首页 > 文献资料
-
基因芯片筛选肝硬化相关基因
目的:应用基因芯片技术研究肝硬化相关基因的基因表达谱.方法:乙肝肝硬化组织为实验组,以正常肝组织为对照.按一步法抽提实验组和对照组标本的总RNA并纯化mRNA;将等量的实验组和对照组标本mRNA分别逆转录合成荧光分子掺入的cDNA做探针,混合后杂交1 568点BioDoorChipLiver-16S芯片.经严格洗片后用ScanArray3000扫描仪扫描芯片获取荧光信号图像,计算机分析后比较两种组织中差异表达的基因.结果:在1 568种基因中,肝硬化组织与正常肝组织间存在差异表达的基因.所检测的3例临床标本中,2例共有的差异表达基因66-76条(4.2-4.8%),3例共有的差异表达基因28条(1.8%).其中包含有与细胞外基质降解相关的基因,与细胞生长因子有关的基因,与信号传导有关的基因等.结论:应用基因芯片技术筛选肝硬化相关基因有助于阐明肝硬化发展机制.
-
两种碘化丙啶染色 DNA 定量方法检测 HL-60细胞凋亡结果的比较
碘化丙啶(propidium iodide,PI)是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。根据细胞周期中不同时项 DNA 的变化来检测细胞周期中DNA 合成前期( G0/ G1期)、 DNA 合成期( S 期)与DNA 合成后期(G2期)各时项的细胞比例。因为 PI是适用于所有流式细胞仪的染料,这一染色技术在临床肿瘤诊断和医学科研中被普遍的采用,常规使用的染色方法是包括固定、RNA 酶处理、PI 饱和染色3个关键步骤的3步法 PI 染色技术[1]。在一些研究中,当细胞在生理或病理条件下发生了凋亡,DNA 损伤,细胞内 DNA 降低,也可以采用3步法 PI 染色检测亚 G1峰(也称作凋亡峰),用于凋亡细胞比例和特征的分析[2]。但是在实际应用中,由于凋亡时相的不同,当凋亡细胞中 DNA 损伤部分没有完全脱出细胞时,往往检测不到明确可辨的亚 G1峰,敏感度较低。作为细胞凋亡检测的经典方法之一的彗星检测[3],以细胞在电泳移动中 DNA 的迁移形态作为凋亡的特征指标,此技术中比较关键的一步即采用碱性高渗试剂使凋亡细胞中断裂的 DNA 碎片脱出细胞,从而在电泳迁移中呈现出彗星尾样的拖痕,本课题组利用类似方法,用高渗缓冲液作用于固定后的悬浮细胞,使凋亡细胞内断裂 DNA 较彻底的脱出细胞外,再进行 DNA定量检测,提高对细胞凋亡的识别度和敏感性[4]。
-
北大“小动物多模态分子医学影像系统”可助新药研制
在2014年全国科技活动周北京主会场,由北京大学生物医学工程系参展的“小动物多模态分子医学影像系统”吸引着众多参观群众。
“小动物多模态分子影像重大科研仪器及关键技术研究是将X射线断层成像(CT)、正电子发射断层成像(PET)、单光子发射断层成像(SPECT)、荧光分子层析成像(FMT)四种成像模态创新性地在同一系统中进行整机集成和同机融合”。北京大学工学院生物医药工程系谢肇恒介绍,这台仪器可研发相关分子影像采集、处理与数字化管理软件系统,并将该系统应用于重大疾病新药研制及肿瘤靶向分子探针研究,为国家新药创制及生物医学研究提供技术支撑。 -
多光谱荧光成像系统
德国弗劳恩霍夫制造技术与自动化研究所推出一种多光谱荧光成像系统,可用于诊断肿瘤诊断,并在日前德国杜塞尔多夫国际医疗器械展览会上展出。
在手术前将特殊的荧光染色剂注入病人的血液中,荧光分子会选择性地附着在恶性肿瘤组织上,用特殊的光波照射相应区域,荧光分子就会发光,并可同步显示图像。多种荧光染色剂可使用,不同的染色剂在不同组织中显示的颜色是不一样的,恶性肿瘤组织会呈现绿色、蓝色、红色或其他颜色。染色的可视性在很大程度上依赖该系统的一组荧光滤镜,即使在荧光亮度不高的条件下,这组滤镜也能将肿瘤上的荧光与普通荧光光波区分开来,从而区分癌变组织和周围的正常组织。荧光成像系统还可与其他染色剂结合使用。例如,5-氨基酮戊酸就是一种能让神经胶质母细胞瘤(一种脑肿瘤)“现形”的染色剂。5-氨基酮戊酸可将肿瘤染成红色,荧光成像系统同样可以检测出这种染色效果。 -
胃肠道肿瘤的切伦科夫内窥成像研究进展
1934年,前苏联物理学家Cerenkov在观察放射性核素衰变时,看到了水中淡蓝色的光,即切伦科夫光[1]。切伦科夫光是高速带电粒子在非真空的透明介质中穿行,当粒子速度大于光在这种介质中的速度时产生切伦科夫辐射,从而发出的一种以蓝紫光为主的可见光[1]。切伦科夫光信号强度与放射性活度有关,并与单光子发射计算机断层成像术(SPECT)和正电子发射断层成像术(PET)显像信号具有良好的线性相关性。相比于传统SPECT和PET显像,切伦科夫光具有低成本、高灵敏度、简单、快捷等优势。由此发展而来的切伦科夫光学成像( Cerenkov luminescence imaging, CLI)使用了与PET相同的、被FDA批准应用于临床的放射性核素探针,较荧光分子成像模式相比很好的解决了光学分子探针局限性及毒性问题,使人们对光学分子成像的临床应用看到了曙光。但CLI存在光学信号弱、组织穿透性不足的缺陷,在体表难以探查到机体深部器官/组织发出的CLI信号(如胃肠道),一些学者们提出了切伦科夫光能量转移成像( CRET)和切伦科夫光二次诱导激发成像( SCIFI)以提高组织穿透力、增强CLI信号,但荧光半导体量子点( QDs)等探针毒性问题一直无法避免,内窥的成像模式为人们提供了新的思路。于是,人们将消化内镜与切伦科夫光学成像相结合,对放射性核素探针进行显像,这种多模态光学分子影像新方法被称为内窥式切伦科夫光学成像( Endoscopic Cerenkov luminescence imaging,ECLI)。
-
焦磷酸测序技术及其应用进展
DNA序列分析技术是现代生命科学研究的核心技术之一,而双脱氧核苷酸链终止法(Sanger法)是目前使用普遍的DNA序列分析技术.在基于Sanger法的全自动DNA测序技术中,测序反应产生的DNA片段是荧光标记的,这些片段经过平板胶电泳或毛细管电泳得到分离,荧光分子被激发而发光,发出的光信号被检测系统检测.Sanger法的优势在了可以分析未知DNA的序列,且单向反应的读序能力较长,目前的技术可以达到1000bp以上.在实际工作中,很多情况需要对已知序列的DNA片段进行序列验证,而这种分析往往测几十bP就可以满足需要.在这种情况下,Sanger法未必是合适的DNA序列分析技术.新发展的焦磷酸测序技术(Pyrose-quencing)应该是目前适合这些应用的DNA序列分析技术.
-
基于生物介质的丙三醇对分子荧光强度影响的研究
目的:生物介质中加入丙三醇是一种保存荧光样品的重要方法,研究丙三醇含量对生物介质中不同发射波长荧光分子的荧光强度的影响.方法:以磷酸盐缓冲液(PBS)作为介质,测定不同丙三醇体积分数下的拓扑替康、磺酰罗丹明B(SRB)、吖啶橙(AO)和罗丹明B的荧光强度以及丙三醇的荧光光谱和紫外-可见吸收光谱.结果:研究发现丙三醇本身无荧光,但其能够增强上述荧光分子的荧光强度.随着丙三醇体积分数的增大,荧光分子的荧光强度逐渐增强.结论:生物介质中加入丙三醇后能够增强分子的荧光强度.选择含高体积分数丙三醇的生物介质,有利于提高荧光分子检测的灵敏度.
-
科学家用荧光分子揭开四链DNA神秘面纱
来自英国伦敦帝国学院的研究人员在国际学术期刊Nature Communication上发表了一项新研究进展,他们利用一种荧光分子在活细胞中揭示了四链DNA的神秘结构。