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肺癌癌性胸水中TIL对肺癌细胞杀伤活性的实验研究
目的:研究肺癌癌性胸水中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)对肺癌细胞株(A549)的杀伤活性,为临床应用TIL治疗肺癌提供依据.
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HLA-G 与免疫耐受
人类白细胞抗原-G( human leukocyte antigen G , HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,其基因多态性、组织分布、结构及生物学功能等方面与经典的HLAⅠ类抗原显著不同。生理情况下, HLA-G抗原主要表达在绒毛外滋养层细胞、成人胸腺髓质、角膜等组织细胞。病理情况下, HLA-G能在多种肿瘤、器官移植物、炎性疾病和病毒感染等组织细胞中诱导性表达[1]。 HLA-G通过与免疫细胞上的抑制性受体( KIR2DL4、ILT2、ILT4)相互作用直接发挥免疫抑制功能,如抑制NK细胞和CTL介导的细胞杀伤活性,抑制B 细胞分化和DC 细胞成熟等。此外, HLA-G可诱导产生多种调节性细胞( Treg、Tr1细胞、DC-10等)及细胞因子( IL-10、TNF-α、IFN-γ等)发挥长效免疫抑制效应[2]。本文就HLA-G在免疫耐受机制中的研究进展作一综述。
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NKG2D配体在鼻咽癌细胞的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响
NK细胞对靶细胞的杀伤活性与其细胞表面的受体和靶细胞表面的配体密切相关,NKG2D为NK细胞活化性受体,表达于所有的NK细胞表面,是介导NK细胞识别和溶解肿瘤细胞的主要活化性受体.NKG2D配体为MHC Ⅰ类链相关基因产物(MICA、MICB)及ULBPS(人巨细胞病毒UL16蛋白的结合蛋白ULBP1、ULBP2、ULBP3),NKG2D的配体在多种肿瘤细胞表达,其在鼻咽癌细胞的表达尚未见报道.本文通过流式细胞仪技术探讨其在鼻咽癌细胞CNE2的表达情况,并进一步分析其在NK细胞杀伤CNE2细胞中的作用.
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树突状细胞诱导肿瘤浸润性淋巴细胞抗胃癌免疫的研究
目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对胃癌细胞杀伤活性.方法:从胃癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体胃癌细胞和SCC-7901细胞的杀伤活性.结果:DC激活的TIL具有很高的对自体胃癌细胞杀伤活性,杀伤率为(87.3±3.0)%,明显高于未经DC激活的TIL,CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体胃癌细胞的杀伤率,分别为(54.4±1.5)%,(53.9±1.5)%和(3.6±0.2)%.而他们对SGC-7901细胞的杀伤活性则相对较低.结论:胃癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗胃癌免疫.
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CD4+ CD25+ 调节T细胞对肝癌特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性的影响
CD4+ CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是体内主要的免疫调节细胞,研究发现多种肿瘤患者的外周血及肿瘤局部均有Treg的比例增高,提示Treg在肿瘤的发生发展过程中可能起重要的作用.
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不同方式刺激脐血树突状细胞对细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞杀伤活性的影响
目前对造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后残留肿瘤细胞的清除需通过过继免疫治疗等手段来解决.通过特定细胞因子联合扩增脐血中细胞因子诱导杀伤(cytokine-induced killer,CIK) 细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞,可增强脐血移植(UCBT)后的移植物抗白血病(graft-versus-leukemia,GVL)效应.树突状细胞(dendritic cells ,DC)在免疫应答的诱导中具有独特地位,为了探讨DC以何种方法作用于免疫效应细胞能对免疫杀伤细胞达到更有效的刺激效果,本实验研究了脐血来源的DC以不同的刺激方式作用于同一来源的脐血CIK、NK细胞,探讨对其杀伤活性的影响.
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乳杆菌肽聚糖对结肠癌细胞的抑制作用及其免疫机制研究
目的:研究乳杆菌肽聚糖(PG)的抑瘤作用及其机制.方法:利用荷瘤、细胞培养和DNA凝胶电泳等技术,研究PG对CT26结肠癌细胞的抑制作用及其对免疫细胞杀伤活性和细胞因子的影响.结果:腹腔注射PG可显著抑制结肠癌细胞的生长,抑瘤率高达54.2%,并诱导其凋亡;PG可诱导IL-1、TNF-α、IFN-γ和NO的产生,而对IL-2无显著影响;PG亦可使CTL、NK、PMФ的杀伤活性显著提高.结论:乳杆菌PG通过提高机体的免疫功能抑制结肠癌肿瘤的生长.PG激活NK细胞、PMФ产生IFN-γ、TNF-α和NO可能部分介导了它的抗肿瘤作用.
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脑梗死患者机体细胞免疫功能变化的研究
当机体受到外伤、感染等应激情况时,产生大量肾上腺皮质激素,机体免疫力降低.中枢神经系统损害必然对机体的免疫功能产生一定的影响.本实验使用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群和NK细胞杀伤活性的变化.
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锤头状核酸抑制CTLL-2细胞凋亡而增强其对Yac-1 细胞杀伤活性的实验研究
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γ-干扰素抗系统性白色念珠菌感染的机制及应用
γ-干扰素(IFN-γ)是由活化的Th1细胞、自然杀伤(NK)细胞和细胞毒T细胞(CTL)产生的致炎因子.其受体具有高亲和力,分布于几乎所有细胞表面.IFN-γ生物学活性有高度的种属特异性,与特异的受体结合后可显示多种功能,如激活巨噬细胞(Mφ)并增强其活性;激活中性粒细胞;提高NK细胞杀伤活性;激活血管内皮细胞;促进Th0细胞分化为Th1细胞并抑制Th2细胞增生;促进CTL成熟及活化等.近年的研究表明,IFN-γ也是一种重要的具有抗系统性真菌感染作用的细胞因子.
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蝎毒多肽促进肝脏移植瘤中自然杀伤细胞表达的机制研究
目的:观察蝎毒多肽提取物( PESV)对H22肝脏原位移植瘤模型小鼠肝脏NK细胞表达及功能的影响。方法:C57BL/6小鼠肝脏接种H22肝癌细胞株悬液构建原位移植瘤模型,术后给予PESV大、小剂量及生理盐水灌胃,14 d后检测肝脏及浸润癌组织中NK细胞及穿孔素、颗粒酶B的表达变化并观察小鼠生存期。结果:PESV大、小剂量组肝脏移植瘤的生长受到抑制,肿瘤体积和瘤重均低于荷瘤对照组,肿瘤抑制率分别为30.77%和15.38%,生存期观察显示PESV大剂量组与荷瘤对照组相比差异显著;荷瘤对照组肿瘤细胞排列紧密,异型性显著,呈浸润性生长,PESV大、小剂量组出现明显坏死区,细胞异型性减轻;与荷瘤对照组相比,PESV大、小剂量组小鼠肝脏NK1.1+细胞分别占肝脏总淋巴细胞的(4.13±0.43)%和(5.91±0.49)%,显著高于荷瘤对照组( P<0.05);PESV大剂量组瘤组织中穿孔素和颗粒酶的mRNA表达量分别是荷瘤对照组的3.62倍和5.82倍(P<0.05)。结论:PESV可通过提高H22肝脏原位移植瘤小鼠肝脏中NK细胞的表达,诱导穿孔素和颗粒酶B的产生,促进NK细胞杀伤活性的恢复,增强对肿瘤细胞的清除。
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模拟失重对IL-2诱导的人NK细胞生物活性的影响
目的 明确模拟失重对白细胞介素2(IL-2)诱导的人自然杀伤(NK)细胞活性的影响.方法 回转细胞模拟失重条件培养人NK细胞,CCK-8法检测NK细胞增殖活性、异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)产生水平,反转录PCR检测NK细胞IL-12β1和IL-12β2受体mRNA水平.结果 与正常重力组相比,模拟失重培养24h和48 h后,IL-2诱导的NK细胞增殖水平分别下降13.6%和31%,凋亡率分别增加8%和19%,IFN-γ分泌水平分别降低25.2%和47.8%,杀伤活性分别下降7%和18%,IL-12刺激IL-2预处理NK细胞产生IFN-γ的水平分别降低21.8%和58.8%,同时,NK细胞IL-12β1和IL-12β2受体mRNA水平显著降低.结论 模拟失重抑制IL-2诱导的NK细胞增殖、IFN-γ产生和杀伤活性,并进一步通过下调IL-12受体mRNA表达抑制IL-12诱导的IFN-γ产生.