92.5％)明显高于三项指标任一单项的检测结果(P＜0.05).结论 PSA、TNF-α、NF-κB联合检测有利于提高对前列腺癌诊断的灵敏度和特异性,为临床诊断及治疗提供参考依据.
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异硫氰酸苯乙酯通过PI3K-NF-κB-MMP-9途径抑制结肠癌SW480细胞的迁移和侵袭
目的 观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制.方法 体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10,30和50 μmol/L PEITC作用24h,MTr法检测细胞的增殖;伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响.荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性,RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达情况;Westem blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、mTOR磷酸化,以及NF-κB核转位情况.荧光素酶报告基因分析NF-κB的活性.后,建立裸鼠异种移植瘤动物模型,观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用.结果 PEITC能在不影响细胞活性的条件下显著抑制SW480细胞侵袭和迁移(P＜0.05),也能抑制MMP-9的酶活性以及mRNA表达(P＜0.05).同时PEITC能抑制PI3K的表达以及抑制Akt和mTOR磷酸化(P＜0.05),上调PTEN表达.PEITC也能抑制NF-κB核转位,并能降低其活性(P＜0.05).此外,PEITC也能抑制裸鼠异种移植瘤的生长(P＜0.05).结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/Akt和NF-κB通路发挥作用.
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Caspase-3和核转录因子-κB在APPSWE转基因小鼠海马内的表达
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)的发生、发展与神经细胞凋亡之间的规律,以及核转录因子κB(NF-κB)在神经细胞凋亡中的调节作用,为阿尔茨海默病的发病机理和临床治疗提供依据. 方法 分别取P0、P7、P14、P30、P90、P180日龄的APPSWE转基因小鼠为模型组,各日龄同窝生野生型小鼠为对照组,应用Nissl染色观察其海马结构和锥体细胞形态,免疫组织化学方法检测小鼠海马细胞内半胱天冬氨酸蛋白3(Caspase-3)表达及NF-κB激活情况,RT-PCR检测小鼠海马caspase-3 mRNA的表达. 结果 模型组及对照组小鼠海马CA3区锥体细胞中凋亡细胞密度和NF-κB阳性细胞密度均随日龄的增大而逐渐下降,在P30后趋于稳定; 与对照组相比,模型组凋亡细胞密度和NF-κB阳性细胞密度均增高,自P14以后具有统计学意义 (P<0.01或P<0.05); RT-PCR检测小鼠海马caspase-3 mRNA表达结果与Caspase-3免疫组织化学检测结果基本吻合. 结论 凋亡相关基因caspase-3和NF-κB在阿尔茨海默病的发病机理中起重要作用,NF-κB的激活可能促进神经细胞凋亡.
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儿茶酚胺调节免疫功能的细胞和分子机制
目前认为儿茶酚胺(catecholamines,CAs)不只是引起普遍的免疫抑制,而是抑制细胞免疫但促进体液免疫.CAs可抑制1型辅助T(T helper 1, Th1)细胞、细胞毒性T(T cytotoxic, Tc)细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞和单核细胞的作用,并增强Th2和B细胞的作用.CAs通过免疫细胞上的β2-肾上腺素受体(β2-adrenoreceptors,β2-ARs)引起细胞内cAMP增加,cAMP激活蛋白激酶A(protein kinase A, PKA),后者调节核转录因子的活性,从而影响细胞因子的基因表达,即抑制白介素-2(interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-12的基因转录;增强IL-6、IL-10和IL-4的基因表达.
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白细胞介素-18对支气管哮喘小鼠气道炎症和核转录因子κB的作用
目的探讨白细胞介素-18(IL-18)对支气管哮喘(哮喘)小鼠气道炎症及核转录因子κB(NF-κB)的影响.1、22d腹腔注射生理盐水(0.1ml)和IL-18 法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组,10只)、哮喘模型组(B组,10只)、IL-18注射组(C组,10只).B组和C组用经紫外线灭活的呼吸道合胞病毒(RSV)激发法建立小鼠哮喘模型,分别于1、2、7、8、9、2 (1μg).第23天用HE染色切片观察动物气道炎症细胞的改变,用免疫组化和蛋白质定量分析法(Western blot)测定肺组织中NF-κB的活性. 结果 B组小鼠哮喘发作症状明显,C组小鼠仅表现为轻度哮喘发作症状,A组小鼠无症状.A组支气管粘膜下未见嗜酸性粒细胞(EOS)和浆细胞,B组支气管粘膜下可见EOS[15±3(平均每视野计数,下同)]和浆细胞(10±2),C组支气管粘膜下EOS(6±2)和浆细胞(2±1)较B组减少(P＜0.05).肺组织冰冻切片免疫组化染色发现:B组NF-κB核表达强,C组表达较弱,A组无表达.NF-κB 的抑制蛋白(IκB)的Western blot定量分析发现:A组、C组的IκB含量分别是B组的3.5和2.5倍,即说明B组NF-κB的含量明显高于其他两组.结论 IL-18对支气管哮喘气道炎症有抑制作用,其机制之一可能与IL-18抑制了支气管哮喘小鼠肺组织中NF-κB的活性有关.
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参附注射液对缺氧/复氧损伤心肌核因子-κB及肿瘤坏死因子-α、白介素-6的影响
目的 探讨参附注射液对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及作用机制.方法 采用培养乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为四组:正常对照组(Ⅰ)、缺氧/复氧损伤模型组(Ⅱ)、缺氧/复氧+低剂量参附注射液组(Ⅲ)、缺氧/复氧+高剂量参附注射液组(Ⅳ).分别用2,4二硝基苯肼显色法检测上清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,酶联免疫吸附试验测定上清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)蛋白含量,Western Blot法测定NF-κB活性变化.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组缺氧/复氧后上清中LDH活性、TNF-α、IL-6浓度及细胞NF-κB活性显著上升(P＜0.01).Ⅲ、Ⅳ组分别与Ⅱ组比较,上述指标均明显降低(P＜0.01).结论 参附注射液对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有明显的保护作用,其作用途径可能与抑制NF-κB活性降低其调控的促炎细胞因子的表达有关.
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血管紧张素Ⅱ对肺泡巨噬细胞NF-κB信号通路的影响
目的 阐明血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肺泡巨噬细胞核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 收集正常或其他肺病患者正常肺叶组织肺泡灌洗液,分离、纯化、培养肺泡巨噬细胞.予10-6M AngⅡ刺激15,30,60,120 min.另外,予AT-1受体阻断剂irbesartan(10-6M)预处理肺泡巨噬细胞60 min后再予10-6 M AngⅡ刺激60 min.设置对照组.凝胶电泳移动抑制实验(EMSA)检测NFκB的结合活性.免疫蛋白质印迹检测胞浆内IκBα的表达.RT-PCR检测TNF-α和ICAM-1的表达.应用SPSS 13.0软件进行One-Way ANOVA方差分析,多重比较采用LSD法.以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 AngⅡ刺激肺泡巨噬细胞15 min NF-xB结合活性增强,60 min达到峰值.AT-1受体阻断剂irbesartan可阻断NF-κB结合活性增强.与对照组(1.0)相比,AngⅡ处理组(0.29±0.11)ⅠκBα旺表达减弱,且差异具有统计学意义(P=0.013).与AngⅡ处理组相比,AngⅡ+irbesartan处理组ⅠκBα表达(0.83±0.12)则增强,且差异具有统计学意义(P=0.001).与对照组(0.42±0.099)相比,AngⅡ处理组TNF-α(1.13±0.17)表达增强,且差异具有统计学意义(P=0.001).与AngⅡ处理组相比,AngⅡ+irbesartan处理组(0.77±0.15)减弱,且差异具有统计学意义(P=0.02).与对照组ICAM-1表达(0.16±0.050)相比,AngⅡ处理组(0.55±0.08)增强且差异具有统计学意义(P=0.003).与AngⅡ处理组相比,AngⅡ+irbesartan处理组(0.32±0.07)减弱,且差异具有统计学意义(P=0.001).结论 Ang Ⅱ对肺泡巨噬细胞NF-κB通路有正向调节作用.
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萝卜硫素对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的神经元保护机制
目的 研究萝卜硫素(SFN)对大鼠局部脑缺血-再灌注损伤的神经保护机制.方法 24只雄性SD大鼠,随机(随机数字法)分为3组,A组:假手术组(n=8),B组:缺血-再灌注模型组(n=8),C组:萝卜硫素干预组(n=8);A组:假手术后腹腔注射等量磷酸盐缓冲液(PBS),B组:缺血-再灌注术后腹腔注射等量PBS,C组:缺血-再灌注术后腹腔注射萝卜硫5 mg/kg.通过四氮唑红(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测定脑梗死体积,苏木精伊红染色法(HE)观察组织学形态改变,TUNEL法检测脑神经元凋亡变化,RT-PCR测定缺血脑组织核转录因子kappa B亚单位p65(NF-κBp65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达,免疫蛋白印记法(Western-bloting)检测脑组织iNOS、NF-κBp蛋白表达水平.结果 与B组比,C组脑梗死体积降低[(96.34±3.72) vs.(124.65 ±3.85),P＜0.01],且脑神经元凋亡减少,RT-PCR法显示C组脑组织NF-κBpmRNA和iNOS mRNA含量降低[(0.26 ±0.018)vs.(0.43±0.031),P＜0.01].Western-bloting结果显示,C组NF-κB和iNOS含量降低[(0.67 ±0.042) vs.(0.56 ±0.032),P＜0.01].结论 SFN可通过减少脑局灶性缺血-再灌注损伤后缺血脑组织NF-κB和iNOS表达,减少脑梗死体积,抑制神经元细胞凋亡,具有脑神经保护作用.
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临产前后子宫肌收缩相关蛋白在人子宫肌中的表达及相关信号转导途径的研究
目的 研究分析临产前后人子宫平滑肌细胞中子宫肌收缩相关蛋白的表达情况,并初步探讨分娩启动中信号转导的可能途径.方法 收集足月妊娠人子宫平滑肌组织,根据是否临产分为足月动产组和足月未动产组.应用蛋白免疫印记法(Western-blot法)检测子宫平滑肌组织中的子宫收缩相关蛋白(CAPs):缝隙连接蛋白-43(CX43)、催产素受体(OTR)、环加氧酶2(COX2)的表达以及NF-κB p65、MAPK家族成员Erk1/2和它们的磷酸化水平.结果 动产组中子宫平滑肌组织中收缩相关蛋白CX43、OTR、COX2的表达量明显高于未动产组(P＜0.05),p-p65、p-Erk1/2蛋白表达高于未动产组(P＜0.05),p65、Erk1/2蛋白表达无统计学意义(P＞0.05);2、线性相关分析显示,CX43、COX2与p-p65的表达之间呈正相关(P＜0.01),OTR与p-p65的表达之间呈正相关(P＜0.05);COX2与p-Erk1/2的表达之间有相关性(P＜0.05),CX43、OTR与p-Erk1/2的表达无显著相关(P＞0.05);p-p65与p-Erk1/2无显著相关(P＞0.05).结论 足月临产子宫相关收缩蛋白表达水平明显上升,提示了在分娩启动中子宫收缩相关蛋白发挥重要作用,其有助于促进子宫收缩,产程进展、使得胎儿顺利娩出.足月临产子宫平滑肌组织中磷酸化的NF-κB p65以及Erk1/2的表达水平有显著性差异,提示NF-κB介导的炎症反应通路及MAPK通路可能在子宫收缩过程中发挥作用.相关性分析提示子宫收缩相关蛋白与NF-κB介导的炎症反应通路可能共同或协同参与分娩的发生.
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电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能和缺血半暗区Tolls样受体4、核转录因子κB蛋白的影响
目的 探讨电针预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能的影响及其机制.方法 雄性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)和电针预处理组(n=12).后两组线栓法制备大鼠脑缺血2 h再灌注模型.电针预处理组在缺血前给予电针百会干预2周.再灌注24 h后,采用改良神经功能缺损评分进行评定,HE染色观察缺血侧脑组织脑损伤程度,West-ern blotting检测脑缺血半暗区Tolls样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达.结果 与模型组比较,电针预处理组神经功能缺损评分降低(P<0.05),脑组织损伤程度减轻,缺血半暗区TLR4、NF-κB蛋白表达下调(P<0.05).结论 电针预处理通过下调缺血半暗区TLR4、NF-κB蛋白表达,诱导脑保护作用,降低炎性损伤程度,改善脑缺血再灌注损伤后大鼠的神经功能.
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螺内酯对心肌肥厚大鼠左心室可溶性ST2及核转录因子κB的影响
目的 探讨螺内酯对心肌肥厚大鼠可溶性ST2(sST2)及核转录因子κB (NF-κB)的影响.方法 选取健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组(n=10)、模型组(n=10)、药物干预组(n=10).对照组大鼠皮下注射生理盐水;模型组皮下注射异丙肾上腺素(ISO);药物干预组皮下注射ISO,同时给予螺内酯20mg/(kg·d)灌胃.14d后处死大鼠,计算心脏质量/体质量、左心室质量/体质量,观察心肌细胞直径;免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中sST2及NF-κB的表达;Masson染色观察心肌纤维化程度.结果 与对照组比,模型组心脏质量/体质量、左心室质量/体质量、心肌细胞直径升高[(3.39±0.11)比(2.47±0.07)mg/g,(2.34±0.11)比(1.78±0.07)mg/g,(26.30±0.95)比(14.53±0.47)μm;均P＜0.05];sST2与NF-κB mRNA和蛋白表达升高(均P＜0.05).与模型组比较,药物干预组心脏质量/体质量、左心室质量/体质量、心肌细胞直径降低[(2.79±0.07)比(3.39±0.11)mg/g,(1.92±0.10)比(2.34±0.11)mg/g,(20.96±0.65)比(26.30±0.95)μm;均P＜0.05],sST2与NF-κB mRNA和蛋白表达降低(均P＜0.05).心肌纤维化程度:模型组大于对照组,干预组小于模型组.结论 螺内酯可能通过调节sST2的表达,抑制下游NF-κB的表达,对抗ISO诱导的大鼠心肌肥厚.
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阿托伐他汀下调内皮细胞Toll样受体4及其下游分子的表达
背景他汀类药物有独立于调脂作用之外的抗炎作用.近年研究表明Toll-样受体4(TLR4)参与了动脉粥样硬化的形成和发展.目的 观察阿托伐他汀对脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞TLR4及其下游分子表达的影响,以探讨他汀类药物抗炎作用的分子机制.方法 采用阿托伐他汀(1及10μmol/L)或核转录因子(NF)κB抑制剂咖啡酸苯乙酯(CAPE)预孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)30 min后,应用LPS(1 mg/L)作用24 h.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测TLR4、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和E选择素mRNA表达水平;采用流式细胞术检测TLR4蛋白表达水平;采用蛋白质印迹技术检测核蛋白NF-κB p65表达的变化.结果 与LPS组比较,阿托伐他汀1 μmol/L,组减轻LPS介导的TLR4表达增加[TLR4 mRNA:(1.24±0.21)比LPS组(1.82±0.27),P<0.05;TLR4阳性细胞数(50.1±4.7)%比LPS组(69.5±7.8)%,P<0.05],阿托伐他汀减轻LPS介导的ICAM-1和E选择素的表达增加.阿托伐他汀抑制LPS介导的NF-κB p65活化(50.4±10.1比LPS组72.3±12.5,P<0.05),10 μmol/L阿托伐他汀较1 μtmol/L作用更明显;CAPE(20 mg/L)也明显抑制了LPS介导的TLR4及ICAM-1和E选择素表达上调.结论 阿托伐他汀抑制TLR4/NF-κB及其下游分子表达是他汀类药物抗炎作用机制之一.
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替米沙坦对高盐饮食诱导大鼠心肌重构的影响
目的 观察高盐饮食对Wistar大鼠心肌重构的影响,探讨替米沙坦逆转左心室重构的可能机制.方法 49只Wistar大鼠经高盐饲养后随机分为高盐高血压组[n-12,NaCl约2.015 g/(只·d)]和高盐正常血压组[n-12,NaCl约2.015 g/(只·d)],同时设立对照组[n=13,NaG约0.094 g/(只·d)]和替米沙坦组[n=12,NaCl约1.966 g/(只·d)].采用HE和Masson染色观察心肌组织形态和结构变化.生化酶学法测定血液及左心室中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛浓度,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清高敏C反应蛋白(hsCRP)浓度,放射免疫法测定心肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western blot法检测心肌核转录因子κB(NF-κB) p65蛋白表达水平.结果 与对照组比较,高盐两组左心室质量指数(LVMI)、心肌细胞直径(CMD)、心肌间纤维化面积(MIFI)、hsCRP、左心室TNF-α浓度、NF-κB p65蛋白表达水平及血清SOD活性明显升高(均P＜0.05),但左心室SOD活性降低；心肌重构(LVMI、CMD、MIFI)与左心室SOD活性呈负相关[分别r=-0.448、-0.625、-0.492,均P＜0.05],与NF-κB蛋白表达水平呈正相关[r=0.556、0.693、0.803,均P＜0.05]；替米沙坦能改善高盐诱导的左心室重构,并增强左心室SOD活性[替米沙坦组(72.20±12.17)比高盐高血压组(58.34±5.78)、高盐正常血压组(54.59±6.65)U/mg pro,P＜0.05]、降低高盐正常血压组左心室TNF-α[替米沙坦组(45.56±6.97)比高盐正常血压组(56.67±9.67)ng/g,均P＜0.05]和高盐高血压组NF-κB[替米沙坦组(62.79±9.00)比高盐高血压组(87.77±10.30),P＜0.05]表达水平.结论 长期高盐饮食可导致Wistar大鼠心肌重构；氧化应激和炎症反应可能参与高盐诱导心肌重构的机制；替米沙坦可能部分通过抑制氧化应激、炎症反应,从而减轻高盐诱导的心肌重构.
