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铜陵地区结核与非结核分枝杆菌菌型鉴定及耐药性分析
目的 通过检测本地区分枝杆菌感染菌株类型以及耐药性,制订化疗方案提供依据.方法 采取两种试剂鉴定菌株,绝对浓度法检测药敏耐药性.结果 80株分枝杆菌中人型结核分枝杆菌 58例,占72.5%;牛型结核分枝杆菌15例,占18.8%;非结核分枝杆菌7例,占8.7%.结核分枝杆菌复合群耐多药率9.6%.非结核分枝杆菌耐多药率85.7%.牛型结核分枝杆菌对药物敏感性大于人型结核分枝杆菌,人型结核分枝杆菌对药物敏感性大于非结核分枝杆菌.耐药以耐R、H、TH1321、Rtf、PAS多见.结论 本地区肺部感染分枝杆菌菌株以结核分枝杆菌复合群为主,耐多药率及非结核分枝杆菌感染率略高于全国水平.
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非结核分枝杆菌感染占肺结核治疗效果不佳病例比例的研究
目的 通过研究非结核分枝杆菌感染占肺结核治疗效果不佳病例的比例,来引起临床对非结核分枝杆菌肺病的重视.方法 选择我院2011年4～10月期间,门诊和住院确诊为肺结核病人中抗结核治疗效果不佳病例共45例,进行临床分析.结果 45例抗结核治疗效果不佳病例中感染非结核分枝杆菌共28例占62%,再次培养仍为肺结核的共17例占38%.结论 抗结核治疗效果不佳病例中有很大部分是非结核分枝杆菌肺病,由于两者在临床症状、X线影像、痰涂片、PPD试验、病理学检查都疑似,很容易误诊误治.
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145株非结核分枝杆菌对10种药物的耐药性分析
目的 了解我院非结核病患者分离的非结核分枝杆菌对10种药物的耐药状况.方法 用MB/Bact 240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的分枝杆菌采用绝对浓度法对10种抗结核药物,利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素,利福喷丁、丙硫异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素、卡那霉素和对氨基水扬酸进行药物敏感性试验.结果 1722 例患者的标本非结核分枝杆菌培养阳性145株,对10种药总耐药率97.2%(141/145),单耐药率高为异烟肼、链霉素和对氨基水扬酸,低为氧氟沙星.结论 非结核分枝杆菌耐药情况十分严重,应加强抗结核药物的耐药性监测;根据药敏试验选择科学有效的化疗方案.
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对硝基苯甲酸生长试验鉴别结核与非结核分枝杆菌应用评价
目的 对应用对硝基苯甲酸(PNB)生长试验鉴别结核分枝杆菌复合群(MTC)与非结核分枝杆菌(NTM)进行评价.方法 采用PNB生长试验、PCR-反向核酸探针杂交和PCR-DNA直接测序对52株MTC和264株NTM临床分离株进行鉴定.结果 以PCR-反向核酸探针杂交和PCR-DNA测序结果为鉴定标准,PNB生长试验中52株MTC菌株均为(100%)阴性(-),264株NTM菌株中233株(88%)为阳性(+),31株(12%)为(-).结论 仅应用PNB生长试验鉴别MTC与NTM存在局限性.用PCR-反向核酸探针杂交能将分枝杆菌鉴定至属、将MTC与NTM相鉴别,并能将NTM准确鉴定至种的水平.
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非结核分枝杆菌肺病24例的CT表现
目的 提高对非结核分枝杆菌肺病的CT影像学表现的认识.方法 回顾性分析2004年9月至2006年10月两年经确诊的24例非结核分枝杆菌肺病的CT影像学表现,分析病变形态和累及范围.结果 片状斑片状影占71%,条索状影占33%,非腺泡样结节影占33%,腺泡样结节影占17%,空洞占17%,支气管扩张占17%,钙化占25%,胸膜增厚占25%,双肺纹理增多占4%.结论 非结核分枝杆菌肺病的CT影像学表现主要表现为增殖改变,邻近胸膜增厚,少见浸润改变,少见腺泡结节.而临床规则抗痨治疗疗效不佳或同步性差,实验室做药敏耐药,应考虑到非结核分枝杆菌肺病的可能.
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分枝杆菌鉴定的分子生物学方法研究进展
分枝杆菌属包括结核分枝杆菌群(mycobacterium tubercu-losis complex,MTC)、麻风分枝杆菌及非结核分枝杆菌(nontu-berculosis mycobaeteria,NTM)自1882年Koch发现结核菌以来,已报道了100余种分枝杆菌,其中约30种与不同的人类或动物疾病有关.
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偶然分枝杆菌感染所致皮下脓肿1例临床分析
偶然分枝杆菌也叫偶发分枝杆菌(Mycobacteriun fortuitum,Mf)为非结核分枝杆菌(NTM)Runyon分类法的第Ⅳ群-快生长菌.该细菌广泛存在于土壤和灰尘中,为环境中常见的分枝杆菌.非结核分枝杆菌造成皮肤感染比较少见,只是近几十年才发现.已证实能侵犯皮肤,皮下组织的细菌有海分枝杆菌,溃疡分枝杆菌,龟分枝杆菌,偶然分枝杆菌,和脓肿分枝杆菌等[1].近年来,随着NTM病疫情呈现上升趋势,偶然分枝杆菌造成皮肤或软组织感染,近几年在国内也有报道,并且医源性病例较多[2-5],而我院这例病人也是由于医源性感染造成的.
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三种方法用于耐多药肺结核患者菌种初步鉴定的比较分析
目的：分析临床分枝杆菌培养阳性的耐多药肺结核患者三种初步鉴定结核菌种方法的准确度，期望为临床结核病实验室初步菌种鉴定技术的有效运用提供参考。方法收集重庆市公共卫生医疗救治中心结核内科2013年7月15日至2014年1月14日期间162例临床明确诊断为耐多药肺结核患者的实验室检查数据，统计三种方法（方法一：噻吩-2-羧酸肼（ TCH）和对硝基苯甲酸（ PNB）试验方法二：胶体金法定性检测MPB64抗原，方法三：分枝杆菌分型鉴定）菌种初步鉴定结果，分析检测结果的敏感性，采用卡方检验，以P＜0．05为差异，具有统计学意义。结果以临床诊断结果为标准，三种方法鉴定结核分枝杆菌的敏感性，为93.8％（152／162），95.7％（155／162），96.3％（156／162）（P＞0.05）。以方法三为标准，方法一和方法二鉴定结核分枝杆菌的敏感性分别为93.8％（150／156），95.7％（154／156）（P＜0.01）；鉴定非结核分枝杆菌的敏感性分别为50％（1／2），100％（2／2）。结论三种方法均可用于耐多药肺结核患者菌种的初步鉴定，使用胶体金法定性检测MPB64抗原法更方便、更省时。
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结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的病例分析
目的 研究结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的病例特点.方法 对南京市胸科医院实验室培养阳性的10389例菌株,经菌性鉴定为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌混合感染的223份样本,共70例患者的培养结果进行分析.结果 结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌可以互为先后顺序感染,也可以同时感染,以先感染结核分枝杆菌,后感染非结核分枝杆菌为多.结论 对于特殊人群和治疗效果欠佳的的患者,应定期、多次的进行相关的培养、菌型鉴定和药物敏感试验,尽早发现存在混合感染及时调整治疗.
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涂片镜检结合胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值
目的：探讨结核分枝杆菌在BACTEC960中湿片镜检形态特征及胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值。方法收集陕西省结核病防治院经BACTEC 960培养阳性920例，进行直接涂片湿片镜检、涂片抗酸染色、胶体金法菌群鉴定，并以PNB(对硝基苯甲酸)和TCH(噻吩-2-羧酸肼)鉴别培养基菌群检测为标准。结果结核分枝杆菌(MTB)在液体培养管中呈镜检呈索状排列98．3%(832/846)；非结核分枝杆菌( NTM)镜检呈团状排列32．43%(24/74)、块状排列35．13%(26/74)、散在排列为24．32%(20/74)。胶体金法检测结核分枝杆菌的敏感性98．34%(832/846)，特异性98．64%，阳性预测值99．87%，阴性预测值86．90%。结论湿片观察结核分枝杆菌在BACTEC 960培养管中形成索状排列，较涂片抗酸染色更简便、快速，对鉴定分枝杆菌有初筛作用。
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南京地区非结核分枝杆菌耐药性分析
目的 分析南京地区非结核分枝杆菌(NTM)近八年的感染情况及耐药趋势.方法 对南京胸科医院2002年～2010年实验室培养阳性的7412例菌株,经菌型鉴定为非结核分枝杆菌的333例菌株的药敏结果进行统计分析.结果 NTM对于常用的抗结核药物大多显现为高度耐药,特别是异烟肼、利福平、链霉素,只有乙胺丁醇、阿米卡星的耐药率稍低.结论 尽快规范非结核分枝杆菌的治疗方案,避免更多的药物出现耐药.
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29例非结核分枝杆菌的药敏实验分析
目的 观察非结核分枝杆菌(NTM)的耐药情况.方法 我院分枝杆菌培养阳性并鉴定为非结核分枝杆菌的病例,对其药敏结果进行分析.结果 748例分枝杆菌培养阳性病例中,29株为非结核分枝杆菌,占3.9％,29株非结核分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、对氨基水杨酸、阿米卡星、对氨基水杨酸异烟肼、卷曲霉素、左氧氟沙星、利福喷丁、丙硫异烟胺等11种常用药物有不同程度的耐药,耐药率高达100％.结论 非结核分枝杆菌对抗结核药的高耐药应引起重视.
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微菌落观察法鉴别分枝杆菌
目的 研究微菌落观察法在鉴别分枝杆菌方面的优点和特异性.方法取验菌株在匡氏琼脂培养3、7、10、14、21、28 d.然后在无菌标准操作箱内用固定专用的100倍显微镜下观察微菌落的特征,同时用传统分型实验做对比.结果 结核杆菌在琼脂培养基上早期形态十分特殊,具有非常明显的特征性,微菌落观察法均可以在3-21天平均9.5天得到鉴定,其速度远快于传统的细菌学方法(≥8周)和生化法(5~8周),微菌落观察法鉴别结核杆菌群和非结核分枝杆菌的灵敏度和特异性达到97.8%.结论 微菌落观察法用于分枝杆菌的直接鉴定,灵敏度和特异性较高,结果比较准确可靠,操作简单,适合推广应用.
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基因芯片杂交技术在肺结核诊治中的应用
目的 探讨基因芯片杂交技术在肺结核诊治中的应用价值.方法 运用分枝杆菌菌种鉴定基因芯片检测系统.对结核杆菌阳性的标本进一步做异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素四种常用抗结核药物的耐药突变基因检测.结果 对基因芯片杂交法检测结核分枝杆菌阳性的29份痰标本做了异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素四种常用抗结核药物的耐药突变基因检测.有18份痰标本检出非结核分枝杆菌.结论 采用基因芯片杂交法查痰结核杆菌,阳性率明显高于传统的痰涂片,与培养法相比较,当天可出结果,极大地缩短了痰培养法的时间.同时可对目前国内发病率较高的10种分枝杆菌进行菌种鉴定,并可对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇这四种一线抗结核药的耐药基因(rpoB、katG、inhA、rpsL、embB)的多种突变进行检测性.此方法 检测快速、准确、特异、敏感,为肺结核的有效诊治提供了重要的技术手段和可靠依据.
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45例非结核分枝杆菌肺病临床特征及耐药特点分析
目的 分析我院近5年来非结核分枝杆菌(NTM)肺病临床特征及耐药特点.方法 对2006年1月至2011年12月我院检验科分枝杆菌实验室分离、培养的分枝杆菌培养物进行菌种鉴定、耐药性统计及其每份标本相对应的临床资料分析总结.结果 我院2006年至2011年NTM的平均分离率0.91%,远低于全国水平.NTM 对异烟肼(INH)、对氨基水杨酸(PAS)耐药率高,对阿米卡星(AMK)耐药率低,同时耐INH、利福平(RFP)和至少耐1种药分别为62.22%和91.11%.结论 NTM肺病病程长,临床症状无特异性,耐药率高,需要及早行细菌学培养、菌株鉴定和药敏试验.
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非结核分枝杆菌肺病MSCT诊断
目的:探讨非结核分枝杆菌肺病患者MSCT诊断的表现特征及应用价值.方法:选取某院诊治的53例非结核分枝杆菌肺病患者(观察组),与同期诊治的53例肺结核患者(对照组),所有患者均采用MSCT(多层螺旋CT)检查进行诊断,观察对比2组MSCT表现特征及病灶分布情况等.结果:所有患者经检查诊断后,2组的舌段、中叶的检出情况相比较,观察组明显高于对照组(P<0.05),且组间支气管扩张或者狭窄(闭塞)的检出率相比较,观察组亦高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义.结论:在非结核分枝杆菌肺病患者的临床诊断中应用MSCT检查,其具有一定程度的提示作用.
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肺科患者痰标本分离非结核分枝杆菌47株分析
目的 探讨临床肺疾病患者非结核分枝杆菌(NTM)分布,耐药情况及临床特点.方法 对1 959例患者的痰标本进行分枝杆菌培养.对培养阳性的910份标本中的860份进行药敏实验与菌型初步鉴定,并对分离出的47株NTM与相对应的44例临床资料进行对比分析.结果 NTM检出率5.5%,总耐药率93.6%,单耐药率平均48%,RH两联耐药率37%,含RH多联耐药率28%.临床症状多为咳嗽,咳痰,发热,部分病例咯血及慢性病症,治疗效果不明显.结论 NTM感染及引发的疾病必须引起医学检验与临床的重视,连续痰鉴定为NTM者为NTM肺病高度可疑者,实验室有必要进一步开展NTM的菌种鉴定技术.诊断耐多药肺结核,必须除外NTM肺病.
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泉州市67例非结核病分枝杆菌感染流行特征
目的 分析非结核分枝杆菌(NTM)感染的流行特征,为NTM的防治提供依据.方法 回顾性分析2012-2014年泉州市耐多药肺结核监测资料.结果 NTM总检出率为13.1％,其中台商投资区和惠安县的检出率均明显高于全市平均水平;检出率女性高于男性,农民占64.2％(43/67),本地户籍占98.5％(66/67);50～65岁占52.2％(35/67).67株非结核分枝杆菌进行异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)、链霉素(S)、氧氟沙星(OFX)、卡那霉素(KM)6种药物敏感性测定,总耐药率达90.5％(364/402),耐多药率为92.5％(62/67).结论 泉州市NTM检出率和耐药率均较高,应加强对NTM感染的控制.
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杭州地区流行非结核分枝杆菌鉴定、易感因素和耐药性分析
目的 了解近年杭州地区非结核分枝杆菌(NTM)感染、优势菌种及其耐药性.方法 采用PNB/TCH生长试验对1 972例患者分枝杆菌阳性培养物标本中NTM进行初步鉴定.采用分枝杆菌分子线性探针法和16S rRNA基因PCR产物测序鉴定NTM菌种.分析性别和年龄对NTM易感性的影响.采用浓度比例法检测NTM分离菌株对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(OFX)、卡那霉素(KM)的敏感性.结果 9.8％(193/1 972)分枝杆菌阳性培养物标本PNB/TCH生长试验结果阳性.分子线性探针法和16S rRNA基因PCR产物测序结果显示,193例PNB/TCH生长试验阳性标本中,66.3％为单一NTM、18.1％为2种分枝杆菌、8.3％为结核分枝杆菌、7.3％为非分枝杆菌属细菌感染.173株NTM(单一感染128株+混合感染45株)中,胞内分枝杆菌占57.8％,其次为脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、龟分枝杆菌和鸟分枝杆菌(12.1％、9.8％、9.8％和5.8％).35例分枝杆菌混合感染标本中,28.5％和20.0％分别为胞内分枝杆菌或龟分枝杆菌与结核分枝杆菌混合感染.NTM感染者男性多于女性(1.67∶1),50岁以上人群感染率(80.4％)高于50岁以下人群(P＜0.01),肺部感染比例(95.1％)远高于其他部位(P＜0.01).NTM分离株对INH耐药率为100％,对其他5种抗结核药物的耐药率也高达70.3％～90.6％.结论 胞内分枝杆菌是杭州地区近年优势流行的NTM菌种,NTM主要引起肺部感染且中老年人易感,NTM临床菌株对常用抗结核药物有很高的耐药性.
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评估一种新的检测瘰疬分枝杆菌菌株的real-time PCR方法
目的 建立针对非结核分枝杆菌中瘰疬分枝杆菌菌株的real-time PCR检测方法.方法 在我们的研究中,根据瘰疬分枝杆菌的SodA基因设计MGB探针和特定的引物,并用来检测模拟样品中的瘰疬分枝杆菌.结果 该方法低瘰疬分枝杆菌DNA检测浓度是101拷贝数,标准曲线显示阈值周期和SodA基因片段拷贝数之间的相关系数是0.973,斜率为-3.249,表现出良好的线性关系.此外,模拟样品低检测浓度是每毫升101个细菌,此外,其他9株菌为阴性结果,验证了良好的特异性.结论 该方法对于检测瘰疬分枝杆菌模拟标本显示很高的敏感性和特异性,可用于瘰疬分枝杆菌菌株的生态和流行病学监测.
关键词： 瘰疬分枝杆菌 Real-time PCR 非结核分枝杆菌
