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神经匀浆激活的巨噬细胞条件培养基对鸡胚背根节神经突起生长的影响
为探讨巨噬细胞在神经再生中的作用机制,本研究用溃变的神经匀浆激活巨噬细胞,将该巨噬细胞条件培养基作用于神经细胞,以观察溃变神经能否激活和诱导巨噬细胞参与神经再生.切取预溃变1d的大鼠自体坐骨神经并放入无血清DME/F12培养基中磨成匀浆,然后注回大鼠腹腔.
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心脏恶液质瓣膜病人围术期营养治疗
近年我科对29例心脏恶液质瓣膜病人进行围术期营养治疗并取得较好效果，报告如下。资料与方法本组29例。男8例，女21例。年龄20～65岁，身高145～176(158.46±10.25)cm，体重30～55(40.83±8.15)kg；心功能Ⅲ级7例，Ⅳ级22例；均接受瓣膜置换术。营养治疗方法：匀浆饮食由本院营养科配制，以优质蛋白、淀粉、蔗糖、胡萝卜等为主，每1 000 ml可供蛋白质41.8 g，热能1 011 Kcal，氮热比值1∶158.8。20%乳化脂肪由华瑞制药厂生产，每500 ml提供1 000 Kcal。
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异丙肾上腺素预适应诱导热休克蛋白72改善兔心保存
缺血预适应的心肌保护作用已在众多动物实验，甚至临床试验中得到证实〔1〕，但将其应用于长期供心保存方面的报道还甚少。我们利用异丙肾上腺素制造预适应模型，观察其对长期供心的保存效果，现报道如下。 材料与方法 1.实验模型：20只健康成年新西兰白兔，随机分为对照组和实验组，每组10只。实验组用异丙肾上腺素(上海市天丰药厂)1 mg/kg，耳缘静脉缓慢静脉推注，自然恢复24 h后，采用改良Langendorff离体兔心灌注模型，工作心稳定15 min后测各项血流动力学指标；心脏停跳，4℃保存6 h后放入Langendorff装置上复跳，工作心稳定15 min后再记录各项血流动力学指标。 2.观察指标：保存前、后工作心记录期末心率(HR)、冠状动脉流量(CF)、左室收缩末期压(LVESP)、左室舒张末期压(LVEDP)，计算心功能恢复率。取心尖前壁心肌0.5 g，加1.5 ml 生理盐水匀浆，取0.5 ml匀浆测定心肌酶学及一氧化氮（NO)，剩余1 ml匀浆多次离心后取10 μl点滴NCM膜。干燥好的NCM膜经50 nmol/L左旋咪唑处理5 min后，依次加一抗［抗热休克蛋白72(HSP72)单克隆抗体(美国Grace公司，1∶500］、二抗［兔抗鼠IgG－碱性磷酸酶复合物、四唑盐(NBT)/5-溴-4-氯3-吲哚磷酸(BCIP)］底物显色至适当反应深度后水冲终止。岛津薄层扫描仪（波长560 nm）对斑点印迹信号进行扫描，行HSP72定量。取适量左室前壁心肌，常规石蜡包埋，切片，免疫组织化学方法显色、摄片，行HSP72定位。利用荧光分析法测定NO含量；测定心肌组织肌酸激酶同功酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH ）、脂质过氧化物（LPO）、超氧化物歧化酶（SOD）含量；测定心肌含水量。
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老兵新传的肿瘤免疫治疗
所谓免疫治疗乃是激活人体的免疫系统,以自身的保护机制消灭肿瘤细胞,从其作用机制人们不难想象该法优于现行的外科、化疗、放疗三大治疗方法,是一既不伤身又能杀敌的理想治疗方法.记得在上世纪60年代末,我刚投身于肿瘤领域时就热衷于瘤苗疗法,将患者自身的瘤组织在体外打成匀浆,试用各种不同方法将其异化后再注入人体,祈能激活自身的免疫系统.
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纳米悬浮液作为颗粒性药物制剂在治疗中的应用及未来展望
许多情况下,在水溶性和脂溶性介质中溶解度都较差的药物,无法用传统的方法来克服这些溶解性因素及其引起生物利用度方面的问题.药物纳米粒子(纳米悬浮液)的制备可以作为克服这些问题的一种可供选择的方法.这一技术的主要优点在于它对大多数药物的一般适用性和操作简单.本文描述了实验室中制备的纳米粒子产品,还讨论了诸如增加饱和溶解度和溶出速率,以及一些突出的特殊用途.例如,口腔给药的粘膜粘附性纳米悬浮液和用于脑部特殊部位给药的经表面修饰的药物纳米粒.大规模生产的可能性还有待于进一步讨论.
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束缚应激免疫抑制蛋白单克隆抗体的研制
我室以前的研究发现,在束缚应激大鼠和小鼠血清中能产生1种抑制正常淋巴细胞转化的大分子蛋白质,相对分子质量为1.55×105和3.70×105,并且证明该蛋白的生成受中枢神经系统的调控[1].随后又发现应激大鼠外周淋巴组织(脾和淋巴结)匀浆提取物亦可抑制淋巴细胞转化,进一步的研究表明这种抑制物的生化特性和相对分子质量与血清中的应激免疫抑制蛋白相类似,并证明血中应激免疫抑制蛋白来源于外周淋巴组织[2].上述结果是我室首先发现并已在国内外报道.本文利用部分纯化的应激免疫抑制蛋白作抗原,制备出抗应激免疫抑制蛋白的单克隆抗体,并利用此单抗从另一侧面证实血清中应激免疫抑制蛋白与淋巴组织产生的抑制蛋白是同一物质.
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新鲜益母草制剂的研究
在"新鲜益母草制剂的研究"这一课题的研究过程中,通过对不同生长期益母草的药效学试验比较及其总生物碱含量的变化进行测定,选用总生物碱含量高的新鲜花前期益母草为原料,经匀浆、取汁、喷雾干燥、套胶囊,制得具有活血调经、祛瘀生新功效的中药新药"益母草胶囊".
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甲硝唑诺氟沙星栓微生物限度检查方法研究
目的:建立甲硝唑诺氟沙星栓微生物限度检查方法.方法:以含1%吐温-80的pH=7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液为溶剂,用匀浆法制备供试品溶液,采用薄膜过滤并在培养基中加入中和剂的方法,来进行细菌数的检测和控制菌检查.霉菌及酵母菌数的测定,可采用培养基稀释法.结果:可以有效地去除甲硝唑诺氟沙星栓的抗菌成分,5种阳性菌的回收率均达到70%,符合<中国药典>2005年版的要求.结论:所建立的方法适用于甲硝唑诺氟沙星栓的微生物限度检查.
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颅脑损伤病人鼻饲并发症的预防及护理
颅脑损伤后病人呈高代谢、高分解状态,能量消耗急增,尤其是蛋白质高分解代谢,使病人处于负氮平衡,增加颅脑损伤的病死率和病残率,而胃肠外营养往往不能满足此时的能量高消耗,所以应以胃肠内营养为主要营养方式.临床应用多的是鼻胃管插管,适用于要素饮食、匀浆饮食、混合奶的胃肠内营养支持.此类病人病情均严重,因此,由鼻饲引起的各种潜在并发症也不容忽视,护士应掌握科学的鼻饲方法,预防鼻饲并发症的发生.
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鲜鹿茸全成分口腔崩解片制备工艺研究
目的 考察影响冻干法制备鲜鹿茸全成分口腔崩解片的关键工艺因素,确定佳制备工艺.方法 以冻干赋形技术制备鲜鹿茸全成分口腔崩解片,采用单因素试验法,以促细胞增殖活性、含水量、崩解时间和外观性状为考察指标,研究关键工艺参数,确定佳处方及制备工艺.结果 优选出的佳制备工艺条件:鲜鹿茸冻存温度-40℃,以醋酸缓冲液为稀释液,按1∶2的比例与鲜鹿茸细粉混匀,10％海藻糖为冻干保护剂,低温匀浆时间为10 min,匀浆分装后按优选工艺进行真空冷冻干燥制备鲜鹿茸全成分口腔崩解片,所得口腔崩解片能在30 s完全崩解,含水量低于5％,促细胞增殖活性与鲜鹿茸无差异.结论 制备的鲜鹿茸全成分口腔崩解片具有生物活性高、服用方便的优点,佳制备工艺稳定可行,适合工业化生产.
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老年鼻胃管饲患者每次鼻饲量及间隔时间的研究进展
鼻饲是指不能经口进食或失去自己进食能力,却还有胃肠消化功能的患者的一种重要进食途径[1].根据胃肠道插管的途径,可分为鼻胃管、口胃管、胃肠管或肠管、空肠造瘘[2].目前,临床应用多的是鼻胃管插管,适用于要素饮食、匀浆饮食、混合奶的肠内营养支持[3].国内护理学者对鼻饲护理技术进行了大量研究,对老年人的鼻饲量及间隔时间的研究相对较少.随着我国进入老龄化社会,由于各种原因造成不能经口进食必须由鼻胃管饲供给营养的老年人亦越来越多[4]本文拟围绕老年患者鼻饲量及间隔时间的研究进展作一综述.
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搅拌机在鼻饲饮食制作中的应用
脑外科昏迷病人多,通常留置胃管鼻饲流质以增强营养,由于鼻饲饮食一般需要无渣的液状食物才能通过胃管注入.因此,鼻饲饮食的制作对食物的限制很大,如剁碎的瘦肉煮熟时会结成团,不能注入胃管;青菜煮的时间长会丧失维生素;另外,要把生米煮成液体状要花很长的时间,而且难度较大.2005年以来,指导病人家属使用搅拌机来制作鼻饲饮食(匀浆),取得了很好的效果.
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胚胎源脊髓组织诱导骨髓间质干细胞向神经元样细胞的分化
背景:研究发现骨髓间质干细胞在体外专门的诱导体系中能产生类似神经元烯醇化酶克隆球样神经球结构,故骨髓间质干细胞成为中枢神经损伤修复种子细胞的热门候选.目的:观察体外分化体系诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的情况.设计:观察性实验.单位:深圳市第二人民医院脊柱外科.材料:选用孕16 d及2月龄的SD大鼠,由华中科大同济医学院动物中心提供.神经元烯醇化酶单抗、胶质纤维酸性蛋白多抗、神经中丝蛋白单抗均购自武汉博士德公司.方法:实验于2006-09在华中科技大学同济医学院基础医学部免疫室开放实验室及本院中心实验室完成.取大鼠下肢骨,离心分离鼠骨髓间质干细胞.提取孕16 d大鼠胚胎脊髓组织匀浆,制备诱导液,诱导骨髓间质干细胞的分化.另取胚胎肌组织同法制备肌组织匀浆作对照.主要观察指标:对诱导后骨髓间质干细胞进行形态学观察及用抗神经元烯醇化酶、NF200、抗胶质纤维酸性蛋白分别标记神经元,星形胶质细胞.反应阳性诱导细胞免疫组化染色后光镜下随机数取10个非重叠视野进行观察,计算神经元烯醇化酶和神经中丝蛋白阳性细胞占总细胞数的比例.结果:①大鼠骨髓间质干细胞在诱导后细胞形态变化:诱导早期光镜下即见部分细胞胞体回缩,突起变长,变细;逐渐出现分化细胞突起生长,并相互交织,类似神经细胞,有的分支类似树突状分枝,对照组细胞形态变化不大.②诱导1周后,骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化相关抗原表达情况:脊髓匀浆组多数细胞表现为神经元烯醇化酶和神经中丝蛋白阳性;少数细胞表达胶质纤维酸性蛋白,对照组无神经细胞抗体阳性染色出现.而对照组未见神经细胞抗原反应阳性.免疫组化发现分化细胞神经元烯醇化酶、神经中丝蛋白表达阳性率分别为(68±1.7)%,(76.2±2.9)%.结论:胚胎脊髓组织匀浆可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞.
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管饲匀浆对脑外伤并使用呼吸机患者的营养支持治疗
Background: Human depend on breathing and nourishment while maintaining their life .Patients with brain trauma are sustained breath by ventilator, gain time for treatment. But it is not think much of a balanced diet providing nutrition for sick body.
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马铃薯匀浆治疗静脉输液外渗的疗效观察
目的 探讨马铃薯匀浆治疗静脉输液外渗的疗效.方法 共有320例患者入组,按随机方法分组,将输液外渗患者分为马铃薯匀浆组(A组)102例、马铃薯薄片组(B组)106例和硫酸镁对照组(C组)112例,各组分别采用马铃薯匀浆、马铃薯薄片和33％硫酸镁外敷,比较各组的疗效.结果 A组总体疗效优于B组和C组,B组优于C组.A组治愈的时间明显少于B组和C组,B组少于C组.结论 马铃薯外敷治疗输液外渗性损伤优于硫酸镁外敷,马铃薯匀浆优于简单的马铃薯薄片外敷,可以明显缩短治愈时间.
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匀浆法提取锦灯笼中木犀草苷工艺研究
目的:研究影响锦灯笼匀浆提取工艺研究的因素并确定佳提取工艺.方法:以木犀草苷的含量为评价指标,研究了提取次数、提取时间、固液比等不同影响因子对提取效果的影响,确定匀浆提取适宜条件.结果:优化的提取条件以液固比(mL∶g)为15∶1加入体积分数为80％的乙醇,匀浆3min,提取2次.结论:匀浆提取比其他常规提取方法操作简单,省去了对物料进行烘干、粉碎的步骤,并使物料破碎和有效成分的提取同步进行,是一种对植物有效成分提取速度快、强度高的方法.
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颅脑损伤昏迷病人鼻饲并发症的预防与护理
颅脑损伤昏迷病人伤后呈高代谢、高分解状态,能量消耗急增,尤其是蛋白质高分解代谢,使病人处于负氮平衡,增加颅脑损伤的病死率和病残率,胃肠外营养往往不能满足颅脑损伤后的能量高消耗.所以,主张胃肠内营养为主要营养方式.临床应用多的是鼻胃管插管,适用于要素饮食、匀浆饮食、混合奶的胃肠内营养支持,此类病人病情均很严重.因此,由胃肠内营养引起的各种潜在的并发症也不应忽视.回顾性分析我科自1999年至2002年共14例重型颅脑损伤病人,总结其鼻饲情况报告如下:
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鲜地龙外敷抑制瘢痕形成的实验研究
1 实验材料 动物:日本大耳白兔24只,4月龄,雌雄各半,体重2.0～2.5kg左右,由佳木斯大学实验动物中心提供.药品:积雪草甙霜软膏由上海现代制药股份有限公司生产,批号061004.鲜地龙原液制备:取鲜地龙,吐泥,洗净泥沙,匀浆致细胞破碎(显微镜下判断),放置24小时,离心,取上清液即为鲜地龙原液.
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匀浆法提取狼牙刺中氧化苦参碱的工艺研究
目的:探索狼牙刺中氧化苦参碱的佳提取工艺.方法:以狼牙刺为原料,采用匀浆法提取氧化苦参碱的工艺,并对超声提取、索氏提取、渗漉法提取法进行比较.结果:确定匀浆法提取的佳工艺条件为提取溶剂为体积分数75％的乙醇,匀浆时间为9 min,固液料液比30∶1.在此工艺条件下,氧化苦参碱的提取率为2.23％,提取率高于超声提取、索氏提取、渗漉法提取,且提取温度低、时间短.结论:匀装提取具有明显的高提取率、短耗时、低温等方面的优势,是一种高效提取氧化苦参碱的方法.
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一种快速、经济提取外周凝血基因组DNA方法的建立
目的:建立一种经济、快速且高质量提取人体外周凝血DNA的方法.方法:摸索佳的匀浆条件,对外周凝血块进行匀浆,采用KI法对匀浆液进行基因组DNA的提取,通过凝胶电泳、单重PCR和多重PCR检测凝血基因组DNA的提取产量和质量,并分别与常规的凝血基因组DNA提取方法,即蛋白酶K消化法,以及提取抗凝血基因组DNA的KI法进行比较分析.结果:佳的匀浆条件为:39000 rmp,15秒.在此条件下提取的基因组DNA完整性好,纯度和产量与蛋白酶K消化法提取凝血DNA和KI法提取抗凝血DNA的结果相比,没有统计学差异.单重PCR和多重PCR也获得了理想的扩增结果.结论:与常规的外周凝血提取方法相比(蛋白酶K消化法),本方法节省了时间和成本,能快速、经济、有效地提取外周凝血基因组DNA,可用于后续的科研和临床诊断需要,解决了部分科研机构血液基因组DNA的样本来源问题.
