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多器官功能障碍综合征患者T淋巴细胞亚群的临床意义
目的:观察多器官功能障碍综合征(MODS)患者T淋巴细胞亚群变化并探讨其临床意义.方法:以MODS患者40例(年龄40岁～86岁)和非MODS患者40例(年龄27岁～82岁)为研究对象,采用流式细胞仪FACS Calibuv(美国BD公司)定量测定外周血CD3+T细胞(CD3阳性淋巴细胞)、CD4+T细胞(CD4阳性淋巴细胞)和CD8+T细胞(CD8阳性淋巴细胞)的百分比及CD4+T/CD8+T值.结果:相比非MODS患者,MODS组CD3+T、CD4+T、CD8+1的百分比及CD4+T/CD8+T值均降低(P<0.01).与MODS存活组相比,死亡组患者CD4+T的百分比和CD4+T/CD8+T值降低(P<0.05或P<0.01),而CD3+T和CD8+T百分比的差异没有统计学意义(P>0.05).结论:MODS患者存在细胞免疫功能损害,死亡组MODS患者损害更为严重.外周血T淋巴细胞亚群检测对MODS患者免疫功能评价和判断预后具有重要的临床意义.
关键词： 多器官功能障碍综合征 CD4+T CD8+T T淋巴细胞 细胞凋亡 -
咳喘宁含药血清对呼吸道合胞病毒诱发大鼠哮喘模型CD4+T、CD8+T细胞内PI3K、STAT6的干预研究
目的:探讨咳喘宁含药血清对呼吸道合胞病毒诱发大鼠哮喘模型CD4+T、CD8+T细胞内PI3K、STAT6的干预作用.方法:制作呼吸道合胞病毒诱发大鼠哮喘模型,提取并培养CD4+T、CD8+T细胞,采用RT-PCR和WesternBlot方法观察咳喘宁含药血清对呼吸道合胞病毒诱发大鼠哮喘模型CD4+T、CD8+T细胞内PI3K、STAT6的干预作用.结果:咳喘宁组PI3K mRNA、STAT6 mRNA表达量均较模型组和阳性药组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).咳喘宁组PI3K蛋白、STAT6蛋白的相对表达量均较模型组和阳性药组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:咳喘宁含药血清对呼吸道合胞病毒诱发哮喘模型大鼠CD4+T、CD8+T细胞内PI3K、STAT6及其mRNA过高的表达产生明显抑制作用,从而纠正Th2细胞的过度增殖分化,影响Th2免疫应答优势,可能为其防治哮喘的作用机制之一.
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进展性与非进展性脑梗死患者阿托伐他汀治疗前后T淋巴细胞亚群的变化
目的 通过研究进展性和非进展性脑梗死在阿托伐他汀治疗前后T淋巴细胞亚群的变化,探讨他汀类药物治疗脑梗死的免疫学机制.方法 选择53例急性脑梗死患者,分为进展和非进展组,应用流式细胞分析仪检测两组患者阿托伐他汀治疗前后T淋巴细胞亚群相对计数,并且根据患者治疗前后神经功能缺损程度进行效果评价.结果 进展组治疗前后比较:CD4+T细胞和CD4/CD8值显著升高,CD8+T细胞显著降低;非进展组治疗前后比较:CD4/CD8值显著升高;两组治疗前后神经功能缺损评分自身比较,均明显降低.结论 阿托伐他汀治疗前后,进展性和非进展性脑梗死患者体内T淋巴细胞亚群分布发生了不同程度的变化.阿托伐他汀可能通过提高CD4+T细胞水平,促进急性脑梗死的恢复.
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18例复发性流产患者调节性T淋巴细胞在孕期前后变化
目的:对18例复发性流产患者采用主动免疫方法,治疗前后进行CD4+ CD25+ highT细胞、CD4 +T细胞、CD8+T细胞水平检测,探讨T细胞群在妊娠期参与调控母体免疫反应中的作用.方法:采用流式细胞仪分别对18例复发性流产患者在流产后初诊时、免疫治疗后3次、孕后免疫治疗2次时其外周血淋巴细胞CD4+ CD25+highT细胞、CD4+T细胞、CD8+T比例进行分析.结果:18例复发性流产患者的CD8+T细胞占淋巴细胞初诊时比例为(22.5±1.35)％、免疫治疗后3次比例为(26.10±1.62)％；CD4+ CD25+ highT细胞占淋巴细胞比例初诊时为(0.98±0.26)％,免疫治疗后3次比例为(1.25±0.35)％；其中12例复发性流产患者孕后免疫治疗2次时的CD8+T占淋巴细胞比例为(29.50±2.20)％,CD4+ CD25+ highT细胞占淋巴细胞比例为(1.56±0.29)％.结论:主动免疫治疗可以提高外周血CD4+ CD25+ highT、CD8+T细胞水平,从而调控母胎界面免疫耐受的形成.
关键词： 复发性流产 CD4+ CD25+highT细胞 CD4+T CD8+T -
PD-L1在人胎盘源间充质干细胞对脐血CD8+T细胞免疫调节中的作用
目的:研究PD-L1在人胎盘源间充质干细胞(Human placenta mesenchymal stem cell,hPMSCs)介导的对脐血CD8+T细胞活化、周期及对IL-17分泌免疫调节中的作用.方法:RT-PCR及FCM检测hPMSCs对PD-L1的表达；应用化学合成的PD-L1 siRNA阻断PD-L1在hPMSCs上的表达；免疫磁珠分选脐血CD8+T细胞；FCM分析阻断PD-L1后,hPMSCs对PHA刺激下CD8+T细胞活化、周期及PMA活化下CD8+T细胞分泌IL-17的影响.结果:hPMSCs高表达PD-L1分子,PD-L1 siRNA能有效阻断hPMSCs对PD-L1的表达；FCM分析结果显示,hPMSCs能够抑制CD8+T细胞对CD69的表达,但阻断PD-L1后,CD69的表达与未阻断组相比无明显变化；与未阻断组相比,处于G0/G1期的CD8+T细胞数量明显减少,处于S期的细胞数量明显增加；在hPMSCs存在条件下,脐血CD8+T细胞对IL-17的分泌明显增加,阻断PD-L1的表达后,IL-17的分泌被进一步上调.结论:PD-L1在hPMSCs上表达能够协同hPMSCs对脐血CD8+T细胞周期的抑制,并且能够抑制hPMSCs上调CD8+T细胞对IL-17的分泌.
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慢乙肝患者HBeAg、肝功能与外周血CD8+T细胞的关系
目的:研究慢乙肝患者的两项常用实验室指标e抗原(HBeAg)、肝功能与外周血CD8+T细胞的关系.方法:收取慢乙肝患者76例,按感染状态的不同分四组:HBeAg阳性肝功能正常组13例;HBeAg阳性肝功能异常组25例;HBeAg阴性肝功能正常组20例;HBeAg阴性肝功能异常组18例.另收集健康对照组(HC)21例.分别检测生化学、血清学指标及CD8+T细胞水平,统计并分析数据.结果:肝功能正常慢乙肝患者(29.11±4.99)、健康对照(32.60±5.62)、肝功能异常慢乙肝患者(35.83±6.16)相比,外周血CD8+T细胞水平逐渐增高,且差别都有统计学意义(P<0.05).结论:①慢乙肝患者的细胞兔疫应答功能不受影响;②判断慢性HBV感染的感染状态时,可参考肝功能水平,不必参考HBeAg状态.
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复方利多卡因乳膏联合强脉冲光照射对激素依赖性皮炎T细胞亚群及IgE的调节作用
156例激素依赖性皮炎(hormone dependence dermatitis,HDD)患者,分为治疗组52例、对照Ⅰ组53例、对照Ⅱ组51例.治疗组给予低能量强脉冲光(intense pulsed light,IPL)照射治疗,每3周1次,共4次,外涂复方利多卡因乳膏(递减),共8周;对照Ⅰ组单纯外涂复方利多卡因乳膏,对照Ⅱ组单纯IPL照射治疗,方法与疗程同治疗组匹配.3组均于治疗前、治疗后、治后4周记录症状积分,流式细胞仪检测CD4+、CD8+T的水平,ELISA双抗体夹心法检测IgE的水平,疗程结束后评价疗效.治疗组治疗后及治疗后4周症状积分较治疗前明显下降,CD4+T水平、CD4+/CD8+比值较治疗前明显上调,CD8+T、IgE水平较治疗前明显下调,以上各项指标与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05 or P<0.01);治疗组有效率96.15％,与对照Ⅰ组84.91％比较差异无统计学意义(P>0.05),与对照Ⅱ组68.63％比较差异有统计学意义(P<0.01).表明复方利多卡因乳膏联合IPL治疗HDD疗效显著,其原因可能与上调CD4+T水平和CD4+/CD8+比值、下调CD8+T和IgE水平有关.
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肿瘤浸润淋巴细胞和树突细胞对胃癌患者预后的影响
目的 研究胃癌组织中CD4+T、CD8+T、CD83+DC肿瘤浸润细胞的临床意义及预后影响.方法 采用免疫组化SP法检测120例胃癌组织及其癌旁正常组织中CD4T、CD8T、CD83+DC表达情况.结果 120例胃癌组织中CD4、CD8、CD83DC表达的阳性率分别为52.4％、63.7％、46.3％,均低于相应的癌旁正常组织(P＜0.05).胃癌中CD4+T、CD8+T、CD83+DC的5年生存率分别为56.5％、58.1％、48.4％,高于CD4+T、CD8+T、CD83-DC组的5年生存率,差别无显著性意义(P＞0.05).标本分成CD4/8(+1+)CD83+DC、CD48(+/-)CD83+DC、CD48(-/+)CD83+DC、CD4/8(-/-)CD83+DC、CD4/8(+/+)CD83-DC、CD4/8(+/-)CD83-DC、CD4/8(-/+)CD83-、CD4/8(-/-)CD83-DC八组,其中CD4//(+/+)CD83+DC组的5年生存率为68.7％,高于其余组(P＜0.05).胃癌中CD4/88(+/+)与CD83+DC之间有相关性(相关系数r=-0.72,P＜0.01).结论 胃癌组织中CD4/8(+/+)CD83+DC表达可能有利于胃癌患者术后的预后,并且CD4/8(+/+)和CD83+DC有密切关系.
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益艾康胶囊对 HIV 感染者免疫功能的影响
目的：探讨益艾康胶囊对 HIV 感染者免疫功能的影响。方法：选取58例 HIV 感染者作为研究对象，运用中药益艾康胶囊治疗，比较治疗前后肝肾功能、血常规及 CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T 淋巴细胞变化情况。结果：治疗后患者 CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T 淋巴细胞计数较治疗前升高，CD3＋T、CD4＋T 淋巴细胞治疗前后比较，差异有统计学意义（P ＜0．05）。肝肾功能及血常规未见明显异常。结论：益艾康胶囊可明显提高 HIV 感染者 CD3＋T、CD4＋T 淋巴细胞计数，可能与益艾康胶囊延缓病毒在CD4＋T 淋巴细胞内复制的速度且促进 T 细胞增殖相关。
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华佗麻药加减方治疗慢性局限性湿疹的作用机理研究
目的 观察华佗麻药加减方对豚鼠慢性局限性湿疹样模型皮损中CD4+和CD8+T细胞影响作用.方法 采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导豚鼠局限性湿疹样模型,以丁酸氢化可的松为阳性对照,乳膏基质为阴性对照.应用免疫组化法,观察豚鼠慢性局限性湿疹样模型的皮损中CD4+和CD8+T细胞的表达.结果 同空白组比较,豚鼠慢性局限性湿疹样模型皮损中CD4+细胞表达减少,CD8+细胞明显增多,CD4+和CD8+T细胞比值降低,差异有统计学意义(P＜0.05).经治疗2周后,华佗麻药加减方组皮损中CD4+和CD8+T细胞表达与乳膏基质组相比较,CD4+细胞增多,CD8+细胞减少,CD4+和CD8+T细胞比值升高,差异有统计学意义(P＜0.05),华佗麻药加减方组与氢化可的松组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 华佗麻药加减方对豚鼠慢性局限性湿疹样模型皮损中CD4+和CD8+T细胞的失衡具有调节作用.
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CD86对CD8+T细胞分化的影响
目的探讨CD86(B7-2)对CD8+T细胞分化的影响.方法用限制性内切酶XhoⅠ酶切质粒pCDM8得到CD86基因,并将其插入pCDNA3,用BamH Ⅰ酶切鉴定.用脂质体法介导pCDNA3-CD86真核表达载体转染人肝癌细胞株HMC7721,600μg/mL C418筛选,稳定且高表达CD86的抗性克隆用流式细胞仪进行鉴定.从健康志愿者血中分离外周血单个核细胞(PB-MC),使PBMC与靶细胞之比为20:1,共同培养48 h后,用流式细胞仪检测CD3+T细胞内IL-4和IFN-γ的表达率.结果成功构建pCDNA3-CD86真核表达载体;CD86在HMC7721-CD86细胞中的表达率为30.8%,而在HMC7721细胞中的表达率为0.98%;健康志愿者CD3+T细胞内IL-4和IFN-γ的表达率分别为1.92%和24.4%;PBMC与靶细胞共同培养48h后,无论是否用IFN-α刺激,IL-4/IFN-γ的阳性比值在HMC7721-CD86转染组均大于1,而在H-MC7721未转染组均小于1.结论在细胞培养中,CD86可诱导CD8+T细胞活化,并向Tc2表型转化.
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淋巴细胞表面CD40分子的表达和作用
CD40和CD40L(CD40 ligand,CD154)都属于肿瘤超家族成员.CD40一CD40L(CD40 ligand,CD154)的相瓦作用一直是与APC和T细胞的活化相关联,并且在肿瘤免疫、自身免疫性疾病、炎症反应等中起重要的作用.目前,有研究发现,CD40不仅表达在APC、内皮细胞以及某些肿瘤细胞上,也会在T细胞中有表达.CD40+CD8T细胞的研究主要集中在细胞信号通路和过继免疫治疗方面,CD40+CD4T细胞主要集中在自身免疫性疾病的研究.本文将对CD40在T细胞表而的表达及其作用做一综述.
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脐血间充质干细胞心肌移植对梗死区CD4+T、CD8+T淋巴细胞分布的影响
目的 研究犬脐血间充质干细胞(cbMSC)心肌移植对梗死区CD4+T、CD8+T淋巴细胞分布的影响.方法 取犬脐带血,密度梯度离心法分离出单个核细胞,贴壁培养法扩增间质干细胞;采用随机数字表法将成年雄性杂种犬36只分为实验组和对照组,采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型;实验组取第4代细胞用5-氮杂胞苷诱导72 h,LacZ报告基因标记后经冠状动脉移植入犬心脏的梗死区域,对照组注射等体积的IMDM培养液;采用免疫组织化学法检测表达β-gal的移植细胞以及梗死区域CD4+T、CD8+T的分布,应用Image-Proplus 5.1软件进行图象分析.结果 异体犬cbMSC移植心肌梗死区后可长期存活;图象分析显示,实验组移植后第2、4、8周时,CD4+T的累积光密度值(IOD)为44.35±7.03,19.29±4.11和20.27±3.51,CD4+T与CD8+T的IOD比值为0.63±0.12,0.51±0.15和0.66±0.08;对照组CD4+T的IOD值为65.78±10.27,28.02±2.59和29.79±6.83, CD4+T与CD8+T的IOD比值为1.28±0.20,1.34±0.09和1.50±0.16,两组比较实验组明显低于对照组.检测表明,实验组移植后第2、4、8周时CD8+T的IOD为69.88±7.84,37.80±8.83和30.81±7.42,高于对照组的51.28±10.01,20.87±4.50和19.91±2.87.结论 初步的实验结果表明,犬cbMSC的同种异体移植能产生免疫耐受,其机制可能与其抑制CD4+T,减少局部浸润的CD4+T数量,降低局部CD4+T/CD8+T比值有关.
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IL-18对胶质瘤大鼠外周血TGF-β、CD8+T水平的影响
目的:分析IL-18对胶质瘤大鼠外周血中TGF-β水平及CD8+T比例的影响.方法:将大鼠随机分为3组,每组5只.分别用立体定向技术接种9L/IL-18、9L、9L/LXSN细胞,建立实验动物模型.14天后,取各组大鼠外周血,ELISA法检测各组大鼠外周血中TGF-β细胞水平.流式细胞术检测各组大鼠外周血中CD8+T比例.结果:接种9L/IL-18组大鼠外周血中TGF-β的水平为(111.5±5.9) ng/L,显著低于接种9L、9L/LXSN细胞组[(133.4±3.7) ng/L、(127.9±4.0)ng/L] (P＜0.05).前者外周血中CD8+T比例(32.3±2.2)％与后两组相比[(分别为(22.3±0.8)％、(22.0±0.7)％]显著增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:IL-18可降低荷瘤鼠外周血中TGF-p水平,提高CD8+T细胞比例,从而改善荷瘤鼠免疫抑制状态,提高免疫功能.
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HIV感染不同疾病进程IL-27和T淋巴细胞亚群的检测
目的 通过检测HIV感染者不同疾病进程IL-27水平、T淋巴细胞亚群,探讨它们之间的关系,寻找疾病进程IL-27、CD4+T和CD8+T细胞的变化规律.方法 选取HIV感染者100例作为研究对象,其中长期不进展者(LTNP) 16例,疾病典型进展者(TP) 84例.采用酶联免疫吸附试验测定IL-27血清水平,用流式细胞仪对CD4+T和CD8+T细胞进行计数,并计算CD4+T和CD8+T的比值.80例健康者作为对照组.结果 TP组和LTNP组的IL-27水平、CD4+T淋巴细胞数、CD4+ T/CD8+T比值均明显低于健康组(P均＜0.01),与LTNP组相比,TP组的IL-27水平、CD4+T淋巴细胞数、CD4+ T/CD8+T比值均明显降低(P均＜0.01).LTNP组CD8+T淋巴细胞数均明显高于健康组和TP组(P均＜0.01),而健康组和TP组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).IL-27与CD4+T和CD8+T均呈正相关(r=0.709,0.427;P均＜0.01).结论 IL-27、CD4+T和CD8+T细胞能反映HIV感染者免疫受损状况和疾病进展情况,IL-27有望成为新的靶点分子与CD4+T和CD8+T共同作为HIV感染和疾病进程的监测指标.
