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江苏省60株非结核分枝杆菌的耐药性分析
目的 分析江苏省非结核分枝杆菌(NTM)的耐药水平和流行病学特点,为制定有效的防控措施提供科学依据.方法 采用比例法,对2008年全省结核病耐药基线调查中确诊的60株NTM,进行针对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和硫酸链霉素(SM)的药敏实验.结果 60株NTM的耐药率为98.33％,耐INH+RFP率为65.00％.对RFP、INH、SM等3种药物同时耐药的5株(占8.33％),对4种药物同时耐药的34株(占56.67％).初治组耐药率、耐INH+ RFP率(95.65％、43.48％)均低于复治组(100.00％、78.38％),差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).结论 江苏省NTM耐药率、耐INH+ RFP率水平较高,复治患者是耐药的主要群体,应作为NTM感染防控的重点人群.
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分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS快速直接鉴定法的建立与评价
目的 建立并评价分枝杆菌液体培养基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定技术.方法 收集2014年6月至2016年5月首都医科大学附属北京同仁医院1 466例呼吸科住院患者痰标本,进行BactecTM MGITTM 960分枝杆菌快速液体培养(简称液体培养),以其中报警并经萋-尼抗酸染色确认为抗酸杆菌的105例(无重复病例)为研究对象,对比本实验室自行设计并改良的“同仁”分枝杆菌液体培养直接鉴定法(培养液经特殊前处理后直接进行MALDI-TOF MS鉴定)及传统鉴定法(培养液转种于L-J固体培养基,得到菌落后再进行MALDI-TOF MS鉴定),并通过16S rRNA基因及16S～23S rRNA基因间隔区测序验证.结果 以基因测序鉴定为金标准,液体培养直接鉴定与传统鉴定法结果一致率为100％;二者鉴定至属的准确率均为100％(105/105),鉴定至种的准确率均为99.05％(104/105).液体培养后直接鉴定与传统鉴定法MALDI-TOF MS鉴定分值≥2.000分的比例差异无统计学意义(x2=2.952,P=0.086).4例分值＜1.700分的菌株谱图杂峰较多而有效峰较少.结论 本实验室自行设计的“同仁”分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS直接鉴定法鉴定结果准确,缩短了分枝杆菌培养和鉴定的时间,且可保证生物安全,对分枝杆菌感染的快速诊断和及时治疗意义重大,适用于我国各级临床实验室.
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非结核分枝杆菌及实验室诊断研究进展
近年非结核分枝杆菌(NTM)感染的发病率呈上升趋势.但由于诊断治疗的困难,且不会发生人与人间传播,所以临床和实验室对该病的认识均留有空白.应提高对NTM所引发的各种临床症候的认识,发展可靠快速的实验室检测技术,以辅助临床明确诊断.该文就NTM的相关知识、感染后的主要临床征象和目前实验室在NTM检测技术上的一些研究、探索、进展进行了回顾性综述.
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分枝杆菌感染易感基因的研究进展
人致病性分枝杆菌主要有结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌和非结核分枝杆菌,是严重危害人类健康的病原微生物之一,其感染与宿主遗传背景关系密切.研究表明,宿主基因在分枝杆菌感染中起重要作用.近年来通过全基因组关联分析、人群候选基因研究、基于家庭连锁分析和罕见易感个体基因分析,发现和分枝杆菌感染易感相关的基因有IL12B、IL12RB1、IFNGR1、IFNGR2、TLRs、NOD2、MRC1、IRGM、NRAMP1、VDR及LTA4H等,研究这些基因为揭示分枝杆菌感染免疫机制提供可能,同时也为麻风和结核高危人群的筛查,预防提供理论依据.
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非结核分枝杆菌感染与艾滋病
近年来,欧美报告高达25%～50%的艾滋病患者中并发非结核分枝杆菌感染,非结核分枝杆菌感染发病率的明显上升引起了人们的关注.综述了非结核分枝杆菌感染与艾滋病的相互关系及其内在联系、非结核分枝杆菌感染的诊断及其防治的研究进展,以期引起人们对非结核分枝杆菌感染的重视和进一步研究.
关键词： 非结核分枝杆菌 获得性免疫缺陷综合征 分枝杆菌感染 -
皮肤嗜血分枝杆菌感染二例研究
目的 提高对皮肤嗜血分枝杆菌感染的认识.方法 报道2例皮肤嗜血分枝杆菌感染的临床表现、组织病理、病原学特点及治疗随访的情况.结果 2例患者均存在免疫功能低下,皮损均发生在外伤后,临床初均表现为界限清楚的皮下结节,逐渐出现破溃结痂和脓肿形成.组织病理显示真皮内上皮细胞肉芽肿形成或组织细胞浸润,伴有灶状坏死和中性粒细胞脓肿形成.抗酸染色可见大量的阳性杆菌.细菌仅能在含有铁离子的培养基中生长,病原体经PCR后测序符合嗜血分枝杆菌.根据药敏结果,给予患者利福平、克拉霉素和莫西沙星联合治疗后3个月,病情好转.结论 嗜血分枝杆菌感染常发生于免疫抑制人群中,继发于外伤,表现为皮下结节和脓肿,组织学符合感染性肉芽肿改变,分子生物学是鉴定本病的可靠方法.
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脓肿分枝杆菌16S rRNA检测及生物学特性研究
目的 鉴定1株脓肿分枝杆菌临床分离株.方法 取2017年12月18日就诊于潍坊医学院附属医院的1例疑似非结核分枝杆菌感染患者的脓液标本行细菌培养、革兰染色和抗酸染色;药敏试验采用比例法.提取菌株基因组DNA,选用16S rRNA通用引物进行PCR扩增,回收、纯化产物后测序,与GenBank数据库中已知脓肿分枝杆菌序列比较同源性.采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定分离株.结果 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱与16S rRNA基因检测均鉴定该分离菌为脓肿分枝杆菌.药敏试验显示该菌对阿米卡星、莫西沙星、左氧氟沙星敏感,对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、卡那霉素、卷曲霉素、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺、利福布汀耐药.诊断为左膝关节皮下软组织感染.根据药敏试验结果,给予阿米卡星和左氧氟沙星治疗后,症状好转.结论 16S rRNA检测与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱可用于脓肿分枝杆菌鉴定.
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皮肤苏尔加分枝杆菌感染一例
患儿女，7岁，因左侧面部斑块4年就诊。皮肤科检查：左侧面部见6cm×5cm境界清楚环状斑块，质韧，无明显触痛，皮损表面可见脓痂。组织病理：表皮部分破溃、坏死，真皮内弥漫性淋巴、组织细胞及上皮样细胞浸润，局灶伴较多嗜中性粒细胞。过碘酸雪夫染色（PAS）阴性、抗酸染色阴性。组织培养25 d后见暗产色分枝杆菌菌落。菌落涂片抗酸染色阳性。PCR扩增16S rRNA、hsp65基因产物发现与苏尔加分枝杆菌同源性接近，分别为100%、99%。给予利福平、异烟肼、乙胺丁醇治疗后好转。
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液基微量稀释法体外测定脓肿分枝杆菌的药物敏感性
脓肿分枝杆菌(M.abscessus)属于速生非结核分枝杆菌(NTM),常导致人局部皮肤软组织和肺部感染.我们根据美国临床和实验窒标准协会CLSI制定的<分枝杆菌药敏试验确认标准>(CLSI M24-A)[1].采用液基微量稀释法对临床分离的2株脓肿分枝杆菌和1株脓肿分枝杆菌标准株做了7种抗菌药物的敏感性测定,建立统一的标准化分枝杆菌快生菌药物敏感试验方法.
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NAP在7H9液体培养基快速鉴定分枝杆菌菌群的可行性
目的 探讨对硝基一苯丙酮(NAP)加入7H9液体培养基建立快速的菌种鉴定方法,以区别结核杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(NTM).方法 用含有NAP 7H9的液体培养基检测5株标准分枝杆菌菌株的体外抑菌浓度.结果 以NAP 300μg/ml为界,111株临床分离菌株NAP 7H9方法与传统罗氏(L-J)对硝基一苯甲酮(PNB)的菌型鉴定相比较,符合率为98.20%(P＞0.05);鉴定结果平均(7.72±1.74)d出报告,明显短于L-J PNB法的28 d(P＜0.01).结论 应用含NAP 7H9液体培养基法鉴定分枝杆菌菌群快速、准确、实用.
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非结核分枝杆菌淋巴结炎特征性组织病理学改变的初步研究
目的:探讨非结核分枝杆菌(NTM)性淋巴结炎的特征性组织病理学改变.方法:建立非结核分枝杆菌性淋巴结炎的实验动物模型,光镜下观察组织病理学改变.结果:NTM淋巴结炎的病理学改变与淋巴结结核的病理学改变不完全相同,其特征性病理学改变为: ①淋巴结内可见肉芽肿形成,肉芽肿呈结节状,中央为凝固性坏死,非干酪样坏死,坏死区域中可见中性粒细胞,周围可见类上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞,外围为纤维组织包裹;肉芽肿外可见朗汉斯巨细胞.②淋巴结内可见长条状匐形坏死,中央为凝固性坏死,并可见坏死组织脱落后遗留的条状空腔,坏死区域中可见中性粒细胞,周围可见类上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞,外围可见纤维组织包绕.结论:匐形性坏死是NTM淋巴结炎的特征性组织病理学改变之一.
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微阵列芯片技术应用于分枝杆菌菌种鉴定的研究
目的 评价基层结核病实验室引用PNB/TCH生长试验初步鉴定非结核分枝杆菌的准确性.方法 引用DNA微阵列芯片法和16 sRNA测序法对70株PNB/TCH试验初步鉴定为非结核分枝杆菌的菌株进行菌种鉴定.结果 70株初步鉴定为非结核分枝杆菌的菌株,经过再次菌种鉴定检测,61.43％ (43/70)为结核分枝杆菌,其余38.57％ (27/70)为非结核分枝杆菌中有55.56％ (15/27)为胞内分枝杆菌；另外分别鉴定出堪萨斯分枝杆菌6株,鸟分枝杆菌2株,龟/脓肿分枝杆菌1株,偶然分枝杆菌1株,土分枝杆菌1株.结论 PNB/TCH生长试验鉴定非结核分枝杆菌的方法特异性低,引用DNA微阵列芯片法可以快速准确地鉴定非结核分枝杆菌菌种,适合在结核病实验室中应用推广.
关键词： 非结核分枝杆菌 PNB/TCH生长试验 鉴定 DNA微阵列芯片 -
糖尿病患者手部非结核分枝杆菌感染的围手术期护理
总结18例糖尿病患者手部非结核分枝杆菌感染的围手术期护理.护理重点是术前加强心理护理,做好皮肤准备、血糖监测和降糖药调整;术后重视体位护理,做好血糖管理、饮食护理、用药护理、患指护理,做好康复锻炼指导,加强出院健康宣教工作.18例患者均痊愈出院.
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浙江丽水地区非结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药性分析
目的 探讨丽水地区非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布特点及其耐药情况,为临床诊疗提供参考.方法 收集2013年1月至2015年12月丽水地区分枝杆菌培养阳性的菌株,用PNB/TCH生长试验初步鉴定菌种,利用基因芯片对分离的NTM作进一步菌种鉴定;对鉴定为NTM的菌株采用比例法进行6种药物敏感性试验.结果 共分离鉴定分枝杆菌属671株,其中NTM 81株(12.07%).NTM共检出9个菌种,以胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌和龟-脓分枝杆菌为主,占比分别为59.26%、16.05%和9.88%.NTM耐药率总体较高,特别是龟-脓分枝杆菌和戈登分枝杆菌对6种药物全部耐药.结论 NTM的耐药率高,根据药敏制定合理的治疗方案是治疗成功的关键.
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宁波市奉化区非结核分枝杆菌感染及耐药状况研究
目的 分析宁波市奉化区近8年非结核分枝杆菌(NTM)的感染分布及耐药情况.方法 选取宁波市奉化区2009-2016年经实验室菌种鉴定确定为NTM的病例作为研究对象,采用WHO/IUATLD推荐的比例法进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)4种药物的耐药性测定.结果 2009-2016年NTM感染占分枝杆菌属培养阳性率分别为15.63％、20.00％、19.05％、12.66％、14.06％、15.63％、15.28％、17.48％.异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇的耐药率分别为96.30％、64.20％、83.95％、69.14％.结论 宁波市奉化区NTM感染情况较为严峻,NTM对常用抗结核药物呈高度耐药现象.
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肉芽肿性小叶性乳腺炎106例临床病理特征及病因分析
目的 探讨肉芽肿性小叶性乳腺炎(granulomatous lobular mastiffs,GLM)的临床病理学特征,并分析其与非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)感染的相关性.方法 对106例已经确诊的GLM重新阅片,并行金胺O、PASM、PAS特殊染色及荧光定量PCR检测.结果 106例GLM均为女性,平均年龄33岁,有生育史及哺乳史104例,97例距末次妊娠3年发病,平均病程3个月.镜下组织学特征以乳腺终末导管小叶单位为中心的慢性化脓性肉芽肿性炎症.荧光定量PCR检测结核/NTM均阴性,PASM、PAS特殊染色未查见真菌,金胺0特殊染色1分15例、2分3例,金胺O染色阴性88例,阳性率为16.98％.18例金胺0染色阳性患者随访发现伴窦道形成5例,手术切口愈合差者2例,在1年内复发5例;88例金胺O染色阴性患者伴窦道形成14例,手术切口愈合差者5例,在3个月内复发5例.结论 GLM是少见的良性炎症性乳腺疾病,NTM感染可能是GLM的病因之一,将金胺0、PASM、PAS特殊染色及荧光定量PCR联合检测可作为GLM的常规检查,为治疗GLM提供病理学依据.
关键词： 肉芽肿性小叶性乳腺炎 临床病理特征 非结核分枝杆菌 病因 -
支气管镜分离检查患者鸟分枝杆菌复合群阳性与肺癌关系的临床研究
目的 探讨肺癌患者中影响鸟分枝杆菌复合群(mycobacterium avium complex, MAC)阳性(感染)的危险性因素以及MAC阳性(感染)与肺癌特征的关系.方法 选择2012年1月-2015年12月来我院行支气管镜下支气管灌洗液常规培养分枝杆菌患者265例,根据MAC培养阴阳性将肺癌患者划分为MAC阳性/非结核性分枝杆菌(non tuberlosis myeobactericum,NTM)阴性(A组,n=36)、MAC阴性/ NTM阳性(B组,n=15)、MAC阴性/NTM阴性(C组,n=214),应用Logistic回归分析筛选出肺癌患者中影响MAC阳性(感染)的危险性因素.结果 265例肺癌患者中,36例检出MAC阳性,阳性率13.58%;检出78例NTM阳性,阳性率19.25%;MAC阴性/NTM阳性肺癌患者中检出9例萨斯分枝杆菌(M.kansasii)、6例脓肿分枝杆菌(M.abscessus);单因素回归分析显示,肺癌患者中女性、年龄是影响MAC阳性(感染)的危险性因素(P=0.025,P=0.033),肺癌患者有吸烟史、原发灶部位、病理组织类型、肿瘤分化程度、TNM分期与MAC阳性(感染)无显著性相关(P>0.05);多因素回归分析显示,肺癌患者中性别为女性(OR=0.386,95% CI=0.182-0.863,P=0.018)、年龄较大(OR=1.031,95% CI=1.001-1.092,P=0.028)是MAC阳性(感染)的危险性因素.结论 性别为女性、年龄较大肺癌患者中MAC阳性(感染)的危险性显著增加,肺癌患者的癌症特征(原发灶部位、病理组织类型、肿瘤分化程度、TNM分期)与MAC阳性(感染)无关,提示临床医师更应密切关注肺癌患者性别、年龄及MAC菌种鉴定结果.
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2月末结核分枝杆菌阳性初治肺结核患者菌型鉴定结果分析
目的：分析深圳市南山区2月末结核分枝杆菌阳性肺结核患者的分枝杆菌分布情况，为诊断与治疗分枝杆菌感染提供参考依据。方法2013年1月至2015年12月深圳市南山区痰结核分枝杆菌阳性的初治肺结核患者治疗2月末仍结核分枝杆菌阳性患者进行菌型鉴定并进行结果分析。结果617例结核分枝杆菌阳性肺结核患者经2个月强化期治疗后，46例患者出现2月末结核菌阳性，其中涂片阳性为33例，涂片阴性而培养阳性为13例；涂片阳性患者中19例培养阴性，10例为结核药物敏感菌，4例为非结核分枝杆菌；涂阴培阳患者中1例为结核药物敏感菌，12例为非结核分枝杆菌；16例非结核分枝杆菌经分型鉴定后，7例脓肿分枝杆菌，9例戈登分枝杆菌。结论肺结核患者可能继发非结核分枝杆菌感染，抗结核治疗2月末肺结核病人应及时留取痰标本做结核菌涂片，培养和菌种鉴定，为进一步诊断和制定个体化疗方案提供依据。
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对硝基苯甲酸鉴别结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌的机制研究
目的：研究对硝基苯甲酸（PNB）鉴别结核分枝杆菌复合群（MTC）与非结核分枝杆菌（NTM）的机制。方法应用高压液相色谱（HPLC）和液相色谱串联质谱法（LC/ MS/ MS）鉴定5株 MTC 标准株和33株NTM 标准株的 PNB 代谢产物。结果33株 NTM 标准株均可将 PNB 还原为对氨基苯甲酸（PABA），而5株MTC 标准株则不具备该能力。结论 PABA 是 PNB 的代谢产物之一。NTM 能将 PNB 还原为细菌可利用的PABA，因此能够耐受 PNB；MTC 不具备该能力，因而不能耐受 PNB。这可能就是 PNB 选择性培养基用于鉴别MTC 与 NTM 的机制。
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快速结核分枝杆菌菌型鉴定方法的应用评估
目的：评估MGIT 960液体培养分枝杆菌阳性时，免疫胶体金法MPB64抗原检测及荧光探针PCR法在结核分枝杆菌快速菌型鉴定中的应用价值。方法临床MGIT960TM液体培养得到203例分枝杆菌阳性菌株，平行采用上述两种方法进行结核分枝杆菌菌型鉴定。结果免疫胶体金MPB64抗原检测法灵敏度为97．7%(169/173×100%)，特异度为100%(30/30×100%)；荧光探针PCR法灵敏度为100%(173/173×100%)，特异度为96．7%(29/30×100%)。结论免疫胶体金法检测MPB64抗原及荧光探针PCR法作为液体培养时结核杆菌菌型鉴定的方法均是快速可靠的。免疫胶体金法检测MPB64抗原由于操作简便，实验要求条件低，更易为临床TB实验室接受。
