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RNAi--一种抗病毒感染的新方法
RNAi又称之为转录后基因沉默(post transcription gene silencing,PTGS),是广泛存在于植物、线虫、果蝇、真菌和动物中的一种抗病毒机制,有如脊椎动物的免疫系统,它能特异地用于抗病毒感染,是一种有广泛应用前景的抗病毒感染的基因治疗方法,本文就近年来该方法在抗病毒感染方面的研究作一综述.
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番茄丛矮病毒p19蛋白抑制转录后基因沉默作用机制
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是真核生物体内由双链RNA(double-stranded RNA)介导的同源RNA降解现象.在细胞内,长的dsRNA被Dicer酶切割成21～26核苷酸(nucleotide,nt)的小干扰RNA(small interfering RNA或short interfering RNA,siRNA);siRNA与多种蛋白结合后形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),同时解链;有活性的RISC可在siRNA的指引下与互补的转录物结合,并导致RNA的降解,这种转录后水平基因沉默(posttranscriptional gene silencing,PTGS)也称RNA沉默(RNA silencing)[1,2].人为地向细胞内导入dsRNA、siRNA,或者是它们的表达载体都可以诱发RNAi,有效地中止同源基因表达.这就为建立基因与表型之间的关系提供了可靠的手段.目前,RNAi技术正因其简捷高效性而广泛应用于功能基因组研究、疾病治疗研究,以及植物抗病毒研究等.
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RNA干扰:脑学习和记忆的可能机制
dsRNA介导同源靶基因沉默的RNA干扰(RNAi)是转录后基因水平沉默的主要作用方式,具有普遍的生物学意义.RNAi是dsRNA介导的核酸酶作用于dsRNA(>26nt)同源不成熟mRNA的酶解过程,mRNA降解为21-23nt的dsRNA而使基因表达沉默.RNAi所具有的特性和脑学习和记忆的特征,提示RNAi可能是RNA介导的脑记忆移转的潜在机制.
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RNA干扰号慢性疼痛的基因治疗
RNA干扰(RNA interference,BNAi)是1998年Fire等[1]首次发现并命名的,是由双链RNA(dsRNA)分子在细胞内特异性诱导与之同源mRNA降解或翻译抑制,导致基因沉默的现象,是一种典型的转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS).RNAi主要的功能特点是其可以调节和关闭基因的表达,进而调控细胞的各种高级生命活动.RNAi技术已经成为模式生物、基因功能、基因治疗等研究领域中有力的工具,本文仅就RNAi在慢性疼痛研究中的进展作-介绍.
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RNA干扰在头颈鳞癌治疗中的应用价值
头颈部肿瘤是全球范围内的第八大常见肿瘤,而鳞状细胞癌是头颈部为常见的恶性肿瘤类型.由于头颈部解剖位置特殊,重要器官密集,手术可切除范围相对有限[1].因此,包含基因治疗的综合治疗在头颈恶性肿瘤中具有重要地位.RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近10年来兴起的一项高效、特异、彻底的转录后基因沉默技术,不仅在基因功能研究中具有重要作用,而且在基因治疗中也具有巨大潜力.本文就RNAi在头颈鳞癌治疗中的应用价值进行综述.
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RNA干扰:快速关闭基因表达新技术研究进展
在后基因组时代,基因功能的研究以前所未有的速度快速发展,各种研究基因功能的新技术不断涌现.RNA干扰(RNA interference, RNAi)作为一种新的、强有力的研究工具,在功能基因组学领域具有巨大的应用潜力.所谓RNAi就是利用双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,使细胞表现出特定基因缺失表型的过程,即诱导序列特异的转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS)[1].
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RNA干扰与高血压
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默.本文简述了RNAi在高血压中的应用.
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RNA干扰的抗病毒效应
双链RNA介导的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)能序列特异性的诱发转录后基因沉默,被认为是机体阻止外来病毒感染、保护细胞免受病毒入侵的一种细胞自我保护机制.近年来研究表明,以病毒基因和宿主细胞受体分子为靶点,引入外源的小分子干扰RNA(siRNA)能显著性抑制病毒的复制与感染.RNAi作为一种抗病毒的有力武器,将给病毒性疾病的基因治疗带来新的希望.
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基因沉默技术研究进展
基因沉默是生物体内基因表达调控的重要方式,也是生命科学研究的重要工具.基因沉默主要分为转录水平上的基因沉默(TGS)和转录后基因沉默(PTGS).TGS主要是由基因甲基化、位置效应、同源基因间的反式失活、后成修饰作用等引起的;PTGS主要是由基因共抑制和RNA干扰等引起的.本文主要从基因沉默类型的角度介绍基因沉默技术的研究进展及原理.
关键词： 基因沉默 转录水平上的基因沉默 转录后基因沉默 -
RNA干扰技术在肝脏疾病基因治疗中的应用
RNA干扰(RNAi)是同源性双链RNA诱发序列特异的转录后基因沉默现象,它可以通过抑制蛋白表达模拟基因敲除技术.RNAi可以由外源性途径导入,对相应的基因进行表达抑制.在病毒性肝炎、肝纤维化、肝脏肿瘤的治疗和肝移植免疫排斥反应的研究等领域具有广阔的应用前景.
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RNA干扰技术沉默survivin基因对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3生物学行为的影响
survivin基因是凋亡抑制蛋白家族(IAP)成员之一,具有肿瘤组织表达特异性,与肿瘤化疗耐药相关,已有研究证明,survivin基因在卵巢肿瘤组织高表达,与肿瘤的恶性程度及预后密切相关[1].RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术具有很强的转录后基因沉默作用,已广泛用于抗肿瘤的研究中.
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RNAi介导肿瘤细胞VEGF基因表达临床研究的现状
目的:针对RNA干扰(RNAi)技术及VEGF基因做相关介绍,总结应用RNAi技术以VEFG为靶点抑制癌细胞生长的实验研究进展.方法:应用CNKI期刊全文数据库、万方数据库检索系统,以“RNAi、肿瘤细胞、VEGF”等为关键词,检索所有的相关文献,纳入标准:1)VEGF的发现及其受体；2)RNAi机制度特点；3)用RNAi技术抑制肿瘤细胞VEGF基因表达的实验研究,凡符合以上几点的发表在2000-01 -2011-09的文章都可作为本文的参考文献.经筛选引用的中文文献25篇,英文文献13篇.结果:RNAi是现在基因治疗的热门方法,由于其高效特异性,越来越受到更多学者得关注.血管生长在肿瘤生长.转移过程中起着关键作用,而VEGF是血管内皮生长的关键因子,通过RNAi对VEGF mRNA表达抑制率可达94％左右,从而可有效抑制癌细胞的增殖.结论:应用RNAi技术以VEGF为治疗靶点的实验研究为肿瘤的治疗提供的大量的实验依据,为其临床应用做好充足的准备.
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哺乳动物RNA干涉及治疗研究进展
RNA干涉是双链RNA介导的序列特异性的转录后基因沉默机制.自2000年发现哺乳动存在RNA干涉以来,RNA干涉作为基因沉默的一个工具,已广泛用于哺乳动物基因功能和基因治疗研究.笔者介绍了哺乳动物体外RNA干涉研究概况,重点综述了哺乳动物体内RNA干涉及利用RNA干涉进行基因治疗方面的研究进展.
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RNA干扰技术的原理与应用
1998年,Fire等[1]首次在向秀丽线虫(C.elegans)注射双链RNA(dsRNA)时发现dsRNA能够引起与该段RNA同源的mRNA产生特异性降解,从而高效地特异性阻断相应基因的表达,他们把这种发生在转录后的基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)现象命名为RNA干扰(RNA interference,RNAi)[2].
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RNA干扰技术及其在口腔肿瘤研究中的进展
RNA干扰(RNA interference,RNAi)首先由Fire等[1]提出,为双链RNA(double strand RNA,dsRNA)介导的细胞内序列特异性转录后基因沉默过程,是生物体在进化过程中,抵御病毒感染及由于重复序列和突变引起基因组不稳定性的保护机制.RNAi技术现已广泛应用于逆基因分析和基因治疗等领域,并日益成为口腔肿瘤患者分子病因和基因治疗研究的重要工具.
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siRNA及其在肿瘤研究中的应用
RNAi(RNA inferference)是一种序列特异性,RNA为依赖性转录后基因沉默技术(PTGS).在大多数真核生物中,RNAi在控制外来基因表达中起到进化上保守的细胞防御作用.
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RNA干扰技术在肿瘤研究中的应用
RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)引起的与其同源的mRNA特异性降解,导致转录后基因沉默.RNAi技术比传统的反义寡核苷酸技术更加有效,为在体内、外研究基因的功能提供了快速而相对简便的途径,并可能成为治疗肿瘤等疾病的有效手段.RNAi技术可以通过各种策略直接靶向肿瘤治疗.RNAi可以抑制癌基因、生长因子及其受体的过表达而抑制细胞生长;通过干扰细胞周期蛋白及其相关基因的表达可以抑制细胞增殖;靶向耐药基因的RNAi有利于肿瘤治疗.
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RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞分泌TNF-α的影响
[目的]探讨RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞表达TNF-α的抑制作用.[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,构建针对小鼠TNF-α的siRNA表达框架,转染细胞,用RT-PCR方法检测TNF-αmRNA的水平,用ELISA方法检测TNF-α分泌情况.[结果]从凝胶电泳图像TNF-α、β-actin灰度值比可以看出干扰组TNF-αmRNA的水平0.18±0.03较阳性对照组0.91±0.05及阴性对照组0.85±0.10明显降低(P＜0.05).干扰组TNF-α分泌量(21.87±1.20)pg/mL较阳性对照组(28.02±1.03)pg/mL及阴性对照组(27.64±1.92)pg/mL均明显降低(P＜0.05).[结论]RNA干扰可以有效地抑制原代培养小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA水平及其蛋白分泌.
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RNA干扰对小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α的影响
目的:探讨小干扰RNA(siRNA)对小鼠脾淋巴细胞分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制效果.方法:体外PCR扩增合成针对TNF-α靶位点的DNA表达盒,转染经脂多糖(LPS)激活的小鼠脾淋巴细胞,在细胞内源性RNA聚合酶Ⅲ作用下转录形成siRNA,诱发目标mRNA的降解.于转染后48 h收集细胞培养上清.TNF-α浓度用ELISA方法测定.结果:与空白对照组和无关干扰组相比,干扰组TNF-α分泌量明显降低(P＜0.05),抑制率约为16%.结论:RNA干扰技术可以在原代培养的小鼠脾淋巴细胞中发挥特异性干扰作用,产生抑制TNF-α分泌的效果,为TNF-α的基因治疗开拓新途径.
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Dicer在肿瘤中的研究进展
Dicer是一个相对分子质量约200000的多结构域蛋白质,是miRNA的形成过程中需要作为RNaseⅢ家族成员的一种关键酶.在产生miRNA的生物发育过程中发挥着重要作用.通过与靶mRNA特异的碱基配对,引起靶mRNA降解或者翻译抑制,产生转录后基因沉默.Dicer与肿瘤的关系已在多种肿瘤中得到证实,现就Dicer与肿瘤的研究进展做一综述.
