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NFAT2在非小细胞肺癌中的表达及预后关联研究
目的:研究NFAT2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及与患者生存预后的关系.方法:收集原发性NSCLC肿瘤组织315例及其配对的正常组织164例,免疫组织化学染色检测NFAT2蛋白表达情况,同时进行临床关联及预后分析.结果:NFAT2在NSCLC中高表达(P<0.001).在女性及非吸烟早期NSCLC中,NFAT2表达上调与生存期缩短相关,差异具有统计学意义(P=0.003、P=0.001).结论:NFAT2是NSCLC发生的危险因子,NFAT2高表达可能预示着不良预后结局.
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结直肠癌中CEACAM1、VEGF的表达及与血管生成的关系和意义
目的 观察癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)、血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌中的表达情况及与微血管密度(MVD)的关系和意义.方法 选择90例行手术切徐治疗结直肠癌患者的癌组织标本作为观察组,50例结直肠腺瘤患者的组织标本作为对照组,随机从观察组中选取10例距肿瘤边缘>5 cm的正常结直肠黏膜组织标本作为正常组.采用免疫组织化学方法检测3组组织标本中CEACAM1、VEGF表达情况,并记录MVD值,对CEACAM1、VEGF表达情况与MVD关系进行相关性分析.结果 观察组中CEACAM1、VEGF阳性表达率和MVD值均明显高于对照组和正常组(P均<0.05).观察组中CEACAM1、VEGF的阳性表达率及MVD值与肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期、肿瘤大小、肿瘤浸润深度均有关系(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位无明显关系(P均>0.05).线性相关性分析显示,CEACAM1、VEGF和MVD均具有正相关性(P均<0.05).结论 CEACAM1、VEGF的高表达及MVD的升高与结直肠癌的生物学行为和进展关系密切,通过调节CEACAM1、VEGF的表达可能抑制肿瘤的浸润和转移.
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乳腺癌患者白细胞介素8临床检测的意义
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤,近50年来发病率一直呈上升趋势,如何更加简便、准确地对乳腺癌患者进行诊断并预测预后,筛选高危患者,进行恰当治疗,避免过度治疗或治疗不力,提高患者远期生存率,一直是研究者们积极探索的努力方向.白细胞介素8(IL-8),是重要的多细胞来源的趋化性细胞因子,近来作为肿瘤细胞自分泌性生长因子引起了众多学者的广泛关注.
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细胞增殖的检测及临床意义
细胞动力学是研究细胞群体内各部分细胞运动规律的学科.肿瘤的细胞增殖研究早期工作由于受方法学的制约主要限于实验肿瘤,随着分子生物学的飞跃发展和免疫组织化学技术的改进,多种与细胞增殖有关的生物标志物得以发现并逐渐有了深入地认识,检测方法不断更新.现已发现许多肿瘤的细胞增殖状态与生物学行为及预后有密切关系[1],内窥镜及针吸活检技术的普及使在治疗前了解肿瘤的增殖状态成为可能,近年来已有许多关于肿瘤细胞增殖与临床病理关系的研究.
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免疫组织化学技术中防止组织脱片的几个关键环节
由于免疫组织化学技术(免疫组化)中,操作步骤多,历时长,整个过程必须在有水的环境中完成,因此,切片易从载玻片上脱落,即出现掉片现象,不仅浪费试剂,而且还延误了诊断时间.笔者在工作中对其掉片原因进行探索,并采取相应措施防止掉片的发生,现介绍如下.
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高温高压抗原修复法提高乳腺癌免疫组化准确率的应用研究
目的 探讨免疫组化反应中的高温高压抗原修复法预处理方法对反应结果的影响.方法 对60份经10%中性甲醛液固定过的乳腺癌组织,经脱水、石蜡包埋制成切片,分别采用高温高压抗原修复法和微波炉抗原修复法做预处理后,进行免疫组化染色.结果 石蜡组织切片免疫组化反应预处理,采用高温高压抗原修复法,其阳性率为55.8%,采用微波炉抗原修复法,其阳性率为45.4%.免疫组化反应中采用高压高温抗原修复法作预处理,石蜡组织切片阳性表达率较微波炉抗原修复法明显提高(P<0.05).结论 预处理采用高温高压抗原修复法,提高了免疫组化阳性率的表达,显色对比鲜明,背景干净清晰,从而提高病理诊断的准确率.
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免疫组织化学技术在肿瘤病理诊断中的应用及其存在问题研究
伴随细胞生物学的快速发展,免疫组织的化学以及众多分子的生物学应用,促使肿瘤的临床诊断技术有了长远进步。免疫组织化学技术在病理诊断中的广泛应用,不仅有效提高了肿瘤的临床诊断水平,而且也进一步客观反映出免疫组织化学技术临床操作过程中存在的一些问题,例如,标准化应用问题、抗体不稳定性、非特异的染色问题等。为了有效提升免疫组织化学技术在肿瘤病理诊断的临床价值,本研究主要介绍免疫组织化学技术在病理诊断中的应用,并分析应用中存在的问题,为临床改进措施的制定提供重要依据。
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实验性大鼠重度心肌挫伤心肌细胞中Bcl-2的表达
目的:观察大鼠重度心肌挫伤后不同时间段挫伤区周围心肌细胞中bcl-2的表达情况,从分子水平上进一步探讨心肌挫伤的损伤机制.方法:成年Wistar大鼠36只,随机分为对照组和实验组.建立大鼠重度心肌挫伤模型,运用免疫组织化学技术(SABC法),结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性重度心肌挫伤后bcl-2、的染色变化.结果:免疫组化染色观察,bcl-2在正常对照组以及死后损伤组为阴性表达,重度心肌挫伤后,在挫伤区周围组织bcl-2在6h即出现轻微表达,并分别在24h和2d达到高峰,此后逐渐下降,至6d仍有表达.结论:bcl-2参与了重度心肌挫伤后细胞的损伤;心肌挫伤后的时序性变化规律使bcl-2有可能成为重度心肌挫伤时间推断的客观指标以及生前伤和死后伤的鉴别指标.
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免疫组织化学技术诊断消化道活组织检查标本564 例分析
运用免疫组织化学技术对内镜咬检组织,特别是消化道的炎性、溃疡组织,配合以免疫组织化学标记,进而作出明确的病理诊断,使患者得到早发现早治疗.
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P16和P15蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义
我们采用免疫组织化学技术,对40例宫颈癌组织中P16与P15蛋白表达情况进行了研究,以探讨它们与宫颈癌发生、发展的关系.1 材料与方法1.1 材料:收集我院2002年1月至2008年6月进行手术切除的宫颈癌组织40例,患者年龄24~72岁.根据FIGO临床分期标准,Ⅰ期28例,Ⅱ期12例.术后对每例的病理类型、组织学分级淋巴结程等情况进行分析记录.正常宫颈组织20例.
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晋东南地区食管鳞癌中 HLA-G 分子的表达及意义
目的::研究人类白细胞抗原-G(Human Leukocyte Antigen G,HLA-G)在晋东南地区食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及意义。方法:利用免疫组织化学 SP 法检测66例 ESCC 及25例癌旁组织中 HLA-G 分子的表达。结果:ESCC 中 HLA-G 分子的表达率为62.1%(41/66),明显高出癌旁食管黏膜鳞状上皮表达率32.0%(8/25)(P <0.05);HLA-G 分子的表达与 ESCC 浸润深度和淋巴结转移关系密切(P <0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度和 ESCC 的 TNM 分期无明显相关性(P >0.05)。结论:HLA-G 分子在 ESCC 中表达升高,且与 ESCC 的浸润和转移密切相关,可能在晋东南地区食管鳞癌的发生发展中发挥重要作用。
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抗原修复液pH值和抗体浓度对免疫组织化学技术检测PD-L2染色结果的影响
目的:探讨不同浓度抗体和不同pH值的抗原修复液对免疫组织化学反应结果的影响,以提高免疫组织化学染色阳性率.方法:采用3种不同抗体浓度作预处理后,分别在pH值6.0和pH值9.0条件下,进行免疫组织化学SP法检测PD-L2分子在食管磷状细胞癌组织中的免疫组织化学染色效果.结果:PD-L2抗体稀释浓度1∶400的免疫组化染色效果优于抗体浓度1∶800;pH值9.0的抗原修复液处理后的免疫组化染色效果优于pH值6.0的抗原修复.结论:PD-L2抗体稀释浓度1∶400,pH值9.0抗原修复液处理后的免疫组化染色效果佳,既可提高免疫组织化学反应阳性表达率,又能提高制片质量,是理想的检测PD-L2分子免疫组织化学反应的优化方案.
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PTEN蛋白及增殖细胞核抗原在原发性小肠腺癌中的表达及临床意义
PTEN抑癌基因对肿瘤的发生、发展起到重要作用,与肿瘤的侵袭和预后紧密相关,内源性增殖细胞的标记物增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平与肿瘤增殖有关.本研究采用免疫组织化学技术,探讨抑癌基因PTEN蛋白和PCNA在原发性小肠腺癌中的表达及其与原发性小肠腺癌发生、发展及临床预后性指标的关系,为判断预后提供参考指标.
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PTEN蛋白在喉鳞癌中表达的研究
PTEN抑癌基因是迄今为止发现的第1个具有磷酸酶活性的抑癌基因,定位于人类染色体10q23,全长200 kb.PTEN蛋白定位于细胞质,具有双特异性磷酸酶活性,在酪氨酸磷酸酶和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶介导的信号传递过程中具有重要作用.PTEN基因异常表达与肿瘤的侵袭、转移和生长有关.本研究采用免疫组织化学技术对喉鳞状细胞癌中PTEN蛋白的表达情况进行研究,旨在探讨PTEN蛋白在喉鳞癌的发生、发展中的临床意义.
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海马LTP/LTD诱导中CaMKⅡ磷酸化水平的变化
长时程增强(LTP)/长时程压抑(LTD)是由强直/低频刺激作用于兴奋性突触传递通路诱发的一种突触传递效率长时间增强/减弱的现象,两者均被认为是很好的研究学习和记忆机制的电生理模型,特别是在大脑皮层和海马等脑区.不同的是一般认为LTP与新的学习记忆有关,而LTD与清除旧记忆有关. 在LTP产生机制中基因突变和抑制剂的实验已经表明:Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的激活在海马LTP诱导中起关键作用[1].有证据表明CaMKⅡ也参与了LTD的诱导.在电生理方法诱导海马LTP/LTD的同时,是否一定伴随有CaMKⅡ表达的变化还不清楚.因此,本研究采用电生理手段记录大鼠海马CA1区场电位变化并结合免疫组织化学技术同步测定海马脑片CaMKⅡ活性,探讨了LTP/LTD诱导与CaMKⅡ磷酸化水平的关系.
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病理科的各种“安全”不可忽视
病理诊断不仅是临床治疗和患者预后评估的可靠依据,而且是目前公认的辅助诊断手段中可信赖的一种方法,是其他任何检查都不能替代的终末诊断,被称为临床诊断的“金标准”。质量控制,无疑一直是我们病理科面临和解决的重要的问题,常规病理制片技术、免疫组织化学技术、分子病理学技术,这三大技术的发展和应用为病理学认识疾病、鉴别疾病、揭示疾病的本质并指导疾病的治疗奠定了技术基础。其中值得我们重视的是常规病理技术,这是基本的问题,也是其他两大技术能够规范正确进行的基础,所谓“基础不牢,地动山摇”,病理制片技术的质量控制是关乎病理诊断准确性的根基,做好常规病理制片质量控制,才能从根本上达到病理质量控制的目的,为终的病理诊断提供强有力的保障,避免安全事故的发生,这个“安全”不光是我们医生和技术人员,更是对患者生命安全所需要的。因此,我将着重从以下几个环节就病理科各种安全问题谈一点自己的看法。
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免疫组织化学染色技术SP三步法与PV二步法比较探讨
免疫组织化学技术在临床病理诊断和形态学研究中,是一种很重要的技术和手段.该技术于20世纪70年代应用于病理诊断,现在我国病理界已广泛应用.影响免疫组织化学结果的因素很多,如组织固定、脱水的过程、修复的好坏以及免疫组织化学的过程和免疫组织化学试剂盒的选取以及显色步骤均对结果有影响.目前研究影响免疫组织化学结果的因素多从免疫组织化学试剂盒以外的方面分析,对不同原理的试剂盒对实验结果的影响研究甚少.本研究拟以SOX2蛋白为指标,观察免疫组织化学两步法和三步法在SOX2检测中的异同,探讨两种染色方法在使用中的优缺点.
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高压锅和微波抗原修复法的对比分析
免疫组织化学技术是用已知抗体或抗原检测组织细胞中的未知抗原或抗体的技术,具有操作简单、敏感性和特异性强等优点,已广泛用于病理诊断.但在甲醛固定、石蜡包埋后的组织有部分抗原决定簇与核酸或其他蛋白发生交联,形成网络,固定液中的醛基在使蛋白质变性的同时,自身也会交联形成网络结构,使组织抗原决定簇封闭.
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免疫组织化学技术标准化的体会
随着分子医学的发展,单克隆抗体的临床应用,免疫组织化学技术作为独立而重要的病理学检测指标,指导着病理诊断和临床个体治疗,它看似简单,却是较复杂的综合多步骤实验技术,由于处于较快发展阶段,抗体和检测系统不断更新,因此免疫组织化学每一步骤的一点点偏差,对于检测结果都可能是失败的,在这里我们讨论的标准化应用与体会,也只是相对的标准化或步骤的优化,现将我们的标准化操作和质量控制做到极致,包括我科从标本接受、制片、抗原修复、对照设立以及免疫组织化学操作各步骤的标准化、染色结果判读标准化,供病理界同仁商榷共同建立实验规范模式。
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免疫组织化学技术在病理诊断中的应用和要求
免疫组织化学技术在病理诊断中的应用,使我国病理诊断工作提高到一个新的水平,在帮助诊断、鉴别诊断方面进入一个传统病理学极少涉及的原位化学领域。为了正确发挥它的作用,笔者认为开展这项工作有5个主要问题值得注意。