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电化学发光测定低浓度乙肝病毒表面抗原的临床意义
低浓度乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)是指HBsAg的浓度小于5 ng/mL[1-3].低HBsAg是判断乙型肝炎感染的重要依据之一;其在人群的感染性疾病诊断中已越来越引起临床实验室及流行病学专家的重视,低浓度HBsAg的检测与报告给临床实验室带来了新的挑战.已有资料表明,低浓度HBsAg人群的检出率占HBsAg阳性人群6.68%-23.16%[3].由于HBsAg受检测方法、试剂盒灵敏度及操作误差、结果判断标准等影响,低浓度HBsAg在不同的实验室可能有不同检测结果.
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血清 AFP 升高对乙肝患者的临床意义探讨
2006年乙肝流行病学调查显示我国人群乙肝病毒表面抗原携带率为7.18%[1],乙肝患者目前尚无根治的有效方法,控制病情进展、防止并发症和肝细胞癌变是治疗乙肝的关键,因此,早期识别患者病情严重程度尤为重要[2]。甲胎蛋白(AFP)是由肝脏合成的一种糖蛋白,血清 AFP 水平的高低可以作为判别肝病严重程度和进展的重要指标[3],本研究通过对乙肝患者血清 AFP 水平检测,探讨血清 AFP水平升高对乙肝患者临床意义,以期为临床治疗和控制乙肝病情提供依据。
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HBsAg阴性的慢性乙型和丙型重叠感染肝炎患者临床研究
为探讨HBsAg阴性的慢性乙型重叠丙型肝炎患者HBV-DNA水平及临床特征,采用PCR-微板核酸杂交-ELISA法对203例HBVM一项/一项以上阳性的慢性丙型肝炎患者进行HBV-DNA定量及HCV-RNA基因分型检测,并分析患者性别、年龄以及肝功能等临床特征.HBsAg阴性及HBsAg阳性慢性丙型肝炎患者在性别、年龄分布上无差异;但血清ALT及总胆红素水平在HBsAg阳性者较高.Ⅱ/1b型HCV感染在HBsAg阴性者中的比例高于HBsAg阳性者(P<0.05).HBsAg阴性慢性丙肝患者HBV-DNA阳性率及HBV水平均低于HBsAg阳性患者.HBsAg阴性的慢性丙肝患者中,抗HBc单独阳性者HBV-DNA阳性率高,但HBV-DNA水平无显著性差异.Ⅱ/1b型HCV感染在HBV-DNA阴性患者中的出现频率较高,与HBV-DNA阳性患者相比差异有显著性.因此,临床上对于那些肝功能损害严重,同时有抗HBc阳性或Ⅱ/1b型HCV感染,尤其是HCV-RNA阴性而肝功能仍有持续损害的患者要及时行HBV-DNA检测,以除外HBV活动的可能.
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HDAg与HBsAg/HBcAg在丁型肝炎病人肝组织中的表达
研究HDAg、HBsAg和HBcAg在丁型肝炎病人肝组织中表达及关系,探讨HDV致病机理.应用免疫组化双重染色及连续切片技术,检测79例丁型肝炎病人肝组织HDAg、HBsAg和HBcAg表达,以52例乙型肝炎作对照.丁型肝炎HBsAg、HBcAg检出率(81%、71%)较乙型肝炎(94%、92%)低(P<0.05或0.01).HDAg以肝细胞核表达为主,HBsAg以肝细胞浆表达为主,HDAg和HBsAg表达强度及阳性细胞分布呈一致性,均与肝组织炎症活动和病理损害程度相关(P<0.01).HBcAg以肝细胞核表达为主,HBcAg阳性细胞明显少于HDAg阳性细胞.HDV感染可抑制HBV抗原表达;在HDV致病机制中既有HDV的直接细胞毒性作用,也有HBV和HDV的协同作用.
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HBsAg对正常肝细胞及肝癌细胞诱导产生NO的影响
采用HBsAg分别刺激体外培养的正常肝细胞及肝癌细胞,观察培养液中NO2-/NO3-,以及NO对这两种细胞DNA合成的影响.结果发现:HBsAg可以诱导正常肝细胞及肝癌细胞产生NO,并抑制这两种细胞DNA合成,但以正常肝细胞受抑较严重.提示:乙肝病毒及乙肝病毒表面抗原也是引起肝硬化病人NO水平增高的重要原因.NO可能是肝硬化组织易于癌变的可疑诱因.
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表达乙肝病毒表面抗原人参细胞系统的建立
目的建立乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统.方法构建含有HBsAg基因的植物细胞表达载体质粒pBIBSb.采用农杆菌感染人参细胞的方法,经农杆菌培养、农杆菌与受体细胞共培养、受体细胞的脱菌培养以及转化体细胞的选择培养后,筛选在G418抗生素培养基上正常生长的细胞株.应用ELISA方法检测抗性细胞株的HBsAg表达;提取基因组DNA进行PCR扩增反应.结果质粒pBIBSb的酶切结果正确.经G418抗生素筛选得到8株正常生长的细胞株,其中5株能够表达HBsAg,提取基因组DNA进行PCR扩增反应,得到大小约700bp的扩增片段.结论获得了整合HBsAg基因,并能够稳定表达HBsAg的人参细胞表达系统.
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鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原含量检测方法的建立及验证
目的 建立鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)含量检测方法,并进行验证.方法 通过对壳聚糖酶的处理条件(反应温度、酶浓度和酶解时间)进行优化,建立鼻腔喷雾型重组乙肝疫苗中HBsAg含量检测方法,并对该方法进行特异性、线性范围、准确度、精密度(重复性、中间精密度)及耐用性验证.结果 确定壳聚糖酶处理条件为:2 U/ml的壳聚糖酶于37℃水浴中孵育60 min,然后采用基于化学发光法的试剂盒定量检测HBsAg含量.壳聚糖酶的加入不会对疫苗中HBsAg含量检测产生干扰;HBsAg浓度在1.25~ 160ng/ml之间与发光值具有良好的线性(r2≥0.95);高、中、低浓度疫苗的平均回收率分别为100.18%、103.54%和113.88%;重复性及中间精密度验证结果的变异系数(CV)均≤20%;壳聚糖酶浓度在1.5~2.5 U/ml之间以及酶解时间为60 min,测定值CV均符合≤20%的验证审定标准.结论 建立了鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中HBsAg含量检测方法,该方法具有良好的特异性、准确度、精密度及耐用性,可用于该疫苗的质量控制.
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化解湿毒法治疗乙型肝炎病毒表面抗原携带者的临床观察
乙肝病毒表面抗原携带带者(ASC)在我国数量巨大[1],其与乙型肝炎、肝硬化、肝癌有一定因果关系,对人群具有极大的威胁[2].
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乙肝病毒表面抗原大蛋白检测结果分析
乙型肝炎病毒(HBV)在我国感染率高,易慢性化,引起肝硬化和原发性肝癌.如何简单快捷地评估HBV在体内是否复制已成为基层医院诊治的首要问题.近年来逐渐认识到乙型肝炎表面抗原大蛋白(LHBs)在HBV感染中具有越来越重要的临床意义,为此我们研究分析了乙肝病毒表面抗原大蛋白检测结果,旨在探讨LHBs反映乙肝患者HBV复制程度的可靠性.
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前S1抗原检测在献血人群的HBV感染筛查中的应用
目的:通过比较献血人群中谷丙转氨酶、乙肝表面抗原和前S1抗原检测与HBV-DNA检测结果的一致性,探讨前S1抗原检测在献血人群中筛查乙肝病毒感染者的应用价值.方法:1080份献血样本中,采用ELISA法检测前S1抗原,PCR法检测HBV-DNA,分析前S1抗原检测与HBV-DNA检测的一致性.结果:①1000例合格的献血人群中,前S1抗原的阳性率为0.3%,HBV-DNA阳性率为0.1%,两者呈中度一致性(Kappa值=0.499),且有统计学意义(P<0.05).②1080例样本中,ALT、HBsAg、前S1抗原的阳性率分别为5.83%、1.76%、1.67%,HBV-DNA阳性率为0.93%,ALT检测法与HBV-DNA检测无一致性(Kappa值=-0.0162);Hb sAg检测与HBV-DNA检测呈高度一致性(Kappa值=0.6160),前S1抗原检测与HBV-DNA检测呈高度一致性(Kappa值=0.7108),二者均有统计学意义(P<0.05).⑤ALT和HBsAg两项联合检测及ALT、HBsAg和前S1抗原三项联合检测的阳性率分剐为7.41%、7.69%,HBV-DNA阳性率为0.93%.两项联合检测法与HBV-DNA检验结果一致(Kappa值=0.1866),三项联合检测法与HBV-DNA检验结果一致(Kappa值=0.2019),均有统计学意义(P<0.05).结论:前S1抗原检测与HBV-DNA检测有较高一致性,能够减少献血人群中HBV感染的漏检;将ALT、HBsAg和前S1抗原进行联合检测能够提高HBV感染筛查率.
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硫酸酯化及羧甲基化虎奶多糖的抗病毒作用
目的研究硫酸酯化及羧甲基化虎奶多糖的抗病毒作用效果及作用机理,探讨虎奶多糖应用于因柯萨奇病毒(CVB3)导致克山病疾病预防的可能性.方法采用病变抑制法,在培养的Hela细胞上测定硫酸酯化和羧甲基化虎奶多糖对HSV-2和CVB3 2种病毒的抑制作用;用ELISA法测定这些多糖对HBsAg的破坏作用.结果 2种不同取代度的羧甲基化虎奶多糖及3种不同取代度的硫酸酯化虎奶多糖在浓度分别为0.5、0.25、0.125 mg/ml时均能明显抑制有囊膜病毒HSV-2引起的细胞病变,取代度对其抗病毒活性无明显影响;但对无囊膜病毒CVB3无明显的抑制作用,对HBsAg无破坏作用.结论虎奶多糖衍生物具有很好的抗HSV-2 病毒活性,其作用机理可能在于破坏病毒体的囊膜.
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乙型肝炎病毒表面抗原病毒流行病学调查分析
目的 为乙型肝炎的早期诊断提供理论依据.方法 本文对2010年6~7月本院检验科的乙型肝炎病毒检测进行了回顾性分析.结果 调查结果提示了乙肝病毒表面抗原的检测,与其它乙肝病毒标志物检测一起用于辅助临床对乙肝的诊断和指导治疗有重要意义.结论 乙肝病毒血清学标志物检测的健康体检人群年龄相对集中,以20~45岁为主,HBsAg阳性率男性高于女性,仍有4.9%的患者需接种治疗,体检医师应在加强乙肝防治、保护乙肝病毒携带者权益的工作中起更为积极的作用.
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乙肝疫苗接种后免疫效果观察分析
乙型肝炎疫苗(乙肝疫苗)是乙肝病毒表面抗原佐剂疫苗.主要是收集健康携带者的血液为原料通过一系列处理后制成.接种于人体后,便刺激人体产生乙肝表面抗体,具有防止乙肝病毒感染作用.为了解乙肝疫苗接种后的免疫效果反应,我校医院主要针对1998~1999 2年中接种乙肝(重组)酵母疫苗(北京生物制品研究所生产)后,观察接种后的反应效果.
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上海市卢湾区部分人群乙型肝炎病毒血清学调查
乙型病毒性肝炎(乙肝)是我国目前一个严重的公共卫生问题.我国人群中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性携带率达10%以上,对人群健康造成较大的危害.为了预防和控制乙肝,保护儿童身体健康,1992起上海市全面开展了新生儿乙肝疫苗的接种工作,并从2002年起对新出生的儿童实施乙肝疫苗免费接种.为了解和分析我区部分人群乙肝病毒感染情况,我区于2006年10月作为全国疾病监测点参加了"全国人群乙肝等相关疾病调查",现将相关调查资料分析如下.
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上海市卢湾区乙肝疫苗接种现状和乙肝危险因素调查
乙型病毒性肝炎(乙肝)是我国目前严重的公共卫生问题之一.我国人群中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性率达10%以上,对人群健康造成较大的危害.为了预防和控制乙肝,保护儿童身体健康,1992起上海市全面开展了新生儿乙肝疫苗的接种工作,并从2002年起对新出生的儿童实施乙肝疫苗免费接种.为了解和分析我区不同人群乙肝疫苗接种率,乙肝病毒感染的相关危险因素,为更好地采取防控措施提供科学依据,我区于2006年10月作为全国疾病监测点参加了"全国人群乙肝等相关疾病调查",现将相关调查资料分析如下.
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HBV和HIV的复合型DNA免疫可诱发BALB/c小鼠的细胞免疫应答
本研究是通过细胞免疫检测来研究含有两种不同病毒基因的复合型DNA免疫的效果,同时和单一病毒基因的DNA免疫作比较。在本实验中,将HBV的S基因和(或)HⅣ-1的gp120基因插入到真核表达载体pcDNA3中,得到能表达HBsAg和gp120融合蛋白的重组体pcDNA-S-120,和能表达HBsAg的重组体pcDNA-S。在实验中,将重组质粒DNA直接注射到BALB/c小鼠股四头肌内,按每只小鼠100μg/100μl的剂量经3次免疫后,在T细胞增殖实验中,用HBsAg蛋白刺激体外培养的被免疫小鼠T细胞后,出现了明显的T细胞增殖。采用”cr释放法检测特异性CTL杀伤作用时,发现致敏的CTL对HIV gp120多肽孵育后的靶细胞P815有明显的杀伤作用。
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HBsAg 抑制浆样树突细胞分泌 IFNα和 IL-12
目的:体外研究 HBsAg 对浆样树突细胞(pDC)功能的影响。方法磁珠分离健康人外周血 pDC,CpG ODN 刺激成熟,再给予 HBsAg 刺激,ELISA 法检测培养上清中 IFNα和 IL-12水平,流式细胞术检测 pDC 的表面CD40、CD80、CD83和 CD86抗原,激光共聚焦显微镜检测 pDC 内 HBsAg 的存在情况。结果实验所需的 pDC 细胞纯度≥95%。CpG-ODN2216 刺激 后,pDC 表面 CD40、CD80、CD83和 CD86抗 原 的 表 达 水 平 分 别 为 78.67±2.04,83.63±3.23,71.82±2.91,70.52±2.22,培养上清中 IFNα和 IL-12水平显著高于对照组。上述效应在加入 HBsAg 后被显著抑制。激光共聚焦显微镜显示在 pDC 细胞核周围有 HBsAg 存在。结论HBsAg 抑制 pDC 的成熟和分泌功能。这种作用可能是通过 pDC 对 HBsAg 的内吞实现。
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艾滋病合并华支睾吸虫和艾美球虫感染一例
患者,男,49岁,广西籍.1985年曾患乙肝.2002年9月因乏力、食欲不振、厌食,在广西某市人民医院诊断为早期肝硬化,2004年4月入该医院复查,因腹水、脾亢、黄疸、肝硬化,于5月10日行脾切除术,术后腹水加重,低蛋白血症.2004年6月4日CT发现肝占位病变,初步诊断为肝硬化代偿失调、肝右叶占位,6月9日行肝动脉造影化疗一次.2004年6月22日入住广西医科大学第一附属医院,血检:HGB81.0g/L,RBC3.34×1012/L,WBC20.9×109/L,肝吸虫抗体(+),乙肝病毒表面抗原(+)、e抗体(+)、核心抗体(+),甲胎蛋白(AFP)20.76 ng/ml,人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体(+),CD4/CD8比值0.04.肝功能:直/间胆红素为13.4/18.7 μmol/L,A/G为31.3/49.7 g/L,谷氨酰转肽酶118 u/L,谷丙/谷草转氨酶67/139u/L,大便检查:华支睾吸虫卵(+),艾美球虫(+++).肝胆B超:肝右叶多发实质性占位,肝硬化并多发高回声区团,胆汁淤积,胆囊结石.出院诊断:肝右叶占位,艾滋病(AIDS),肝硬化代偿失调.
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驻泰高校大学生HBsAg携带现状及分析
目的探讨驻泰高校大学生HBsAg携带情况、流行特征、表现形式及病毒复制状况.方法结合驻泰高校大学生无偿献血之际,检测ALT用酶联紫外连续检测法,HBV五项指标用酶联免疫法,HBVDNA采用PCR法.结果HBsAg阳性者病毒复制状况154例中属于高复制状态者95例(61.69%)、低复制状态者44例(28.57%)、无复制状态者15例(9.74%).结论高校大学生检测HBsAg具有重要的临床意义.
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注射乙肝疫苗前要查『两对半』
雷女士因为同事得了乙肝,自己想去注射乙肝疫苗,同时,她也想知道,注射乙肝疫苗前需要注意哪些呢?其实,在接种乙肝疫苗之前,应先检查乙肝病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体及核心抗体,即"乙肝两对半".检测结果显示上述三系统均为阴性,且转氨酶正常者,才可以接种.一般来说,凡没有感染过乙肝病毒,且自身抗体不足者都应接种乙肝疫苗.