招标新规给谁提供了机会?

马尾松树皮提取物体外诱导肺腺癌GLC-82细胞凋亡的机制

目的:探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniara bark extract,PMBE)在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞生长的机制.方法:通过CCK-8法分析了PMBE对GLC-82细胞的生长活力影响;AO/EB染色、透射电镜和流式细胞术检测了PMBE诱导的肺腺癌细胞GLC-82的凋亡;Western blot检测PMBE处理GLC-82细胞后caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bcl-2和Bid蛋白表达水平的变化.结果:PMBE在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞的生长具有时间和剂量依赖性;通过荧光显微镜、透射电镜和流式细胞术证实PMBE诱导了GLC-82细胞的凋亡;细胞周期分析结果说明PMBE可以显著减少S期的GLC-82细胞;免疫杂交发现PMBE可以诱导caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的激活,并下调Bcl-2和Bid蛋白的表达.结论:PMBE可能通过激活caspase-8从而激活Bid蛋白,进一步激活caspase-9来诱导肺腺癌GLC-82细胞的凋亡.

Bad、Bax和Bid蛋白表达在非酒精性脂肪性肝炎中的作用

目的:探讨细胞凋亡相关蛋白Bad、Bax和Bid表达在小鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)中的作用.方法:采用胆碱-蛋氨酸缺乏、高脂(high fat, methionine and choline deficient, MCD)饮食建立小鼠NASH模型(实验组), 以胆碱-蛋氨酸充足饮食设立对照组. HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动和纤维化程度; 采用Western blot检测Bad、Bax和Bid蛋白表达.结果: MCD饮食喂养小鼠10 d可见轻度肝脂肪变, 3 wk形成中、重度肝脂肪变及明显的炎性细胞浸润, 8 wk肝脂肪变、肝细胞坏死、炎性细胞浸润加重, 或伴有轻度肝纤维化. 血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)水平随肝损伤加重而进行性升高. 10 d、3 wk和8 wk实验组小鼠肝组织Bad和Bax蛋白表达显著高于对照组(P<0.05、P<0.01和P<0.05); 造模10 d实验组小鼠Bid蛋白活化, 10 d、3 wk和8 wk表达均显著高于对照组(P<0.01).结论:MCD饮食可导致小鼠NASH, 诱发细胞凋亡调节蛋白Bad、Bax和Bid表达上调.

小肠腺癌组织的细胞凋亡及相关蛋白Bid和Bcl-xL的表达及意义

目的:探讨细胞凋亡及相关蛋白的表达与小肠腺癌发生发展的关系.方法:研究包括35例正常小肠(空肠)组织和7例手术切除的小肠腺癌组织,临床资料查阅病历;用TUNEL法检测细胞凋亡;用免疫组织化学检测相关蛋Bid和Bcl-xL的表达.结果:小肠腺癌的凋亡指数(apoptotic index,AI)明显低于正常小肠组织(0.29% vs 15.78%,t=6.51,P<0.01):蛋白Bid在小肠腺癌的表达低于正常小肠组织(28.57% vs 77.14%,P<0.05);蛋白Bcl-xL在小肠腺癌的表达高于正常组织(86.7 1% vs 34.29%,P<0.05):Bid/Bcl-xL≥1的样本数在小肠腺癌低于正常小肠(14.29% vs 80.00%,P<0.01).相关性分析显示AI和蛋白Bid的免疫组织化学得分呈正相关(r=0.368,P<0.05),但与蛋白Bcl-xL的免疫组织化学得分之间缺乏相关性(r=0.017,P>0.05).结论:细胞凋亡水平的降低;蛋白Bid的低表达和Bid/Bcl-xL比值的降低可能在小肠肿瘤的发生和发展过程中发挥重要的作用.

血糖全面达标,只需多打一针

患者男性,50岁主诉多饮、多尿、乏力2年.现病史患者2年前因多饮、多尿、乏力来院就诊,查随机血糖11.8mmol/L,诊断为2型糖尿病.给予二甲双胍250mg Bid和格列齐特80mg Bid,因血糖控制不佳,用量逐渐增至二甲双胍500mg Tid和格列齐特160mg Bid,糖化血红蛋白7.5％.

简单而有效的胰岛素治疗之选

患者男性,55岁主诉血糖升高6个月现病史患者6个月前因烦渴多饮、多食量饥到医院就诊,辨认查随机血糖17.8mmol/L,糖化血红蛋白9.4%.医生诊断2型糖尿病,给予格列吡嗪5mg Bid,二甲双胍250mg Tid治疗.

胰岛素起始治疗还可这样用

患者男性,56岁主诉多饮、多尿3年,视物模糊1个月.现病史患者3年前因多饮多尿到当地医院就诊,查随机血糖12．8mmol／L,次日复查空腹血糖10.4mmol／L,诊断为“2型糖尿病”.一个月后开始二甲双胍治疗,起始剂量为250mgBid,半年后用量逐渐增加至1000mg Bid.一年后因血糖控制仍未达标,糖化血红蛋白始终在8.8％以上,患者开始加用格列奇特,起始剂量为80mg Bid,逐渐增加至160mg Bid,糖化血红蛋白控制在7．8％左右.

胰岛素起始治疗还可这样用

患者男性,56岁主诉多饮、多尿3年,视物模糊1个月.现病史患者3年前因多饮多尿到当地医院就诊,查随机血糖12.8mmol/L,次日复查空腹血糖10.4mmol/L,诊断为“2型糖尿病”.一个月后开始二甲双胍治疗,起始剂量为250mgBid,半年后用量逐渐增加至1000mg Bid.一年后因血糖控制仍未达标,糖化血红蛋白始终在8.8％以上,患者开始加用格列奇特,起始剂量为80mg Bid,逐渐增加至160mg Bid,糖化血红蛋白控制在7.8％左右.一个月前,患者出现视物模糊,来本院就诊.

病例研究Ⅱ:口服降糖药治疗的无奈

患者女性,65岁主诉发现血糖升高6年现病史患者6年前因多尿、烦渴、多饮就诊,被诊断为"2型糖尿病".经过3个月饮食控制和运动治疗后,患者开始服用二甲双胍500mg Bid.糖化血红蛋白得到了显著改善,A1C降至6.8%,但患者因严重的恶心而停药.随后开始服用阿卡波糖50 mg Tid,也因严重胃肠道反应而停药.患者接下来开始服用格列吡嗪5 mg Bid,但常常出现餐后低血糖,血糖可达2.5～3.9 mmol/L.患者自行停用降糖药物.患者自诉会不定期检测餐前血糖多在5～6 mmol/L之间,餐后血糖没有检测.

GrB/Bid蛋白在胃癌中表达及临床意义的初步研究

目的 探讨胃癌组织中颗粒酶B(GrB)和Bid蛋白的表达情况及与胃癌演进的关系,了解二者在肿瘤免疫耐受机制中的作用.方法 采用免疫组织化学S-P法检测GrB和Bid在胃癌和切缘组织中的表达状况.结果 GrB在胃癌组织中阳性表达率为47.62％,切缘组织中的阳性率为40.48％,二者相比差异无统计学意义(P ＞0.05);Bid在胃癌组织中的阳性表达率(26.19％)明显低于胃切缘上皮组织(76.19％),二者相比有统计学意义(P ＜0.05);GrB的表达水平与胃癌临床分期、淋巴转移有关(P＜0.05),Bid的表达水平与胃癌分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移有关(P ＜0.05);GrB和Bid在42例胃癌中表达呈负相关(rs=-0.311,P＜0.05).结论 胃癌组织中GrB和Bid表达可能共同参与胃癌演进,胃癌组织中Bid的表达下调或缺失可能引起胃癌细胞逃逸内源或外源性GrB介导的细胞凋亡,获得免疫耐受潜能,逃逸机体免疫应答.

曲古抑素A对耐顺铂人肺腺癌细胞株凋亡影响及其机制的探讨

目的:探讨曲古抑素A(TSA)诱导耐顺铂(DDP)人肺腺癌A549/DDP细胞株凋亡的作用及机制.方法:荧光染色检测细胞凋亡,蛋白质印迹法分析cFLIP、Caspase-8、Caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白表达的变化,同时比色法测定Caspase-8活性.结果:曲古抑素A能诱导凋亡A549/DDP细胞株凋亡,随着浓度增加,其凋亡率逐渐增加.蛋白质印迹法结果显示,TSA处理细胞后,cFLIP蛋白水平下降,Procaspase-8减少,提示该酶被激活,促使Bid蛋白切割.Procaspase-3减少,提示酶被激活.PARP蛋白减少,切割的条带逐渐增加,提示PARP活性增加,促进细胞凋亡.比色法结果显示TSA对Caspase-8活性和cFLIP的影响具有浓度和时间依赖性.结论:TSA可以通过降低cFLIP水平激活Caspase-8诱导A549/DDP细胞凋亡.

肿瘤坏死因子α通过抑制线粒体呼吸链复合体Ⅲ诱导L929-A细胞发生RIP1激酶依赖性细胞凋亡

目的 探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)诱导L929-A细胞发生受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein 1,RIP1)依赖性凋亡的分子机制.方法 通过胰蛋白酶浓度梯度消化及蛋白质印迹法检测RIP1、胱天蛋白酶8(caspase-8)和Bid蛋白的表达和线粒体定位;利用荧光探针标记法检测TNF-α处理后L929-A细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、胞内钙离子浓度、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)浓度,应用试剂盒检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ的活性变化;采用RIP1激酶特异性抑制剂坏死抑素1(necrostatin-1,Nec-1)和Bid基因敲除的L929-A细胞评估RIP1激酶活性和Bid蛋白在介导细胞死亡中的作用.结果 RIP1、caspase-8和Bid蛋白均定位在线粒体外膜上;TNF-α处理后3 h即可诱导Bid剪切,伴随Bid剪切,线粒体呼吸链复合体功能检测显示复合体Ⅲ的活性受到抑制,MMP下降.TNF-α处理后6~12 h细胞内ROS升高、钙离子浓度上升、ATP浓度降低;抑制RIP1激酶活性或敲低Bid蛋白可完全拮抗TNF-α诱导的细胞毒性.结论 TNF-α通过诱导RIP1激酶活性依赖的Bid剪切,继而抑制线粒体呼吸链和细胞能量代谢,诱导细胞死亡.

抗感染药物致过敏性口炎误诊3例

口炎为口腔科常见病,抗感染药物所致口炎在临床上常被误诊误治.我院近期收治了3例此类病例,予以总结:1临床资料1.1 男,5岁,外伤至耳膜穿孔在外院就诊,予头孢克肟颗粒50mg bid口服,4天后上下唇U角及上腭黏膜充血,糜烂.当地医院予头孢呋辛0.75 bid抗感染治疗3天,糜烂面增大,疼痛剧烈,影响进食而来我院.查体:溃疡波及上下唇红部,表面渗液、覆盖灰白色假膜,腭部见4、5个溃疡,直径约0.1cm至0.3cm大小,颌下淋巴节肿大,有压痛.

环丙沙星三联治疗幽门螺杆菌疗效观察

目的 探讨环丙沙星在治疗幽门螺杆菌中的作用.方法 选择胃镜检查中HP阳性者62例,随机分为治疗组和对照组,每组各31例.治疗组给予环丙沙星0.5g bid,甲硝唑0.4g bid奥美拉唑20mg bid;对照组给予阿莫西林1.0g bid,甲硝唑0.4gbid,奥美拉唑20mg bid;疗程均为10天.停药4周后14C尿素呼气实验复查.结果 治疗组HP根除率87%;对照组HP根除率90%.两组无统计学差异(P＞0.05).结论 环丙沙星三联疗法HP根除率效果良好,不良反应小.

Caspase-8、Bid在扁平苔藓中的表达和意义

目的:探讨Caspase-8、Bid在扁平苔藓中的表达情况,研究其与扁平苔藓发生的关系.方法:用Tunel原位凋亡检测法检测30例扁平苔藓与10例正常皮肤组织的细胞凋亡情况,并用免疫组织化学法分别检测该30例扁平苔藓与10例正常皮肤组织中Caspase-8、Bid 的表达,定量分析其表达差异.结果:在扁平苔藓皮损处,Tunel原位凋亡检测结果显示,在角质形成细胞和真皮浅层浸润的淋巴细胞有大量细胞核阳性表达,在相同部位Caspase-8、Bid在胞质内大量表达;在正常皮肤组织中,凋亡细胞数较扁平苔藓明显减少,Caspase-8、Bid 仅在基底层有少量表达.结论:Caspase-8、Bid表达增多可能参与扁平苔藓的发病.

miR-26调控BID蛋白对结肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-26对BID蛋白的调控作用及在结肠癌细胞中对其增殖和侵袭能力的作用.方法 qPCR检测结肠癌组织和结肠癌细胞中miR-26的表达情况;观察miR-26和结肠癌临床病理分期之间的关系;免疫荧光检测miR-26-inhibitor在结肠癌细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-26和BID的关系;MTT实验检测沉默miR-26对结肠癌细胞增殖能力的影响;Transwell侵袭实验检测沉默miR-26对结肠癌细胞侵袭能力的影响;结果 miR-26在结肠癌组织中表达水平较高;随着结肠癌的病理分期升高,miR-26的表达相应升高;沉默miR-26可以有效上调BID的表达;沉默miR-26可以抑制结肠癌细胞的增殖侵袭能力.结论 miR-26在结肠癌中表达上调,同时miR-26可以调控BID的表达影响结肠癌细胞增殖和侵袭能力.

Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究Bcl-2家族蛋白在维生素E琥珀酸(RRR-α-tocopheryl succinate,α-TOS;vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡线粒体途径中的作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)法测定VES对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50值);吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察细胞凋亡;Mito Tracker Red CMXRos染色观察线粒体膜电位(△ψm)的改变;Western Blot法检测不同剂量VES对人胃癌SGC-7901细胞Bid、Bax、Bcl-2蛋白表达和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白表达与定位的影响.结果:VES对SGC-7901细胞的IC50值为101.45μg/ml;VES可引起SGC-7901细胞发生凋亡和线粒体膜电位下降;并引起Cyt C蛋白在细胞内重新定位、Bid蛋白剪切活化、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少.结论:VES可抑制SGC-7901细胞的生长,并通过线粒体途径诱导凋亡,其机制可能是通过剪切活化Bid蛋白、上调Bax/Bcl-2相对水平来实现的.

慢性高原病患者骨髓有核红细胞凋亡及Bcl-xl、Bax、Bid表达水平研究

慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)是高原地区常见病,大量研究肯定了红系细胞过度增殖在CMS发病中的作用,但生理造血的特点是造血细胞生成和死亡之间的平衡,越来越多的资料表明细胞凋亡机制在生理造血调控中发挥着相当重要的作用.

姜黄素对大鼠肺纤维化形成病理形态及上皮细胞凋亡的影响

目的 研究姜黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成上皮细胞凋亡及Bcl-2家族部分蛋白的影响,探讨姜黄素治疗肺纤维化的可能机制.方法 选取SD大鼠72只,随机分为4组,每组18只:空白组、模型组、姜黄素组、泼尼松龙组.应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白组注入等量生理盐水,造模后第2天起,姜黄素组和泼尼松龙组分别给予姜黄素(300mg/kg)和泼尼松(5mg/kg)每日灌胃1次,其余两组每日给予1％羧甲基纤维素钠(10ml/kg)灌胃1次.各组动物于7d、14d、28 d随机处死6只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,消化法测定肺组织羟脯氨酸(HYP),TUNEL法检测肺组织细胞凋亡.SABC法检测Bid及Bcl-xl蛋白的表达.结果 姜黄素组肺纤维化程度、病理改变及HYP含量及上皮细胞凋亡指数较同时期模型组降低(P值均＜0.01)；姜黄素组肺组织肺泡上皮细胞Bid表达较同时期模型组比较差异无统计学意义.姜黄素组肺组织肺泡上皮细胞Bcl-xl表达较同时期模型组升高(P值均＜0.01).结论 在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预能有效减轻肺纤维化程度,可能机制为姜黄素上调Bcl-xl的表达而非下调Bid表达来抑制上皮细胞凋亡.

肺纤维化大鼠上皮细胞凋亡及Bcl-xl和Bid动态变化

目的 探讨肺纤维化大鼠中Bcl-2家族部分蛋白介导的线粒体途径引起上皮细胞凋亡的动态变化及相关关系.方法 选取SD大鼠48只,随机分为4组:空白对照组(24只)、模型7d组(8只)、模型14 d组(8只)、模型28 d组(8只).应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白对照组注入等量生理盐水,各组动物于第7、14、28天随机处死8只,取肺组织采用HE染色观察病理变化,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织Bid、Bcl-xl mRNA以及蛋白的表达.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、肺泡炎与纤维化并存(14 d)及稳定的肺纤维化(28 d)等表现；同时间段模型组肺组织细胞凋亡指数、Bid mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组(P＜0.01),Bcl- xl mRNA及蛋白表达显著低于空白对照组(P＜0.01);模型组细胞凋亡与Bid蛋白及mRNA从第7天开始逐步升高,第28天达高峰,Bid mRNA与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.8275,t =7.937 5,P＜0.01)；模型组Bcl-xl蛋白与Bcl-xl mRNA表达在第7天开始下降,第28天达低峰,Bcl-xl mRNA与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.633 8,t=-4.489,P＜0.01); Bcl-xl mRNA与Bid mRNA无明显相关性(r=-0.3869,t=-2.2986,P＞0.05).结论 细胞凋亡在肺纤维形成中起重要作用,肺纤维化细胞凋亡可能与Bcl-2家族蛋白的表达失衡有关.