首页 > 文献资料
-
一起蜡样芽胞杆菌食物中毒分离株的毒力基因分析研究
目的 对红河州发生的一起蜡样芽孢杆菌食物中毒分离株进行毒力基因分析研究.方法 本次食物中毒从一位病人肛拭子标本和三种剩余食物中分离出4株蜡样芽孢杆菌,利用PCR检测分离株的腹泻型毒力基因:hbl(ACD)、nhe (ABC)、cytK、entFM、bceT和呕吐型毒力基因:NRPS.结果 病人(肛拭子)和剩余食物(火腿烩乳饼)分离株均携带有hbl(ACD)、nhe(ABC)、cytK、entFM、bceT基因;剩余食物(虾)分离株携带有nhe (ABC)、entFM基因;剩余食品(冰木瓜凉水)分离株携带有hbl(CD)、nhe(ABC)、cytK、entFM、bceT基因;所有分离株均不携带有呕吐型毒力基因NRPS.结论 本次食物中毒根据毒力基因检测结果,可以确定为由蜡样芽孢杆菌引起的腹泻型食物中毒.
-
致病性李斯特菌毒力因子蛋白组学及基因组学研究进展
单增李斯特菌与绵羊李斯特菌是李斯特菌属中具有致病性的两个菌种,均能在胞内繁殖,可以作为疫苗载体构建疫苗.但它们在宿主范围和致病力等方面又存在较大差异,导致两者在疫苗学和免疫学领域的应用不尽相同.从分子层面上看,两种菌独特的病原学特点与各自的主要毒力因子蛋白及相关毒力基因的差异有关.分析比较两者的毒力因子蛋白及基因,对两菌进一步在疫苗学上的应用很有必要.本文特对单增李斯特菌与绵羊李斯特菌毒力因子蛋白组学和基因组学研究进展作一综述.
-
2011-2014年北京市副溶血性弧菌血清型及毒力基因特征分析
目的 了解2011-2014年北京市引起腹泻的副溶血性弧菌血清分型及主要毒力基因特点.方法 对561株副溶血性弧菌进行生化鉴定和血清学分型试验,应用实时荧光PCR方法检测毒力基因tlh、tdh和trh.结果 561株副溶血性弧菌有9个O群和23个K型,共34个血清型,以O3:K6血清型为主,占67.6％ (379/561).2011-2014年血清型分布存在差异.561株副溶血性弧菌tlh、tdh和trh基因阳性率分别为100.0％ (561/561),97.1％ (545/561)和1.1％ (6/561).3种毒力基因分成4种类型,tlh +tdh+trh-为优势基因型,占96.4％ (541/561).结论 2011-2014年北京市引起腹泻的副溶血性弧菌有多种血清型,多为产毒株,以携带tlh和tdh基因的O3:K6为优势血清型.通过对生化、血清分型和毒力基因检测结果进行综合分析,有助于提高副溶血性弧菌鉴定的正确性.
-
金黄色葡萄球菌耐药性及毒素分析
目的 分析100株金黄色葡萄球菌的耐药谱、耐药基因、毒力基因分布及其相关性.方法 收集2014年10-12月江苏大学附属人民医院临床分离的100株金黄色葡萄球菌,采用VITEK 2 compact进行细菌鉴定及药敏试验,聚合酶链反应技术(PCR)检测常见的9种耐药基因及10种毒力基因.结果 共检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 52株,检出率52％,未检出替加环素、万古霉素、利奈唑烷及喹努普汀/达福普汀耐药株,对庆大霉素、左氧氟沙星、红霉素、利福平、环丙沙星、莫西沙星、克林霉素、四环素和复方新诺明的耐药率分别在12％～64％之间.实验共检出7种耐药基因和7种毒力基因,其中常见的耐药基因组合为aacA-aphD+ ermC+ tetM,另外,检出的耐药基因与其表型并不完全一致.毒力基因hla、RNAⅢ及psmα在所有的菌株中均表达,而eta、etb和edin C在所有菌株中均未表达.pvl、seb、sec和tst-1毒力基因阳性率分别为7％、47％、64％和4％.其中MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)相比,MRSA多重药物的耐药率明显增高,且部分毒素基因分布存在差异.结论 临床标本分离的金黄色葡萄球菌存在多重耐药性,且部分菌株毒力较强,需加强监控.
-
江西省239株霍乱弧菌毒力相关基因分布特征
目的 对江西省2000-2011年分离的霍乱弧菌进行毒力相关基因检测,在分子水平上了解霍乱弧菌毒力基因的分布特点以及流行和变迁规律.方法 采用PCR方法对239株霍乱弧菌进行ctxA、ace、zot、tcpA、rtxA和cri基因检测.结果 在239株霍乱弧菌中,共表现出15种毒力基因携带类型,其中病例分离株,带菌者和环境调查分离株分别有7种,6种和3种基因携带类型,以6种基因全部携带为主,携带率分别为76.09％ (35/46),81.82％ (27/33),83.33％ (20/24),而外环境霍乱监测中霍乱弧菌毒力基因携带则有13种毒力基因携带型,呈现多样性.结论 霍乱弧菌中6种毒力基因的携带情况呈现多态性,病例相关分离株的毒力基因携带率高于外环境监测分离株.
-
三亚市食物中毒中人感染副溶血性弧菌的毒力基因及耐药性研究
目的 了解三亚市食物中毒中人感染副溶血性弧菌携带毒素基因及耐药性情况,为副溶血性弧菌食物中毒病人的治疗提供参考依据.方法 利用19种不同的抗生素药敏纸片,采用K-B扩散法进行耐药检测;用荧光定量PCR扩增法,以检测菌株的TDH和TRH基因.结果 经检测的30份菌株,28株携带有TDH基因,阳性率93％,所有菌株均没携带TRH基因.30份菌株对诺氟沙星、头孢曲松、氧氟沙星、头孢哌酮、庆大霉素、氯霉素、头孢克洛、氨苄青霉素、妥布霉素、环丙沙星、洛美沙星、依诺沙星、亚胺培南、萘啶酸未见有耐药株;青霉素G、苯唑西林、羧苄青霉素全部耐药;头孢噻吩、链霉素部分耐药.结论 带有TDH毒力基因是三亚市近年来引起食物中毒中人感染副溶血性弧菌主要分子流行病学特征,所分离菌株对大多数常见抗生素敏感性高.研究结果为评价引起食物中毒的副溶性弧菌的分子流行病学特征和制定可行的防控措施提供了科学依据.
-
福氏志贺菌4c亚型深圳分离株的生物学和分子特性分析
[目的]对深圳市首次分离的福氏志贺菌4c亚型菌株进行生物学和分子特性分析,了解该类新菌型生物学特征及分子特征.[方法]采用生化反应、血清学分型、刚果红侵袭试验、药敏分析等方法对患者、厨工肛拭及物体表面的17株福氏志贺菌分离株进行病原学分析,采用质粒图谱和毒力基因分析方法进行分子特性分析.[结果]所得到的福氏志贺菌4c亚型分离菌均分解葡萄糖产酸不产气,甘露醇阳性,血清学鉴定为福氏志贺菌Ⅳ型,7群菌株;刚果红侵袭试验均阳性;对氨卞西林、四环素、甲氧苄啶、阿莫西林耐药,而对阿来卡星、环丙沙星、庆大霉素、头孢噻肟、头孢噻吩和诺氟沙星敏感;所有菌株的质粒电泳图谱相同,但与F4a,F46质粒电泳图谱差异较大;所有菌株均携带ipaH和setl基因,而仅有23.5% (4/17)的菌株携带ial和sen基因.[结论]该福氏志贺菌4c亚型深圳分离株的的生化、血清学鉴定结果与现有报道基本相符,该菌具备一定毒力.所有菌株均为同一来源,但4c亚型并非变异于F4a和F46.ipaH和setl毒力基因携带情况与相关报道相符,ial和sen基因携带情况低于现有报道.
-
肠出血性大肠杆菌O157:H7多重PCR快速检测研究
[目的]建立能快速、特异检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的多重PCR技术. [方法]选用针对大肠杆菌O157志贺样毒素1、2(sh1/sh2)基因、溶血素(hlyA)基因、和0157特异性基因(rfbE)的4对引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了猪肉模拟样品检测. [结果]该方法扩增目的基因片段分别为348,584,250 bp和497 bp,特异性和灵敏度均高.细菌纯培养物的检测灵敏度为103cfu/ml,猪肉模拟样品37℃预增菌4 h后检测灵敏度能达到100cfu/ml. [结论]初步建立了快速、灵敏、特异地测定肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7的多重pCR检测技术.
关键词： 多重PCR 肠出血性大肠杆菌O157-H7 毒力基因 rfbE基因 -
北京昌平区46株副溶血性弧菌分子流行病学特征分析
目的 了解北京昌平区副溶血性弧菌临床菌株血清型、耐药性、毒力基因携带情况及分子特征.方法 对2017年北京市昌平区分离到的46株副溶血性弧菌进行血清分型、药敏实验、毒力基因检测及脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)分析.结果 46株副溶血性弧菌的主要血清型为O3∶K6,PFGE分析得到37种PFGE带型,菌株之间的相似系数为59.9％～100.0％.本实验中的副溶血性弧菌除头孢唑啉外,对其他16种抗菌素敏感或完全敏感,临床菌株均携带tlh和tdh基因,不携带trh基因.结论昌平区引起腹泻的副溶血性弧菌主要为O3∶K6血清型、毒力基因均为tdh(+)/tlh(+)/trh(-)、对多数抗生素敏感,PFGE带型呈高度多态性.
-
长沙地区8起副溶血性弧菌食物中毒的病原学特征分析
目的 了解长沙地区副溶血性弧菌食物中毒的病原学特征,为预防和控制由副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供科学依据.方法 对2015年长沙地区8起食物中毒事件中分离的21株副溶血性弧菌进行血清学分型,PCR检测毒力基因tdh和trh,微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性,脉冲场凝胶电泳进行分子分型.结果 21株副溶血性弧菌均为O3:K6血清型;tdh携带率为100％,未检测到trh阳性菌株;分离菌株对氨苄青霉素耐药率为14.29％,对四环素、氯霉素等其他7种抗生素均敏感;分离株PFGE带型相似度高(＞85％).结论 长沙地区引起食物中毒的副溶血性弧菌主要为O3:K6血清型,菌株都携带tdh毒力基因且相似度高.
-
温州市食源性疾病中小肠结肠炎耶尔森菌的调查分析
目的 了解温州地区食源性疾病中小肠结肠炎耶尔森菌的血清型、毒力基因携带和耐药性.方法 利用常规细菌分离方法从食源性疾病标本中分离小肠结肠炎耶尔森菌和进行血清分型,同时进行抗生素敏感试验,并进行5种毒力基因检测.结果 2012年从温州地区采集的364份腹泻患者肛拭标本中共分离到2株小肠结肠炎耶尔森菌,全部为O:5血清型.2株全部携带ystB毒力基因,其余毒力基因均为阴性.2株对利福平、氨苄西林、链霉素及多粘菌素B耐药,对阿米卡星、头孢噻吩中介外,其他常用抗生素都敏感.结论 温州地区食源性疾病中检出的小肠结肠炎耶尔森菌携带毒力,具有潜在危险,应该引起重点关注.
-
江苏省霍乱病例病原学特征及与外环境污染间的关系
[目的]了解江苏省外环境中霍乱弧菌的污染现状,探讨其与病例发生、疾病流行问的关系.[方法]检测水体、水产品和熟食中霍乱弧菌的携带情况,比较外环境来源株与病例株在血清型、耐药性及毒索基因等方面的差异,应用PFGE分型技术分析不同来源菌株的遗传相关性.[结果]株外环境来源株均为不带毒力、对抗生素敏感的O1群非流行株,病人来源株为具有ctxA、zot、ace、tcpA毒力基因的O139群.11株O139群被分成7种PFGE带型,与O1群相似性系数为76.14%.[结论] 外环境来源株在表型及基因水平上与病例株差异较大,不是病例发生的原因.目前霍乱在江苏省处于低频的高度散发状态,近期大规模暴发和流行的可能性较小.
-
崇州市23株副溶血弧菌的病原特征分析
目的 分析四川崇州地区2014-2017年6起23株副溶血弧菌食物中毒疫情分离株毒力基因携带,耐药及分子分型特征,为该地区副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据.方法 采用微量肉汤稀释法(MIC)检测13种抗生素的敏感性;实时荧光PCR法检测(tdh、trh)毒力基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和BioNumerics软件对菌株进行分子分型分析.结果 23株副溶血性弧菌PFGE聚类分析共分为18个型别.2起暴发的病人之间分属同一PFGE型别,其余4起暴发病人、食品、环境之间相关性均低于60％;2起暴发病人分离株存在100％相似的带型.食品和环境分离株无毒力基因检出,病人分离株毒力基因检出率88.89％(16/18).食品环境分离株对头孢唑啉100％(5/5)耐药,对其他12种药物均敏感;临床分离株对氨苄西林27.78％(5/18)耐药、头孢唑啉100％(18/18)耐药,对其他11种药物均敏感.结论 该地区近年来由副溶血性弧菌引起的食物中毒事件存在由多种不同型别和相同型别(PFGE带型100％相似)弧菌引起情况.
-
2010-2012年四川省小肠结肠炎耶尔森菌感染状况
目的 研究四川省小肠结肠炎耶尔森菌(Y.e)在常见宿主及患者中的分布特征.方法 在不同季节采集不同地区腹泻患者或宿主动物进行常规分离鉴定.对分离菌株进行血清学和生物学分型,同时用PCR方法检测毒力基因.结果 从1557份各类样品中分离出Y.e 47株,其中腹泻患者7株,宿主动物猪25株,青海田鼠10株,喜马拉雅旱獭5株;总分离率3.03％.血清型分布为O∶3血清型菌株27株,O∶9血清型2株,O∶5血清型6株,O∶8血清型2株,不能分型10株;毒力基因检测情况表明除青海田鼠分离的到4株O∶3血清型菌株外,其余O∶3、O∶9血清型菌株均具有致病性.结论 四川省腹泻患者与常见宿主动物均存在小肠结肠炎耶尔森氏菌感染,感染率存在季节差异;首次证实在四川高原野生动物喜马拉雅旱獭中存在致病性Y.e,并证实宿主动物O∶3血清型中存在不产毒力基因的非致病性菌株.
-
2006-2010年高密市小肠结肠炎耶尔森菌调查
目的 了解高密市食品中小肠结肠炎耶尔森菌及动物带菌情况.方法 2006 - 2010年采集家畜家禽粪便、冷冻食品共2 097份,4℃冷增菌后用选择性培养基进行病原菌分离培养并作生化鉴定,将可疑菌株做进一步的血清学鉴定和生物分型及毒力检测.结果 2 097份标本中分离出131株小肠结肠炎耶尔森菌,总的检出率为6.25％,其中0∶3(携带毒力基因ail+、ystA+、rbfc+)和0:9血清型的检出率分别为0.76％和1.52％.108株仅携带ystB基因(82.44％)；26株不携带任何基因(19.85％).131株小肠结肠炎耶尔森菌分布在3个生物型,其中生物1A型占74.80％；生物3型占1.52％；生物4型占0.76％.结论 本地区存在致病性小肠结肠炎耶尔森菌,有感染人和动物及引起食源性型疾病的可能,因此必须加大该菌的监测力度,以预防小肠结肠炎耶尔森菌病的感染流行.
-
2006年四川省部分地区霍乱弧菌毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳分型分析
目的 分析四川省2006年霍乱弧菌分子特征,分析疫情分离的菌株与监测分离的霍乱弧菌之间的遗传相关性,查找霍乱传染来源,为进一步研究本菌的流行规律和制定防治措施提供依据.方法 PCR检测霍乱弧菌毒力基因(ctxAB);脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株进行分子分型,以BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析.结果 所试18株霍乱弧菌均具有ctxAB,为产毒株.对18株菌以Not I酶切后PFGE可分为4个型别.结论 首次从牛蛙中分离到产毒株.甲鱼中分离的霍乱弧菌与霍乱疫情分离菌株之间同源,被污染的甲鱼可能是本年度食源性霍乱暴发的传染来源之一,应进一步加强对各类海、水产品的监测.
-
屎肠球菌类毒力基因hyl的致病性研究
采用菌落杂交法检测364株不同脉冲场电泳(PFGE)型的屎肠球菌中透明质酸酶(hyl)基因的分布.用自杀质粒pTX4577通过体内同源重组,筛选获得hyl基因的突变株,体外研究hyl基因缺失对突变株生长能力的影响.采用小鼠腹膜炎模型体内研究hyl基因突变株的毒力下降情况.结果显示,在临床分离菌株中hyl基因阳性率为32.76%,明显高于非临床分离菌株(5.30%).经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、PFGE和Southern 印迹进行鉴定获得hyl基因突变株,命名为·hyl.突变株在体外的生长能力低于野生株.小鼠腹膜炎模型中,在相同细菌感染浓度(3.7×109 cfu)下,野生株TX2466组小鼠的存活率为0,而·hyl组小鼠的存活率为50%,差异有显著性.hyl基因主要出现于临床感染的屎肠球菌中,在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一.
-
临床感染粪肠球菌致病岛毒力相关基因的研究现状
致病岛（PAI）是细菌染色体上一段具有典型结构特征的基因簇，主要编码与细菌的毒力及代谢等功能相关的产物，近年研究发现，肠球菌PAI毒力增强或获得新的毒力基因可能是导致肠球菌感染率和病死率上升的主要原因。本文就粪肠球菌致病岛常见的几种毒力相关基因的研究现状进行综述。
-
血液中分离一株O139群霍乱弧菌分子生物学检测及药物敏感性分析
目的 对南昌大学第一附属医院从患者血液中分离的一株O139群霍乱弧菌进行毒力基因检测、药物敏感试验及溯源分析.方法 用PCR检测技术检测霍乱ctxA、ctxB、ace、cep、zot、rtxA、hlyA、toxR、tcpA和eri毒力基因,用小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行体外抗菌药物敏感性检测,利用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE)进行分子同源性分析.结果 rtxA、hlyA和toxR毒力基因为阳性,ctxA、ctxB、ace、cep、zot、tcpA和cri毒力基因均为阴性;药物敏感试验显示该菌对头孢吡肟、头孢曲松、头孢西丁、亚胺培南、强力霉素敏感,对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星、庆大霉素、磺胺甲噁唑、复方磺胺甲噁唑和阿奇霉素耐药;PFGE分型显示与近5年江西省分离的O139群霍乱弧菌相似性聚类分析为80％.结论 江西省首次在患者血液中分离出O139群霍乱弧菌,该菌对喹诺酮类、磺胺类和青霉素类药物具有较高的耐药性,PFGE溯源分析该菌与近5年江西省分离的O139群霍乱弧菌存在一定差异.
-
霍乱疫情分离霍乱弧菌的耐药性及分子特征分析
目的 对一起霍乱疫情分离的O139菌株进行毒力相关基因检测,耐药性和分子特征分析,了解其毒力相关基因的携带情况,药物敏感性以及同源性.方法 应用PCR技术对分离到的23株O139霍乱菌进行ctxA、ctxB、ace、cep和zot毒力相关基因检测,应用KB纸片法对菌株进行12种抗生素的药物敏感试验,用PFGE进行同源性分析.结果 23株O139霍乱菌ctxA、ctxB、ace、cep和zot毒力相关基因检测均为阳性,所有菌株药物敏感度一致,且对复方磺胺甲噁唑、强力霉素、庆大霉素敏感,PFGE带型一致,为同一克隆株.结论 此次由O139霍乱菌引起的疫情由同一克隆株引起,实验室检测结果为霍乱疫情的快速有效控制和临床治疗提供科学依据.
