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用猴的类DPB基因诱导的PCR指纹图对HLA-DP基因快速相容性测定
目的将PCR指纹图用于个体间HLA-DP的基因水平交叉配型,确定供-受体间DPB基因的相容性。方法引入猴的类DPB等位基因的扩增产物作通用性异源双链生成物(UHG),使原不能产生PCR指纹图的DPB基因扩增产物在非变性PAGE中显示特定的“卫星条带”,从而可用于供-受体间HLA-DP基因的相容性测定。结果 11株HLA纯合的B淋巴细胞系和随机个体进行PCR-DPB指纹图及交叉配型分析,能敏感地反映个体间DP基因的差异,特别是在纯合子DPB*0201和杂合子DPB*0402/0501中初步发现了可能存在着未能被PCR-RFLP区分的新的亚型或新的等位基因,但是尚不能区分DPB*0201和DPB*0402两个等位基因,有待今后进一步探索。结论初步表明该技术可有效判别供-受体DPB基因匹配性,并有简单、快速等优点。
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血清蛋白质指纹图谱模型在胃腺癌诊断中的应用
为探讨胃腺癌早期诊断方法,我们采用本院近引进的蛋白质指纹图谱仪,表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI),用于检测早期胃腺癌,经对临床检测33例胃腺癌患者,其病理分级为Ⅰ级3例、Ⅱ级13例、Ⅲ级11例、Ⅳ级6例. 31例健康查体者,其灵敏度为90.91%(30/33),特异性为93.55%(29/31),阳性预测值为93.75%(30/32).
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PCR指纹图技术鉴定临床常见酵母菌的探讨
目的探讨PCR指纹图技术用于鉴定临床常见酵母菌的方法. 方法采用PCR方法,使用随机引物M13和T3B对临床常见的7属17种酵母菌进行扩增. 结果17种酵母菌的扩增产物在数量和大小上都有其自身特征;不同种间酵母菌其PCR指纹图型存在明显的差异;对同种酵母菌内不同菌株扩增的结果表明,酵母菌的PCR指纹图分析种间变异远远大于种内变异,据此能将各种酵母菌有效地区分开. 结论控制好实验条件,PCR指纹图技术可有效地鉴定临床常见的酵母菌.
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浅谈几种中药指纹图谱技术在中药鉴定中的应用
中药用于治疗疾病在我国源远流长,在某些疾病的治疗中具有独特的西药不可取代的作用.由于它的疗效与药材品质密不可分,药材品种又繁多,既有植物药又有动物药.为了保证用药安全有效,需要建立准确迅速简捷的鉴别方法,因此长期以来,以人为主的经验鉴别法逐步被现代的、以仪器分析为主的鉴别技术所优化.中药指纹图谱技术的应用,使中药鉴别技术逐步科学、完善、先进、实用.
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中法科学家发现房颤致病基因/科学家研究出检测鼠疫的新技术/同仁堂将采用"指纹图谱技术"改造十大名药/德科学家利用胚胎干细胞治疗糖尿病获进展
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1HNMR 指纹法鉴定植物中药
阐述了1HNMR 指纹法鉴定植物中药的理论要点、方法学研究及其应用.
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中药指纹图谱技术的研究与应用
中药作为中华民族的瑰宝,从神农尝百草开始利用中草药治病已有悠久的历史.然而,在国际植物药领域中,却很少能得到认可.中药由于成分复杂,药效部位常常不是单一成分,而是群体疗效,所以如何控制中药材、中成药的质量,成为中药现代化、中药走出国门的瓶颈.随着现代分析手段的发展,中药指纹图谱技术以较为宏观、综合地反映中药的内在质量,已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的有效的手段.
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他克莫司、霉酚酸酯和甲泼尼龙联合治疗慢性移植物抗宿主病二例
例1,女,7岁,重型β地中海贫血,Pesaro临床Ⅲ期,血型为B型.供者为其胞兄,HLA全相合,血型为AB型,予G-CSF 5μg@kg-1@d-1×5 d皮下注射动员后采集外周血造血干细胞(PBSC).预处理方案:马利兰18 mg/kg,环磷酰胺200mg/kg,噻替哌6 mg/kg,抗胸腺细胞球蛋白1 10 mg/kg.急性移植物抗宿主病(aGVHD)预防用环孢菌素A(CsA).患儿获得的单个核细胞为10.6×108/kg,CD34+细胞为11.7×106/kg.移植后第13天ANC>0.5×109/L,但从移植后第14~第39天白细胞不再上升,骨髓从增生活跃转为低下,DNA指纹图呈“供者型”.于移植后第39天进行“第2次移植”,单个核细胞为6.93×108/kg,CFU-GM为3.32×105/kg,CD34+细胞为9.0×106/kg.第2次移植后第9天,白细胞开始上升,第61天起血红蛋白从86g/L上升至正常水平.第42天出现肠道GVHD,从Ⅱ度渐发展至Ⅳ度,加用甲泼尼龙(MP)2 mg@kg-1@d-1,停止一切进食,全静脉营养,维持水电解质平衡.
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中药指纹图谱技术已成为中药质量控制研究国际趋势--中医药现代化国际科技大会参会感
中医药现代化国际科技大会于2002年11月3~5日在四川省成都市举行,主办单位包括中华人民共和国科学技术部、中华人民共和国卫生部、国家药品监督管理局、国家中医药管理局、中国科学院和四川省人民政府.此次大会规模之大、层次之高均是前所未有,有3000多人参加了此次大会,其中包括200多名国外知名人士.由此也反映了中医药现代研究受到了国内外专家、学者和各国政府的普遍关注.
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RAPD技术在微生物学领域的研究与应用
新型DNA指纹技术--RAPD(随机多态DNA)作为一种基因分析法,具有简便、重复性好、价格相对低廉等诸多优点,在无需预知靶基因DNA的情况下,可迅速得出多态性很好的DNA指纹图.目前,这种方法在细菌、分枝杆菌、真菌等领域中都已得到了广泛的应用.
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中药与天然药物国际学术研究新热点
——“第四届中国北京高新技术产业国际周”专业研讨会精彩议题 1.中药、天然药物的国际化: 入关在即,为把握中药进入欧美市场的有利条件,了解和比较FDA、欧盟药物局、日韩等国对中药、天然药物的相关规定和要求,探讨我国中药的开发重点和进入欧美市场的相关对策,推动中药真正走向世界。2.医药产业创业投资与创业板上市: 探讨医药企业改制上市的思路与技巧、寻求企业中长期发展方向,并为医药企业、投资者和科研院所架设沟通的桥梁,指导中小型科技企业的创业发展之路。3.中药的临床研究与CRO的作用: 分析比较国外GCP实施情况和我国中药临床开发现状,探讨中药的发展趋势,推动中药GCP的实施和提高。同时借鉴国外CRO在临床开发中的操作方式和重要作用,探讨CRO如何在我国中医药企业的临床开发中发挥作用。4.中药活性成分与指纹图谱技术 中药活性成分是中药药效的物质基础,阐明其活性成分对于了解中药的作用机理以及实现中药的现代化具有重要的推动作用。指纹图谱技术是中药标准化的关键技术,与中药活性成分研究密切相关。会议着重探讨中药活性成分与指纹图谱技术研究的新方法、新途径与新思路,为实现中药活性成分明确,作用机理清晰,质量可控奠定理论和方法学基础。5.中医药学与人类基因组计划: 中医药具有几千年的历史,积累了丰富的临床经验,是一种有效而独特的治疗手段。由于科学的发展和认识的局限性,传统中医药理论已经不适应现代科学的标准而较难为人们广泛接受。如何将传统中医药现代化是中医药发展的关键问题。人类基因组计划不仅为中医药理论的发展提供了理论基础,而且提供了大量的技术手段,如基因大规模序列分析、基因文库、生物芯片、蛋白质组学等。随着人类基因组研究的深入,相信揭开中医“证候”,中药“多靶点”作用机理等将成为可能。6. 21世纪中药工程与工程技术: 实现中药现代化,必须首先实现中药工程与工程技术现代化。由于中药工程与工程技术落后,使中药的活性成分得不到有效的提取、纯化,也不能制成现代制剂,严重影响了我国中药产业的发展和中药进入国际市场。会议旨在对我国中药工程和工程技术存在的主要问题进行系统分析,对新技术的应用前景和21世纪的发展趋势进行探讨。7.现代复方中药研究的创新思维: 复方中药是目前临床应用及新药开发研究的主流药物。现代复方中药的研究涉及质量控制、药效评价、再优化等多方面的内容,这些问题深入探讨和研究,对于提高复方中药的疗效水平,创新复方中药,提升产业效益具有重要的意义。会议就目前在复方中药研究中所遇到的关键科学问题、解决的切入点、可运用的技术手段与方法等进行交流,为复方中药的研究提供新的启迪。8.海洋药物——二十一世纪药物研究新热点: 海洋是生命之源,开发海洋已成为世界技术革命重要的领域。由于海洋生态环境的特殊性和生物链之间的密切相关性,海洋生物具有化学结构奇特、新颖的特性,并存在高活性、高药效的先导化合物,可为新药的研究开发提供大量的模式结构和前体药物。本次讨论会旨在分析探讨海洋药物的开发途径和发展方向,以促进相关学科的合作,提高国内海洋生物的研究开发水平。9.西部濒危药用植物的保护与开发 中药材资源的开发与保护是一对矛盾的统一体,是关系到资源可持续利用的大问题。西部地区脆弱的生态环境,使其野生中药材资源保护状况更为严峻。如何利用生物技术等高新技术手段,对濒危、贵重及大宗药材进行培养和栽培研究,探讨保护与开发相协调的发展之路,以确保中药材资源的可持续利用。——源自“2001中药与天然药物*中国”国际研讨会
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蔬菜中有机磷农药气相色谱定量及指纹图谱定性方法
目的:建立常见蔬菜的气相色谱火焰光度检测器(GC-FPD)定量检测和FPD指纹图谱定性检测的方法.方法:样品经乙腈提取、石墨炭黑柱固相萃取净化,GC-FPD测定,FPD指纹图和内标物辅助定性,用外标进行定量.结果:检出限为0.005 mg/kg-0.01 mg/kg(S/N=3),加标回收率为67.1%-135%,相关系数为0.9945-0.9998.结论:部分蔬菜有其固定且特有的FPD指纹图,通过与样品和标样的对照用于定性确证;用外标定量,大多数有机磷农药外标定量的同收率较好.
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链球菌感染中毒综合征17例临床观察
1 引言 1998年、 1999年夏季,江苏省海安、如皋、通州、泰县等地区发生成批生猪发病,数以千计的病猪死亡,同期与病猪密切接触者中有多人发病.经流行病学调查、临床观察、病原体分离鉴定、猪的人工感染试验及菌株 PCR指纹图同源性分析等,确定这是由链球菌引起的感染中毒综合征,为人猪共患疾病,人可由猪传染而发病、死亡[1].两年来我院收治了由链球菌引起的感染中毒综合征 17例.现报告如下.
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液相色谱指纹图法鉴别灵芝孢子油掺伪研究
采用液相色谱指纹图法检验灵芝孢子油掺伪现象,并针对掺伪进行了定量分析.
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结核分枝杆菌ERIC-PCR分型技术的建立
目的 建立结核分枝杆茵ERIC-PCR分子生物学分型技术,并应用于临床分离酋株的流行病学调查.方法 以肠杆菌科基因间重复序列(Enterbacterial repetitive intergenic consensus,ERIC)为引物,对临床分离的结核分枝杆菌DNA进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后得到指纹图并进行分析.结果 122株临床分离株产生42种不同的指纹图,密切接触者指纹图相同或相似,指纹图谱与患者年龄、菌株的耐药性及耐药种类有关.结论 ERIC-PCR是结核分枝杆茼分子流行病学调查的有效技术.
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AmpF STR SGM试剂盒应用评价
短串联重复序列( STR)是一类广泛分布于人类基因组中的多态性 DNA,由于检测方便,检材适应性广,多态性较高, STR近年来正逐渐取代血清学和 DNA指纹图,越来越多地应用于亲权鉴定中 [1]。但是对 STR在亲权鉴定中的应用价值的评价,多数是通过调查群体的等位基因频率资料,计算非父排除率作为参考,这种评估的方法反映的是平均值,为了了解 STR在亲子鉴定中实际应用的情况,本文从实际案例出发,分析 10个 STR位点在亲权鉴定中的应用效果。