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大豆苷元对运动训练大鼠自由基代谢的研究
目的:研究大豆苷元对运动训练大鼠自由基代谢的影响.方法:30只SD大鼠随机分为安静组、运动训练组、溶剂对照组、药物组和药物+运动训练组.大鼠游泳运动训练给药4周后,颈椎脱臼处死,测定心、脑、肝等组织中的SOD的活性和MDA的含量.结果:大豆苷元、大豆苷元+运动训练组对大鼠心、肝等组织中SOD活性显著升高;大鼠心、脑、肝等组织中MDA含量显著下降.结论:大豆苷元对运动训练大鼠具有清除体内脂质过氧化物,改善大鼠体内异常的过氧化状态,减轻对机体的过氧化损伤的作用.
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大鼠体内大豆苷元及其代谢物分布影响因素研究
目的 研究大鼠灌胃给予大豆苷元后,多剂量与性别对大豆苷元及其代谢物在大鼠血浆中分布的影响.方法 雌、雄大鼠分别单次或多次灌胃给予大豆苷元1.0 mg·kg-1,血浆样品经沉淀蛋白处理,采用LC-MS/MS方法测定血浆样品中大豆苷元及其Ⅱ相代谢物的质量浓度,采用Winnoin 6.4计算各化合物的主要药动学参数,并对获得的药动学参数进行统计分析.结果 大鼠多次灌胃给予大豆苷元后,血浆中大豆苷元及其代谢物的AUC0-24明显高于单次给药.多次给药后雌鼠血浆中大豆苷元主要以大豆苷元-7-葡萄糖醛酸结合物和大豆苷元-7-硫酸结合物形式存在,雄鼠血浆中主要以大豆苷元-7-葡萄糖醛酸结合物、大豆苷元-7-硫酸结合物和大豆苷元-7-葡萄糖醛酸-4'-硫酸结合物形式存在.结论 多次给药及性别差异明显影响大豆苷元在大鼠血浆中的分布.
关键词： 大豆苷元 Ⅱ相代谢物 液相色谱-串联质谱法 血浆分布 性别差异 -
不同月龄大鼠骨矿含量、骨生物力学改变及大豆苷元的干预作用
目的 探讨不同月龄大鼠骨生物力学的改变及补充大豆苷元对其变化的影响.方法 60只3月龄雌性大鼠,20只假手术,30只切除双侧卵巢,按体重随机分为6组:3月龄基础对照组(3-Yong),6月龄假手组(6-Sham),6月龄去卵巢组(6-OVX),9月龄假手术组(9-Sham ),9月龄去卵巢组(9-OVX),9月龄灌喂75 mg/kg大豆苷元组(9-OVX-D75).大鼠处死后,取下后肢,分离软组织,采用质构仪进行3点弯曲实验,测定左侧股骨生物力学指标大荷载、大挠度等,并测定骨矿含量.结果 大鼠去卵巢后,股骨生物力学特性及骨矿含量均降低,但随着月龄的增长,大鼠股骨承受大载荷增加,骨矿含量也增加,给予大豆苷元后,可改善大鼠股骨生物力学特性.结论 大鼠去卵巢后不但可以导致骨量的丢失,而且使骨生物力学性能下降.补充大豆苷元可较好改善股骨的挠度和大载荷,增强抗性.
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异黄酮对前列腺癌细胞的激素受体基因表达的影响
[目的]通过大豆异黄酮的活性物质染料木黄酮和大豆苷元抑制前列腺癌PC-3和LNCaP细胞增殖和对激素基因表达的影响,探讨大豆异黄酮治疗和预防前列腺癌的可能机制.[方法]0、10、20、40、60、80和160μmol/L剂量组的染料木黄酮和大豆苷元处理前列腺癌细胞,细胞存活率用MIT方法检测,α雌激素受体(ERα)、β雌激素受体(ERβ)、雄激素受体(AR)和血管上皮生长因子(VEGF)等基因的mRNA表达用RT-PCR进行检测.[结果]染料木黄酮和大豆苷元对PC-3、LNCaP细胞具有明显的抑制生长作用,在160μmol/L的浓度时,染料木黄酮、大豆苷元作用72 h后,PC-3细胞的存活率分别为12.28%和44.88%,LNCaP细胞的存活率分别为25.48%和43.14%,其抑制效应具有时间和剂量依赖性,同时发现对PC-3细胞的VEGF、ERα和ERβ基因表达下调,AR基因处理前后没有检测到;对LNCaP细胞的VEGF和AR基因表达下调,ERα和ERβ的表达并无影响.[结论]大豆异黄酮能抑制前列腺癌细胞的增殖效应,存在时间和剂量效应关系,雌激素受体基因可能直接在大豆苷元抑制PC-3细胞的增殖中参与作用,而染料木黄酮抑制PC-3细胞和染料木黄酮及大豆苷元抑制LNCaP细胞可能主要是通过Akt通路影响VEGF和AR等基因而实现.
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异黄酮类化合物对前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制
[目的] 通过观察金雀异黄素(genistein,GS)、大豆苷元(daidzein,DA)和大豆黄素(glycitein,GL)对前列腺癌细胞(PC-3)增殖的影响,探讨通过膳食干预途径预防前列腺癌发病的可行性.[方法] 将PC-3在PRMI 1640培养液(含10%小牛血清)中采用开放式单层贴壁培养.实验设溶剂对照组、顺铂阳性对照组及三种受试物各三个剂量组(5×10-6 mol/L,25×10-6 mol/L,75×10-6 mol/L),采用MTT法、3H-TdR掺入法及流式细胞术对PC-3的增殖情况进行分析.[结果] 与溶剂对照组相比,25 μmol/L GS、75 μmol/L DA和75 μmol/L GL对PC-3处理72 h可抑制PC-3增殖,抑制率分别为42%、50%及39%.三种受试物均可抑制细胞DNA合成并推进G0/G1期细胞进入S期,降低细胞增殖指数.[结论] 大豆异黄酮类化合物GS、DA和GL均具有明显抑制前列腺癌细胞PC-3增殖效应,并呈现剂量-效应和时间-效应关系,提示通过膳食干预方式可预防前列腺癌的发生.
关键词： 金雀异黄素 大豆苷元 大豆黄素 前列腺癌细胞PC-3 -
大豆苷元固体分散体的制备及生物利用度研究
目的 制备载大豆苷元(daidzein,DZ)二氧化硅(Aeroperl(R) 300 Pharma,AP)固体分散体(DZ-AP),并对其促进大豆苷元口服吸收作用进行体内外评价.方法 利用均匀设计优化DZ-AP处方;采用差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射法(XRPD)进行表征;通过检测其体外累积溶出速率和大鼠体内血药浓度变化评价DZ-AP体内外释药行为,并对DZ-AP固体分散体的稳定性进行考察.结果 均匀实验设计优化出DZ-AP固体分散体的处方为:大豆苷元100 mg,溶解在3倍量的甲醇中,加入300 mg AP,室温搅拌45 min,旋蒸除去溶剂,减压干燥1h.DSC和XRPD分析表明药物大部分以无定型的状态存在于固体分散体中.与原料药相比,DZ-AP体外溶出速率显著加快.大鼠药动学数据显示,固体分散体的相对生物利用度是大豆苷元原料药的137.1％.稳定性实验结果表明,DZ-AP在室温及加速条件下放置3个月,大豆苷元的含量、溶出度均未发生明显改变,表明在贮存过程中稳定性良好.结论 以AP为载体制备DZ-AP固体分散体可有效提高大豆苷元的溶出速率和口服生物利用度.
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野葛藤总黄酮提取的工业化生产和实验室工艺验证比较
目的 验证比较生产车间和实验室制备的葛藤提取物的内在质量,探讨实验制备与工业化生产工艺之间的差异.方法 采用紫外-可见分光光度法和HPLC法,以葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分的含量为评价指标,测定葛藤提取物含量,通过HPLC法制作的葛藤提取物指纹图谱比较和分析各提取物中异黄酮成分组成和含量.结果 工业化生产和实验室制备的不同批次间葛藤提取物样品的异黄酮含量相近,差异较小,质量稳定.结论 葛藤提取物实验室制备工艺转化为产业化工艺流程可靠可行,为工业化生产提供了保障.
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大豆苷元免疫效学的研究
大豆苷元(Daidzein,DD)系葛根的主要成分,是从中分离提取的异黄酮类化合物,研究发现其具有广泛的生物学作用,如雌激素样作用、抗肿瘤、抗心率失常、抗脑缺血等[1],对心血管有良好的保护作用[2].我们曾报道大豆苷元的抗骨质疏松作用[3],所以本文将对其免疫功能进行较为详细的研究.
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脑脉通有效部位中葛根异黄酮类成分的含量测定
目的:建立脑脉通有效部位中葛根异黄酮类成分的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,流动相为甲醇-水-冰醋酸,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为250 nm.结果:葛根素的平均加样回收率为100.89%,RSD=2.10%,芹糖基葛根素的平均加样回收率为100.23%,RSD=1.06%,3'-甲氧基葛根素的平均加样回收率为101.04%,RSD=1.92%,大豆苷的平均加样回收率为99.82%,RSD=2.02%,大豆苷元的平均加样回收率为102.06%,RSD=1.34%.结论:该方法操作简便、易行,可用于脑脉通中葛根异黄酮的含量测定.
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RP-HPLC测定大鼠口服葛根后血浆中大豆苷元的含量
目的:建立准确快速测定大鼠口服葛根后血浆中大豆苷元含量的方法,探讨大豆苷元的体内代谢情况.方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定大鼠口服药物后不同时间血浆中大豆苷元的含量,待测血浆样品采用沉淀蛋白法处理,Phenomenex Luna C18高效液相色谱柱(4.60 mm×250 mm,5μm)进行分析,流动相为甲醇-0.1%甲酸水(60∶40v/v).结果:测定方法稳定,给药后5 min血浆中即可检测出大豆苷元,20min内达到峰值,高、中、中低、低4种浓度的日内精密度均≤5.7%,日19精密度均≤9.3%,回收率分别为89.5%、93.2%、93.9%、84.8%,在0.1～64μg/mL范围内线性关系良好.结论:此方法快捷、灵敏、简便,用于血浆中大豆苷元的含量测定,取得满意结果.
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HPLC测定红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量
目的:建立测定红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A含量的高效液相色谱方法.方法:Kro-masil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%H3PO4(40:60),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:254nm,柱温:25℃.结果:大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的线性范围分别为0.0662～0.6620 μg,0.0978～0.9780μg,0.0866～0.8660μg和0.0992～0.9920μg.该方法回收率大豆苷元为98.9%(RSD=0.46%),染料木素为98.8%(RSD=1.21%),芒柄花素为98.8%(RSD=0.71%),鹰嘴豆芽素A为97.5%(RSD=1.33%).结论:该法简便、快速、准确.
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异黄酮类植物雌激素通过雌激素受体对靶基因的转录调节作用
目的:观察异黄酮类植物雌激素染料木素和大豆苷元通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)对靶基因的转录调节作用.方法:采用磷酸钙瞬时转染的方法,利用转染雌激素受体表达质粒的Hela细胞,观察染料木素和大豆苷元对雌激素反应元件(estrogen response element,ERE)报告基因的转录激活作用;此外还观察ER拮抗剂ICI182780对这两种植物雌激素转录激活作用的影响.结果:染料木素和大豆苷元均可通过ER的两种亚型ERα和ERβ激活ERE报告基因的转录,且这种转录激活作用能被ICI 182780所阻断.结论:染料木素和大豆苷元均能产生类雌激素样作用,通过ERα和ERβ激活ER靶基因的转录.
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孕早期妇女摄入大豆制品不影响甲状腺功能
抽取沈阳地区孕早期妇女505例,通过问卷方式获得其对富含大豆制品食物的摄入频度及相关背景资料,分组如下:(1)经常摄入组:≥3次/周；(2)一般摄入组:2次/月～3次/周；(3)偶尔摄入组:≤2次/月.采用固相化学发光酶免疫分析法测定血清TSH、FT4,并对其中95名孕妇的尿异黄酮浓度进行了检测.在调查对象中,经常摄入富含大豆制品食物者占18.6％,一般摄入组占62.6％,偶尔摄入者占18.8％.3组在年龄、甲状腺疾病史、家族史、血清FT4和TSH水平及甲状腺功能紊乱患病率方面差异均无统计学意义.经常摄入组尿中尿大豆苷元、尿染料木黄酮水平高于其他2组,血清FT4、TSH水平与尿异黄酮浓度无显著相关.本研究提示在碘充足地区,孕早期妇女进食富含大豆的食物未影响甲状腺功能.
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大豆异黄酮体外对大鼠淋巴细胞激活和天然杀伤细胞活性的作用(英文)
目的:研究大豆异黄酮对大鼠免疫细胞的体外作用. 方法:取大鼠抗凝血,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,以伴刀豆球蛋白A(ConA)和体内所能达到的不同浓度的金雀异黄素或大豆苷元共同孵育68 h后,四唑蓝还原法(MTT)测定体外ConA诱导的淋巴细胞增殖;另取外周血单核细胞为效应细胞,YAC-1细胞为靶细胞,以乳酸脱氢酶法测定天然杀伤细胞(NK)活性. 结果:在0.01～1 μmol*L-1浓度范围内,大豆苷元可剂量依赖性的增强体外ConA诱导的淋巴细胞增殖(P<0.01),1 μmol*L-1的大豆苷元可明显增强NK细胞活性(P<0.01).而同样浓度范围内的金雀异黄素对淋巴细胞增殖及NK细胞活性均无明显作用.结论:大豆苷元体外能剂量依赖性的刺激ConA诱导的淋巴细胞转化,增强NK细胞活性,这种增强的免疫功能可能是大豆制品抗肿瘤作用的机制之一.
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植物雌激素对体外培养的大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的作用
目的:研究植物雌激素(大豆苷元、染料木素)对睾丸间质细胞分泌睾酮的刺激作用,并初步研究其可能的分子作用机制.方法:采用Percoll不连续密度梯度离心,分离获得3月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠的睾丸间质细胞.以人绒毛膜促性腺激素(hCG)为阳性对照药物,测定不同浓度(0、0.02、0.1、0.5、1、5μmol/L)大豆苷元、染料木素对睾丸间质细胞分泌睾酮的影响.RT-PCR检测睾酮生物合成过程中胆固醇侧链裂解酶细胞色素P450(P450scc)的表达. 结果:0.1μmol/L的染料木素能显著刺激原代大鼠睾丸间质细胞的睾酮分泌,RT-PCR结果显示染料木素能显著上调睾酮合成过程中P450scc mRNA的表达.在较高浓度下(5 μmol/L),大豆苷元和染料木素均能抑制睾丸间质细胞分泌睾酮. 结论:染料木素在低浓度下(0.1μmol/L)显著促进睾丸间质细胞分泌睾酮,但随着浓度的增加(5μmol/L),大豆苷元和染料木素均显著抑制Leydig细胞的睾酮分泌.
关键词： Leydig细胞 睾酮 大豆苷元 染料木素 胆固醇侧链裂解酶细胞色素P450 -
大豆异黄酮类成分对去卵巢大鼠脂质代谢的影响
目的:观察大豆异黄酮中主要成分染料木素(genistein,G)、大豆苷元(daidzein,D)及其苷对于去卵巢大鼠脂质代谢的影响.方法:Wistar雌性大鼠,双侧摘除卵巢,手术后1周,分为假手术组、模型组、雌激素组,大豆苷元高、中、低剂量组,染料木素高、中、低剂量组和大豆总黄酮提取物(T)高、中、低剂量组,灌胃给药3个月.每天称进食量,每周称一次体重;实验结束后,取血和肝脏,进行血清和肝脏胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的测定.结果:大豆苷元及大豆总黄酮提取物能明显抑制大鼠体重和进食量的增长(P<0.01),抑制腹部脂肪的堆积(P<0.001),染料木素无明显作用;大豆苷元降低血清中TC、LDL-C的浓度(P<0.05),对于血清中甘油三酯TG、HDL-C没有明显的作用,而染料木素可以降低LDL-C(P<0.01)且升高HDL-C(P<0.05),但对于TC、TG无作用;大豆苷元、染料木素及大豆总黄酮均能降低肝脏中TC、TG的浓度(P<0.001).结论:大豆苷元可以抑制去卵巢大鼠体重增长,减少腹部脂肪堆积,降低血浆胆固醇的升高.
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应用高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮的含量
大豆异黄酮是一种从大豆中分离提取的植物雌性激素,具有抗氧化、改善心血管功能等功效[1].目前发现的大豆异黄酮分为游离型的苷元和结合型的糖苷2类,其中以染料木素和大豆苷元为主要活性成分.本实验通过研究用80%乙醇超声提取后,用水定容,采用高效色谱法测定大豆制品类保健食品中大豆异黄酮含量,方法回收率高,易于操作,满足检测要求.
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大豆苷元耐缺氧的实验研究
目的研究大豆苷元对小鼠的耐缺氧作用.方法常压耐缺氧法、对抗异丙肾上腺素法、断头喘息法、结扎双侧颈总动脉法及游泳实验法.结果大豆苷元能显著延长常压耐缺氧条件下小鼠的存活时间;显著延长皮下注射异丙肾上腺素的小鼠在常压缺氧条件下的生存时间;显著性延长断头小鼠的喘息时间;显著延长脑缺氧时间和游泳时间.结论大豆苷元具有显著的耐缺氧作用.
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大豆异黄酮与心血管疾病
流行病学调查显示,日本人心血管疾病死亡率与美国人有显著差异.研究表明亚洲人心血管疾病的低发病率可能与亚洲人饮食中的大豆食品所含的异黄酮物质,主要是金雀异黄素和大豆苷元有关.本文就大豆异黄酮对于防治动脉粥样硬化和相应的心血管疾病的有益作用进行综述.
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大豆苷元对大鼠心室肌细胞INa的影响
目的 观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响,探讨其抗心律失常的机制.方法 MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心室肌细胞INa及其动力学特征的变化.结果 MTT实验表明,大豆苷元的IC5030～100μmol·L-1,由此选定用于后续实验的药物浓度为0.3～10μmol·L-1.膜片钳实验结果表明,当给予终浓度为0.3、1、3、10μmol·L-1大豆苷元后,药物对INa呈浓度依赖性抑制现象;大豆苷元0.3μmol·L-1时对INa作用的时间过程也具有一定影响,随时间推移缓慢减小;1、3、10μmol·L-1大豆苷元使I-U曲线上移;在此同等条件下,激活曲线向去极化方向移动、稳态失活曲线向超极化方向移动和失活后恢复曲线的τ值延长.结论 大豆苷元对大鼠心室肌Na+通道有明显的抑制作用,这可能是其抗心律失常的机制之一.
