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日本血吸虫二价DNA疫苗的免疫保护效果研究
目的观察本课题组所构建日本血吸虫大陆株二价DNA疫苗VR101 2-SjGST-Sj31和VR1012-SjGST-Sj32的免疫保护效果.方法用纯化质粒免疫昆明鼠:60只小鼠分为5组,2个对照组的小鼠分别于股四头肌注射生理盐水100μl或空质粒VR1012 100μg,3个实验组的小鼠则同法分别注射VR1012-SjGST、VR1012-SjGST-Sj31和VR1012-SjGST-Sj32各100μg,每隔3周免疫1次,共免疫3次,以间接免疫荧光法观察VR1012-SjGST-Sj31、VR1012-SjGST-Sj32在肌肉组织中的表达后,每只鼠经腹部感染10条尾蚴,45 d后剖杀计数各小鼠成虫数及肝卵数,并用ELISA分析小鼠血清中的抗体.结果ELISA分析表明,第3次免疫后小鼠出现特异性IgG抗体.与生理盐水组比较,3个实验组的减虫率分别为33.90%、33.90%及27.14%(P＜0.01),减卵率分别为61.86%、74.88%及68.87%(均为P＜0.01),每雌肝减卵率分别为44.67%、59.40%、54.32%(P＜0.01).与VR1 012-SjGST组相比,VR1012-SjGST-Sj31和VR1012-SjGST-Sj32组的减卵率分别为34.19%(P＜0.01)、1 8.51%(P＜0.01),每雌肝减卵率为26.62%、17.46%(P＜0.01).结论DNA疫苗VR101 2-SjGST-Sj31和VR1012-SjGST-Sj32能在组织中正常表达,能诱导小鼠产生一定水平的抗日本血吸虫感染保护作用,二价疫苗的抗生殖免疫效果要大于单价疫苗.
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重组血吸虫GST-Sj31蛋白对小鼠的免疫保护性研究
目的在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)b、c片段蛋白,并对表达产物进行免疫保护效果测定.方法分别将重组质粒pGEX-Sj31b,pGEX-Sj31c转化感受态大肠杆菌ER2566,在IPTG诱导下进行表达,表达产物GST-Sj31b、GST-Sj31c蛋白分别免疫小鼠,免疫第3次后进行攻击感染,观察其免疫保护效果.结果在IPTG诱导下,表达载体中的SjGST基因与重组Sj31b和Sj31c基因获得了高效融合表达,用这两种融合蛋白免疫小鼠,分别诱导产生了22.71%和13.6%的减虫率;减卵率分别为54.21%及45.01%.结论重组质粒pGEX-Sj31b,pGEX-Sj31c可在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白GST-Sj31b能诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力,而GST-Sj31c的减虫率为13.6%.
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日本血吸虫SjCTPI和SjC23 DNA疫苗联合免疫保护作用的研究
目的探索SjCTPI和SjC23 DNA疫苗联合应用保护性免疫的协同作用.方法大量制备pcDNA3.1-SjCTPI和pcDNA3.1-SjC23的质粒DNA.48只BALB/c小鼠分为4个组(A、B、C、D组)每组12只.A组每鼠经双侧股四头肌注射100 μg pcDNA3.1的质粒DNA,为对照组;B组为SjC23组,每鼠肌注100 μg pcDNA3.1-SjCTPI的质粒DNA;C组为SjCTPI组,每鼠肌注100 μg pcDNA3.1-SjCTPI的质粒DNA;D组为联合免疫组,每组肌注100 μg pcDNA3.1-SjC23和100 μg pcDNA3.1-Sj CTPI质粒DNA的混和物.分别于0、14、28 d免疫3次.末次免疫后30 d,每鼠经腹部皮肤攻击感染(45±2)条日本血吸虫尾蚴.攻击后45 d,剖杀所有小鼠,灌冲,收集成虫并计数.每鼠肝脏称重后剪碎,置5%KOH中消化,并计数虫卵数.比较各组间的减虫率和减卵率.结果与对照组相比,SjC23组、SjCTPI及联合组的减虫率分别为28.1%、29.1%和41.5%,均非常显著地高于对照组(P分别为＜0.01,＜0.01,＜0.001),而联合组则又显著地高于单独SjC23组及单独SjCTPI组(P均＜0.05).三组的减卵率分别为37.9%、44.2%和61.4%,均非常显著地高于对照组(P分别为＜0.01,＜0.01,＜0.001),但联合组则显著地高于单独SjC23组及单独SjCTPI组(P均＜0.05).结论 SjC23DNA疫苗和SjCTPI DNA疫苗联合免疫可非常显著地提高这两种疫苗分别单独应用时的免疫保护作用.
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日本血吸虫rSj338及膜蛋白rSj22.6抗原表位联合免疫对小鼠的保护性研究
目的观察日本血吸虫(中国大陆株)的线粒体相关蛋白rSj338及膜蛋白rSj22.6有效抗原表位混合后对小鼠的免疫保护性,为将来复合疫苗的研制提供理论依据.方法分别用特异性抗rSj338抗体和抗rSj22.6的抗体筛选噬菌体随机12肽库,将获得的rSj338的有效抗原表位与rSj22.6有效抗表位混合后免疫BALB/c小鼠,并与rSj338的有效抗原表位混合免疫组进行比较.结果 rSj338的4种表位和rSj22.6抗原的4种表位混合免疫组小鼠获得了45.4%(P＜0.01)的减虫率及59.1%(P＜0.01)肝总减卵率,rSj338的4种表位混合免疫组小鼠获得了34.2%(P＜0.01)的减虫率及46.8%(P＜0.01)肝总减卵率;rSj338 4种表位和rSj22.6的4种表位混合免疫组获得的减虫率和肝总减卵率均高于rSj338的4种表位混合免疫组,差异有显著性(P＜0.05).结论两种抗原分子的有效抗原表位联合免疫的效果优于单个抗原分子的有效抗原表位.
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日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白对小鼠免疫保护性的初步研究
目的研究日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白(rSj338/26GST)对小鼠的免疫保护性,预测其作为血吸虫疫苗候选分子的潜能.方法将编码日本血吸虫线粒体相关蛋白的cDNA经PCR扩增后亚克隆入载体质粒pGEX-6p-1进行表达,并用表达的重组抗原的融合蛋白免疫BABL/c小鼠.结果与对照组相比,rSj338/26GST重组蛋白免疫小鼠获得了32.3%的减虫率及46.5%肝总减卵率;与Sj26GST免疫组相比,rSj338抗原可能使小鼠获得22.5%的减虫率及30.0%的肝总减卵率.结论证明重组的日本血吸虫线粒体相关蛋白(rSj338/26GST及rSj338)可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力,可望成为新的疫苗候选分子.
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弓形虫棒状体蛋白及其核酸疫苗研究现状
弓形虫病目前尚无理想的特效治疗药物和防治措施,研制安全便捷、保护力强的核酸疫苗是弓形虫病防治的有效策略.棒状体蛋白(Rhoptry protein,ROPs)是弓形虫在入侵宿主细胞过程中所分泌的一类蛋白,其在弓形虫入侵宿主细胞、纳虫空泡(Parsitophorous vacuole,PV)形成及胞内弓形虫的增殖调控等方面发挥着重要作用,是具潜力的疫苗候选抗原分子之一.本文就ROPs家族重要成员特性、表达载体选择及其核酸疫苗在动物实验中的免疫原性,以及免疫保护作用等方面进行了概述.
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弓形虫磷酸丙糖异构酶原核表达及免疫保护的初步研究
目的 克隆刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase,TPI)基因,原核表达和纯化蛋白,研究其对弓形虫感染小鼠的免疫保护作用.方法 抽提弓形虫速殖子总RNA,利用PCR技术扩增刚地弓形虫TPI基因,构建重组原核表达载体TPI/pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达,镍亲和层析法纯化目的蛋白.将与佐剂乳化后的TPI蛋白对小鼠颈背部多点皮内免疫,间隔2周,连续免疫4次,后一次为加强免疫,同时设置佐剂对照组与正常对照组.尾静脉采血检测小鼠血清抗体效价.以400个弓形虫速殖子/只接种小鼠腹腔,观察记录各组小鼠的生存率.结果 成功扩增到弓形虫TPI基因,构建原核表达载体TPI/pET-28a(+),获得纯化的TPI蛋白,TPI免疫4次后的小鼠血清抗体效价可达1:100000以上,且生存期显著高于佐剂对照组与正常对照组.结论 弓形虫TPI蛋白对弓形虫感染小鼠具有一定的免疫保护作用,为研究弓形虫疫苗奠定了理论基础.
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重组生长激素对COPD合并呼吸衰竭患者应用呼吸机过程中的免疫保护作用
目的：探讨重组生长激素对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease ，COPD）合并Ⅱ型呼吸衰竭患者应用呼吸机过程中的免疫保护作用。方法选取2014年7月～2015年11月台州市立医院符合纳入标准的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭均应用呼吸机辅助治疗患者52例，按随机数字表法分为对照组与研究组，每组26例。对照组予以常规治疗，研究组在常规治疗基础上予以重组生长激素8 U／d皮下注射治疗。治疗前和治疗14 d后采血测定营养指标、免疫功能指标、炎症因子指标及氧化应激指标。结果与治疗前比较，2组治疗后总蛋白、白蛋白、转铁蛋白及纤维连接蛋白含量升高，IgM、IgG及CD4＋、CD8＋和CD4＋／CD8＋含量升高，肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）、白介素8（interleukin－8，IL－8）及C反应蛋白（C reactive protein，CRP）含量降低，丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）及总抗氧化能力（total antioxidant capacity，TAO）含量降低，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量升高（P＜0．05）；与对照组比较，研究组治疗后总蛋白、白蛋白含量较高，IgM、IgG及CD4＋、CD8＋和CD4＋／CD8＋含量较高，TNF－α、IL－8及CRP含量较低，MDA、GSH及TAO含量较低，SOD含量较高（ P＜0．05）。结论重组生长激素对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者应用呼吸机过程中的免疫功能具有保护作用，能提高营养指标，降低炎症反应。
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肾、带血管蒂肾上腺联合移植的实验研究
目的:建立肾、带血管蒂肾上腺移植大鼠模型,探索肾、肾上腺联合移植对移植肾的免疫保护作用.方法:分别建立假手术、肾移植和肾、带血管蒂肾上腺联合移植模型,对各组在血皮质醇、肾功能、移植肾病理等方面进行比较.结果:肾、带血管蒂肾上腺联合移植组血皮质醇浓度明显高于肾移植组(P＜0.05),血尿素氮及肌酐明显低于肾移植组(P＜0.05),移植肾排斥反应明显减轻.结论:肾、肾上腺联合移植对移植肾可产生免疫保护作用,其机制可能是通过移植肾上腺分泌内源性皮质激素产生免疫抑制作用.
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钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用
目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株groEL基因原核重组表达系统,了解重组表达的GroEL蛋白(rGroEL)对金地鼠的免疫保护作用.方法:采用高保真PCR扩增问号钩体赖株groEL基因并测序,常规方法构建groEL基因原核表达系统.采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rGroEL表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL.观察rGroEL免疫金地鼠对问号钩体赖株感染的保护率.采用MAT法检测免疫动物血清与我国流行问号钩体血清群交叉凝集效价.结果:所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列与GenBank中相应基因完全相同.所构建的groEL基因原核表达系统能表达可溶性rGroEL.100和200 μgrGroEL对金地鼠的免疫保护率分别为50.0％和75.0％.rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各问号钩体血清群.结论:GroEL蛋白是问号钩体属特异性保护性抗原,可用于制备通用性钩体基因工程疫苗.
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黄芪多糖对小鼠生殖道沙眼衣原体感染免疫保护作用的研究
[目的]探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）对小鼠生殖道沙眼衣原体感染的免疫保护效果。[方法]建立小鼠生殖道沙眼衣原体感染的模型得出原体的小有效感染量，用不同剂量（10mg·kg-1、20mg·kg-1、40mg·kg-1）的黄芪多糖和0.9%生理盐水注射液免疫小鼠，并以空白组作为对照组，免疫后ELISA方法检测各小鼠血清IgG抗体水平，免疫一周后用两倍有效感染量的原体攻击生殖道，再每间隔2d取小鼠生殖道脱落上皮细胞进行培养，10d后处死小鼠计算脾、胸腺指数，并观察小鼠整个生殖道的病理改变。[结果]黄芪多糖组脾（胸腺）指数和血清IgG抗体水平明显高于对照组，生殖道脱落细胞沙眼衣原体培养结果显示，黄芪多糖组阳性率明显降低，所形成的包涵体数也明显减少，且随黄芪多糖浓度的增加，保护效果越明显。生理盐水组各项指标与对照组无明显差异。[结论]黄芪多糖对沙眼衣原体生殖道攻击的小鼠有免疫保护作用，且在研究浓度范围内，随浓度的增加保护效果越佳。
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日本血吸虫P14基因纳米微球-DNA疫苗的免疫保护作用
目的 探讨日本血吸虫碱性调宁蛋白样蛋白P14基因的重组真核表达载体(pcDNA3.1(+)-SjP14)对小鼠血吸虫感染的免疫保护作用.方法 制备无内毒素pcDNA3.1 (+)-SjP14及纳米微球DNA疫苗,将雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别为生理盐水对照组、pcDNA3.1(+)-Sj P14组及纳米微球-DNA疫苗组.各组小鼠分别肌肉注射生理盐水和pcDNA3.1(+)-Sj P14、纳米微球DNA疫苗100μg/鼠·次,每2周免疫一次,共3次.末次免疫后2周,尾蚴攻击,6w后处死小鼠,收集成虫,计算减虫率；同时留取肝脏,部分消化后在显微镜下行虫卵计数,计算减卵率.结果 pcDNA3.1(+)-Sj P14p核酸疫苗能明显提高小鼠的抗血吸虫感染能力,减虫率和减卵率分别达到44.6％和61.6％；纳米微球-DNA疫苗免疫能进一步提高小鼠抗血吸虫感染作用,减虫率和减卵率分别提高至56.2％和73.5％.结论 pcDNA3.1(+)-Sj P14核酸疫苗有一定程度的抗血吸虫感染作用,pcDNA3.1(+)-SjP14-纳米微球复合物疫苗免疫能增强小鼠对血吸虫感染的免疫保护作用.
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辅助肝脏对其它同种移植物的免疫保护作用
目的探讨辅助性肝脏移植免疫学特点,明确辅助肝脏移植物的免疫保护作用.方法分析二例辅助性肝脏移植患者的免疫学指标和病理学资料.结果辅助性肝脏移植患者免疫抑制剂浓度相对较低,排斥反应次数少,强度低.存活良好的辅助性肝移植患者的其它移植物功能良好.结论辅助性肝脏移植术后处于免疫低反应状态.辅助性肝脏对其它移植物有免疫保护作用,低浓度免疫抑制剂对辅助肝脏和其它同种移植物的负作用也较小.
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白细胞介素12在伯氏疟原虫红细胞内期感染中的免疫调节作用
[目的]探讨白细胞介素12(IL-12)在伯氏疟原虫(P.berghei)红细胞内期感染中的免疫调节作用.[方法]BALB/c小鼠接种5×105个感染P.berghei的RBC,分别以不同剂量(0.01、0.03、0.10和0.15μg/d)IL-12,或分别在不同给药时间(感染前1 d、感染同时、感染后第3 d)给予0.03μg/d IL-12,各组均连续用药6 d.观察各组小鼠原虫血症变化及存活时间.[结果]与对照组比较,较低剂量(0.01或0.03 μg/d)IL-12均可显著推迟血中原虫的出现及原虫血症达峰值的时间,但仅0.03μg/d剂量可明显提高生存率;较高剂量(0.1或0.15μg/d)IL-12则增加原虫密度,加速小鼠死亡.在感染的第3 d给予0.03μg/d IL-12,对原虫血症、生存率均无明显影响.IL-12不能改变感染的结局,终各组小鼠均死亡.[结论]IL-12具有免疫保护和毒副反应双重活性.诱导保护作用而减少毒副作用,剂量及给药时间是关键,适时地给予适当剂量的IL-12可诱导抗红内期疟原虫的部分保护作用.
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弓形虫ROP5基因真核表达载体的构建及其免疫保护性的研究
目的 构建弓形虫pcDNA-ROP5真核表达载体,观察弓形虫ROP5基因在小鼠体内诱导的免疫反应.方法 克隆弓形虫ROP5基因,将其插入真核表达载体pcDNA-3.1中构建重组质粒pcDNA-ROP5,脂质体法转染Hela细胞体外表达蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定.将45只小鼠随机均分为3组,分别为PBS组、空质粒组、pcDNA3.1-ROP5组,每2 w肌注免疫(100 μg/只)1次,共3次,于免疫前及每次免疫前1 d和末次免疫后2 w收集小鼠血清,用间接ELISA法检测血清抗弓形虫的IgG.各组小鼠腹腔注射RH株弓形虫速殖子1 000个/每鼠,观察小鼠受攻击感染后的存活时间.结果 真核表达载体构建成功,Western blotting分析结果显示,重组质粒pcDNA3.1-ROP5能在Hela细胞表达,蛋白相对分子质量为61 kDa.pcDNA3.1-ROP5末次免疫后血清中IgG水平显著高于其他组,pcDNA-ROP5免疫的小鼠与对照组相比,实验组小鼠产生了明显的体液免疫应答.攻击感染试验中,实验组的小鼠比对照组的存活时间有明显延长.结论 构建的真核表达重组质粒pcDNA-ROP5对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性.
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弓形虫pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗免疫保护性的研究
目的 研究pcDNA3-p30-ROP2- HSP70复合核酸疫苗的免疫保护作用.方法 150只BALB/c小鼠随机分为5组,其中3实验组,每鼠分别肌肉注射pcDNA3-p30-ROP2-HSP70、pcDNA3-p30-ROP2、pcDNA3-ROP2各50 μg;2对照组每鼠分别注射pcDNA3空质粒50 μg、PBS 50 μL.共免疫3次,每次间隔2 w,末次量加倍.末次免疫后2w,各组分别取6只小鼠的血清和脾组织,检测CD+4、CD+8及各细胞因子.各组其余小鼠腹腔注射RH株弓形虫速殖子500个/每鼠,观察其存活时间等.结果 pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应.小鼠血清抗体滴度高并能识别重组ROP2蛋白抗原；免疫接种后CD+4和CD+8均增殖明显,组间有显著性差异(F=45.00,P＜0.01;F=15.01,P＜0.01),实验组CD+4/CD+8比值增加明显,各组间有显著性差异(F=9.17,P＜0.01)；其脾、淋巴结细胞培养液及血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)均有不同程度的升高,尤其是血清中升高为显著.弓形虫攻击感染后,实验组与对照组比较,实验组小鼠存活时间明显延长.结论 该复合核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生良好的免疫保护作用.
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幽门螺杆菌黏附素HpaA蛋白在大肠杆菌中表达及其免疫保护作用
目的 表达和纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. Pylori)黏附素HpaA蛋白,研究其免疫活性和对小鼠的免疫保护作用.方法 诱导TB1(pMAL-c2X-hpaA)表达H. Pylori黏附素HpaA蛋白, Amyloss树脂预装柱进行分离、纯化,Western blot鉴定其免疫学活性;纯化蛋白免疫小鼠后, H. Pylori国际标准菌株NCTC11637攻击感染,观察H. Pylori定植情况及免疫保护效果.结果 获得了高纯度且免疫活性良好的目的蛋白;HpaA蛋白免疫小鼠的保护率为53.33% (8/15),与对照组统计学差异显著(P = 0.002).结论 纯化HpaA蛋白对小鼠有免疫保护作用,可作为H. Pylori基因工程疫苗的候选组分.
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微小隐孢子虫重组BCG疫苗免疫保护作用观察
目的 研究微小隐孢子虫重组BCG疫苗的免疫保护作用.方法 100只BALB/c小鼠随机分为4组,BCG组免疫BCG,载体组免疫含PMV262质粒的BCG(BCG-PMV262),实验组免疫rBCG-CP15/60-23(各组均为每鼠尾静脉注射0.1mL,接种物浓度均为106细菌/mL),对照组每鼠尾静脉注射0.05 mol/L pH7.2 PBS 0.1mL.免疫后,每组分别随机选6只小鼠检测其血清抗体和脾细胞培养液中的CD+4、CD+8 以及细胞因子水平,各组剩余小鼠进行攻击实验.结果 rBCG-CP15/60-23能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,小鼠血清抗体水平于免疫后2周逐渐升高,与BCG组和载体组差异显著(P均<0.05);脾细胞培养液中白细胞介素2(IL-2)、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)均有不同程度的升高,实验组IFN-γ和IL-2含量与对照组和BCG组差异显著(P均<0.05),IL-12水平组间差异无统计学意义(P＞0.05).各组小鼠经隐孢子虫卵囊攻击感染后,实验组小鼠卵囊排泄数量减少40%～60%,初始排卵囊时间延长2d,卵囊持续排出时间缩短5d;组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗免疫小鼠后,能产生良好的免疫保护作用.
关键词： 微小隐孢子虫 BCG-CP15/60-23 疫苗 免疫保护 -
细粒棘球绦虫(中国大陆株)亲肌肉抗原重组蛋白的免疫保护性研究
目的 探讨细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)亲肌肉抗原重组蛋白的免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值.方法 ICR小鼠随机分为蛋白免疫组和佐剂对照组,每隔2w皮下免疫1次,在第3次免疫后2周,用Eg原头蚴进行攻击感染,感染后20w剖杀小鼠,检获棘球蚴包囊,计算免疫保护力,并用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平.结果 与佐剂对照组比较,蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为94.46%;与免疫前比较,免疫后和攻击感染后蛋白免疫组小鼠血清IgG、IgG1、IgG3和IgE水平均明显升高(P<0.05),IgG2b降低(P<0.05).结论 细粒棘球绦虫亲肌肉抗原重组蛋白能诱导小鼠产生一定的保护性免疫,是潜在的疫苗候选抗原分子.
关键词： 细粒棘球蚴 Eg myophilin重组蛋白 免疫保护 -
广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆表达及免疫保护作用研究
目的 对广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)基因进行克隆、原核表达,并对表达产物的免疫保护作用作出初步鉴定.方法 将广州管圆线虫cystatin基因克隆入载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达.用纯化融合蛋白隔周免疫小鼠1次,共3次,设GST免疫及未免疫对照组,末次免疫后1w用广州管圆线虫Ⅲ期幼虫攻击感染,3w后剖杀小鼠,计算减虫率及保护率,并测定小鼠特异性IgG抗体水平变化.结果 成功构建了pGEX-4T-1/cystatin重组表达质粒,并在大肠杆菌中得以高效可溶性表达,融合蛋白免疫小鼠后诱导产生了58.1%的减虫率及20%的保护率,与对照组相比减虫效果显著(P<0.01).结论 广州管圆线虫cystatin基因能在大肠杆菌中高效表达并可诱导小鼠产生一定水平的保护性免疫力.
关键词： 广州管圆线虫 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 分子克隆 免疫保护
