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寄生虫microRNA研究新进展
microRNA(miRNA)是一类19～24nt左右的内源性单链非编码RNA,其可与特定的mRNA结合,从而抑制靶mRNA的翻译或导致靶mRNA降解,在寄生虫生长发育、形态性别分化、营养代谢及致病等过程中发挥着至关重要的基因表达调控作用.虽然目前寄生虫miRNA的相关研究已取得新进展,但参与寄生虫与宿主相互作用的关键miRNA尚乏报道.本文就近年来寄生虫miRNA的研究进展作一综述,以期为寄生虫致病机制等的深入研究提供思路.
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MicroRNA与流行性乙型脑炎病毒感染研究新进展
流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起病毒性脑炎的重要病原,其发生机制与炎症因子的大量释放和神经系统的炎症损伤密切相关.microRNA作为一类具有调控功能的非编码RNA分子,对JEV感染过程中炎症因子的释放及其信号传导通路具有重要调节作用.本文就microRNA在JEV感染过程中的作用机制研究进行简要综述.
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miRNA在造血调控和骨髓增殖性肿瘤中作用的研究进展
microRNA(miRNA)是一类广泛存在于各种真核生物中大小约为19-25个碱基的单链非编码小分子RNA,miRNA在转录后水平通过促进靶mRNAs的降解或抑制其翻译过程而发挥负调控的作用.已有研究表明,面RNA能参与造血调控,进而与血液系统疾病的发生存在密切的关系.本文就近年来miRNA在血液细胞分化调控中的作用及其与骨髓增殖性肿瘤的发生、发展关系,诸如miRNA与淋巴细胞生成,miRNA与红细胞生成,miRNA与巨核细胞形成,miRNA与粒细胞形成,miRNA与BCL-ABL阳性的骨髓增殖性肿瘤-慢性髓系白血病,miRNA与BCR-ABL阴性的MPN(PV.IMF,ET)等相关研究作一综述.
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表观遗传调控在白血病发生中作用的研究进展——MicroRNA与白血病
表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因的表达却发生了可遗传的改变,表观遗传调控与白血病的发生密切相关.随着发现一类新的非编码的微小RNA(microRNA)参与基因表达的转录后和翻译水平的调节,异常的mieroRNA的表达在白血病的发生中起着重要的作用.作为表观遗传研究范畴的microRNA,已成为了白血病发病机制中的异常表观遗传调控研究的新热点.本文就表现遗传调控与白血病的发生、miRNA的表达异常在白血病发生中的作用、miRNA在白血病诊断、分类、治疗和预后判断中的应用前景进行了综述.
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microRNA调控树突状细胞研究的新进展
microRNA(miRNA)是一类长度为22个核苷酸左右的非编码单链RNA,通过与靶基因mRNA 3'UTR区域结合,引起靶基因mRNA剪切、降解及其翻译抑制,通过这种转录后的调控,进而调节细胞增殖、分化、凋亡、发育以及肿瘤的发生.树突状细胞(DC)是一类重要的免疫细胞,通过呈递抗原,启动下游的免疫应答,参与一系列生理和病理活动.近的研究发现,多种miRNA能够调控DC的发育、分化及功能.对这方面的研究进展予以归纳总结有利于深入了解miRNA层面的DC调控机制,为建立免疫系统相关疾病的全新诊疗策略提供线索.为此,本文就近年来miRNA调控DC的相关研究做一综述.
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microRNA在淋巴细胞发育分化及淋巴系统恶性肿瘤发生中的作用
microRNA (miRNA)是一类普遍存在的长度为21 -25 nt的小分子非编码RNA,通过与靶基因mRNA3’非编码区不完全互补结合,抑制翻译,在转录后水平调控靶基因的表达.miRNA参与了多种正常细胞发育及肿瘤发生的调控,在淋巴细胞的发育分化以及淋巴系统恶性肿瘤的发生中发挥着重要作用.研究表明,miRNA可作为有效的肿瘤生物标记应用于淋巴系统恶性肿瘤的诊断、预后判断以及对治疗反应的预测.本文就miRNA在淋巴细胞发育分化中的作用及miRNA与淋巴系统恶性肿瘤发生的关系进行了综述.
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MicroRNA在弥漫大B细胞淋巴瘤诊断预后方面的研究进展
microRNA (miRNA)是一类长度只有19-25个核苷酸的内源性小分子非编码RNA,miRNA通过和靶基因mRNA3'UTR的互补序列的不完全结合来调控一系列的基因表达,包括细胞增殖、分化、凋亡、干细胞发育.近年来研究发现,许多miRNA在肿瘤发生与发展中有着特殊的基因调控作用,已经被用作肿瘤治疗目标和预后标记物.本文将回顾弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)发生中miRNA重要的基因调控作用,以及miRNA在DLBCL的分型与诊断、治疗及预后方面的近年来研究进展.
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循环microRNA在恶性血液病中的研究进展
MicroRNA (miRNA)是一类内源性非编码小分子RNA,在肿瘤的发生和发展中起着至关重要的作用.近年来人们在血清/血浆、脑脊液、唾液、尿液及乳汁等体液中发现了稳定存在的循环miRNA,在不同的恶性血液病中循环miRNA具有不同的表达谱,并且与患者的疾病状态、预后等相关,这为恶性血液病的诊断、预后评估及靶向治疗提供了新的思路.本文就循环miRNA、循环miRNA的存在形式及功能、循环miRNA与恶性血液病进行综述.
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miRNA与慢性髓系白血病研究进展
microRNA (miRNA)是一种内源性的、长度约为22 nt的小非编码RNA,在转录后水平参与调控基因表达,广泛参与细胞的凋亡、增殖、分化、代谢等过程,具有重要的生物功能,并且可行使癌基因或抑癌基因功能.研究表明,miRNA的异常表达与慢性髓系白血病密切相关,参与调控慢性髓系白血病的发生、进展及耐药等过程,可成为潜在的诊疗靶点.本文就miRNA的合成与作用方式、慢性髓系白血病发病、耐药、治疗相关miRNA的研究进展作一综述.
关键词： microRNA microRNA异常表达 慢性髓系白血病 -
MicroRNA介导的急性髓系白血病化疗耐药机制研究进展
急性髓系白血病(AML)是一种常见的严重危害人类健康的造血系统恶性肿瘤,其常规化疗的长期生存并不理想,特别是此种疾病的高危患者的预后差.对化疗耐药是AML难治、复发的主要原因之一.MicroRNA(miRNA)是近年来在真核生物中新发现的一类内源性非编码的单链小分子RNA,长度为19-25 nt,其在转录后水平通过与特异的靶mRNA的3'UTRs(untranslated regions)结合使之降解或者抑制其翻译,从而调控相关靶基因的表达.已经有证据表明,miRNA的失调对肿瘤的发生和发展起着重要的作用.近年来,也有越来越多研究发现miRNA在AML耐药的形成中也起着重要的作用.本文从ABC转运蛋白介导的多药耐药、细胞周期、细胞凋亡耐受3个方面对miRNA介导的AML的主要耐药机制及其研究进展作一综述.
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非霍奇金淋巴瘤耐药相关microRNA研究进展
非霍奇金淋巴瘤(NHL)是起源于淋巴造血组织的恶性肿瘤,化疗是目前治疗NHL的主要手段,但化疗耐药仍旧是NHL治疗失败的重要原因.NHL多药耐药(MDR)机制复杂,涉及到多种信号通路.这些通路中的关键基因在遗传学水平的变异可以导致肿瘤细胞耐药现象的发生.microRNA是广泛存在于动物、植物及病毒中的非编码RNA,通过转录后水平调控靶基因的表达参与肿瘤细胞的分化发育及肿瘤的发生发展,其表达水平的改变在NHL的发病及耐药机制中起重要作用.因此,通过制备microRNA反义寡核苷酸(AMO),或采用microRNA替代治疗,人为地干预microRNA在NHL细胞中的表达,改变其靶向调控的相关基因蛋白的表达水平,并与NHL放化疗进行联合应用,对于逆转NHL细胞化疗耐药及放疗抵抗、改善其不良预后具有重要指导意义.本文就与NHL化疗耐药及放疗抵抗密切相关的microRNA及其潜在的作用靶点进行综述,并对这些microRNA在NHL发病及耐药机制中的具体作用进行深入阐述.
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MicroRNA与人类血液系统疾病的研究进展
microRNA(miRNA)是一类长约22 nt(19-25 nt)在进化方面属保守的非编码RNAs,miRNA与靶mRNA3'端非翻译区序列不完全互补结合,抑制翻译,在转录后水平调控靶基因的表达.miRNA在人体内发挥着非常广泛而重要的调控作用.本文对miRNA的特征、功能特点及在人类血液系统肿瘤发生中的作用等方面的研究进展进行综述.
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慢病毒荧光素酶载体介导的miRNA靶向基因筛选系统的建立及应用
本研究旨在建立miRNA靶基因高通量筛选系统,筛选出能调控p21NAs,以便试验验证及探索这些miRNA的生物学功能及意义.利用分子克隆技术构建并鉴定2个慢病毒表达载体-pWPXL-Luc及pWPXL -Luc -P21-3 'UTR,分别与包装载体psPAX-2及PDM2G共转染HEK 293T细胞；包装病毒颗粒,感染HEK 293细胞,获得稳定单表达荧光素酶及共表达荧光素酶与P21-3'UTR的细胞株,前者在后续实验中作为对照；采用荧光素酶检测试剂检测pWPXL-Luc病毒感染后的293细胞的荧光素酶活性.结果表明:包装出高滴度的病毒颗粒,成功建立稳定株,且在一定范围内稳定株细胞的荧光素酶活性与细胞数目成正比.结论:成功建立了miRNA靶基因高通量筛选系统；利用本筛选系统,成功筛选出靶向细胞周期调控基因P21( CIP1/WAF1)的miRNA.
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miR-21在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义
检测microRNA-21( miR-21)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中表达水平,分析miR-21表达水平与临床Durie-Salmon (D-S)分期法和常用肿瘤负荷指标血浆β2微球蛋白(β2-MG)水平的相关性,探讨miR-21在MM的发生、发展及预后中的意义.收集43例MM患者及20例正常对照的骨髓标本,用D-S分期法对MM患者进行临床分期,行髂骨穿刺获取BMMNC,采用实时荧光定量PCR方法检测BMMNC中miR-21表达同步抽取外周血,检测β2-MG水平.结果表明:①miR-21在MM患者BMMNC中表达水平明显高于正常对照者,复发/难治组MM患者miR-21表达水平明显高于初治组MM患者,差异有统计学意义(P＜0.05)；②MM患者化疗后miR-21表达水平较化疗前明显减低(P＜0.05),其中以化疗有效组减低为明显(P＜0.05),无效/进展组miR-21表达水平化疗前后无明显改变；③miR-21表达水平与患者病程D-S分期和血浆β2-MG水平有相关性.结论:miR-21过表达在MM的发病中发挥着重要的致癌基因作用,与MM肿瘤细胞的增殖、化疗效果和疾病预后有密切关系；miR-21表达水平与血浆β2 -MG水平、临床D-S分期呈正相关,可能成为判断MM患者预后不良的指标之一.
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microRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达
为进一步探讨microRNA(miRNA)在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达.从人脐血中分离单个核细胞(MNC),应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞;抽提miRNA后与miRNA芯片杂交,应用生物信息学技术分析miRNA芯片的表达结果.结果发现,miRNA在人脐血CD34+CD38+细胞的表达水平比在CD34+CD38-细胞的表达水平降低至1/2以下者共11个,表达水平升高至2倍以上者共73个,以上84个miRNA被称为"干细胞性"miRNA.经比较Georgantas等和芯片表达结果,发现有12个(14.29%,12/84)相同的miRNA.部分miRNA经历了类似于CD34在造血细胞表面的发展历程.应用生物信息学技术可寻找到新的与造血调控相关的miRNA簇及miRNA的下游靶基因.结论:"干细胞性"miRNA在正常造血中发挥着重要作用,即miRNA的系统表达模式→造血干/祖细胞基因表达谱→造血干/祖细胞的自我更新和系列定向分化.
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FLT3基因3'-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定
为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)基因3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3'-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用.采用PCR方法从HepG2细胞基因组DNA中扩增FLT3基因3'-UTR区序列,插入经PstI和FcoRI双酶切的经过改造的荧光素酶报告载体pGL3-control(pGL3-control-m);通过Target Scan 5.1软件预测可能与FLT3基因3'-UTR作用的miRNA;采用FuGENE(R) HD转染试剂包裹荧光素酶报告重组子和miRNA真核表达载体共转染293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性.结果表明,成功构建了含有804 bp的FLT3基因3'-UTR序列的荧光素酶报告重组子,通过酶切和基因测序的方法鉴定正确;miRNA靶位点预测显示,FLT3基因3'-UTR可能是miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-16、miRNA-195、miRNA-424、miRNA-497的作用靶点;与对照组相比,miRNA-15a、15b、195可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低20%左右.结论:成功构建了FLT3基因3'-UTR-荧光素酶报告载体,而niRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-195可抑制其荧光素酶活性.
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Has-miR-204的生物学信息分析及研究进展
MicroRNA(miRNA)是一类由 21 ～ 25 个核苷酸组成的非编码蛋白质的单链小分子 RNA,它们广泛存在于真核生物中,在物种进化中相当保守,其表达具有组织特异性和阶段特异性.miRNA 基因通常位于基因间或内含子区域,在核内由 RNA 聚合酶 II 转录产生具有帽子结构多聚腺苷酸尾巴的初级 miRNA(primary miRNA,Pri-miRNA).
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microRNA及其在心血管疾病中的作用研究进展
microRNA 是一类长22 个核苷酸左右的进化保守的内源性非编码单链RNA 小分子.自1993 年Lee 等[1]发现第一个被称为lin-4 的microRNA 以来,研究者对microRNA 的生物合成、功能及作用机制进行了大量研究.目前,人们已经鉴别出500 多个人类microRNA,它与RNA干扰(RNAi)一起被认为是RNA 研究的又一次革命[2].microRNA 可参与细胞的分化、增殖、凋亡以及多种生物组织的发育调节过程[3-6],但在哺乳动物心血管系统中的生物学功能自2005 年才得以阐释[7].目前,已证实microRNA在血管生成和心血管疾病中均具有重要作用[8-9].在心血管疾病发生发展过程中,血管内皮损伤及其功能紊乱对疾病进程具有重要作用,而诸如内皮型一氧化氮合酶(eNOS)等内皮特异性基因的表达将直接影响这些疾病的发生发展过程.因此,探讨microRNA 在心血管疾病中的调节作用及其机制具有理论与临床上的双重价值.
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消化系统恶性肿瘤miRNA研究的新进展
microRNA(miRNA)是一类存在于真核生物中长度约22 bp的非编码小RNA分子.miRNA通过与靶基因mRNA的3'端非编码区(3'UTR)结合,在转录后水平调控基因表达,来参与机体不同时期不同组织生长发育的重要过程.已知有一些miRNA基因定位在染色体脆性位点,还有部分miRNA基因存在于一些与肿瘤相关的基因组序列中,而且人们发现在肿瘤组织中多种miRNA的表达谱发生变化,进一步的研究证实miRNA与肿瘤细胞的生长分化迁移、肿瘤血管的生成及肿瘤耐药机制的形成等诸多方面都有着千丝万缕的联系.
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体液中microRNA的研究进展
Lee等[1]和Wightman等[2]1993年发现在线虫体内存在一种RNA(lin-4),其不编码蛋白但可以生成一对小的RNA转录本,每一个转录本能在翻译水平通过抑制一种核蛋白lin-14的表达而调节了线虫的幼虫发育进程.
