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呼吸内科肺部真菌感染62例临床分析
目的 探讨呼吸内科肺部真菌感染的易感因素、临床特征和治疗措施.方法 对2006年7月-2009年6月间本院呼吸内科收治并确诊为肺部真菌感染的62例患者病历进行回顾性分析,对呼吸内科肺部真菌感染的易感因素、临床特征和治疗措施进行总结.结果 我院呼吸内科真菌感染发生率为2.7%,易感因素主要有长期使用广谱抗生素,糖皮质激素,营养不良,放化疗等;其中患有COPD的32例,占总数的51.6%,COPD是呼吸内科肺内真菌感染的常见基础疾病;主要病原菌为白假丝酵母菌,约占呼吸内科肺部真菌感染的60%;治疗方法主要以抗真菌治疗,积极治疗原发疾病的综合治疗为主.结论 长期使用广谱抗生素,糖皮质激素,营养不良,放化疗等因素是呼吸内科肺内真菌感染的易感因素,COPD是呼吸内科真菌感染的常见基础疾病,白假丝酵母菌是主要的病原菌,临床上应予以重视.
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白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制的研究进展
近年来,白假丝酵母菌对唑类药物耐药问题备受人们关注.随着耐药菌株的不断出现,耐药机制的研究也取得了一定的进展.白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制主要与Erg11基因、CDR1和CDR2基因、MDR1基因的过度表达及突变有关.本文就这方面研究新进展进行综述.
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鸡蛋制品对烫伤后常见感染病原菌的抑制作用研究
目的:开发鸡蛋制品的医药价值.方法:采用打孔扩散法,用鸡蛋油、鸡蛋清等鸡蛋制品和冰硼等中药,对烫伤后常见感染的病原菌进行药敏试验研究.结果:鸡蛋清对烫伤后感染的常见病原菌有明显的抑制作用,鸡蛋油、冰硼无明显抑菌作用.结论:提倡人们在烫伤后及早使用鸡蛋清治疗.
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青黛对白假丝酵母菌抗菌作用的研究
目的:研究青黛对白假丝酵母菌抑菌与杀菌作用.方法:运用琼脂扩散法、试管稀释法测定青黛悬浊液对于白假丝酵母菌的抑菌环直径、低抑菌浓度(MIC)和低杀菌浓度(MBC).结果:青黛悬浊液1∶8、1∶16、1∶32、1∶64稀释液对白假丝酵母菌抑菌环直径分别为(27.22±5.22)mm、(34.97±3.83) mm、(31.26±5.74)mm、(24.95±5.12) mm;青黛悬浊液1∶16稀释液的抑菌环直径明显大于其他浓度稀释液的抑菌环直径(P＜0.01).青黛悬浊液对白假丝酵母菌MIC为62.5 mg/mL,MBC为62.5 mg/mL.结论:青黛悬浊液对白假丝酵母菌有较明显的的抑制与杀菌作用.
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新生儿科分离白假丝酵母菌多位点序列分型研究
目的 分析白假丝酵母菌多位点序列分型(MLST)与标本来源、药物敏感性之间的关系,探讨菌株间的亲缘关系及其分子流行病学特征.方法 收集2015年4—5月某院新生儿科病房分离的白假丝酵母菌,采用试剂盒对菌株进行体外药物敏感性测试,并采用MLST方法对菌株进行分型,分析菌株间的同源性及分子流行病学特征.结果 共分离15株白假丝酵母菌,来自4例患儿和1名医务人员,15株白假丝酵母菌经MLST获得3个序列型(ST),其中13株为ST 1997,另外2株分别为ST 1359和ST 1933.经eBURST软件对ST分型进行聚类分析,ST 1997菌株属于Group 13,ST 1359菌株属于Group 1,ST 1933菌株属于Group 20.同一患者外周血和外周静脉导管分离的白假丝酵母菌属于同一克隆株.结论 新生儿科病房存在白假丝酵母菌血流感染的暴发,应积极制定相应的预防控制措施,加强对新生儿科病房的医院感染管理.
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免疫抑制BALB/c小鼠系统性白假丝酵母菌感染生物指标模型的建立
目的 探讨经腹腔注射白假丝酵母菌建立免疫抑制BALB/c小鼠系统性感染的生物指标模型,为研究白假丝酵母菌感染的致病机制和抗真菌药物的药效学提供相关动物模型.方法 对免疫抑制组BALB/c小鼠(腹腔注射环磷酰胺200 mg/kg·d,连续2 d)经腹腔注射白假丝酵母菌增强毒力株0.25 mL(浓度为1×107 CFU/mL)建立系统性白假丝酵母菌感染模型;取小鼠尾静脉血进行白细胞和中性粒细胞计数,取小鼠组织进行真菌镜检、培养、病理检查以及(1,3)-β-D-葡聚糖检测.结果 免疫抑制组与对照组小鼠用药后第4天白细胞计数、中性粒细胞计数、平均体重比较,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).白假丝酵母菌感染组生存率为30.00％,对照组生存率为100.00％,两组生存率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对注射真菌后第2～14天死亡小鼠以及第14天存活小鼠进行解剖,发现肺、肝、肾组织出现多处脓肿,以肾组织感染为显著;小鼠组织真菌直接镜检可见大量菌丝体,组织培养均为白假丝酵母菌,组织病理可见大量菌丝体、炎细胞及组织坏死.白假丝酵母菌感染组肺、肾组织(1,3)-β-D-葡聚糖均增高,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 本实验方法可以成功建立免疫抑制BALB/c小鼠系统性白假丝酵母菌感染的动物模型.
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早产儿真菌血症临床特点
目的 了解早产儿真菌血症患儿临床特点.方法 回顾性分析2011年1月-2015年12月某儿童医院重症监护病房早产儿真菌血症的临床特点,比较早产儿的一般情况、实验室相关指标及药敏结果.结果 2011年1月-2015年12月该院收治确诊的真菌血症早产儿42例,其中白假丝酵母菌22例(占52.38％),近平滑假丝酵母菌13例(占30.95％),克柔假丝酵母菌3例,其他4例.按感染的主要病原菌进行分组,分为近平滑假丝酵母菌组和白假丝酵母菌组.白假丝酵母菌组母亲泌尿生殖系感染率、真菌性脑膜炎的发生率均为27.27％,高于近平滑假丝酵母菌组(分别为7.69％、0.00％),白假丝酵母菌组经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)置管率低于近平滑假丝酵母菌组(22.73％ vs 69.23％),近平滑假丝酵母菌组血小板计数低于白假丝酵母菌组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 早产儿真菌血症感染病原菌以近平滑假丝酵母菌和白假丝酵母菌为主,母亲孕期生殖系感染易导致白假丝酵母菌血症的发生,白假丝酵母菌血症早产儿更易患真菌性脑膜炎;PICC置管更易导致近平滑假丝酵母菌血症的发生,血小板的下降更明显.
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白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体的制备、纯化及鉴定
目的 制备白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体,并对其进行鉴定.方法 提取白假丝酵母菌基因组DNA为模板,经聚合酶链反应(PCR)获取SAP2目的基因;双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),构建pMAL-c2x/SAP2重组质粒;在大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中经IPTG诱导表达出可溶性的融合蛋白;用可溶性Sap2免疫小鼠制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清效价,亲和层析法纯化抗血清后,利用Western免疫印迹(Western Blot)检测抗体特异性.结果 该研究成功制备了抗Sap2多克隆抗体,抗体效价＞1∶51 200;Western Blot检测结果表明,该抗体可特异性识别Sap2蛋白.结论 纯化后的Sap2作为抗原免疫小鼠,有较好的抗原性和免疫原性,可成功制备多克隆抗体,并具有高特异性,为快速检测侵袭性白假丝酵母菌感染奠定了基础.
关键词： 白假丝酵母菌 分泌型天冬氨酸蛋白酶 多克隆抗体 抗原 抗体 -
铜绿假单胞菌代谢产物体外对白假丝酵母菌等的抑菌活性研究
目的 观察铜绿假单胞菌代谢产物对假丝酵母菌属的体外抑菌活性.方法 用交叉条带实验方法测定铜绿假单胞菌对54株假丝酵母菌属的体外抑制活性.结果 铜绿假单胞菌产生的抗菌物质对白假丝酵母菌及光滑假丝酵母菌的抑菌作用强,抑菌带宽.产蓝绿色素的第6株铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌和热带假丝酵母菌的抑制率均达100%,产黄绿色素的第8株铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌的抑制率也均达100%,铜绿假单胞菌产色素菌株的抗真菌活性优于不产色素的菌株.结论 铜绿假单胞菌产生的抗菌物质对白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌具有较强的抗真菌活性.
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临床分离508株酵母菌的菌种分布及耐药性分析
目的 了解某院临床分离酵母菌的种群分布与耐药情况,为合理用药提供依据.方法以常规方法培养真菌,并采用法国生物梅里埃公司VITEK-32微生物分析仪YBC酵母菌卡进行鉴定;药敏试验以微量稀释法进行.结果 共检出508株酵母菌,其中以白假丝酵母菌多,达369株(72.64%),其次为热带假丝酵母菌48株(9.45%),无名假丝酵母菌26株(5.12%).93.22%(344/369)的白假丝酵母菌和89.58%(43/48)的热带假丝酵母菌由呼吸道分泌物标本分离,呼吸道分泌物酵母菌的分离率显著高于其他临床标本(χ2=644.26,P<0.01).白假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的MIC90分别为≤16 mg/L、≤0.5 mg/L、≤1 mg/L、≤0.25 mg/L和≤0.06 mg/L,耐药率为1.12%(3/269)～10.78%(29/269).结论 该院临床酵母菌的检出以白假丝酵母菌为主,主要分离自呼吸道标本.白假丝酵母菌对氟康唑等临床常用抗真菌药物的耐药性相对较低,但仍应加强对临床酵母菌的药敏监测.
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白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2的构建
目的 构建白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2,为以其作为基因疫苗进行免疫动物实验奠定物质基础.方法 从白假丝酵母菌中提取基因组DNA,以其为模板采用聚合酶链反应(PCR)法获取SAP2基因,将真核表达质粒peDNA 3.1(+)myc-HisC和SAP2基因行EcoR I和Xho I双酶切,琼脂糖凝胶纯化,连接酶切产物,转化TOP10感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定.结果 经PCR扩增获得的目的 基因分子量与预计相同,并定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)myc-HisC,电泳获得预期的SAP2条带,测序证实为正确的SAP2序列.结论 利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)myc-HisC可以方便而高效地构建pcDNA3.1/SAP2重组质粒,该质粒能直接激活抗原提呈细胞,可以使重组质粒具有较强的免疫原性和免疫反应性.
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白假丝酵母菌感染分布及耐药性分析
回顾性分析某院2003-2005年各类临床标本分离的186株白假丝酵母菌分布特点及药敏结果.186株白假丝酵母菌主要分离自呼吸道标本,占60.75%;其次为中段尿18.28%,分泌物11.83%,血液4.30%,其他4.84%.白假丝酵母菌对两性霉素B、制霉菌素、5-氟胞嘧啶、氟康唑、咪康唑、酮康唑、益康唑、伊曲康唑的耐药率分别为4.84%、9.68%、41.94%、63.98%、61.83%、67.23%、46.77%、66.67%;3年来,白假丝酵母菌除对两性霉素B和制霉菌素的耐药率显著降低(P＜0.01),对益康唑的耐药率没有太大变化(P＞0.05)外,对5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑的耐药率显著增高(P＜0.01或P＜0.05).
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白假丝酵母菌感染与药敏分析
为了解白假丝酵母菌分布特点及其耐药性,对分离自临床标本的假丝酵母菌采用显色平板,联合YBC及VITEK-32半自动细菌检测分析仪进行鉴定,并用CANDIFAST真菌药敏试验板做药敏试验.465株假丝酵母菌中白假丝酵母菌占71.83%(334株);以中老年患者分离居多(64.67%),其次为侵入性治疗者(60.78%),使用肾上腺糖皮质激素者(16.77%);对两性霉素B具有较高敏感性(91.0%),其次为制霉菌素(87.1%),5-氟胞嘧啶(84.7%).
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白假丝酵母菌基因分型方法的研究进展
随着医疗技术的快速发展,各种医用材料和侵入性操作技术在临床广泛应用,广谱抗菌药物、糖皮质激素和免疫抑制剂在临床的大量使用,医院内真菌感染的比例越来越高,其中白假丝酵母菌在真菌感染中所占比例高,是临床中常见的致病菌之一.白假丝酵母菌主要引起皮肤、黏膜的浅表部位感染,侵袭性呼吸系统感染和血流感染等,其中血流感染相对严重,如白假丝酵母菌血症.早在二十世纪八十年代,Pfaller等[1]报道,侵袭性假丝酵母菌感染的发病率有上升趋势,应引起临床医生的重视.近十几年,假丝酵母菌在美国和欧洲引起医院感染的致病菌中分别占第四位和第六位[2].在亚洲假丝酵母菌引起医院感染的发病率也相对较高[3].尽管有较多抗真菌药物可以用来治疗侵袭性假丝酵母菌感染,但其病死率仍然在30%左右[2-3].利用分子生物学的方法,可以对假丝酵母菌进行同源性分析和查找传播途径.从而为制定预防和控制假丝酵母菌医院感染流行、传播的有效措施提供理论依据.
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免疫功能正常成人社区获得性白假丝酵母菌败血症1例
白假丝酵母菌败血症是真菌败血症的一种,一般发生于存在严重基础疾病、免疫功能低下及使用大量广谱抗菌药物、长期留置导管等危险因素的患者,且通常为医院获得性感染.而免疫功能正常的成年患者发生社区获得性真菌败血症少见,现报告1例,以便临床医生了解其临床特点及处理.
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白假丝酵母菌致踝关节感染1例
深部真菌感染多见于免疫功能低下的患者,健康人感染罕见,关节真菌感染报道尚不多.本院近日收治1例踝关节白假丝酵母菌感染患儿,现报道如下.患儿,男,10个月.因右足婴儿车车轮压伤后肿痛20余天入院.伤后次日拍右踝X线片未见明显异常,未处理,右踝持续肿痛.伤后第2周予中药外敷治疗2 d,右踝肿痛加重且出现发热,转入本院.患儿病前健康情况良好,无传染病史,无使用激素等药物史.体查:体温:37.8℃,右踝部明显红肿,皮肤完整,局部皮温升高,有压痛,右踝活动受限.
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早产儿白假丝酵母菌败血症13例临床分析
目的 探讨早产几白假丝酵母菌败血症的临床特点.方法 回顾性分析13例早产儿白假丝酵母菌败血症患儿的临床资料.患儿胎龄28～36周,体重1400～2815g.结果 患儿发生白假丝酵母菌感染的时间为生后19±11d.临床表现主要为:呼吸暂停、皮肤灌注差、反应差、反复血氧下降、皮肤灰暗、皮肤黄染、安静状态心率增快、痰多、撤机困难.在白假丝酵母菌感染时患儿血小板明显下降,C反应蛋白、血小板分布宽度升高.谷丙转氨酶、肌酸激酶同工酶、总胆红素、肌酸激酶、乳酸脱氢酶在白假丝酵母菌感染时升高,抗真菌治疗两周后肌酸激酶、乳酸脱氢酶下降明显.仅3例对氟康唑耐药,换用伏立康唑治疗有效,10例治愈,放弃治疗2例,死亡1例.结论 早产儿白假丝酵母菌败血症临床表现非特异性,生后2～3周的早产儿并发的感染,应考虑白假丝酵母菌感染的可能.白假丝酵母菌感染时,患儿血小板下降,C反应蛋白、血小板分布宽度升高、谷丙转氨酶、肌酸激酶同工酶、总胆红素、肌酸激酶、乳酸脱氢酶升高.
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小鼠巨噬细胞对白假丝酵母菌的影响
目的探讨小鼠巨噬细胞(MΦ)对白假丝酵母菌的影响,为研究抗白假丝酵母菌的免疫机制提供一定的实验依据.方法取约5.6×106/mL小鼠MΦ 1 mL与1.36×106/mL白假丝酵母菌1 mL作用后,分别于30 min、90 min、120 min、150 min、180 min、210 min、240 min进行菌落形成单位(CFU)计数,利用t检验分析实验组与对照组CFU数结果的差异性.结果小鼠MΦ与白假丝酵母菌作用到30 min时,与对照组比较,CFU数差异无显著性(P>0.05).当作用到90 min时,较对照组CFU数减少3/5,CFU数差异有非常显著意义(P<0.001).当作用到150～180 min时,实验组CFU数是对照组的1/4(P<0.001).当作用到210 min时,实验组CFU数在180 min的基础上增加了一倍.当作用到240 min时,实验组与对照组比较,CFU数差异无显著性(P>0.05).结论小鼠MΦ在体外对白假丝酵母菌不能起到胞内杀菌和胞外细胞毒作用.
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阴道白假丝酵母菌的耐药性和ERG11基因突变关系研究
目的 探讨ERG11基因突变与白假丝酵母菌对吡咯类药物敏感性下降的关系.方法 收集VVC患者的白假丝酵母菌60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验,选取所有中度敏感株和耐药株用聚合酶链反应扩增(PCR)ERG11基因,将PCR产物进行测序分析和比对分析.结果 60株白假丝酵母菌对咪康唑、酮康唑和氟康唑敏感率分别为36.7％、56.1％和80％;将38株中度敏感株和耐药株进行ERG11基因分析后共发现29个有义突变和25个同义突变,其中,有义突变中发现多个新突变位点.结论 有些新发现的突变位点可能与耐药相关;多位点有义突变可能降低菌株对药物的敏感性.
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肺结核合并下呼吸道感染的病原菌谱分析
目的 了解临床肺结核病人合并下呼吸道感染病原菌的分布及其耐药特点.方法 对深圳市第三人民医院2009-2011年间临床确诊为肺结核病人的痰标本细菌培养结果进行分析.结果 从临床确诊的结核病人中共分离出结核菌以外的病原菌213株,其中真菌占44.1％(94/213),革兰阴性杆菌占45.5％(97/213),革兰阳性球菌仅占10.3％(22/213).肺结核病人并发下呼吸道感染的病原菌前5位依次为白假丝酵母菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌和肺炎克雷伯菌肺炎亚种,药物敏感试验显示多数耐多种抗生素.结论 肺结核合并下呼吸道感染病原菌的构成比与普通住院病人不同,以白假丝酵母菌和铜绿假单胞菌等耐多种抗生素条件致病菌为主.
