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虾青素对大鼠海马神经元细胞的保护作用
目的 探讨虾青素对大鼠海马神经元细胞的保护机制.方法 取SD大鼠10只,采用0.125％的胰酶分离其海马神经元细胞并进行原代培养.对照组在海马神经元细胞中加入5 mmol/L β样淀粉蛋白(Aβ)25-35诱导24h,建立AD模型；治疗组在海马神经元细胞中分别加入虾青素5、10、20 μg/μL,然后均加入5 mmol/L的Aβ25-35诱导24h.采用噻唑蓝比色法检测各组海马神经元细胞的存活情况,RT-PCR、Western blot法分别检测细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶、γ-分泌酶的基因及蛋白表达,半自动生化仪检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)及脂质过氧化物(MDA).结果 随着虾青素浓度升高,海马神经元细胞的存活率、SOD活性明显升高(P＜0.05或＜0.01),MDA降低(P＜0.05),HIF-1α、APP、β-分泌酶、γ-分泌酶mRNA表达及蛋白表达明显降低(P＜0.01或＜0.05).结论 虾青素通过抑制大鼠海马神经元细胞HIF-1α、β-分泌酶、γ-分泌酶、APP表达,减少Aβ合成,从而对其细胞起到保护作用.
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虾青素与氯化锂治疗慢性有机磷中毒小鼠认知障碍的协同作用
目的：探讨虾青素与氯化锂治疗慢性有机磷中毒小鼠认知障碍的协同作用。方法成年健康雄性昆明小鼠55只，采用随机数字法选8只作为对照组，其余47只连续氧乐果染毒4周建立慢性有机磷中毒认知障碍模型，将造模成功的40只小鼠随机分为模型组，虾青素治疗组，依达拉奉治疗组，氯化锂治疗组和虾青素＋氯化锂联合治疗组，每组8只。应用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力；ELISA法检测脑组织活性氧（ ROS）含量，化学比色法检测超氧化物歧化酶（ SOD）活性；HE染色观察小鼠海马组织形态学变化，免疫组织化学染色和Western blot检测p-PI3K，p-Akt，p-GSK3β与p-CREB在海马组织内的分布和表达水平。结果各组小鼠5 d平均逃避潜伏期差异具有统计学意义（F＝1662．147， P＜0．05），虾青素＋氯化锂组5 d平均逃避潜伏期用时明显低于模型组（均 P＜0．05），并均低于其他治疗组；与对照组相比，模型组小鼠海马神经元出现明显损伤，p-PI3K（0．032±0．008），p-Akt（0．030±0．006），p-GSK3β（0．028±0．007）与p-CREB（0．020±0．008）在海马区表达水平较对照组（0．087±0．007，0．084±0．009，0．097±0．002，0．076±0．012）明显降低（均P＜0．05）；虾青素＋氯化锂组小鼠海马神经元损伤较模型组有所减轻，p-PI3K（0．067±0．008），p-Akt（0．065±0．005），p-GSK3β（0．068±0．009）和p-CREB（0．062±0．008）在海马区表达水平较模型组显著升高（均P＜0．05）。结论虾青素与氯化锂联合治疗通过上调Akt／GSK3β／CREB信号通路的磷酸化水平，对慢性有机磷中毒致认知障碍起到神经保护作用。
关键词： 虾青素 有机磷农药 认知障碍 协同作用 Akt/GSK3β/CREB信号通路 -
雨生红球藻粉90d喂养试验研究
目的 评价雨生红球藻粉的安全性,为进一步开发雨生红球藻粉提供科学依据.方法 96只SD大鼠,雌雄各半,按体重随机分为对照组和3个雨生红球藻粉剂量组.对照组给予粉饲料,3个剂量组分别给予1.8 g/kg、3.6 g/kg、7.2 g/kg的雨生红球藻粉,连续喂养90 d.每周记录大鼠进食量、体重变化并观察中毒症状.于试验中期和末期取血进行血常规和各项血生化指标测定,试验末进行大体解剖观察和组织病理学检查.结果 大鼠一般表现良好,生长发育正常.对体重、食物利用率均无明显影响,对大鼠肝功能、肾功能、血液学指标无明显影响.组织病理学检查显示,除有少许常见自发病变外,均未观察到与摄入样品有关的组织病理学变化.结论 本实验条件下未观察到雨生红球藻粉有明显的毒性反应.
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虾青素人参茶叶对老龄小鼠的抗氧化作用
目的 评价虾青素人参茶叶的抗氧化功能.方法 采用SPF级昆明种老龄小鼠动物模型,设置0.117 g/kg BW、0.233g/kg BW、0.467 gag BW3个剂量给药30 d,同时设置阴性对照和溶剂对照组,30 d后测试脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、谷胱甘肽(GSH)和蛋白质羰基含量.结果 与老龄对照组比较,各剂量组10％肝匀浆中蛋白质羰基含量差异无统计学意义,高剂量组1％溶血液中MDA含量降低(P＜0.05),1％肝匀浆中SOD活性、1％溶血液GSH-PX活性和10％肝匀浆中GSH含量明显升高(P＜0.05).结论 虾青素人参茶叶对老龄小鼠有明显的抗氧化作用.
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三文鱼:源自深海的"美"食
三文鱼是一种深受大众喜爱的美容食品,不仅因为其绝佳的味道和上乘的口感,更因为它富含了许多对肌肤有益处的营养成份,如Omega-3脂肪酸、虾青素、DMAE、高质蛋白、维生素A和硒等.
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虾青素对兔骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的研究
目的 通过观察虾青素对新西兰兔骨性关节炎模型的软骨细胞增殖与凋亡基因表达的影响,初步探索其干预软骨细胞代谢的作用机制.方法 取5月龄新西兰兔骨性关节炎模型的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MTT法、TUNEL法、免疫组化法对细胞增殖、凋亡及细胞周期调控基因Bax、Bcl -2、Caspase-3、p53 mRNA的表达进行检测.结果 不同剂量组虾青素可显著促进软骨细胞体外增殖,并可通过减弱软骨细胞Bax、Caspase -3、p53 mRNA 的表达,增强Bcl -2 mRNA的表达来减缓软骨细胞凋亡进程.结论 虾青素可有效调控兔骨性关节炎软骨细胞代谢,增强细胞活性,延缓凋亡,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能.
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虾青素对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的保护作用
目的 观察虾青素在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中的保护作用.方法 成年雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组(sham)、SAH加安慰剂组(vehicle)和虾青素处理组(ATX).通过建立大鼠视交叉SAH模型,于手术后24 h分别检测大鼠脑组织含水量、伊文氏蓝含量的改变,并应用Western blot技术、原位末端转移酶标记(TUNEL)以及分光光度比色法分别检测脑组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白水平的表达、神经细胞凋亡和脑组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)的变化.结果 SAH后24 h大鼠脑组织含水量[(80.76±0.67)％]、血脑屏障通透性[(2.17 ±0.53)μg/g]显著升高;颞叶底部皮层Caspase-3蛋白水平表达(0.49 ±0.13)和TUNEL凋亡阳性细胞[(41.54±9.38)％]也明显增多;应用虾青素干预以后,大鼠脑组织含水量[(79.91±0.42)％]、血脑屏障通透性[(1.35 ±0.46) μg/g]、Caspase-3蛋白水平表达(0.34±0.06)和TUNEL凋亡阳性细胞[(27.86±5.17)％]均显著减少,同时,虾青素能够减轻SAH后的氧化应激损伤[MDA:(2.52±0.60)、(4.44±1.32)、(2.64±0.78) nmol/mg;GSH:(6.50±1.80)、(3.72±1.12)、(6.23±0.87)μmol/g;SOD:(25.71 ±4.00)、(14.71 ±2.35)、(21.61±3.87) U/mg].结论 虾青素能够减轻SAH后EBI,并可能与其强抗氧化性有关.
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虾青素保护线粒体和抑制氧化应激诱导的内皮祖细胞凋亡
目的：探讨虾青素对体外氧化应激诱导人外周血内皮祖细胞凋亡的影响及其机制。方法体外培养人外周血单核细胞源的内皮祖细胞，分为正常对照组、模型组（给予叔丁基过氧化氢100μmol·L-1）、预处理组（给予叔丁基过氧化氢100μmol·L-1+虾青素0.1，1.0，10.0 nmol·L-1预处理24 h）。噻唑蓝（ MTT）法检测细胞存活率；4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（ DAPI）染细胞检测细胞凋亡率；2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐（ DCFH-DA）法检测细胞内活性氧（ ROS）水平；比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（ caspase-3）活性；阳离子脂质JC-1法测定线粒体膜电位。结果 MTT检测发现，随着虾青素浓度的增加，内皮祖细胞的存活率也增加。与模型组[（48.5±4.3）％]比较，虾青素+叔丁基过氧化氢组细胞存活率明显升高[（57.6±8.2）％，（77.6±7.5）％，和（85.3±6.1）％，P﹤0.05]；DAPI染细胞检测发现，预处理组凋亡细胞明显减少，模型组凋亡小体形成率（27.8±3.2）％，3个预处理组凋亡小体形成率分别为[（20.4±2.9）％，（14.9±1.7）％和（7.8±0.7）％，P﹤0.05]；caspase-3活性检测表明，与模型组（0.345±0.018）比较，预处理组活性随虾青素剂量增大而依次降低[（0.291±0.013），（0.209±0.004），（0.169±0.013），P﹤0.05]；DCHF-DA分子探针检测细胞内ROS发现，与模型组比较，预处理组细胞内ROS水平呈剂量依赖性降低，荧光强度明显减弱。JC-1法线粒体膜电位检测显示，与模型组比较，预处理组线粒体膜电位丢失被明显抑制。结论虾青素通过减少细胞内ROS，保护线粒体膜电位，下调caspase-3活性，终起到抗氧化应激诱导的EPCs凋亡。
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HPLC测定皂化后雨生红球藻中虾青素的含量
目的:建立雨生红球藻中皂化后虾青素的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Dionex Aeelaim120 C18柱(150mm ×4.6mm,5μm).流动相:甲醇-水(95:5).检测波长:475nm.结果:线性范围为0.5～10.0μg·ml-1,r=0.999 9(n=5).平均回收率为97.00%,RSD为0.99%.结论:本方法简便快速、重复性好.
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雨生红球藻中虾青素酯皂化工艺的研究
目的:研究雨生红球藻中虾青素酯的皂化工艺,优选雨生红球藻中虾青素酯皂化的佳工艺条件.方法:采用HPLC测定皂化后虾青素的含量,以雨生红球藻中虾青素提取量为指标,应用正交试验设计进行筛选.结果:皂化的佳工艺条件为10g·L-1的KOH-CH3OH皂化液在20℃条件下恒温振荡皂化60min.结论:优选得到的工艺稳定可行.
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虾青素对紫外线诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用
目的:探讨虾青素(astaxanthin)对紫外线(UV)诱导人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化损伤的保护作用.方法:人晶状体上皮细胞系传代培养24 h后,分别加入不同质量浓度(2.0,20.0 μg·L-1)虾青素预处理12 h后,紫外线照射30 min后继续培养,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测凋亡相关因子caspses-3及caspase-9的表达.结果:紫外线照射可以诱导HLEC形态改变,而虾青素预处理组HLEC形态改变不明显;流式细胞计数:正常对照组HLEC平均凋亡率为3.75％±0.36％,阳性对照组(紫外线照射)HLEC凋亡平均率为38.34％±3.19％,高剂量组(虾青素)HLEC凋亡平均率为14.19％±3.41％,与阳性对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);虾青素还可以减少紫外线所致HLEC内caspses-3及caspase-9的表达,且随作用时间的延长其表达量呈下降趋势.结论:虾青素可以明显抑制紫外线诱导的HLEC的凋亡,可能是防止和延缓白内障发生的细胞学基础.
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虾青素及其药理作用研究进展
虾青素( Astaxanthin)即3,3’-二羟基-4,4’-二酮基-β,β-胡萝卜素,又称虾黄素.它广泛存在于自然界的海洋动物体、藻体及少数陆生植物体内,是一种萜烯类非维生素A源的类胡萝卜素,具有多种生物学功能,其中以降低血糖、保护心血管、抗癌、对骨骼的作用和提高免疫力作用尤为突出.本文就它的药理作用及其研究进展作一综述.
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基于AMPK/eNOS/NF-κB信号通路探讨虾青素对脑梗死大鼠的影响及作用机制
目的 基于AMPK/eNOS/NF-κB信号通路探讨虾青素对脑梗死大鼠的影响及作用机制.方法 采用改良的Longa法建立脑梗死大鼠模型,取50只造模成功的SD雄性大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、虾青素低、中、高剂量组,每组10只,另外未造模的10只作为空白对照组.空白对照组与模型对照组均给予等体积生理盐水,阳性对照组给予20 mg/(kg·d)尼莫地平,虾青素低、中、高剂量组分别给予10、20、30 mg/(kg·d)虾青素,连续给药14天.检测大鼠神经功能变化;氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死面积;酶联免疫吸附法检测白细胞介素10(IL-10)、IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;TUNEL法检测脑皮质缺血半影区的细胞凋亡情况;反转录-聚合酶链反应检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、核因子κB (NF-κB) mRNA表达水平;Western blot检测p-AMPK、AMPK、p-eNOS、eNOS、NF-κB蛋白表达.结果 虾青素可明显改善脑梗死大鼠的神经功能及脑梗死面积(P＜0.01);抑制促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达,促进抗炎因子IL-10表达(P＜0.05);降低皮质缺血半影区细胞凋亡率(P＜0.01);下调NF-κB mRNA和蛋白表达,促进AMPK和eNOS磷酸化(P＜0.05),但AMPK、eNOS mRNA和蛋白表达无显著差异(P＞0.05).结论 虾青素能明显改善脑梗死大鼠神经功能、脑梗死面积、皮质缺血半影区细胞凋亡率及血清细胞因子,其作用机制可能与AMPK/eNOS/NF-κB信号通路密切相关.
关键词： AMPK/eNOS/NF-κB信号通路 虾青素 脑梗死 神经再生 -
虾青素抑制NF-κB的激活减轻大鼠心肌梗死后的交感神经重构的研究
目的 探讨虾青素对心肌梗死后的交感神经重构的影响以及可能的作用机制.方法 心肌梗死组和虾青素组大鼠结扎冠状动脉前降支制作心肌梗死模型;假手术组开胸后剪开心包腔,不结扎冠状动脉.虾青素组按100 mg/(kg·d)的剂量于术前1日开始灌胃,1次·d-1;心肌梗死对照组和假手术组灌胃等量无菌蒸馏水.28 d后用HE染色观察细胞形态,采用蛋白免疫印迹法检测心肌梗死周边NF-κB核移位、p-CX43蛋白的表达.采用免疫组化方法检测心肌梗死周边神经生长因子(NGF)、生长相关蛋白43(GAP43)、酪氨酸羟化酶(TH)的分布.结果 与心肌梗死组相比,虾青素抑制了NF-κB核移位,p-CX43蛋白水平表达增多,虾青素组GAP-43与TH阳性的密度及NGF的含量明显减少.结论 虾青素可减轻心肌梗死周边的交感神经重构,可能是通过抑制NF-κB的激活.
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红球藻软胶囊抗氧化功能评价研究
目的 观察红球藻软胶囊的抗氧化功能.方法 117名符合条件的受试者随机分为对照组(60人)和试验组(57人),试验组每人每日口服红球藻软胶囊1次,每次1粒,连续服用30天.观察受试者一般状况,检测安全性指标和功效性指标,采用自身前后对照和组间对照两种研究方法进行对比研究.结果 试验期间受试者一般状况良好,体检各项安全性指标亦未见异常,表明受试样品对人体无不良影响.试验后试食组血超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于试验前、且显著高于对照组.结论 红球藻软胶囊有一定的抗氧化功能.
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左旋虾青素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤保护作用的研究
目的:探讨左旋虾青素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法:通过皮下注射四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤,检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,考察左旋虾青素的保肝作用.结果:左旋虾青素能显著降低小鼠血清中ALT、AST的活性与肝脏中MDA含量,提高小鼠肝脏的SOD活性.结论:左旋虾青素对CCl4所致肝脏毒性具有一定保护作用.
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超声提取雨生红球藻中左旋虾青素的正交试验研究
目的:以雨生红球藻为原料,筛选超声法提取左旋虾青素的佳工艺.方法:以超声功率、超声时间、溶剂、料液比为考察因素,正交试验设计,用紫外分光光度法测定其提取率,并作为考察指标.结果:正交试验结果得出佳工艺为以乙酸乙酯为提取溶剂,加入10倍量,在45 W功率下提取30 min,提取左旋虾青素的提取率平均达2.8036％.结论:该提取工艺下提取率高,耗时少,结果稳定,该工艺可行.
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超临界CO_2流体萃取雨生红球藻中虾青素的工艺研究及其脂肪酸GC-MS分析
目的:本文研究了从雨生红球藻中提取虾青素的超临界CO_2流体萃取工艺.考察了原料的前处理、夹带剂种类、夹带剂量、萃取压力温度等因素对虾青素提取率的影响,确定了较为适宜的萃取工艺:原料用30%乙酸浸泡后制粒(20目),萃取压力35 MPa,萃取温度80℃;分离I压力6 MPa,温度50℃;分离Ⅱ压力6 MPa,温度45℃;夹带剂为1倍量95%乙醇;萃取时间3 h,虾青素的提取率为89.4%.分析了萃取物中的脂肪酸,鉴别出5种脂肪酸成分.
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酶法提取雨生红球藻中虾青素的新工艺研究
目的:探索酶法提取雨生红球藻中虾青素的新工艺.方法:用雨生红球藻粉为原料,以虾青素的提取率为指标,通过纤维素酶对雨生红球藻进行酶解处理,然后用乙醇提取虾青素.考察了酶解液初始PH值、酶解温度、酶用量、酶解时间对虾青素提取率的影响,并与传统的乙醇直接提取方法比较.结果:酶解法提取雨生红球藻中虾青素的佳工艺条件为:酶解液初始pH值4.5、酶解温度45℃、酶用量1.5%、酶解时间15 h.在此条件下虾青素的提取率达94.6%,比乙醇直接提取法高61.5%.
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虾青素对低渗性对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用
目的 研究虾青素(astaxanthin,AST)对低渗性非离子型对比剂碘海醇造成的大鼠急性肾损伤模型的保护作用其及机制.方法 SD大鼠被随机分为5组:对照组;虾青素对照组(100 mg/kg虾青素);模型组;低剂量治疗组(50 mg/kg虾青素);高剂量治疗组(100 mg/kg虾青素);每组6只.虾青素对照组、低剂量治疗组、高剂量治疗组大鼠连续虾青素灌胃10d,其他组大鼠给予等体积溶剂灌胃.于实验第8天,除对照组及虾青素对照组外其余大鼠经股静脉注射吲哚美辛、左旋硝基精氨酸甲酯(NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester,L-NAME)、碘海醇,建立对比剂急性肾损伤模型.注射碘海醇72 h后检测大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织病理改变;氧化应激试剂盒法检测肾组织丙二醛(MDA)含量,总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)和过氧化氢酶(CAT)活性;Western印迹法检测肾组织B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶3 p17亚基(Caspase3 p17)的表达.结果 与对照组相比,模型组Scr、BUN水平明显升高;虾青素治疗组明显降低(均P＜0.01).HE染色可见模型组肾小管损伤严重,髓质充血,肾小管结构破坏,上皮细胞刷状缘脱落、空泡变性、细胞坏死及蛋白质沉积.虾青素治疗组大鼠肾脏上述改变减轻,肾损伤评分减低(P＜0.05);与对照组相比,模型组肾组织T-SOD、GPx、GSH活性下降,MDA含量增加(均P＜0.05),虾青素治疗组大鼠上述指标明显改善(均P＜ 0.05).Western印迹结果显示,与对照组相比,模型组大鼠肾组织Bax、Caspase-3 p17表达上调,Bcl-2表达下调;虾青素治疗组上述指标有明显改善(均P＜0.05).结论 碘海醇导致肾组织氧化应激增加,激活Caspase-3信号通路,上调Bax表达,下调Bcl-2表达,导致细胞凋亡.虾青素通过抑制氧化应激,减轻细胞凋亡,对低渗性对比剂碘海醇诱导的急性肾损伤有保护作用.
