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脐血单个核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的影响
新生儿缺氧缺血性脑病是新生儿一常见疾病,可以导致脑瘫、癫痫、智力低下等严重后遗症~([1]),给家庭与社会带来沉重负担,目前尚无特效治疗,因此寻找一种有效的治疗方案是目前研究的重点.近年来脐血库及干细胞工程的兴起为其治疗带来希望.近日研究发现脐血单个核细胞脑内移植可以存活,且可以促进其远期行为学与组织学的恢复~([2]),但机制不清.
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脐血单个核细胞体外扩增的实验研究
目的:采用集落刺激因子体外扩增脐血单个核细胞(CBMC),研究集落刺激因子对CBMC增殖活性的影响.方法:用RPMI1640培养液加入集落刺激因子IL-3、SCF、GM-CSF及其组合,体外扩增CBMC,健康成人外周血单个核细胞(PBMC)作为对照组.结果:加入不同集落刺激因子体外培养CBMC与PBMC后,增殖活性均有不同程度的升高,以加入IL-3、SCF、GM-CSF组为显著; CBMC的增殖活性与PBMC比较有显著性差异(P<0.05).结论:集落刺激因子可在体外扩增CBMC,IL-3、SCF、GM-CSF之间有明显的协同作用;与PBMC相比,CBMC有更高的增殖潜能.
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脐带间充质干细胞支持脐血单个核细胞冻存复苏后的体外生长
目的:研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUC-MSC)对冻存复苏后脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)体外生长的支持作用,以提高冷冻损伤后的造血细胞在体外的生存率.方法:用组织块培养法分离获得hUC-MSC,流式细胞仪检测其表面分子并诱导分化进行鉴定.分两组培养冻存复苏后的脐血MNCs:一组以hUC-MSC为滋养层共培养,另一组单独培养.光镜下观察两组MNCs密度.培养第10天,流式细胞仪检测两组造血细胞的百分比,并计数MNCs总数和造血细胞数进行对比.结果:成功分离培养获得hUC-MSC,符合各项鉴定标准.共培养组MNCs总数、CD45、CD14及CD19阳性造血细胞数均明显多于单培养组.结论:hUC-MSC可有效支持冻存复苏后脐血MNCs的体外生长.
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激活脐血单个核细胞体外抗白血病细胞株活性研究
目的探讨植物血凝素(PHA)、白细胞介素-2(IL-2)、抗CD3单克隆抗体(αCD3Ab)激活的脐血单个核细胞(CBMC)体外对K562的杀伤活性,以及外源性刺激因子对CBMC的可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)含量的影响.方法采集CBMC分别与不同刺激因子体外短期培养,台盼蓝拒染法测效应细胞的增殖能力,ELISA法检测上清液中sIL-2R的含量,3H-TdR释放法测定效应细胞体外对K562靶细胞的杀伤活性.结果脐血PHA-CD3AK细胞在体外培养3 d后增殖倍数、活化后上清液中sIL-2R的含量显著高于PHA-LAK,CD3AK和LAK细胞(P＜0.05).PHA-CD3AK细胞体外对白血病细胞株K562细胞的细胞毒活性明显高于PHA-LAK,CD3AK和LAK细胞(P＜0.05).结论脐血单个核细胞经PHA,IL-2和αCD3Ab激活后,可有效形成PHACD3AK效应细胞,其增殖活性、细胞毒性均高于PHA-LAK,CD3AK和LAK细胞.
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脐血单个核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠促红细胞生成素蛋白及少突胶质祖细胞的影响
目的 探讨脐血单个核细胞(UCBMC)移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑促红细胞生成素(EPO)蛋白及少突胶质祖细胞的影响.方法 7日龄健康Sprague-Dawley新生大鼠40只随机分为正常对照组、HI组、UCBMC对照组和HI+UCBMC组,每组10只.采用经典Rice法制成HIBD模型,造模24 h后,正常对照组和HI组经侧脑室注入2μLPBS,UCBMC对照组和HI+UCBMC组经侧脑室注入3×106 UCBMC.移植后7d,采用EPO/DAPI与NG2/DAPI免疫荧光双标法观察损伤侧室管膜下区(SVZ) EPO蛋白及少突胶质祖细胞的变化,并进行相关性分析.结果 移植后7d,HI+UCBMC组NG2+DAPI+及EPO+DAPI+细胞数均显著高于UCBMC对照组(均P＜0.05)、HI组及正常对照组(均P＜0.01),UCBMC对照组NG2+DAPI+及EPO+DAPI+细胞数均显著高于正常对照组和HI组(均P＜0.01),正常对照组NG2+DAPI+细胞数显著高于HI组(P＜0.01).HI+UCBMC组NG2+DAPI+细胞数与EPO+DAPI+细胞数呈正相关(r=0.898)及直线回归(β=1.4604,P＜0.01).结论 UCBMC可促进HIBD新生大鼠少突胶质祖细胞的表达,其机制与EPO蛋白的表达增加相关,从而修复脑白质损伤.
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脐血单个核细胞侧脑室移植对HIBD新生大鼠脑神经元凋亡及Bax、Bcl-2蛋白的影响
目的：探讨脐血单个核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑神经元凋亡及Bax、Bcl-2蛋白的影响。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠制备缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型，随机分为正常对照（N）+生理盐水（NS）、HIBD+NS、N+脐血单个核细胞（UCBMC）及HIBD+UCBMC组。N+UCBMC与HIBD+UCBMC组侧脑室注入3×106个UCBMC，N+NS与HIBD+NS组注入等体积NS。移植后7?d采用NeuN/活性Caspase-3免疫荧光双标染色法、TUNEL法观察大脑皮层神经元凋亡，Western?blot观察脑组织Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 HIBD+NS组的NeuN+活性Caspase-3+DAPI+细胞及TUNEL+DAPI+细胞均多于N+NS和N+UCBMC组（P<0.01）；HIBD+UCBMC组的NeuN+活性Caspase-3+DAPI+细胞及TUNEL+DAPI+细胞均少于HIBD+NS组（P<0.01）。HIBD+NS组的Bax蛋白表达高于N+NS与N+UCBMC组，Bcl-2蛋白低于N+NS与N+UCBMC组（P<0.01）；而HIBD+UCBMC组的Bax蛋白较HIBD+NS组降低（P<0.01），Bcl-2蛋白则高于HIBD+NS组、N+NS和N+UCBMC组（P<0.05）。结论 HIBD新生大鼠侧脑室移植UCBMC可以减轻神经元凋亡，其机制可能与Bcl-2蛋白表达上调，Bax蛋白表达下调有关。
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脐血单个核细胞移植联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响
目的：观察脐血单个核细胞（UCBMC）联合高压氧（HBO）治疗对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠远期行为学及组织学的影响。方法7日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组、UCBMC移植组及 UCBMC 联合HBO（UCBMC+HBO）组。采用Rice法制成HIBD模型。HBO于造模3 h进行，造模后24 h 行 UCBMC 移植。采用Western blot法观察联合治疗对 HIBD 大鼠脑内IL-1β、TNF-α蛋白的影响，采用T迷宫、放射性迷宫试验及尼氏染色法，观察联合治疗对 HIBD 大鼠远期行为学及HIBD 大鼠脑海马 CA1区组织学的影响。结果移植后24 h，UCBMC+HBO组大鼠脑内 IL-1β、TNF-α蛋白的表达水平均显著低于HIBD组与 UCBMC 组（P<0.05）。HIBD组学习记忆及运动能力均减退，海马CA1区锥体细胞数减少，UCBMC+HBO组大鼠学习记忆及运动能力均较UCBMC组及HIBD组有改善，海马CA1区锥体细胞数显著多于UCBMC组及HIBD组（P<0.05）。结论 UCBMC联合HBO治疗可减轻HIBD新生大鼠IL-1β、TNF-α蛋白的表达，促进脑损伤的修复并改善远期行为学。[中国当代儿科杂志，2015，17（7）：736-740]
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人脐血单个核细胞静脉移植联合阿托伐他汀对急性心肌梗死心肌组织血管再生影响实验研究
目的 探讨人脐血单个核细胞(HUCBMCs)静脉移植联合阿托伐他汀对急性心肌梗死(AMI)模型兔心肌组织血管再生的影响.方法 中国家兔AMI模型60只随机分4组,每组15只.对照组:术后24 h生理盐水0.5 mL静脉注射(静注),生理盐水灌胃4周;阿托伐他汀组:同时间静注生理盐水0.5 mL,阿托伐他汀5mg/(kg·d)溶入生理盐水灌胃4周;细胞移植组:同时间静注含3×107 GFP标记HUCBMCs生理盐水0.5 mL,生理盐水2mL灌胃4周;联合治疗组:同时间静注含3×107 GFP标记HUCBMCs生理盐水0.5mL,阿托伐他汀5 mg/(kg·d)溶入生理盐水2mL灌胃4周.移植后分别超声检测左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF);荧光显微镜检测GFP阳性细胞;免疫组织化学检测抗第VⅢ因子染色检测毛细血管密度、血管内皮生长因子(VEGF).结果 ①与对照组、阿托伐他汀组治疗后比较,细胞移植组与联合治疗组LVFS、LVEF改善,联合治疗组改善更加显著;②移植4周后,细胞移植组及联合治疗组梗死区周边可见GFP阳性细胞,后组GFP阳性细胞数量计数多于前组;③与对照组、阿托伐他汀组治疗后比较,移植组及联合治疗组VEGF表达增加,毛细血管密度增加,后组增加幅度显著.结论 HUCBMCs静脉移植联合阿托伐他汀治疗AMI,提高移植细胞在心肌组织内存活率,进一步改善心功能,心肌梗死组织内血管再生增强可能是其联合治疗AMI疗效改善的主要机制之一.
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人脐血干细胞静脉移植对急性心肌梗死胶原重构及组织基质金属蛋白酶9表达的影响
目的 探讨人脐血单个核细胞静脉移植对急性心肌梗死(简称心梗)后胶原重构及组织基质金属蛋白酶9表达水平的影响.方法 45只健康成年中国家兔随机分为3组:移植组15只,结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死模型后24h,经耳缘静脉注入BrdU标记的人脐血单个核细胞(HCBMCs)悬液2×107/mL；对照组15只,结扎冠状动脉左前降支后同时间、同途径注入等量生理盐水；假手术组15只,左前降支穿线不结扎,术后同时间、同途径注入生理盐水.移植后1、2和4周超声检测心功能；心肌组织切片HE染色观测心肌病理变化；免疫组织化学法检测心肌BrdU阳性细胞,ELISA和RT-PCR检测血浆基质金属蛋白酶MMP-9水平及心肌组织MMP-9 mRNA表达水平,Masson染色观察心肌胶原蛋白变化.结果 与对照组比较,移植组移植后1、2和4周左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)均明显改善(P＜0.01)；免疫组织化学显示仅移植组梗死区及周边区存在BrdU阳性细胞.ELISA及RT-PCR显示,与对照组比较,移植组血浆基质金属蛋白酶MMP-9水平和MMP-9 mRNA表达水平显著减低(P＜0.01)；Masson染色显示,与对照组比较,移植组胶原沉积明显减少,且胶原纤维基本处于有序状态.结论 对兔急性心肌梗死模型静脉移植人脐血单个核细胞能迁移并存活于梗死周边区域,并抑制心肌组织基质金属蛋白酶MMP-9表达,减少胶原蛋白沉积,改善心功能.提示抗胶原重构是人脐血单个核细胞静脉移植改善心梗心功能机制之一.
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脐血单个核细胞对血管性痴呆大鼠脑组织BDNF、NGF的影响
目的 观察颈内动脉输注脐血单个核细胞(HCMNCs)对血管性痴呆(VD)大鼠脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达及大鼠学习记忆能力的影响. 方法 改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型;大鼠受用随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组;每组又分为2,4,8周三个时相点,每时相点12只.体外分离HCMNCs,术后24h颈内动脉输注3x106个BrdU标记细胞于治疗组;利用穿梭箱系统和ELISA法检测注射HCMNCs后2,4,8周VD大鼠学习记忆能力以及脑组织BDNF和NGF含量的变化. 结果 模型组大鼠主动回避反应比率显著低于对照组(P＜0.01),治疗组较模型组显著提高(P＜0.01).术后2周模型组大鼠脑BDNF、NGF含量较对照组显著增高(P＜0.01),4周时达到高峰(P＜0.01),8周时则明显下降,与2,4周时相比有显著性差异(P＜0.05);治疗组大鼠脑BDNF、NGF含量较模型组显著升高(P＜0.01),4周时高(P＜0.05,P＜0.01),8周时略有下降,但仍维持在较高水平,与2,4周时相比无统计学意义(P＞0.05).结论 颈内动脉输注HCMNCs可显著改善VD大鼠学习记忆能力,推测原因为通过增加VD大鼠脑组织BDNF和NGF发挥作用.
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脐血单个核细胞联合黄芪注射液治疗Duchenne型肌营养不良症的临床研究
Duchenne型肌营养不良症(DMD)是一种致死性、遗传性神经肌肉疾病.目前DMD在治疗上仍然无突破.干细胞可替代局部受损的骨骼肌细胞,改善dystrophin的表达,促进肌肉的再生.中医药综合治疗可延缓病情的发展,提高患者生存质量,而且中医药对干细胞治疗有促进和保护作用.两者可成为该病治疗研究的重要方向.笔者在临床应用研究中观察脐血单个核细胞联合黄芪注射液治疗DMD的疗效,分析如下:1 对象与方法1.1研究对象 本研究纳入的DMD患者19例,均为男性,就诊年龄7～20岁,病程3～15年.
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人脐带和骨髓源间充质干细胞对脐血单个核细胞增殖能力的影响
目的：探讨人脐带间充质干细胞（UCMSCs）与骨髓间充质干细胞（BMMSCs）在体外对造血干细胞的支持作用。方法分别从人脐带和骨髓中分离、培养间充质干细胞，通过免疫细胞化学染色等方法对其进行表型鉴定；采用流式细胞仪测定脐血单个核细胞的周期分布，采用甲基纤维素法测定脐血单个核细胞混合集落形成单位（CFU-Mix），比较 UCMSCs和BMMSCs对脐血单个核细胞细胞周期、CFU-Mix形成能力的影响。结果成功培养获得 UCMSCs和BMMSCs，鉴定结果符合预期；与非共培养组细胞相比，UCMSCs和 BMMSCs共培养均能促进脐血单个核细胞进入增殖周期，并增加其形成CFU-Mix的能力（P＜0．05），但UCMSCs和BMMSCs共培养组之间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论成功从人脐带和骨髓组织中培养获得间充质干细胞，两种来源的间充质干细胞均能提高脐血单个核细胞的体外增殖能力及 CFU-Mix形成能力，均具有造血支持作用。
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脐血单个核细胞体外培养和诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达
目的:探讨人脐血单个核细胞(human cord blood monocytes,HCMNCs)培养增殖过程中的形态变化及诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达.方法:采用OLYMPUS倒置显微镜观察培养过程中HCMNCs形态的变化;RT-PCR方法鉴定MNCs用神经生长因子(NGF)和维甲酸(RA)诱导前后神经干细胞(neural stem cells,NSCs)标志物巢蛋白(Nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达.结果:HCMNCs培养前,胞体较小,呈均一的圆形;培养后,细胞胞体增大,有破骨样细胞和间质样细胞两种形态.破骨样细胞胞体较大,呈圆形,多个核.间质样细胞胞体呈较均一的长梭形,形态类似于骨髓MSCs,但较骨髓MSCs稍小.RT-PCR检测提示,诱导前HCMNCs中Nestin弱表达,Musashi-1无表达;诱导后两者均表达增强,之后逐渐减弱.结论:使用密度梯度离心法可以从脐血中分离得到具有多向分化潜能的HCMNCs,经过EGF和RA诱导后,神经干细胞标志表达一过性增强后减弱.
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人脐血单个核细胞移植改善雌鼠压力性尿失禁
目的 探讨人脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)移植对压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)大鼠尿道括约肌的修复和功能重建作用.方法 采用反复阴道扩张的方法模拟产道损伤建立雌性SD大鼠SUI模型.40只大鼠按随机数字表法分为模拟组10只、实验组30只(移植组15只,实验对照组15只).羟乙基淀粉沉淀加密度梯度离心的方法制备HCMNCs,并以4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记.模型制作成功后即在移植组近端尿道注射已标记HCMNCs 2×106个,对照组注射相同质量PBS液.检测尿动力学指标后获取近端尿道组织,观察荧光细胞的形态和分布以及尿道括约肌的变化.结果 通过反复阴道扩张可建立SUI大鼠模型,HCMNCs可在受损尿道括约肌内存活、分布,移植组比较对照组尿道括约肌得以较好修复,SUI大鼠控尿能力明显改善.结论 HCMNCs可成功移植到SUI大鼠尿道括约肌,改善控尿,促进尿道括约肌的修复.
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牙周膜干细胞对脐血单个核细胞分化为破骨样细胞的影响
目的 研究牙周组织改建过程中,牙周膜干细胞对破骨细胞形成的影响,初步探讨静压力和诱导因子对牙周膜干细胞调控破骨细胞形成的作用机制.方法 有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,密度梯度离心法分离脐血,收集单个核细胞.建立直接共培养和Transwell间接共培养体系.实验分组:A组,对照组(单纯共培养)；B组,静压力组,共培养后第2天即对共培养细胞施加120 KPa压力,持续作用1h后继续培养；C组,诱导因子组,培养液中加入诱导因子1,25二羟基维生素D3(1 ×10-8 mol/L)和前列腺素E2(1×10-6 mol/L).采用倒置相差显微镜及TRAP染色,骨磨片染色等方法检测破骨样细胞( osteoclast-like cells,OLC)的形成及功能.结果 各组第3、7天OLC计数比较结果显示,施加静压力后,直接共培养组OLC数量明显多于间接共培养组(P＜0.01)；而诱导因子组,直接共培养组OLC少于间接共培养组(P＜0-01).结论 牙周膜干细胞能够促进脐血单个核细胞分化为破骨样细胞,且在静压力作用下,两种细胞直接接触时,这种调控作用更为明显.
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脐静脉内皮细胞诱导脐血单个核细胞向树突状细胞的分化
目的 探讨人脐静脉内皮细胞对人脐血单个核细胞(UBMCs)向树突状细胞(DC)分化的影响,建立更便捷、更经济体外培养DC的方法.方法 胶原酶消化分离出脐静脉内皮细胞(HUVEC),经鉴定和体外培养扩增后,使其平铺生长于Transwell板上室底部,将UBMCs接种到Transwell小室内,同时加入EC9706细胞冻融形成的蛋白质抗原,与HUVEC共培养,使UBMCs与HUVEC紧密接触并从Transwell板上室迁移到下室,收集Transwell板下室细胞,流式细胞术检测下室细胞DC相关表面标志CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC分子;通过MTT法检测肿瘤负载的UBDC诱导CTL对靶细胞的特异性杀伤作用.结果 经HUVEC诱导并负载了肿瘤细胞抗原的DC CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC-Ⅱ类分子表达增加,产生的细胞毒性T细胞(CTL)可特异性杀伤食管癌细胞EC9706;与细胞因子诱导DC活化的CTL对EC9706的杀伤率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 利用Transwell小室以人原代脐静脉内皮细胞诱导脐血单个核细胞分化的DC是可行的一种实验方法.
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脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究
目的 探讨人脐血单个核细胞的分离培养和诱导后神经干细胞(NSCs)标志物mRNA的表达.方法 使用密度梯度离心法得到脐血单个核细胞,用体外贴壁生长的方法获得脐血间质干细胞(MSCs),观察培养过程中脐血MSCs形态的变化,通过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达,使用NGF和RA联合诱导后,用RT-PCR方法鉴定诱导前后NSCs标志物巢蛋白(nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达.结果 脐血单个核细胞贴壁生长后大部分细胞呈梭形,诱导后可分化为神经元样细胞.流式细胞仪检测该细胞不表达CD34、CD11a、CD11b和强表达CD29,符合MSCs特征.诱导后,NSCs表面标志Nestin及Musashi-1表达明显增强,48h达高峰,然后逐渐减弱.结论 脐血中存在间质干细胞,分离后可以体外扩增,诱导后分化为神经元样细胞,并表达NSCs表面标志.脐血能够成为NSCs的新来源.
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脐血单个核细胞体外诱导树突状细胞联合CTLs抗肿瘤效应的研究
目的 探讨从人脐血中定向诱导扩增树突状细胞(dendritic cells,DCs)的方法及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用.方法 常规无菌采集新鲜脐血,密度梯度离心分离脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells,CBMCs),加入细胞因子(GM-CSF+IL-4+TNF-α)定向诱导培养并进行相应的表型鉴定.观察肿瘤抗原负载后诱导特异性细胞毒T淋巴细胞生成和对肿瘤细胞杀伤作用.结果 从人脐血分离到的CBMCs经GM-CSF+IL-4+TNF-α共同培养后,第7天镜下即可见典型形态的DCs,细胞表型检测见CD1a+细胞比例增加到(20.8±1.62)%.DCs负载肿瘤抗原后能诱导产生肿瘤特异性淋巴细胞,并可特异性抑制YTMLC肿瘤细胞.结论 经细胞因子组合可以从脐血中诱导出DCs,并可诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T-lymphocytes,CTLs)的产生,为进一步开展DCs的实验研究及临床应用奠定了基础.
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脐血单个核细胞对脑白质损伤低龄大鼠少突胶质细胞及髓鞘碱性蛋白的影响
目的 探讨脐血单个核细胞(umbilical cord blood monocytes,UCBMC)移植对低龄大鼠脑白质损伤(white matter damage,WMD)中少突胶质细胞及髓鞘碱性蛋白表达的影响.方法 将3日龄健康Sprague-Dawley新生大鼠80只随机分为正常对照(control,CON)组、WMD组、WMD+ UCBMC组与UCBMC对照组.通过单侧缺血联合缺氧的方法制成WMD模型(每个时间点每组各5只),造模24 h后,CON组和WMD组经侧脑室注入2μL PBS,UCBMC对照组和WMD+ UCBMC组经侧脑室注入3×106 UCBMC.移植后24 h、3d、7d和14 d,采用2',3'-环核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNPase)/活性半胖氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase-3)及髓鞘碱性蛋白(MBP)/4'6-二脒基-2苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)免疫荧光双标观察UCBMC移植对纹状体处少突胶质细胞及MBP的变化,并行机制的探讨.结果 移植后24 h、3d和7d,WMD组CNPase+ Cleaved Caspase-3+细胞数均高于CON组、WMD+ UCBMC组与UCBMC对照组(均P＜0.01),且在24 h开始增加,3d达高峰,7d有所下降;WMD+ UCBMC组CNPase+ Cleaved Caspase-3+细胞数显著少于WMD组(P＜0.01).移植14 d后,WMD组MBP+ DAPI+细胞数显著少于CON组及UCBMC对照组(P＜0.01);WMD+ UCBMC组MBP+ DAPI+细胞数显著高于WMD组,仍少于CON组(P＜0.01).结论 UCBMC侧脑室移植可减少脑白质损伤低龄大鼠的少突胶质细胞的凋亡,减少髓鞘的脱失,从而修复损伤的脑白质.
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细胞因子体外诱导脐带血单个核细胞向成熟肥大细胞分化
目的 分离脐带血单个核细胞并进行体外定向诱导培养,获得人源化、纯度高的成熟肥大细胞.方法 用重组人干细胞生长因子(rhSCF)、重组人白细胞介素6(rhIL-6)定向诱导从脐带血中分离的单个核细胞,使其分化成为成熟的肥大细胞.收集不同时间段的细胞,进行甲苯胺蓝染色并用流式细胞术检测其膜上FcεRⅠ受体,以鉴定其成熟程度.成熟的肥大细胞经过敏原激发后,检测细胞上清中的组织胺及类胰蛋白酶.结果 在加入rhSCF和rhIL-6诱导2周以后,肥大细胞即开始表达FcεRⅠ受体,诱导3周后达到高峰,同时细胞质内嗜碱性颗粒增多.诱导成熟后的细胞经过敏原激发后,能有效释放类胰蛋白酶和组织胺.结论 脐带血单个核细胞可定向诱导成为成熟的肥大细胞,可用于过敏原性的体外评价试验.
