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STA COMPACT全自动血凝仪维修案例
STA COMPACT全自动血凝仪是法国STAGO公司生产的一款中高档血凝仪,它由实验室分析仪和操作软件组成,是与试剂产品和消耗品配套使用的体外诊断医疗设备.它可以对标本血浆进行凝固法、发色底物法或免疫比浊法检测.其中,凝固法检测灵敏度高,不受血脂、黄疸、溶血等干扰.
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ACL-ADVANCE凝血分析仪常见故障的检修
ACL-ADVANCE全自动凝血分析仪是由贝克曼库尔特公司新设计的一款代表当前先进的血凝检测水平的凝血分析仪,它集凝固法、发色底物法和免疫法检测于一身,检测项目多达200项,涵盖当前所有血凝检测范围.是国内大中型医院实验室使用比较广泛的凝血分析仪.因此ACL-ADVANCE凝血分析仪的工作原理及其故障维修是广大使用、维修以及相关人员非常关注的问题.本文探讨了ACL-AD-VANCE凝血分析仪的常见故障的分析和检修方法.
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不稳定性心绞痛患者血浆TF、TFPI含量和活性的变化
急性冠脉综合征(不稳定性心绞痛,急性心肌梗塞,心原性猝死)(Acute Coronary Syndrome ,ACS)原理基于斑块的破裂是启动一系列事件并导致血栓形成的原因.临床研究表明,ACS患者血液检查显示激活的凝血级联反应会增加临床事件的发生风险[1].近年来通过对组织因子(tissue factor ,TF)、组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor ,TFPI)的研究,提出了止血的外源性启动,内源性维持的观点.本研究采用ELISA法和发色底物法测定、分析51例不稳定性心绞痛(UA)患者血浆中的TF、TFPI含量和活性水平变化,并对其临床意义进行探讨.
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一种测定组织因子活性的简便方法
目的建立一种简便的测定组织因子(TF)活性的方法.方法采用已商品化的冻干人凝血酶原复合物作为因子Ⅶ、Ⅹ的来源,活化的Ⅹa水解底物S2222,释放对硝基苯胺,405 nm处的吸光度与标准液中的组织凝血活酶含量成良好的双对数关系(r=0.998).结果该方法的线性范围从10～105 U.低、高值的批内变异系数为10.3%、6.6%,低、高值的批间变异系数为18.1%、10.2%.结论方法简单、灵敏、能定量,可用于临床上TF的快速测定.
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血管紧张素Ⅱ对大鼠HSC合成PAI-I的影响及NO的干预作用
目的:明确血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肝星形细胞(HSC)细胞外基质降解的影响以及一氧化氮(NO)对其的干预作用.方法:采用原位酶灌注法分离培养HSC,发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制物-I(PAI-I)活性,硝酸还原酶法测定NO浓度;采用半定量RT-PCR法检测PAI-I mRNA的表达.结果:AngⅡ能剂量依赖性地促进HSC合成和释放PAI-I,NO、依那普利和氯沙坦均能减弱这种作用.结论:AngⅡ能通过Ⅰ型受体抑制细胞外基质降解,NO可以拮抗这种作用.促进细胞外基质代谢是依那普利和氯沙坦抑制肝纤维化的机制之一.
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急性冠状动脉综合征患者的血栓前高凝状态(摘要)
1 资料与方法检测40例急性冠状动脉综合征(ACS)患者的血浆组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血因子VII(FVII)、纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)、von Willebrand因子(vWF)水平,与正常对照组30例健康人比较.ACS组中15例还检测了常规治疗14天后的各指标水平.常规治疗包括:阿司匹林、硝酸酯类药物、极化液、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)类药物、普通肝素、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂,取血时停用肝素至少5天.TF、TFPI及vWF抗原含量以酶联免疫吸附法检测,FVII活性以凝固法检测,PAI-1活性以发色底物法检测.
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蛋白S基因突变导致肺栓塞1例
目的：对1个新的遗传性蛋白S基因缺陷症家系进行基因突变检测。
方法：筛查导致患者肺栓塞的诱因，在未服用抗凝药华法林的情况下检测血浆蛋白S活性（ProteinS凝固法法国STAGO）、血浆蛋白C活性（ProteinC发色底物法法国STAGO ）、抗凝血酶Ⅲ活性（ATⅢ发色底物法法国STAGO）、血浆游离蛋白S抗原（Liatest Free PS免疫比浊法法国STAGO）作实验诊断；用PCR法对先证者蛋白S基因的15的外显子及其侧翼内含子序列进行扩增，PCR产物纯化后直接测序，作基因诊断；进行家系调查，并比对相关人员进行基因诊断；对所发现的点突变采用在正常人群中进行相应区域PCR扩增结合测序的方法进行多态性筛查。 -
纤溶酶原激活物抑制剂-1与急性心肌梗死关系的研究
目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)在急性心肌梗死(AMI)发病中的作用.方法应用发色底物法测定中国汉族AMI患者56例(男44,女12,平均年龄67±10岁)和正常对照组55例(男42,女13,年龄68±8岁)血浆PAI-1活性,并分析环境因素对PAI-1水平的影响.结果(1)AMI组和正常对照组的血浆PAI-1水平分别为0.90±0.13Au/ml和0.72±0.13Au/ml,两组间比较有显著性差异(P＜0.001).(2)吸烟、高血压病史、既往血栓性疾病病史、冠心病家族史、体重指数(BMI)、三酰甘油(TG)、血糖水平均与血浆PAI-1水平呈正相关,多元逐步回归分析显示,高血压病史、冠心病家族史是血浆PAI-1水平的独立预测因素.结论血浆PAI-1水平增加是心肌梗死(MI)的危险因素;(2)高血压、冠心病家族史为PAI-1水平的独立决定因素.
关键词： 急性心肌梗死 纤溶酶原激活物抑制剂-1 发色底物法 -
发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性
目的：优化发色底物法，使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶（ AAT）的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响；计算初速度并确定被底物饱和的大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育，剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线，测定相关样品的活性，进行精密度和准确度验证。结果胰蛋白酶浓度为0．0625 mg／ml，20 min内酶促反应处于初速度内。 AAT标准曲线范围为200～1200 IU／ml， r＞0．99。该法测定Cohn Ⅳ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为（720．59±18．63）、（601．84±19．18）、（568．09±24．83）IU／ml。每个样品之间的RSD＜10％，加样回收率均在90％～110％。结论发色底物法经优化后，准确度和精密度大幅度提高，更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。
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Sysmex CA-7000全自动血凝分析仪故障及排除
0 引言Sysmex CA-7000全自动血凝分析仪由日本Sysmex公司生产,是目前世界上检测速度快、检测项目多的血栓/止血分析装置.该仪器集凝固法、发色底物法和免疫法于一体,具有操作简便、可预定自动连锁筛选及自动稀释再检等功能.与同类仪器相比,CA-7000具有下列优势:(1)采用了散射光加百分比测定原理,解决了黄疸、溶血、高脂血病标本对凝固时间测定的干扰问题;(2)设计高度人性化和智能化,由全自动进样架进样,全能随机分析,急诊全天候随时插入,操作简便[1];(3)先进的高频振荡混匀技术,确保样本和试剂充分混匀,且具有自动稀释、自动再检和自动连锁筛选功能,可以做到日常工作随机分析.
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早产儿纤溶活性的研究及临床意义
目的 探讨早产儿的纤溶活性状态和胎龄、体重时纤溶活性的影响,分析早产儿临床出血倾向的可能原因及风险因素.方法 采用发色底物法和酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)对健康足月儿和无合并症早产儿各35例进行纤溶活性检测.结果 无合并症早产儿与足月儿相比,纤溶酶原(Plg)活性和D-dimer含量显著降低(P<0.01),PAl/t-PA比值显著增高(P<0.05);胎龄、体重和Plg活性、D-dimer含量均呈显著正相关.结论 早产儿纤溶活性有较大个体差异;早产儿、低出生体重儿纤溶活性显著降低;胎龄、体重和新生儿纤溶活性,纤溶潜能密切相关;纤溶活性和凝血活性,抗凝活性在极低水平上维持相对平衡可能是引起早产儿出血倾向的因素之一.
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凝血酶原复合物中肝素含量测定的两种方法的比较
目的 对凝血酶原复合物(prothrombin complex concentrate,PCC)中肝素含量测定的发色底物法和经典的硫酸鱼精蛋白中和肝素凝固法进行比较.方法 对本公司制备的8批PCC实验样品,分别采用发色底物法和凝固法测定肝素含量,比较两种方法检测结果的差异和测定重复性.结果 凝固法、发色底物法重复性均良好,凝固法检测有20％的误差,发色底物法CV在3.5％～9.2％之间;两种方法样品检测值的差值与均值比在4.4％～29.2％之间,检测值的相关系数为0.407,而仅选取用组分Ⅲ沉淀制备样品时,检测值的相关系数为0.938.结论 凝血酶原复合物中肝素含量测定的两种方法中,发色底物法与经典的硫酸鱼精蛋白中和肝素凝固法相比,定量更精确,适用性更强.
关键词： 凝血酶原复合物 肝素含量 硫酸鱼精蛋白中和肝素凝固法 发色底物法 -
在高原地区使用 ACL-Advance型全自动血凝分析仪的临床评价
在昆明高原地区使用ACL Advance型全自动血凝分析仪,评价此仪器的性能.按美国NCLLS方案进行重复性、准确性、线性、回收、交叉污染和干扰等六方面进行临床试验.ACL Advance型全自动血凝分析仪,融传统的血液凝固分析法和现代的发色底物法及免疫比浊检测原理于一体,操作简易而功能多样,性能稳定,特点适用于大、中型医院推广使用.现将具体试验情况介绍如下:
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优化的α1-抗胰蛋白酶生物活性测定方法的验证
目的 验证优化的α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)生物活性测定方法.方法 用发色底物法测定α1-AT活性,以牛胰蛋白酶替换冻干正常人血清来优化先前建立的方法,验证优化方法的准确性、重复性,并观察不同物质对优化方法的影响.结果 优化方法在胰蛋白酶质量浓度为0.01～0.05 g/L时线性关系良好,相关系数＞0.99.优化方法具有良好的准确性和重复性,当采用优化方法测定质量浓度为0.01、0.03、0.05 g/L胰蛋白酶时,胰蛋白酶的回收率分别为99.33％、94.44％和92.67％,变异系数分别为3.79％、1.66％和1.02％.在一定范围内,聚乙二醇、蔗糖、枸橼酸钠、人白蛋白浓度变化对优化方法测定α1-AT生物活性没有影响.结论 以牛胰蛋白酶作为参考标准品的优化α1-AT生物活性测定方法可用于α1-AT制备工艺中的常规质量控制.
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重视血栓与止血检测方法的合理选择
至20世纪初,对出血性疾病还没有理想的检测方法.1935年Quick建立的一期法凝血酶原时间(PT)及1953年Biggs建立的凝血活酶生成试验(TGT),能明确诊断一些凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病A、血友病B等.20世纪50年代,有许多因凝血因子缺陷所致的出血性疾病见诸文献,这为60年代关于凝血过程"瀑布学说"的建立奠定了基础.1960年Hellem在研究血小板黏附性时发现了R因子(随后R因子被确认为二磷酸腺苷,即ADP).1962年Born以ADP为诱聚剂建立了血小板聚集试验(PAgT),这一检测方法为诊断血小板功能缺陷所致的出血性疾病提供了有用的工具.更为重要的是,其在抗血小板药物的开发、应用和监测上发挥了作用.60年代以来,随着生物化学、分子生物学和免疫学的进展,也促进了检测方法的发展;蛋白质分离技术的进步,得以从血浆中分离和纯化凝血因子,从而对凝血因子的相互作用有了进一步的了解.在此基础上产生了发色底物法测定凝血活性,应用该法可对凝血因子和抗凝血因子进行分析,并可对其活性得出量化的数据.需要注意的是,发色底物法的结果和凝固法的结果有时不相符合,作为临床诊断似乎应以后者为主.
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遗传性第Ⅴ因子缺乏症血小板第Ⅴ因子活性分析
凝血第V因子(FV)是分子质量为330u的单链糖蛋白，正常人约75％存在于血浆中，其余的25％存在于血小板α颗粒中。活化的第V因子(FVa)作为辅因子，与活化的第X因子(FXa)、钙离子及磷脂共同构成凝血酶原酶复合物，参与凝血酶原的活化，是一种重要的凝血因子[1]。遗传性FV缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传性出血性疾病，近年发现，其出血症状的严重性与血浆中FV水平并不平行，而与血小板中FV活性高低有更密切的关系[1]。有关血小板中FV的测定，国内尚未见报道。我们采用发色底物法，对一个遗传性FV缺乏症家系患者的血小板FV活性进行了分析，现报道如下。
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颅内血肿抽吸引流术对脑出血患者血浆凝血酶含量的影响
为探讨高血压性脑出血(HCH)患者颅内血肿抽吸引流术后血浆凝血酶含量的变化,我们采用发色底物法检测了70例HCH患者的血浆凝血酶水平,现报告如下.
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SysmexCA-530型全自动血凝仪的应用体会
CA-530型血凝仪是日本东亚医用电子仪器有限公司生产小型全自动血凝仪，它可同时测定多项凝血试验，可以根据不同试验选择不同的实验方法：(1)凝固法；(2)发色底物法。作者对日本Sysmex公司CA-530型血凝仪作了初步实验评价如下。 1 材料与方法……
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ACL6000全自动血凝仪的使用评价
美国Beckman公司的ACL6000全自动血凝仪,融传统的血液凝固分析法和现代的发色底物法及免疫比浊检测原理于一体,操作简易而功能多样,适应现代临床医学的发展需要.现就ACL6000全自动血凝仪的凝固法按美国NCLLS方案进行以下内容评价:(1)重复性;(2)准确性;(3)线性;(4)回收试验;(5)交叉污染;(6)干扰试验.介绍如下:
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血浆蛋白C活性检测在呼吸疾病中的临床意义
目的探讨几种呼吸疾病患者血浆蛋白C活性的变化.方法对107例呼吸疾病患者及30例正常对照组,用发色底物法检测血浆蛋白C活性,比较分析其病理变化在几种呼吸疾病中的意义.结果显示血浆蛋白C活性肺癌组(129.2+19.1%)、慢性阻塞性肺疾病组(118.9+17.1%)均显著增高,与正常对照组(99.1±17.5%)比较均有显著性差异(P＜0.05);支气管哮喘患者组(102.3+18.8%)与正常对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论血浆蛋白C的活性异常显著升高有利于肺癌和慢性阻塞性肺疾病的辅助诊断.
