黄白兰草煎治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎临床研究

目的:观察黄白兰草煎治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)的疗效及对血清白细胞介素(IL)中的IL-17和IL-22水平的影响.方法:选取本院2016年1月-2017年6月收治的脾肾阳虚型UC患者62例,按照数字表法随机分为治疗组和对照组各31例.对照组口服美沙拉嗪肠溶片,每次1g,每日4次;对中度患者反应欠佳者加服泼尼松龙片,每次10 mg,每日3次.治疗组在对照组基础上联合中药黄白兰草煎治疗,每日1剂,水煎早晚分服.两组均连续治疗8周后,比较两组的临床症状评分、结肠镜检查评分、病理检查评分和Southerland评分情况及临床疗效,记录两组不良反应情况,检测两组血清IL-17和IL-22水平.结果:治疗组脾肾阳虚症状(腰酸、膝软、脐腹冷痛、少气懒言、形寒肢冷、腹胀)评分显著低于对照组(P＜0.01);治疗组患者的结肠镜检查评分、病理检查评分和Southerland评分均显著低于对照组(P＜0.01);治疗组总有效率为90.32％(28/31),显著高于对照组的64.52 ％(20/31)(P＜0.05);两组均未见明显不良反应;治疗组患者血清中IL-17和IL-22水平均显著低于对照组(P＜0.01).结论:在常规西医治疗基础上,联合中药黄白兰草煎治疗脾肾阳虚型UC疗效显著.

细胞因子IL-17、IL-22和IL-33与补体C3、补体C4在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及意义

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的细胞因子IL-17、IL-22和IL-33与补体C3、补体C4的表达情况及临床意义.方法 收集2015年1月-2017年4月本院就诊的SLE患者40例为研究对象,另选取同期健康体检者20例为对照组,采用酶联免疫双抗体夹心法检测患者静脉血浆中IL-17、IL-22和IL-33的表达水平及采用免疫速率散射比浊法测定补体C3和补体C4含量.结果 SLE患者活动期外周血血清的IL-17、IL-22和IL-33表达水平明显高于缓解期和对照组,缓解期患者的IL-17、IL-22和IL-33表达水平明显高于对照组.SLE患者活动期外周血的补体C3和补体C4含量明显低于缓解期和对照组,缓解期患者的补体C3和补体C4含量明显低于对照组.SLE患者血清IL-17和IL-33水平与SLEDAI评分呈正相关(r值分别为0.574、0.486,P＜0.05),与补体C4水平呈负相关(r=-0.278,P＜0.05).结论 SLE患者外周血的IL-17、IL-22和IL-33表达增高及补体C3和补体C4含量降低与其发病有关,可以作为病情监测指标.

Th22细胞及其相关细胞因子在胰腺癌中的表达及意义

目的 探讨Th22细胞及其细胞因子与胰腺癌发病的关系.方法 采用流式细胞术检测24例胰腺癌患者和20例健康体检者外周静脉血和胰腺癌及癌旁组织中Th22细胞和IL-22+ CD4+T细胞频数及IL-22细胞因子表达水平,实时定量反转录PCR检测胰腺癌和癌旁组织中SATA-3和AHR的mRNA表达水平.结果 胰腺癌患者外周血的Th22细胞和IL-22+ CD4 +T细胞的百分率明显高于对照组,IL-22表达水平明显高于对照组.胰腺癌组织的Th22细胞和IL-22+ CD4+T细胞的百分率明显高于癌旁组织,IL-22表达水平明显高于癌旁组织.胰腺癌组织中的SATA-3和AHR的mRNA表达明显高于癌旁组织.胰腺癌组织的IL-22细胞因子水平、IL-22+ CD4+T细胞百分比与Th22细胞百分比均呈正相关.结论 Th22细胞及其细胞因子在胰腺癌肿瘤微环境高度表达可能与胰腺癌的发生发展有关.

结肠癌患者外周血Th17和Th22细胞分布及IL-17A和IL-22的作用研究

目的 研究结肠癌患者外周血Th17和Th22亚群分布及血清IL-17A和IL-22含量与临床病理的相关性及IL-17A和IL-22对结肠癌细胞的作用.方法 收集结肠癌患者全血和血清样本,流式细胞术检测Th17和Th22亚群比例;ELISA法检测血清细胞因子IL-17A和IL-22含量;流式细胞术检测IL-17A和IL-22对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响. 结果 结肠癌患者外周血Th17和Th22含量较健康对照组显著升高;血清IL-22表达水平显著升高;IL-17A和IL-22促进结肠癌细胞增殖,抑制细胞凋亡.结论 Th17和Th22细胞及其相关细胞因子与结肠癌的发生、发展密切相关.

人白细胞介素家族的新成员——IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23

白细胞介素是激活的T细胞分泌的一类细胞因子,它们在免疫调节中发挥重要作用,具有很高的临床应用价值.迄今为止,已有23种人白细胞介素被发现,构成了一个庞大的家族.其中2000～2001年间,就有5种人白细胞介素家族新成员的序列被阐明.本文简单介绍了它们的结构、诱导表达方式、功能、及其信号相关受体等各个方面的新研究进展.

Th22细胞在慢性粒细胞白血病患者中的临床研究

目的:研究慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血中Th22细胞的比例、相关转录因子芳香烃受体(AHR)的表达水平及细胞因子IL-22的浓度,探讨Th22细胞在CML免疫机制中的作用.方法:应用流式细胞术检测Th22细胞在33例CML患者(初诊15例,伊马替尼治疗后的CML-CP 18例)外周血中的比例,实时荧光定量PCR技术检测CML患者Th22相关转录因子AHRmRNA的表达水平,ELISA法检测细胞因子IL-22的浓度.同时以15例正常者作为对照.结果:CML初诊患者外周血的Th22细胞比例(0.43％±0.23％)明显低于伊马替尼治疗后的CML-CP患者(3.19％±1.76％,P＜0.05)和对照者(2.58％±0.98％,P＜0.05).CML初诊患者外周血单个核细胞的AHR基因转录水平(0.212 9±0.1746)与伊马替尼治疗后的CML-CP患者(0.817 1±0.388 7,P＜0.05)和对照者(0.468 1±0.180 4,P＜0.05)比较均明显降低.伊马替尼治疗后的CML-CP患者外周血AHR mRNA表达水平较对照者显著升高(P＜0.05).CML-CP患者的外周血IL-22浓度较对照者显著升高(100.94±18.48) pg/ml∶(85.14±13.46) pg/ml,P＜0.05].Th22细胞的比例与CML患者外周血白细胞计数及BCR-ABL％均呈负相关.结论:Th22细胞下调,Th22免疫功能受损可能有助于CML的发生和发展.

Th17细胞在慢性鼻-鼻窦炎中的研究进展

IL-22基因启动子区甲基化检测在宫颈癌中的临床意义

目的:检测IL-22基因启动子区域甲基化修饰的改变,以明确IL-22激活的可能机制及其在宫颈癌中的临床意义.方法:选取2016年1月至2017年6月惠州仲恺高新区人民医院收治的宫颈癌患者104例,选取同期我院因子宫良性病变行子宫全切手术的患者60例作为对照.IL-22基因启动子甲基化使用特异性PCR(MSP)检测,ELISA检测IL-22因子表达.结果:宫颈癌患者IL-22启动子甲基化阳性率为32.7％(34/104)显著高于对照组的15.0％(9/60) (P＜0.05),宫颈癌患者IL-22表达水平为(28.36±5.48) ng/L,显著高于对照组的(14.52±1.37) ng/L(P＜0.01).IL-22启动子甲基化阳性率和IL-22因子表达量在临床Ⅲ,Ⅲ期患者为40.4％(19/47)和(30.71±6.11) ng/L,均显著高于Ⅰ,Ⅱ期的26.3％(15/57)和(27.42±4.74) ng/L(P＜0.05);在淋巴结有转移患者为42.1％(16/38)和(31.02±6.58) ng/L,显著高于无转移的27.3％(18/66)和(27.42±4.74)ng/L(P＜0.05);在中、低分化患者为36.6％(26/71)和(30.13±6.37) ng/L,显著高于高分化的24.2％(8/33)和(24.56±4.85) ng/L(P＜0.05).结论:宫颈癌患者中IL-22基因启动子高甲基化,IL-22表达增加可能参与宫颈癌的发生、发展和转移过程.

竹黄颗粒介导IL-22/miR-330调控角质形成细胞增殖的机制研究

目的 研究竹黄颗粒干预IL-22/miR-330调控角质形成细胞增殖的分子机制.方法 IL-22处理HaCaT和HKCs细胞,应用QPCR技术检测细胞中miR-330的表达变化;之后慢病毒感染HaCaT和HKCs细胞,实现miR-330的过表达和干扰,通过CCK8和BrdU技术检测细胞增殖情况;采用CCK8、Western blot、QPCR、ELISA实验分别检测不同浓度竹黄颗粒处理HaCaT、HKCs后细胞增殖能力,IL-22蛋白表达水平,miR-330表达水平及细胞分泌IL-22含量的变化.结果 IL-22处理后的HaCaT和HKCs细胞中miR-330的表达水平显著下调(P<0.01),而细胞增殖能力显著提升(P<0.01);过表达miR-330后HaCaT和HKCs细胞增殖能力显著下降(P<0.05),干扰miR-330后HaCaT和HKCs细胞增殖能力显著上升(P<0.05);竹黄颗粒处理HaCaT、HKCs后,细胞增殖能力下降(P<0.01),IL-22蛋白表达水平显著下降(P<0.01),miR-330表达水平显著上升(P<0.01),细胞分泌IL-22含量显著下降(P<0.01).结论 竹黄颗粒可以通过抑制IL-22的表达,促进miR-330的表达,从而抑制角质形成细胞增殖.

Th17细胞在帕金森病模型小鼠神经炎症过程中的作用研究

目的 探讨T细胞亚群Th17细胞是否参与帕金森病(PD)的神经炎症过程.方法 C57BL/6小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备PD动物模型,用免疫荧光双染分别标记葡萄糖转运体1和CD4+T细胞、Th17细胞的核转录因子维甲酸相关孤儿核受体γt(ROR γt)、白介素(IL)-17,实时定量PCR法检测黑质致密部中IL-17及Ⅱ-22 mRNA的表达.结果 腹腔注射MPTP成功制备PD模型小鼠.在PD模型小鼠中脑黑质致密部中,血管周围见到较多CD4+T细胞,而且在PD发病后期(MPTP注射后第7天)CD4+T细胞的渗入比发病早期(MPTP注射后第2天)多,同时ROR γt和IL-17的表达亦增加,两者具有共定位；PD模型小鼠黑质中IL-17及IL-22 mRNA表达上调,这种上调在PD发病后期(MPTP注射后第7天)更明显.结论 Th17细胞可侵入PD脑内诱导炎症反应,参与PD的发病机制.

白鲜皮提取液对湿疹模型小鼠血清IL-10、IL-17和IL-22含量的影响

目的:研究白鲜皮对湿疹模型小鼠血清IL-10、IL-17和IL-22的作用效果和机制.方法:将60只BALB/C小鼠随机分为6组,每组10只,除空白组外,其余5组均给予2,4-二硝基氯苯诱导和激发造成小鼠湿疹模型.造模成功后分别给予0.025%地塞米松洗剂和不同浓度(0、1%、3%、5%)白鲜皮提取液进行干预处理,测量激发前后耳中部厚度差、左右耳重量差及测定血清IL-10、IL-17和IL-22值变化,进行干预后评估.结果:不同浓度白鲜皮提取液均可明显降低小鼠的耳厚度和重量差,同时升高小鼠血清IL-10含量,但仅中高浓度组可显著降低IL-17和IL-22含量,差异有统计学意义(P<0.05).此外,高浓度白鲜皮提取液组与0.025%地塞米松洗剂组在小鼠的耳厚度差和重量差及IL-10、IL-17和IL-22含量上均无明显差异(P>0.05);中低浓度白鲜皮提取液组在耳厚度差和重量差及IL-17和IL-22含量值明显高于0.025%地塞米松洗剂组,血清IL-10含量明显低于0.025%地塞米松洗剂组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:不同浓度白鲜皮提取液均可改善湿疹模型小鼠的皮肤损害,而高浓度的白鲜皮提取液与0.025%地塞米松洗剂效果相当;其机制可能与下调炎症因子IL-17和IL-22、上调IL-10的表达相关.

寻常型银屑病外周血中Th17细胞及相关因子的表达

目的:检测寻常型银屑病患者外周血中Th17细胞及相关因子IL-17、IL-22表达,分析其与疾病严重程度及病程的相关性,进一步阐明银屑病的发病机制.方法:实验组为寻常型银屑病患者60例,对照组为健康体检者40例,抽取外周血,用三色法流式细胞术检测外周血Th17细胞,ELISA法检测血清中Th17相关因子IL-17、IL-22表达,分析Th17细胞、IL-17、IL-22表达与PASI评分及病程的相关性.结果:实验组外周血Th17细胞百分率(4.71%±2.55%)高于对照组(0.55%±0.39%),差异有统计学意义(P<0.01);Th17细胞与患者PASI评分呈正相关(r=0.47,P<0.01),但与病程无相关性(r=0.09,P>0.05).实验组血清中Th17相关因子IL-17、IL-22表达(24.02±12.31,18.32±8.14)均高于对照组(7.16±4.04,6.53±4.15),差异有统计学意义(P均<0.01);IL-17、IL-22表达与患者PASI评分呈正相关(r=0.46,P<0.01;r=0.51,P<0.01),但与病程无相关性(r=0.03,P>0.05;r=0.19,P>0.05).结论:Th17细胞可能在寻常型银屑病发病机制中发挥重要作用,可作为判断疾病严重程度的免疫学指标,阻断其相关因子IL-17、IL-22表达可能成为治疗银屑病的新靶点.

NK-22细胞及IL-22相关功能分子在类风湿关节炎滑膜细胞增殖中的作用

目的：探讨类风湿关节炎（RA）患者滑液（SF）自然杀伤（NK）细胞NK-22促成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖作用及相关信号通路。方法采用流式细胞术分选6例RA患者SF中NK-22细胞（2×104），体外悬浮培养2周，佛波酯（20 ng/ml）和离子霉素（0.5μmol/L）刺激后ELISA检测NK-22细胞培养上清IL-22浓度。组织块培养法原代培养RAFLS，NK-22细胞培养上清分别作用于RAFLS24、48、72 h，MTT法检测FLS增殖；同时加入IL-22抗体检测FLS增殖情况。RT-PCR检测rhIL-22及AG490作用后RAFLS Stat3 mRNA的表达，Western blot检测RAFLS p-Stat3蛋白含量。结果①流式分选2×104 NK-22细胞，细胞纯度>90%；①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清中IL-22浓度为1273.42±254.48 pg/ml；①PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清作用于RAFLS 24 h、48 h、72 h，可明显刺激RAFLS增殖（P<0.05）。IL-22抗体能明显抑制NKp44+NK细胞上清诱导的RA FLS增殖（P<0.01）；①rhIL-22（1 ng/ml）能诱导RAFLS p-Stat3表达（P<0.05）；①AG490能抑制rhIL-22诱导的RAFLS p-Stat3表达（P<0.05）。结论 RA患者SFNK-22细胞体外可分泌高浓度的IL-22，通过激活STAT3信号通路进而刺激RAFLS增殖。

IL-22对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响

[目的]探讨IL-22对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡的影响.[方法]收集行关节置换术或关节镜下滑膜切除术患者的滑膜组织,组织块法培养FLS.利用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测Bcl-2 mRNA和Bcl-XLmRNA、Western Blotting检测Bcl-2蛋白在RA、骨关节炎(0A)和创伤(Trauma)患者中FLS的表达水平.将RA-FLS以一氧化氮(N0)供体硝普钠(SNP)和／或重组人源性IL-22(rhIL-22)等处理24 h,流式细胞术分析检测凋亡.rhIL-22以不同的浓度(0、1、10、100 ng/mL)作用于RA-FLS和OA-FLS 24 h,Western Blotting检测Bcl-2蛋白表达水平的变化.[结果]RA-FLS中Bcl-2 mRNA(P＜ 0.05)、Bcl-XL mRNA(P＜ 0.01)和Bcl-2蛋白(P＜0.01)的表达水平明显高于与OA-FLS组和Trauma-FLS组.流式细胞术结果显示:与对照组相比,rhIL-22组细胞凋亡率未见明显变化(P＞0.05),SNP组RA-FLS细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);与SNP组相比,SNP+rhIL-22组细胞凋亡率明显下降(P＜0.01).rhIL-22可明显上调RA-FLS和OA-FLS中Bcl-2的蛋白表达水平(P＜0.05),但RA-FIS对rhIL-22的作用更敏感.[结论]IL-22可抑制由SNP诱导的RA-FLS细胞凋亡,其机制可能部分与上调RA-FLS中Bcl-2的表达有关.

2型心肾综合征患者外周血IL-22和IL-27的表达及意义

目的 探讨白细胞介素(IL)-22、IL-27在2型心肾综合征(cardiorenal syndrome,CRS)患者外周血中的表达.方法 选择70例2型CRS患者,根据纽约心功能分级(New York Heart Function Assessment,NYHA)将入选患者分为NYHA Ⅱ级组、NYHA Ⅲ级组、NYHA Ⅳ级组;另选15例健康志愿者作为对照组.收集患者一般临床资料,心脏超声检查心功能变化,抽取静脉血用于检测IL-22、IL-27的表达.结果 与对照组、NYHA Ⅱ级组相比,NYHA Ⅲ级组、NYHA Ⅳ级组患者外周血IL-22、IL-27水平显著升高(P＜0.01).外周血IL-27水平在NYHAⅣ级组患者高于NYHA Ⅲ级组(P＜0.05),在对照组和NYHAⅡ级组间差异无统计学意义(P＞0.05);在对照组与NYHA Ⅱ级组、NYHA Ⅲ级组和NYHAⅣ级组间患者外周血IL-22水平差异均无统计学意义(P＞0.05).相关性分析显示:外周血IL-22与IL-27呈正相关(r=0.75,P＜0.01),IL-22与左室射血分数(LVEF)呈负相关(r=-0.68,P＜0.01),IL-27与LVEF呈负相关(r=-0.64,P＜0.01).结论 IL-22和IL-27参与了2型CRS的发生、发展,这两种细胞因子可能共同促进了2型CRS的病理、生理发展.

肺结核患者治疗前后外周血中IL-10、IL-22、IL-23水平变化及其临床意义

目的 分析肺结核患者治疗前后外周血中IL-10、IL-22、IL-23表达水平变化及其临床意义.方法 收集本院2014年10月至2015年5月收治的活动性肺结核患者49例,选择健康体检者30例为对照组.ELISA法检测肺结核患者治疗前、治疗6个月后以及对照组外周血血清中IL-10、IL-22、IL-23表达水平,并分析其相关性.结果 ELISA结果显示,肺结核患者治疗前外周血血清IL-10表达水平为(24.15±13.21) pg/ml,明显高于对照组[(14.91±8.23) pg/ml],P＜0.05,经抗结核常规治疗6个月后,血清IL-10表达水平为(17.11 ± 7.59) pg/ml,明显低于治疗前(P＜0.05),但仍高于对照组.肺结核患者治疗前外周血血清IL-22、IL-23表达水平分别为(20.56±7.41) pg/ml、(21.12 ± 2.68) pg/ml,明显低于对照组[(53.78±8.22) pg/ml、(36.42±2.16) pg/ml,P＜0.05],经抗结核常规治疗6个月后,血清IL-22、IL-23表达水平分别为(38.95±6.35) pg/ml、(29.89±3.74) pg/ml,明显高于治疗前(P＜0.05),但仍明显低于对照组(P＜ 0.05).Pearson相关分析结果表明,血清IL-22、IL-23呈正相关性.结论 肺结核患者外周血中IL-10、IL-22、IL-23在治疗前后表达水平发生变化,可能与机体结核免疫有关,有望作为评价肺结核疗效的参考指标.

Th22细胞和 IL-22在肝癌外周血的表达及与肿瘤标记物的相关性研究

目的探讨Th22和IL-22在肝细胞癌外周血的表达情况，并分析其与肿瘤标记物的相关性。方法抽取45例肝细胞癌患者和15名正常人的外周血标本，采用流式细胞术检查Th22细胞水平，ELISA法检测IL-22水平，分析Th22、IL-22水平与肿瘤标记物AFP、CA125、CA193、CA199、CEA的相关性。结果肝细胞癌患者Th22和IL-22水平均显著高于健康人群水平（ P＜0.05）。男性和女性患者Th22、IL-22水平差异无统计学意义（P＞0.05）。肝细胞癌患者外周血Th22细胞数量和血清IL-22水平存在正相关（r＝0.322，P＝0.033），而Th22数量和血清 IL-22水平与肿瘤标记物AFP、CA125、CA193、CA199、CEA 均无相关性（ P＞0.05）。结论尽管Th22和IL-22在肝癌外周血中高表达，但与血清肿瘤标记物无相关性，其在肝癌发病中的临床意义仍需临床大样本研究证实。

IL-35、IL-22与广西肝癌家族聚集性的相关性研究

目的:探讨白介素(IL)-35、IL-22与广西肝癌家族聚集性的相关性.方法:2017年3～5月选取广西肝癌高发区肝癌高发家族成员93例作为研究组,以相同生活环境、相同生活习惯、同性别、同民族、同HBV携带状况、年龄相差5岁以内作为匹配条件,选择无癌家族成员93例作为对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组血清IL-35、IL-22水平.结果:研究组血清IL-35水平明显高于对照组(P＜0.05).两组IL-22水平比较无明显差异(P＞0.05).研究组中壮族和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性成员的IL-35水平明显高于对照组壮族和HBsAg阴性成员(P＜0.05),而相应的IL-22水平与对照组无明显差异(P＞0.05).结论:IL-35与广西肝癌家族聚集性存在一定相关性,IL-22与广西肝癌家族聚集性无明显相关性.

IL-22在自身免疫性疾病中的表达研究

白细胞介素( Interleukin) 22是一种可介导免疫调节的炎症性因子,合成于胸腺及脑组织中,可对急性期蛋白的产生起到诱导作用,主要由活化的Th22细胞、Th17细胞和NK细胞分泌产生. 有研究报道, IL-22在肠道炎症、肝损伤和肺部肿瘤中发挥了重要作用[1～3]. 而针对IL-22与自身免疫性疾病的关系也展开了大量的研究,结果发现 IL-22 在系统性红斑狼疮、银屑病、类风湿关节炎这三种常见自身免疫性疾病患者机体内均呈异常表达,但其表达水平不同,这可能是因为IL-22作为免疫细胞因子,既可能参与自身免疫性疾病的发生中,又可能作为自身免疫性疾病治疗时的靶点. 本文首先对IL-22的分子结构及受体进行阐述,再针对 IL-22 在系统性红斑狼疮、银屑病、类风湿关节炎等自身免疫性疾病中的表达进行分析,以明确IL-22 在不同自身免疫性疾病发生、发展过程中扮演的角色.

广西人群中IL-22基因启动子区rs2227513A/G位点多态性研究

目的 探讨广西正常人群中IL-22基因rs2227513A/G位点的多态性分布特点和不同人群间的多态性差异.方法 采取多重单碱基延伸法(SNaPshot)与DNA测序相结合的方法对280例广西人群的IL-22基因的rs2227513A/G位点进行基因分型检测,并用统计学方法比较不同性别及组间分布差异.结果 广西人群中IL-22基因rs2227513A/G存在AA、AG基因型,分布频率分别为95.0％和5.0％,此位点基因型及等位基因频率在广西人群的男女性别间差异无统计学意义(P>0.05).其基因型和等位基因与人类基因组计划项目(HapMap)公布的意大利、墨西哥人群相比,差异有统计学意义(P<0.05),而与北京、日本人群比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-22基因rs2227513A/G基因多态性在不同种族和地区间存在差异.