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胶体染料免疫渗滤法在血吸虫病传播阻断地区的应用
黄山市地处皖南山区,原属山丘型血吸虫病重流行区,1993年达到消灭血吸虫病标准,1994年进入监测巩固阶段.通过12年的监测,未发现有人、畜本地感染的病例和感染性钉螺.
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西安地区3-5岁入托儿童Hp/CagA+Hp感染的随访研究
目的:对3-5岁入托儿童进行Hp感染及CagA+亚型Hp感染的3 a定期随访,了解该年龄段Hp感染及CagA+亚型Hp感染状况,为研究儿童Hp相关性疾病提供依据.方法:西安市某幼儿园托班儿童54人,进行连续3 a的跟踪随访.使用统一设计调查表,采用问卷调查方式,由专人填写.血清中抗Hp-CagA-IgG检测及Hp尿素酶IgG检测采用斑点金免疫渗滤法.结果:随着年龄的增加,Hp感染率及CagA+亚型Hp感染率逐渐增高,在3-4岁时已经达到高峰,分别为77.8%和27.8%.4岁年龄段Hp感染率增高了46.3%,Hp-CagAIgG增加了20.4%,5岁年龄段Hp感染率有所下降,Hp-CagA-IgG下降不明显.第2年与第1年相比,Hp感染及CagA阳性Hp感染阳转率分别为64.8%和24.0%.第3年与第2年相比,Hp感染及CagA阳性Hp感染阴转率分别为28.5%和8.3%.结论:儿童期是Hp感染的关键年龄,幼儿园集体生活,活动环境拥挤,卫生条件较差,共同的生活方式可能是导致Hp感染传播的主要原因之一.
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结核性脑膜炎三种快速诊断方法的比较
结核性脑膜炎(结脑)是肺外重症结核病,也是常见的中枢神经系统感染疾病.结脑误诊率较高,如冯玉麟等[1]对129例结脑(尸检证明)研究发现误诊率高达49.6%.结脑实验诊断的金标准是脑脊液(CSF)涂片抗酸染色镜检和培养[2],然而这两项检查敏感性很低或费时.因此,建立快速、敏感、特异的检测技术具有重要的实用价值.我们比较并评估了聚合酶链反应(PCR)、斑点酶免疫渗滤法(DIEFA)和快速免疫色谱测试卡(ICAT)法检测CSF对结脑的诊断价值.
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斑点酶免疫渗滤法抗体检测对结核性脑膜炎诊断价值的评估
脑脊液(CSF)检查有助于准确诊断结核性脑膜炎(TBM).我们将CSF涂片找抗酸杆菌、PCR扩增结核杆菌DNA和金标抗体试剂盒检测IgG设为对照,评价用重组结核分支杆菌38000蛋白作抗原所建立的斑点酶免疫渗滤法(DIEFA)快速检测CSF抗体的价值,报告如下.
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国内首个艾滋病唾液检测试剂上市
用棉签在口腔内蘸取唾液后,在试剂盒中加入几种不同的检测试剂,30分钟就可快速检验出是否感染艾滋病.昨天,记者从北京生物技术和新医药产业促进中心获悉,国内首个艾滋病唾液检测试剂已获批上市.早在2009 年,在国家"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项的支持下,北京万泰生物药业股份有限公司与厦门大学成功研制出"HIV(1+2型)口腔黏膜渗出液抗体检测试剂盒".这款艾滋病唾液检测试剂采用先进的免疫渗滤法,操作简便,采样时无痛,不会对受试者皮肤造成针刺损伤,极大降低了被检测者和医护人员受感染的风险.
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大肠埃希菌O157:H7的胶体金免疫渗滤法检测
肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Esherichia coli,O157:H7)是新出现的肠道致病菌,它可引起人腹泻、出血性肠炎、血栓性血小板减少性紫癜和溶血性尿毒综合征.自1982年在美国报道出现此菌引起的食物中毒以来[1],已在世界范围内多次暴发流行,我国也于1986年在徐州发现感染病人[2].
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血吸虫病快速免疫诊断--胶体染料免疫渗滤法的初步研究
目的开发一种适合现场应用的血吸虫病快速免疫诊断方法.方法将纯化的日本血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)点于硝酸纤维素膜上,以捕获血清标本中血吸虫特异性抗体,通过胶体染料R3标记的SEA来直接显色,阳性者出现红色斑点.结果胶体染料免疫渗滤法检测急性血吸虫病人血清35份、慢性血吸虫病人血清107份、晚期血吸虫病人血清35份,其敏感性分别为100%、97.2%和74.3%.检测健康人血清87份,特异性为100%.检测肝吸虫病人血清38份、姜片虫病人血清11份、钩虫病人血清20份,其交叉反应率分别为2.6%、0.0%和0.0%.整过试验过程仅需2~3分钟,操作简单.染料标记SEA在室温条件下保存6个月、37℃恒温中保存62天,其活性均未发生明显变化.结论胶体染料免疫渗滤法检测各期血吸虫病结果准确,操作简便、快速、廉价、肉眼观察结果不需特殊仪器,特别适用于基层现场查病.
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胶体染料免疫渗滤法检测血清血吸虫抗体的研究
血吸虫病的免疫诊断是以检测抗体为主,常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、环卵沉淀试验(COPT)和间接血凝试验(IHA).
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血吸虫病快速免疫诊断--胶体染料免疫渗滤法的初步研究
目前,血吸虫病的免疫诊断是以抗体检测为主,常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、环卵沉淀试验(COPT)和间接血凝试验(IHA).这些方法,操作较烦琐,对大规模的现场查病来说仍不十分理想.本研究根据双抗原夹心ELISA、斑点渗滤法和胶体染料标记抗原、抗体技术开发研制出一种快速、敏感、适于血吸虫病现场筛查的新方法-胶体染料免疫渗滤法(Colloidal Dye Immunofiltration Assay,以下简称CDIFA),检测患者血清中特异性抗体,用于血吸虫病现场快速筛检.
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外出采血用胶体金免疫渗滤法对HBsAg进行初筛
随着<中华人民共和国献血法>的颁布实施,血站全部实行无偿献血.无偿献血基本上在站外采血,用ELISA法检测HBsAg比较困难,需要37℃水浴、板机等设备,加上孵育时间长,不可能在采血现场对献血员进行初筛.胶体金免疫渗滤法(金标法)的问世,使外出采血HBsAg的初筛成为可能,可简单快速地判断出阳性结果.
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胶体金标记免疫渗滤法检测抗PPD-IgG对结核病的诊断价值
结核病的诊断方法很多,痰菌检查阳性率低,培养法费时且不经济,X线胸片只能提供可能的诊断,放射核素标记技术难以作为常规项目应用于临床,PCR假阳性问题有待解决,酶联免疫吸附试验操作时间较长.
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乙肝表面抗原4种检测方法的评价
我们用间接血凝法(RPHA)、酶联免疫吸附一步法(ELISA1)、酶联免疫吸附二步法(ELISA2)和快速斑点免疫渗滤法(DIGFA),对1000份血清进行了检测,现将结果报告如下.
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时间分辨荧光免疫分析定量检测HBsAg的临床价值
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的一个检测指标,其定量检测对乙肝的研究和防治,特别是观察疗效具有重要的意义.目前,临床上测定HBsAg的方法主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、胶体金免疫层析法(GICA)、斑点金免疫渗滤法(DIGFA)等,其中以ELISA为主,但其灵敏度只有1 μg/L,且属于定性分析.时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)作为一种高灵敏的定量免疫测定方法,近年来应用范围在不断扩大.本文应用Wallac公司的Auto DELFIA系统,对310例乙肝患者血清进行HBsAg定量检测,现将结果报告如下.
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免疫渗滤法实验中非特异性染色封闭方法的改进
目的 选择理想的非特异性抗原封闭方法以适应基于免疫渗滤法的蛋白芯片制备.方法 以杆状病毒-昆虫表达系统制备的人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白抗原为例,采用脱脂奶粉、小牛血清、牛血清白蛋白及不同组合等5种方法对非特异性抗原进行封闭,检测其在免疫渗滤实验中对消除非特异性染色的效果,寻找佳封闭非特异性染色的方法.结果 经过多次重复试验,并以PBS代替血清作空白试验,结果显示,目前常用的先固相然后封闭的几种方法,其封闭效果的稳定性和重复性不佳,且空白对照易出现假阳性;同时发现使用脱脂奶粉做封闭剂封闭后,由于奶粉颗粒易堵塞NC膜的孔径,影响NC膜的渗滤速度;使用小牛血清做封闭剂封闭后,由于NC膜对小牛血清的吸附而产生背景,影响结果判读;而采用20g/L BSA先封闭后固相的方法,在实验中得到满意的结果.结论 先封闭后固相的方法,在免疫渗滤实验中对非特异性抗原封闭的效果理想、结果稳定、重复性好,为一种理想的新的封闭方法.