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小檗碱对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病的作用研究
目的 观察小檗碱对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病的治疗效果.方法 ICR小鼠112只,采用雌激素化+阴道灌洗白假丝酵母菌菌液,构建外阴阴道假丝酵母菌病小鼠模型.随机分为正常组、模型组、实验组(小檗碱低、中、高剂量)和制霉菌素组,各18只,相应药物干预10天,观察小鼠在接菌后4、7、14天症状、体征、微生物学及组织病理学改变.结果 接菌第7天,小檗碱高剂量组和制霉菌素组感染症状、体征消失,与模型组比较,小檗碱高剂量组真菌载量和阴道灌洗液真菌阴性鼠数均明显下降 [(1.83 ±0.75)104CFU/mL比(18.17 ±2.93)104CFU/mL,P<0.05;5鼠比0鼠,P<0.05].小檗碱高剂量组和制霉菌素组效果相当[(1.83±0.75)104CFU/mL比(1.67±1.21)104CFU/mL,P>0.05;5鼠比6鼠,P>0.05].结论 小檗碱能有效治疗雌激素化小鼠外阴阴道假丝酵母菌病.
关键词： 小鼠 外阴阴道假丝酵母菌病 白假丝酵母菌 小檗碱 -
不同浓度口腔修复金属材料离子溶液对白假丝酵母菌生长影响
目的 检测常用口腔修复金属材料离子在不同浓度、不同时间段对白假丝酵母菌菌落形成的影响,以进一步研究预防和治疗义齿性口炎的方法.方法 采用液体稀释法经过8 h、24 h、48 h测定Ni2+、Cr3+对白假丝酵母菌的抑制作用.结果 Ni2+与白假丝酵母菌培养8 h、24 h、48 h后,在160 PPm浓度下,白假丝酵母菌计数值为0;经统计学检验,在8 h组80 PPm和40 PPm与8 h组的阳性对照比较,差异均有统计学(t分别=8.84、4.85,P均＜0.05);24 h组80 PPm和40 PPm与24 h组的阳性对照比较,差异均有统计学(t分别=6.76、11.01,P均＜0.05);48 h组80 PPm和40 PPm与48 h组的阳性对照比较,差异均有统计学(t分别=11.96、5.41,P均＜0.05);而Cr3+各组浓度之间比较,差异均无统计学意义(F=0.41,P＞0.05).结论 Ni2+低杀菌浓度为160 PPm;Ni2+在40～80 PPm有抑制白假丝酵母菌生长的作用;Cr3+对白假丝酵母菌的抑制能力较弱.
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高龄重症肺炎诊治1例
男性，91岁，因反复发热、咳嗽、咳脓痰50年，加重4年余于2007年10月入院。患者1957年诊断两下肺支气管扩张，此后多次因支扩合并感染住院治疗。1996年因患急性会厌炎而后遗严重误吸。此后经常因误吸而发生吸入性肺炎。平素每日咳痰量至少100 ml。2001年患者出现气短，活动后加重。胸片出现左肺渐进性、多形性病灶、肺不张（痰栓堵塞）等改变，左侧胸腔明显变小，塌陷。自2007年10月起，患者反复发热，咳嗽、咳脓痰，血象增高。经抗生素治疗，病情曾一度好转。2008年3月后两肺感染加重，无力咳痰，出现Ⅱ型呼吸衰竭。遂行经鼻气管插管，呼吸机辅助呼吸。2008年4月行气管切开术。此后多次床旁像提示两肺多发炎性病变。痰培养革兰阴性杆菌主要是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌，革兰阳性菌主要为肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌，真菌主要为白假丝酵母菌。住院期间应用抗生素、机械通气、纠正水、电解质紊乱、营养支持治疗等，2011年3月因多脏器功能衰竭死亡。
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等离子体体外抑制白假丝酵母菌生长的实验研究
选择白假丝酵母菌ATCC10231 作为实验菌株,以低温等离子体对其进行照射,观察照射后菌落生长情况. 经低温等离子体照射30、60、120、180 s后,在培养基中心照射位置处,出现明显的抑菌环,随着照射时间的延长,抑菌环逐渐增大;连续观察3 d,抑菌环没有改变. 低温等离子体在体外可抑制白假丝酵母菌的生长,为其将来成为治疗白假丝酵母菌感染的一种新手段提供了实验室依据.
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白假丝酵母菌分泌型天冬氨酰蛋白酶的研究进展
白假丝酵母菌俗称白念珠菌,是存在于健康人群口腔、肠道、生殖道等部位的微生物,也是人体内的重要条件致病菌.随着抗生素、抗癌药物、免疫抑制剂及大量激素的临床应用,白念珠菌已成为常见的医院感染病原体之一,同时也是引起女性生殖道感染的常见菌.尽管有抗真菌药物的治疗,但真菌菌血症的病死率仍然较高,特别是念珠菌菌血症的病死率达40%～80%,有报道深部白念珠菌感染病死率达68.9%[1].
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白假丝酵母菌分离和鉴定方法的探讨
目的:建立一种白假丝酵母菌培养和鉴定的方法.方法:选用经改良沙氏培养基培养白假丝酵母菌,观察假菌丝、厚膜孢子,芽管形成,并结合糖发酵和其他生化试验给以初步鉴定,新法提取DNA作后鉴定.结果:形态学观察和生化反应证实菌种为Candida albicans 1型.DNA提取表明菌种与标准株DNA带型完全相同,提取DNA浓度(1.06±0.29)μg/μl,纯度好(OD260/OD280＞1.7).结论:本法制备的培养基适合白假丝酵母菌的生长和鉴定.
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白假丝酵母菌性阴道炎患者血清IL-1β、TNF-α水平检测
目的 检测白假丝酵母阴道炎患者血清细胞因子IL-1β、TNF-α的变化,探讨它们在疾病及机体免疫防御机制中的作用.方法 选取生育年龄女性白假死丝酵母阴道炎患者50例为研究组.同期选取无阴道炎症的健康育龄女性30例为对照组,用ELISA法检测这2组人群中血清IL-1β、TNFα的水平.结果 与健康对照组血清IL-1β(44.43 ng·L-1)、TNF-α(65.23 ng·L-1)水平相比,白假丝酵母菌性阴道炎患者血清IL-1β为61.02 ng·L-1,TNF-α为81.35 ng·L-1,均显著升高(P<0.01).结论 白假丝酵母阴道炎时血清IL-1β、TNF-α有升高趋势,提示先天免疫应答是粘膜念珠菌感染的主要宿主防御机制.
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生殖道康复治疗仪配合阴道放药治疗阴道炎826例临床观察
白假丝酵母菌及阴道毛滴虫是引起女性阴道炎并因外阴瘙痒而就医的主要原因.选择一种疗效好,使用方便,又经济实惠的治疗方案很有必要.本文选用生殖道康复治疗仪配合阴道放药治疗阴道炎取得满意的效果,现报告如下.
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白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑耐药性及其与CAP1基因相关性研究
目的 了解白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑的耐药率以及氟康唑耐药与白假丝酵母菌CAP1基因相关性.方法 采用微量稀释法检测了245株白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑的敏感性.采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和流式细胞术分别检测白假丝酵母菌CAP1基因mRNA(CAP1-mRNA)及其表达产物Cap1p.采用氟康唑浓度递增(4～64μg/mL)的YPD培养液连续培养法了解氟康唑诱导白假丝酵母菌耐药性的作用,qRT-PCR和流式细胞术确定CAP1基因与氟康唑耐药性形成的关系.结果 134株白假丝酵母菌对氟康唑敏感(MIC≤8 μg/mL)、36株剂量依赖敏感(16～32 μg/mL)、75株耐药(≥64 μg/mL),耐药率为30.6％(75/245).氟康唑耐药白假丝酵母菌株CAP1-mRNA和Cap1p表达水平均明显高于氟康唑敏感菌株(P＜0.05).氟康唑能诱导氟康唑敏感菌株产生耐药性(MIC≥64 μg/mL),其CAP1-mRNA和Cap1p表达水平也显著升高(P＜0.05).结论 白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑有较高的耐药率.氟康唑能诱导氟康唑敏感白假丝酵母菌株产生耐药性.白假丝酵母菌对氟康唑耐药性与CAP1基因表达上调密切相关.
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妇科白带涂片多功能染色液的应用
由于女性阴道感染情况复杂,阴道分泌物检查需要不断改进方法,以全面、综合判断结果,给临床提供正确的诊断依据,有利于女性阴道炎的的预防和治疗.妇科白带涂片多功能染色液(即BTR)为一种液态双试剂,是利用化学反应分子之间的相互吸附原理:病原体、细胞等含有多种氨基酸,其极性基带有不同的电荷,与带不同电荷的染料亲合,而染成不同的颜色,达到对细胞、病原形态的鉴别作用.本文用BTR染色法检测7698例阴道分泌物,在一定条件下与盐水法作对比,现将检测、对比情况报告如下.
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KZY-2复方制剂对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响
目的:探讨知母等抗真菌中药有效组分复方制剂(KZY-2)的免疫药理作用.方法:(1)采用BALB/c小鼠体内吞噬实验法,设立对照组与试验组,对比观察试验组与对照组小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌标准菌株(ATCC 14053、CCCM C1a)和临床分离菌株(C1-1、C1-2、C1-3、C1-4)的吞噬百分数及吞噬指数.(2)将不同浓度的药物分别注射至小鼠腹腔,观察药物浓度对吞噬细胞吞噬功能的影响.结果:(1)低浓度药物作用结果:①吞噬百分数均值及P值:对ATCC 14053、CCCM C1a 、C1-1、C1-2、C1-3、C1-4依次为:75.1%、P<0.01, 67.9%、P<0.01,54.8%、P<0.05,52.6%、P<0.05, 66.3%、P<0.05; 43.6%、P＞0.05 .②吞噬指数均值及P值:依次为2.03、P<0.01, 1.53、P<0.01;0.873、P＞0.05,0.783、P＞0.05 0.505、P＞0.05,0.356、P＞0.05.(2)高浓度药物作用结果:①吞噬百分数均值及P值:对 ATCC 14053、C1-4依次为:83.21%、P<0.01:66.5%、P<0.05.②吞噬指数均值及P值:对ATCC 14053、C1-4依次为:2.11、P<0.01 ;1.23、P<0.05.结论:KZY-2复方制剂具有明显增强小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬作用,吞噬细胞对实验菌吞噬作用的强弱与药物浓度有关.
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15种中草药对小鼠吞噬细胞吞噬白假丝酵母菌的影响
目的:探讨黄芩等中草药50%乙醇提取物对小鼠中性粒细胞吞噬白假丝酵母菌的影响.方法:采用BALB/c小鼠体内吞噬实验法,设立对照组与试验组，对比观察实验组与对照组小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬百分数及吞噬指数.结果:(1)吞噬百分数均值及P值：黄芩85.1%、P<0.01,牡丹皮87.6%、P<0.01，羌活51.7%、P<0.05,大黄53.8%、P<0.05,千里光66.3%、P<0.05;(2)吞噬指数均值及P值:黄芩2.09、P<0.05,牡丹皮1.523、P<0.05;(3)知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、桑枝、海金沙吞噬百分数及吞噬指数的P值均大于0.05.结论:黄芩、牡丹皮、羌活、大黄、千里光具有增强中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬作用,知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、、桑枝、海金沙对中性粒细胞吞噬作用无明显影响.
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白假丝酵母菌不同菌株荚膜的对比性观察
目的:观察白假丝酵母菌标准菌株(CCCMC1a、ATCC 14053)与临床分离菌株(C1-1、C1-2、 C1-3 、C1-4)于不同条件下荚膜层的厚度变化.方法:(1)将实验菌种沙保氏琼脂36小时培养物用生理盐水配成约含1×109个/ml的菌悬液,家兔耳缘静脉注射,1ml/只,同时用BALB/c小鼠腹腔注射,0.5ml/只;待实验动物发病后解剖动物,分别取家兔肾组织印片及小鼠腹腔液涂片进行Hiss荚膜染色镜检,用显微测微计测量荚膜层的厚度,各菌株随机计数40个酵母细胞的荚膜层的厚度值,取各菌株荚膜层厚度的均值进行比较. (2)实验菌株沙保氏液体培养物与同一菌株的抗血清作荚膜肿胀实验及血清交叉实验,Hiss荚膜染色镜检.荚膜层厚度的测量与计算方法同前.结果:(1)标准菌株与临床分离菌株在家兔及小白鼠体内均可形成荚膜,荚膜层的厚度可因不同菌种(株)和不同环境而有差异(均值在0.25～0.58μm不等;P＜0.01或＜0.05),边界明显.(2)用全菌抗血清作荚膜肿胀实验,可见菌细胞的荚膜明显加宽,且菌株之间可出现交叉阳性.结论:白假丝酵母菌的荚膜厚度可因不同菌种(株)和不同环境而有差异;荚膜肿胀实验显示各菌株除与相应抗血清作用出现荚膜肿胀实验阳性外菌株之间还可出现血清交叉阳性.
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五味子等中草药对肠道致病菌和条件致病菌的抗菌作用
目的:探讨五味子等12种中草药对痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的抗菌作用.方法:(1)药物用50%乙醇浸提,采用琼脂平板扩散法观察抑菌圈的大小;(2)琼脂平板连续稀释法测药物的低抑菌浓度(MIC,mg/ml).结果:(1)对四种实验菌均具有抑菌作用的药物有5种:五味子、五蓓子、黄莲、黄芩、大黄(抑菌圈直径在13～39mm);(2)对三种细菌具有抑菌作用而对白念珠菌(真菌)无抑菌作用的药物有4种:山楂、秦皮、叶下珠、铁苋(抑菌圈直径在12～40mm);(3)只对白念珠菌具有抑菌作用的药物有知母一种;(4)各药对实验菌的MIC差异较大,对三种细菌以五味子的MIC低,为6.25～10.00mg/ml;对白念珠菌则以黄莲的MIC低,为5mg/ml.结论:五味子、五蓓子、黄莲、黄岑、大黄对全部实验菌具有抑菌作用;五味子、五蓓子、山楂等9种中草药对痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌具有抑菌作用;黄莲、知母、五蓓子等6种中草药对白色念珠菌具有抑菌作用;其中对肠道致病菌及绿脓杆菌抑菌作用强的是五味子,抑菌圈大者达40mm,MIC低(6.25～10.00mg/ml);对白念珠菌抑菌作用强的是黄莲,抑菌圈大(32mm),MIC低(5mg/ml).
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具有荚膜的白假丝酵母菌蛋白质组学分析
目的:研究从淋病患者阴道分泌物中分离鉴定的具有荚膜的白假丝酵母菌蛋白质组学特征.方法:采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离从淋病患者阴道分泌物中分离鉴定的具有荚膜的白假丝酵母菌(C14)和无荚膜的白假丝酵母菌(ATCC14053)的菌体蛋白质,用ImageMaster 2D platinum 7.0软件识别差异蛋白点,MALDI-TOF-MS鉴定差异蛋白.结果:C1-4与ATCC14053相比,显著差异表达蛋白点232个,其中180种蛋白表达明显上调,52种蛋白表达明显下调,质谱鉴定了32差异蛋白质点,8个得到鉴定,均在C1-4菌株显著表达.结论:具有荚膜的白假丝酵母菌与无荚膜的白假丝酵母菌菌株相比,蛋白质表达存在明显差异.
关键词： 白假丝酵母菌 荚膜 蛋白质组学 2-DE MALDI-TOF-MS -
白假丝酵母菌荚膜样结构菌株基因型分析
目的:研究白假丝酵母菌荚膜样结构菌株的基因型.方法:采用PCR方法扩增标准菌株(ATCC14053)和自行分离与鉴定的白假丝酵母菌荚膜样结构菌株包含l类内含子的编码rRNA的25S rDNA区基因,根据扩增条带大小进行基因分型,并对大小约为450 bp条带切胶回收测序及利用clustalx 1.83软件对测序结果进行分析.结果:ATCC14053、C1-1、C1-3、C1-4、RC112401、RC112701、RC1 12703均为A型,RC112403为C型.荚膜样结构菌株与标准菌株的基因差别,主要集中在第85 ～ 94位缺少AGGAGCAATC,从性病病人阴道分泌物分离到的白假丝酵母荚膜样结构菌株与从肺结核病人痰液中分到白假丝酵母荚膜样结构菌株也存在一定的差别,主要集中在第148位多了G,第95 ～99位是CACGA(而非TCGGG).结论:临床分离到的白假丝酵母荚膜样结构菌株以A型为主,不同菌株rRNA25S rDNA区包含1类内含子的基因存在差异.
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细菌-酵母共感染对自动血培养系统假丝酵母菌检测的影响
假丝酵母菌血症实际上是医院第四大血液感染[1]。真菌血症对病人的预后有很大影响，病死率较高[2]。血培养阳性是真菌血症的有力证据。白假丝酵母菌是真菌血症的主要感染真菌[3]。许多医院并不常规使用真菌特异的培养基（加入抗生素），这种非特异的血培养会导致无法检验到真菌感染或延迟真菌的检验。如果采用选择性的真菌培养基会解决这一问题。本研究的目的就是估计非特异性培养基中细菌的存在对真菌生长的影响，从而证明真菌特异的培养基对于血培养中真菌检出的作用。
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白细胞介素17 A等细胞因子在复发性外阴阴道假丝酵母菌病发病中的作用
目的:通过检测复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)不同时期IL-17 A等细胞因子的变化,探讨Th17细胞在RVVC发病过程中的作用.方法:选取致病菌为白假丝酵母菌RVVC患者33例、外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者32例以及8例健康对照者,收集不同时期阴道冲洗液.采用液相悬浮芯片技术(luminex)检测IL-10、IL-17 A、IL-22、IL-23和IFN-γ等细胞因子浓度.结果:RVVC组与VVC组发作期阴道冲洗液中IL-17A浓度分别为(79.08±78.80)pg/ml和(68.67±85.67)pg/ml,明显高于对照组[(4.52±3.89)pg/ml],差异均有统计学意义(P<0.01);RVVC组与VVC组比较差异无统计学意义(P>0.05).RVVC组缓解期阴道冲洗液IL-17A浓度为(3.53±2.03)pg/ml,明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.013).RVVC组阴道冲洗液IFN-γ、IL-17 A及IL-23浓度在发作期明显高于缓解期,差异均有统计学意义(P<0.05);RVVC组阴道冲洗液IL-10浓度在发作期明显低于缓解期,差异有统计学意义[(1.58±1.12)pg/ml vs(2.45±0.92)pg/ml,P=0.041].VVC组阴道冲洗液IL-17A浓度在发作期明显高于缓解期,差异有统计学意义(P<0.01).结论:IL-17A在阴道黏膜防御白假丝酵母菌的免疫反应中起非常重要的作用.缓解期阴道局部IL-17 A低水平表达可能引起VVC反复发作.RVVC发作期IL-10没有参与阴道局部的免疫调节反应,可能也是VVC反复发作的原因之一.
关键词： 外阴阴道假丝酵母菌病 白假丝酵母菌 Th17细胞 IL-17A -
Farnesol对白假丝酵母菌细胞生长及活性的干扰作用
目的:评价Farnesol对白假丝酵母菌生长、细胞活性及形态的干扰作用;检测氟康唑、克霉唑、制霉菌素、特比萘酚、卡泊芬净在不同浓度Farnesol条件下对白假丝酵母菌的抗菌活性.方法:通过吸光浊度测定不同浓度组Farnesol对白假丝酵母菌生长作用的影响;采用MTT法检测Farnesol对白假丝酵母菌细胞活性的干扰作用;光镜及电镜扫描观察不同浓度组Farnesol作用下,白假丝酵母菌细胞形态改变;测定不同种类抗真菌药物在不同浓度组Farnesol条件下对白假丝酵母菌的抗菌活性.结果:Farnesol对白假丝酵母菌的生长及细胞活性具有抑制作用.低浓度Farnesol即可抑制假丝酵母菌菌丝的形成,随着Farnesol浓度的升高,菌株以孢子相存在且生长受到抑制;高浓度组Farnesol并不能完全抑制菌株生长.Farnesol对抗真菌药物的抗菌活性具有干扰作用,低浓度Farnesol环境可以改善氟康唑的“拖尾”现象.结论:Farnesol对白假丝酵母菌生长及细胞活性具有浓度依赖性的抑制作用.Farnesol抑制白假丝酵母菌菌丝形成,可干扰抗真菌药物的活性,低浓度改善氟康唑的“拖尾”现象.
关键词： Farnesol 白假丝酵母菌 真菌感染 群体感应信号分子 外阴阴道假丝酵母菌病 -
健康女性阴道乳杆菌抑菌功能的初步研究
目的:研究健康女性阴道乳杆菌对阴道常见致病菌的抑制作用及其机制.方法:选取北京大学第一医院体检中心18 ～45岁的育龄期健康女性17例,从其阴道分泌物中分离、纯化乳杆菌并进行鉴定.采用spot on lawn和双层牛津杯法筛选出对粪肠球菌、微小消化链球菌、大肠埃希菌和白假丝酵母菌有抑制作用的阴道乳杆菌菌株.测定乳杆菌的生长曲线及代谢物内的乳酸含量.将乳杆菌与白假丝酵母菌共培养,观察乳杆菌菌体和菌液粗提物在抑制白假丝酵母菌的过程中各自所起的作用.结果:17例健康女性阴道分泌物中分离出23株乳杆菌,其中6株具有抑菌作用,分别是加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、阴道乳杆菌、卷曲乳杆菌、发酵乳杆菌和德氏乳杆菌,其中加氏乳杆菌增殖能力较强,詹氏乳杆菌弱.6株乳杆菌代谢物内乳酸的含量不同,发酵乳杆菌高为(2.72±0.035) mg/ml,卷曲乳杆菌和德氏乳杆菌较低,分别为(2.14±0.035) mg/ml和(2.13±0.025) mg/ml.加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、阴道乳杆菌的菌液、菌体及菌液粗提物均可以抑制白假丝酵母菌的生长(P≤0.05)；发酵乳杆菌和德氏乳杆菌的菌液和菌体可以抑制白假丝酵母菌的生长(P≤0.05)；卷曲乳杆菌对白假丝酵母菌则无抑制作用.结论:健康女性阴道乳杆菌的多个菌株均具有抑制大肠埃希菌、粪肠球菌、微小消化链球菌或白假丝酵母菌的功能.詹氏乳杆菌粗提物中细菌素类物质和过氧化氢的联合作用可以抑制白假丝酵母菌,加氏乳杆菌和阴道乳杆菌主要依靠过氧化氢起作用.乳杆菌产生的乳酸没有发挥抑菌作用.
