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射频消融治疗肝细胞癌后血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3检测及意义
目的 检测肝细胞癌(HCC)患者射频消融治疗前后血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)的浓度,初步研究其在疗效评价中的临床应用价值.方法 采用酶联免疫吸附法检测59例HCC患者、35例肝硬化患者、30例健康对照组血清中GPC3的表达,其中30例HCC患者经射频消融治疗,对治疗前与治疗后1d、5d、30d血清中GPC3的浓度进行比较.结果 HCC患者血清GPC3浓度明显高于肝硬化患者和健康对照组人群,3组间比较差异有统计学意义(R＜0.01),HCC患者射频消融治疗后不同时间点GPC3含量较治疗前均有显著下降(P＜0.01).结论 血清GPC3含量升高有助于HCC的诊断,特异性较好,与甲胎蛋白表达无显著相关性,射频消融治疗后不同阶段GPC3均有不同程度降低,在疗效评估中有一定临床价值.
关键词： 肝细胞癌 射频消融 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 诊断 -
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝穿刺活检标本中鉴别诊断的意义
目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在肝细胞癌(HCC)等不同肝病组织中的表达情况及其对肝癌早期诊断的意义.方法:采用免疫组织化学方法检测126例肝穿刺活检标本(包括13例极早期HCC、44例早期HCC、16例不典型增生、29例肝硬化和24例肝炎)及57例中晚期HCC手术标本中GPC3和甲胎蛋白(AFP)的表达,28例正常肝组织作对照.结果:GPC3在HCC与其他组织中的表达差异具有统计学意义(P＜0.01).GPC3和AFP对HCC诊断的敏感性分别为80.7%和37.7%,特异性分别为99.4%和93.6%.在极早期和早期肝癌中,GPC3的阳性表达率,显著高于AFP(92.3%vs38.5%:72.7%vs34.1%,均P＜0.05).GPC3在极早期和早期肝癌中的表达均高于高级别不典型增生组(P＜0.01).在肝硬化、肝炎、正常肝组织中均未见GPC3和AFP蛋白表达.GPC3在小肝癌中的阳性率为78.6%,联合AFP可将诊断敏感性提高为85.7%.在血清AFP阴性的小肝癌中GPC3的阳性率高达70%.GPC3阳性表达患者肝癌根治术后1年、2年、3年的复发率明显高于GPC3阴性患者(P＜0.05).结论:GPC3在极早期和早期HCC中具有良好的敏感性和特异性,有望成为新的肝癌早期诊断标志物,肝穿刺活检行GPC3染色是一个有效的肝癌早期鉴别诊断的辅助工具,同时也有助于预测HCC患者的预后.
关键词： 肝细胞癌 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 鉴别诊断 肝穿刺 -
GPC3和AFP联合检测在原发性肝癌诊断中的价值
目的：探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican-3，GPC3）和甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）联合检测在原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）诊断中的价值。方法本研究共纳入PLC患者107例，普通肝病患者49例，其他肿瘤患者45例，健康对照60例，AFP采用微粒子化学发光法，用美国雅培ARCHITECT i2000SR全自动化学发光仪进行定量检测；GPC3采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）进行定量检测。结果 PLC组血清GPC3水平均显著高于普通肝病组、其他肿瘤组和健康对照组，差异有统计学意义（P =0.00）；GPC3、AFP及二者联合检测对诊断PLC的灵敏度分别为58.88%、62.62%、91.59%，其受试者工作特征曲线（ROC曲线）下面积（AUC）分别为0.71、0.73、0.92。结论 GPC3和AFP联合检测能提高PLC诊断的灵敏度和诊断价值。
关键词： 原发性肝癌 甲胎蛋白 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 诊断价值 -
肝癌组织、外周血细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA表达的意义
目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)mRNA表达对肝细胞肝癌(HCC)及其血液微转移的诊断价值.方法参照甲胎蛋白(AFP) mRNA,半定量与巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例HCC、41例癌旁组织、52例非瘤肝组织(41例远离癌灶组织与11例正常肝组织)及67例外周血的GPC3表达.结果半定量PCR显示组织与外周血细胞全部存在GPC3 mRNA表达,HCC、癌旁、非瘤肝组织的表达量分别为78.9±35.5、30.6±21.6、23.8±15.5;而AFP mRNA的表达量依次为61.2±32.6、31.5±23.6、21.2±15.9.各基因在HCC与其他组织中的表达量差异具有统计学意义(P<0.01),以各基因在非瘤肝的相对表达量上限(+1.96s)为界,HCC中GPC3 mRNA和AFP mRNA的高表达分别占80.5%与63.4%;至少一个基因高表达HCC达总数的92.7%,与AFP mRNA单独检测差异有统计学意义(P<0.01).临床病理特征分析发现AFP mRNA与HCC分级及血清AFP浓度有关,GPC3 mRNA表达与HCC分级及侵袭性有关.67例外周血GPC3 mRNA的表达量为15.9±9.0,各类组织中GPC3 mRNA表达均强于相应的外周血表达(P<0.01).外周血GPC3 mRNA表达量在HCC组、非HCC组分别为16.1±8.3、15.6±10.2,组间差异无统计学意义;在HCC转移组、HCC无转移组的表达量各为16.0±9.0、16.3±7.7,组间差异无统计学意义.巢式PCR显示,AFP mRNA表达比率在HCC组与非HCC组各为56.1%、23.1%,组间差异有统计学意义(P=0.011);HCC转移组与无明显转移组各为80.9%、30.0%,组间差异有统计学意义(P=0.002).结论GPC3 mRNA是潜在的HCC组织诊断指标,与AFP mRNA有明显的互补作用,两者联合检测可提高HCC的阳性检出率;外周血存在GPC3 mRNA的广泛表达,但其与HCC的转移复发无关,不能用于HCC微转移的检测.
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血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌中的表达及其与临床病理因素的相关性
目的 初步探讨肝细胞癌(HCC)患者血清和组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在HCC诊断中的临床应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和免疫组织化学染色法检测79例HCC患者血清和组织中GPC3表达水平,并与35例肝炎后肝硬化患者和30例健康体检者GPC3含量检测结果进行比较,采用Logistic回归模型对HCC患者GPC3表达水平与影响因素进行分析.结果 HCC组患者血清GPC3水平[(143.02±40.26) μg/L]明显高于肝硬化患者组[(6.15±4.31) μg/L]和健康对照组[(4.47±3.22)μg/L],三组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.01)；GPC3阳性表达水平在HCC组织高于癌旁和远癌肝组织；GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及甲胎蛋白(AFP)水平无明显相关性；与临床分期(x2 =4.250,P＜0.05)及肿瘤有无远处转移(x2=13.182,P＜ 0.001)关系密切.结论 GPC3检测对于HCC的诊断具有较好的特异性,联合血清AFP更有利于提高HCC诊断的敏感性,可作为HCC患者诊断及预后评估的标志物.
关键词： 癌 肝细胞 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 诊断 -
甲胎蛋白异质体3、高尔基体蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌诊断中的价值
目的 探讨血清肿瘤标志物甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、高尔基体蛋白73(GP73)和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值.方法 采用酶联免疫吸附法检测34例原发性肝癌患者血清AFP-L3、GP73、GPC-3的表达水平,同期选择20例门诊健康体检者作为对照组.采用软件绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC),并对各指标表达情况进行比较分析.结果 原发性肝癌组AFP-L3、GP73、GPC-3表达水平均高于健康对照组[(1890.13±506.47)ng/L比 (623.40 ±317.89)ng/L,(219.53±136.33)ng/ml比 (56.40±25.63) ng/ml,(14.28±7.15)μg/L比(7.33±3.71)μg/L](均P＜ 0.01).三项标志物单项检测原发性肝癌的AUC分别为0.909、0.832、0.817,AFP-L3+GP73为0.935、AFP-L3+GPC-3为0.945、GP73+GPC-3为0.912,三项指标联合AUC可高达0.960.结论 AFP-L3、GP73和GPC-3联合检测可提高原发性肝癌的检出率,对原发性肝癌的早期诊断具有重要的临床意义.
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融合蛋白人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原核细胞中的表达
目的：构建人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican3, GPC3）重组原核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因产物，与pMD-18 simple T 载体进行连接构建出T克隆载体；从T载体上获取基因片段，并对pET-32a（+）空载体进行双酶切，用T4连接酶连接，构建出pET-32a（+）-GPC3原核表达载体；对构建好的载体再次测序，并进行诱导表达。结果 PCR产物长度为837 bp，即扩增的GPC3 C末端长度，与NCBI网站的相比较，序列完全一致，说明pET-32a （+）载体中正确插入了目的片段，并且诱导表达出蛋白。结论成功构建了融合表达Pet-GPC3载体，蛋白诱导表达成功。
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 基因表达 融合蛋白 -
GPC3特异性HLA-A11限制的T淋巴细胞表位肽免疫活性检测
目的：设计合成人类白细胞抗原（HLA）-A11限制性T细胞识别的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）多肽，并检测其免疫原性和反应性。方法利用BIMAS 和SYFPEITHI评分系统评价GPC3多肽与HLA-A11分子的结合能力，预测出相应的抗原谱，合成HLA-A1101限制性GPC3多肽库；流式细胞仪检测HCC患者HLA-A11分子的表达；多肽刺激外周血淋巴细胞，酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测T细胞对GPC3多肽的反应性。结果流式细胞仪检测32例HCC患者，7例HLA-A11分子表达阳性（21.9%）；ELISPOT检测发现17例（53.1%）HCC患者的T细胞应答阳性，7例（21.9%）HLA-A11表型检测阳性的 HCC患者，T细胞应答结果成强阳性。HLA-A11限制性GPC3多肽应答率符合人群中相应基因位点的自然表达率。结论 GPC3多肽设计合理，具有良好的免疫原性和反应性。
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 人类白细胞抗原 T淋巴细胞 表位肽 -
Glypican-3与肝癌关系的研究进展
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3是硫酸乙酰肝素糖蛋白家族中的一员,它参与调控细胞增殖、分化、黏附和迁移等过程.研究表明,它在肝癌组织中特异性高表达,与肝癌的发生相关,且在肝癌的诊断方面具有较高的敏感性,有望成为肝癌诊断新的肿瘤标志物.现就磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的结构特点、与肝癌发生及其在肝癌临床诊断和治疗中的作用做一综述.
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 肝癌 诊断 -
热休克蛋白27与磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义
目的 通过检测热休克蛋白27(HSP27),磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在原发性肝癌中的表达,探讨两者在诊断原发性肝癌及临床病理特征的意义.方法 采用免疫组织化学染色SP法检测重庆市巴南区人民医院32例手术切除的原发性肝癌组织、30例肝硬化组织、25例肝脏良性占位组织及31例肝炎组织中GPC3、HSP27的表达,并分析其与原发性肝癌临床因素之间的关系.结果 HSP27其在肝癌组织中高表达阳性率为56.25％(18/32),GPC3在肝癌中的阳性率为87.50％,HSP27和GPC3均在肝癌组织中高表达,与肝硬化、肝脏良性占位、肝炎组织中的表达水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).HSP27在肝癌组织的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期有关,但GPC3的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期无关.结论 HSP27、GPC3在肝癌组织中高表达,与肝癌的发生、发展、转移有密切联系,可能成为新的肿瘤标志物.
关键词： 热休克蛋白 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 原发性肝癌 免疫组织化学 -
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在人大肠癌组织中的表达
目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3)在大肠癌组织及癌旁组织中的表达、分布及意义.方法 采用免疫组化方法检测Glypican-3在200例大肠癌及其癌旁组织中的表达,分析其表达的意义.结果 大肠癌中Glypican-3阳性率为66.0%(132/200),明显高于癌旁组织[24.0%(48/200)],差异有统计学意义(P=0.019).Glypican-3的表达与大肠癌组织浆膜浸润、淋巴结转移有相关性(P=0.015).结论 Glypican-3在人大肠癌中表达增加,与大肠癌的浸润、淋巴结转移相关.
关键词： 肠肿瘤 免疫组织化学 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 -
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞肝癌中的表达及意义
目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在肝细胞肝癌中的表达及临床意义.方法:利用免疫组织化学方法检测60例肝细胞肝癌及癌旁组织中GPC3及AFP的表达,评价GPC3在肝细胞肝癌诊断中的意义,并分析其乌肿瘤临床病理特征的关系.结果:GPC3在肝细胞肝癌组织中高表达[75%(45/60)],明显高于AFP表达[35%(21/60)](P<0.005);而在距肿瘤不同距离的癌旁组织中未见表达.CPC3主要表达在肝癌细胞的细胞浆和细胞膜.根据阳性细胞比例及染色强弱,其表达模式可分为弥漫强阳性表达(27例)、弥漫弱阳性表达(8例)、局灶强阳性表达(2例)和局灶弱阳性表达(8例).统计学分析表明GPC3在肝细胞肝癌组织中的表达与患者性别、年龄、血清AFP值、HBsAg定性、是否合并肝硬化及肿瘤大小、生长方式、分级、分期等临床病理特征无关.结论:GPC3更特异地广泛存在于肝细胞肝癌组织中,对比AFP的免疫组化结果,GPC3对肝细胞肝癌有更显著的敏感性及特异性,可能成为新的肝癌病理诊断标志物.
关键词： 肝细胞肝癌 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 免疫组织化学 -
癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体的制备及应用
目的：制备抗癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）单克隆抗体，并初步应用。方法利用PCR方法，将GPC3基因重组到原核表达载体pET16b中，在大肠杆菌中表达，纯化后的GPC3融合蛋白对Balb/c小鼠脾内包埋免疫，取小鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合，应用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）和Western blot法筛选及鉴定分泌特异性抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光检测肝癌细胞中GPC3表达。结果成功构建了GPC3原核表达载体，在大肠杆菌中的诱导表达重组GPC3蛋白。应用单克隆抗体杂交瘤技术成功制备1株稳定分泌抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，通过Western blot鉴定具有高度的特异性，间接免疫荧光实验显示单克隆抗体能与HepG2细胞内GPC3特异性结合。结论成功制备出特异性抗人GPC3单克隆抗体。
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类 抗体 单克隆 重组融合蛋白质类 杂交瘤 细胞系 癌 肝细胞 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 单克隆抗体 -
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3与甲胎蛋白异质体在原发性肝癌中的表达及诊断意义
目的 探讨甲胎蛋白异质体(AFP-L3)和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)联合检测对诊断原发性肝癌(PHC)的意义.方法 收集确诊的PHC患者100例(PHC组),肝硬化患者50例(肝硬化组),正常对照50例(对照组).用酶联免疫法分别测出AFP-L3、GPC3的浓度,用放射免疫法测出AFP的浓度,分别按照检测项目统计分析.结果 PHC组与肝硬化组和对照组比较,GPC3和AFP的检测值差异有统计学意义(P<0.01).肝硬化组与对照组比较,GPC3、AFP的检测值差异有统计学意义(P<0.01).PHC组的AFP-L3阳性率明显高于肝硬化组和正常对照组(χ2=65.147、88.043,P<0.01);肝硬化组阳性率与正常对照组差异有统计学意义(χ2=4.432,P<0.05).PHC组GPC3阳性率明显高于肝硬化组和对照组(χ2=88.500、100.780,P<0.01);肝硬化组阳性率与对照组差异无统计学意义(χ2=2.3437,P>0.05).AFP-L3、GPC3两者联合检测时,诊断PCH的敏感度为97.0%(97/100),特异度为90.0%(90/100),准确度为93.5%(187/200),优于任何单项检测的敏感度和准确度.结论 AFP-L3和GPC3联合检测优势互补,从而提高PHC诊断的敏感度、特异度和准确度.
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肝细胞癌中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、热休克蛋白和谷氨酰胺合成酶的表达及其临床意义
目的：探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）、热休克蛋白70（HSP70）和谷氨酰胺合成酶（GS）在肝细胞癌中的表达及临床意义。方法运用组织芯片技术，通过免疫组织化学Envision法检测182例肝细胞癌和92例癌旁肝组织中GPC3、HSP70和GS的表达情况，并结合临床病理因素进行分析。结果 GPC3、HSP70和GS在肝细胞癌中表达均明显高于癌旁肝组织（P＜0．05），GPC3表达与肝细胞癌分化程度、脉管内瘤栓、TNM分期与转移显著相关（ P＜0．05）；HSP70和GS表达与肝细胞癌TNM分期、转移和术后复发显著相关（ P＜0．05）。结论 GPC3、HSP70和 GS在肝细胞癌的发生、发展中起着不同程度的作用。联合检测GPC3、HSP70和GS可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。
关键词： 肝细胞癌 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 热休克蛋白70 谷氨酰胺合成酶 -
C-GPC3蛋白的表达及人源GPC3抗体的筛选
目的 构建C-磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)基因真核表达质粒,表达C-GPC3蛋白,并通过哺乳动物展示型全人源scFv抗体库筛选GPC3抗体.方法 通过PCR从含有全长GPC3的质粒中扩增C-GPC3基因,将其克隆至p3457-his载体中,构建重组真核表达质粒p3457-C-GPC3,转染293T细胞,对C-GPC3蛋白的表达进行Westem blot鉴定.将质粒p3457-C-GPC3瞬时转染293E细胞,获得C-GPC3蛋白,采用Ni亲和柱纯化后,进行FITC标记.以本课题组构建的哺乳动物展示型全人源scFv抗体库为起始文库,FITC-C-GPC3抗原按照10、2和0.8 nmol/L的浓度梯度,通过流式细胞术进行分选,获得荧光强度强、比例约为0.1％的阳性细胞.结果 重组表达质粒p3457-C-GPC3经菌液PCR和测序鉴定证明构建正确;瞬时转染293T和293E细胞均可表达相对分子质量约为25 000的C-GPC3蛋白;获得了可与C-GPC3结合的阳性率约为0.1％的阳性细胞.结论 成功构建了重组真核表达质粒p3457-C-GPC3,并从哺乳动物展示型全人源scFv抗体库中筛选出了阳性细胞,为后期全人源GPC3抗体的构建和表达奠定了基础.
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 C-末端 293E细胞 哺乳动物展示型抗体库 ScFv 流式细胞术 分选 -
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3基因与肝癌关系的研究进展
原发性肝癌(PHC)是目前世界上常见的恶性肿瘤之一.肝癌的发生是由化学致癌物、病毒、遗传等多病因作用引起的.其恶性程度高,预后差,进展较快.早期诊断、治疗对肝癌患者的预后至关重要,目前临床诊断主要依靠影像学检查及肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP).但AFP的敏感性和特异性均不高.近年来,一种新的肝癌肿瘤学标志物磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)成为不少国内外学者研究热点,其在肝癌中无论mRNA水平还是蛋白质水平均为高表达,GPC3对PHC的诊断具有较高的敏感性和特异性,其在AFP阴性的肝癌中亦有表达.
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 肿瘤标志物 基因治疗 -
AFU,AFP,GP73和GPC3联合检测对原发性肝癌的诊断价值
目的:研究α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、甲种胎儿球蛋白(AFP)、高尔基体蛋白73(GP73)和磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)联合检测对原发性肝癌的诊断价值.方法:选择2014年1月～2016年5月在我院进行诊治的原发性肝癌患者90例为肝癌组,同期住院诊治的肝硬化患者60例为肝硬化组,以及同期在我院体检健康者60例为对照组.比较三组的AFU、AFP、GP73和GPC3水平和阳性检出率,并观察AFU、AFP、GP73和GPC3单独检测和联合检测对原发性肝癌的诊断效率.结果:肝癌组和肝硬化组的AFU、AFP、GP73和GPC3水平均明显高于对照组(P＜0.05),且肝癌组明显高于肝硬化组(P＜0.05);肝癌组和肝硬化组的AFU、AFP、GP73和GPC3阳性率均明显高于对照组(P＜0.05),且肝癌组明显高于肝硬化组(P＜0.05);AFU、AFP、GP73和GPC3联合检测对原发性肝癌的特异性、敏感性、阳性预测值及阴性预测值均明显高于单独检测和三项指标联合检测(P＜0.05).结论:AFU、AFP、GP73和GPC3联合检测可以提高对原发性肝癌的检出率,具有较高的临床应用价值.
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血清AFP、GP73和GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的应用
目的 探讨甲胎蛋白(AFP)、高尔基体蛋白73(GP73)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)联合检测在原发性肝癌(PHC)诊断中的临床应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测148例PHC患者、73例肝硬化(LC)患者、57例慢性乙型肝炎(CHB)患者及85名健康人(正常对照组)血清GP73、GPC3含量,同时采用免疫化学发光法检测血清AFP含量,并对检测结果进行比较.结果 PHC组GP73、GPC3、AFP血清水平分别为346.9±208.7、143.1 ±66.9和(690.3±402.5)μg/L,与LC组、CHB组和正常对照组血清水平比较差异具有统计学意义(P均＜0.01);血清AFP、GP73、GPC3联合检测诊断PHC的敏感性为95.9％,准确性为89.2％.结论 血清AFP、GP73、GPC3联合应用能弥补单项肿瘤标志物临床应用的不足,对提高PHC的阳性检出率及鉴别诊断具有重要的临床意义.
关键词： 甲胎蛋白 高尔基体蛋白73 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 联合检测 原发性肝癌 -
血清glypican3ELISA检测法的建立及初步应用
目的 建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值.方法 以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法.对建立的方法进行线性范围、灵敏度、精密度、回收率等方法学评价,并用于测定原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及体检健康者血清标本.结果 该法线性范围为0.2～12.5 μg/L,灵敏度为0.101μg/L,批内CV≤5.99%,批间CV≤6.96%,平均回收率为99.9%.原发性肝癌患者血清GPC3浓度5.43(2.28～8.62)μg/L明显高于肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及健康对照组(P均＜0.05).以3.19μg/L为临界值时,诊断肝癌的敏感性和特异性分别为85.4%及98.9%.结论 该法灵敏、特异和准确,可用于原发性肝癌的诊断.
关键词： 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 ELISA法 原发性肝癌
