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沉默T细胞Cbl-b基因对4T1细胞免疫杀伤作用影响
目的 乳腺癌发生发展与机体免疫水平有密切关系,而Cbl-b基因可作为抗肿瘤治疗的免疫靶点.利用超声介导微泡破裂技术(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)沉默T细胞Cbl-b基因表达,观察转染T细胞对4T1乳腺癌细胞的体外免疫杀伤效率.方法 磁珠分选纯化T细胞,构建靶向Cbl-b基因的短发夹RNA(short-hair-pin RNA,shRNA)表达质粒,超声微泡介导转染48 h后,荧光显微镜和流式细胞仪评估细胞转染效率,蛋白质印迹法检测Cbl-b蛋白表达情况.转染72 h后,利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)比较各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平.转染72 h后,观察对比单纯T细胞、阴性对照T细胞及转染T细胞与小鼠4T1乳腺癌细胞共培养时肿瘤杀伤效率.结果 原代培养T细胞纯度为93.7％.利用UT-MD技术介导shRNA转染效率达到61.3％.qPCR和蛋白质印迹法检测结果显示,Cbl-b基因和蛋白水平表达均能被有效抑制.与空白组(1.007±0.022)相比,实验组Cbl-b mRNA表达量(0.333±0.046)明显降低,P<0.001;实验组、对照组和空白组Cbl-b蛋白相对表达量分别为0.301±0.080、0.773±0.101和0.719±0.090,检验统计量组间总变异,F=38.751,P<0.001;实验组Cbl-b蛋白表达显著降低.与空白组〔(74±6)pg/mL〕相比,实验组T细胞因子TNF-α分泌〔(157±26)pg/mL〕水平明显升高,P=0.001.转染72 h后,与空白组及阴性对照组T细胞相比,在15:1(P=0.046)、30:1(P=0.028)和60:1(P=0.003)的效靶比水平,转染T细胞杀瘤活性均明显增高.结论 利用UTMD技术介导shRNA转染能有效沉默Cbl-b基因表达,促进T细胞免疫活性,增强T细胞对小鼠4T1乳腺癌细胞的体外免疫杀伤效率.
关键词： Cbl-b 超声介导微泡破裂技术 基因沉默 乳腺癌 免疫治疗 -
多发性硬化患者外周血淋巴细胞Cbl-b的表达
目的 分析多发性硬化(MS)患者外周血淋巴细胞Cbl-b基因和蛋白的表达变化并探讨其与MS发病的关系.方法 采用RT-PCR和Western-blot方法检测31例MS患者(缓解期20例、急性复发期11例)和16名健康对照者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白的表达.结果 (1) MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白表达水平均较健康对照组明显下调;(2)急性复发期和缓解期MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA表达水平差异无统计学意义;(3)急性复发期MS患者外周血淋巴细胞Cbl-b蛋白表达水平较缓解期患者明显下调.结论 外周血淋巴细胞Cbl-b mRNA和蛋白表达下调可能参与了MS发病,且蛋白表达的进一步下调可能与MS急性复发相关.
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microRNA-1183通过抑的表达促进胃癌细胞的增殖及转移
目的 研究microRNA-1183对胃癌细胞增殖及转移的影响,初步探讨microRNA-1183和CBL-B信号转导通路在此过程中的作用.方法将人胃癌细胞MGC803瞬时转染microRNA模拟物microRNA-1183,采用实时PCR法检测胃癌细胞中microRNA-1183的表达,MTT法检测细胞增殖的能力,Transwell法检测细胞的转移.双荧光素酶报告基因检测系统检测microRNA-1183与CBL-B的结合,Western blotting观察蛋白的表达.结果MTT法显示microRNA-1183可促进胃癌细胞MGC803的增殖,Transwell法显示microRNA-118促进了胃癌细胞MGC803的转移.BLAST对比分析结果显示,CBL-B是microRNA-1183的靶基因之一.Western blotting结果显示,过表达microRNA-1183后,CBL-B的表达明显下调.双荧光素酶报告基因检测系统证实CBL-B是microRNA-1183的靶基因.敲除CBL-B后,促进了MGC803的增殖与转移.microRNA-1183通过抑制CBL-B促进了胃癌细胞MGC803的增殖与转移.结论microRNA-1183通过抑制CBL-B的表达,促进胃癌细胞MGC803的增殖及转移.
关键词： 胃癌 microRNA-1183 Cbl-b 增殖 转移 -
Cbl-b在T细胞和肿瘤免疫中的研究进展
泛素化在细胞信号通路中是一个重要的转录后修饰过程,参与细胞的增殖、分化、凋亡以及基因表达、信号传递、炎症免疫等生命活动的调控.其中E3泛素连接酶Cbl-b参与T细胞的激活和耐受,与肿瘤免疫也有着密切联系,因而Cbl-b对T细胞的调节及它在肿瘤免疫中的研究具有重要意义.
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MiRNA在E3泛素连接酶Cbl-b抑制CD4+T细胞活化中的作用研究
本研究探讨miRNA在Cbl-b抑制CD4+T细胞活化中的作用机制.采用miRNA深度测序的方法检测WT CD4+T细胞、Cbl-b-/-CD4+T细胞、抗CD3抗体活化的WT CD4+T细胞和抗CD3抗体活化的Cbl-b-/-CD4+T细胞中miRNA的表达谱.结果显示,miR-125b-2-3p、miR-125b-5p、miR-99a-5p和miR-99a-3p同时在Cbbb-/-CD4+T细胞和抗CD3抗体活化的Cbl-b-/-CD4+T细胞中显著高表达.运用miRWalk2.0预测差异表达miRNA的靶基因并用GO和KEGG分析差异表达的miRNA的可能作用机制.结果显示差异表达的miRNA可能通过MAPK等信号通路来影响Cbl-b抑制CD4+T细胞的活化.综上所述,Cbl-b可能通过miR-125b-2-3p、miR-125b-5p、miR-99a-5p和miR-99a-3p等miRNA调控MAPK等信号通路来抑制CD4+T细胞的活化.
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Cbl-b在T细胞免疫耐受和肿瘤免疫治疗中的作用
Cbl-b(casitas B-cell lineage lymphoma-b)为一种高度保守的RING家族E3泛素连接酶,是调节T细胞信号的关键因子,对维持外周T细胞免疫耐受至关重要.Cbl-b表达受转录因子、共刺激分子CD28、CTLA4及自身泛素化的调控.Cbl-b通过泛素化激活的受体、受体相关酪氨酸激酶和下游信号分子而参与淋巴细胞信号的负性调控,进而精密调节抗原受体信号和免疫反应.另外,Cbl-b在调控T细胞TGF-β信号转导通路中起着重要作用.Cbl-b的缺失能增强抗肿瘤免疫反应,打破自身免疫耐受.因此,深入研究Cbl-b在T细胞免疫耐受和肿瘤免疫治疗中的作用可为肿瘤免疫治疗提供新的靶点.
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MicroRNA-150在结膜黏膜相关淋巴组织淋巴瘤增殖、迁移及侵袭中的作用
目的 观察结膜黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤中microRNA-150 (miR-150)的表达,探讨miR-150在结膜MALT淋巴瘤中影响肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制.方法 使用qPCR法检测第二军医大学长征医院收治的3例结膜MALT淋巴瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中miR-150及其可能的下游靶分子Cbl-b的表达.将miR-150抑制物和阴性对照转染人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226,采用CCK-8法和流式细胞术研究miR-150对RPMI8226细胞增殖和凋亡的影响,通过Transwell实验研究miR-150对RPMI8226细胞迁移和侵袭的影响,用蛋白质印迹法检测miR-150对RPMI8226细胞中Cbl-b表达的调控.结果 与瘤旁组织相比,结膜MALT淋巴瘤组织中miR-150表达上调(P＜0.05,P＜0.01);抑制miR-150后,RPMI8226细胞的增殖受到抑制,细胞凋亡明显增加,迁移和侵袭能力降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).在结膜MALT淋巴瘤组织中,miR-150下游靶基因Cbl-b表达下调(P＜0.01);抑制miR-150后,RPMI8226细胞内Cbl-b蛋白的表达上调(P＜0.01).结论 MiR-150对淋巴瘤细胞的增殖、迁移和侵袭有促进作用,其表达上调参与了MALT淋巴瘤的发生.其机制可能与miR-150对下游分子Cbl-b的抑制性调控有关.
关键词： 结膜肿瘤 黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 MicroRNA-150 Cbl-b 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵袭 -
E3泛素连接酶Cbl-b对白细胞介素1诱导细胞效应的负调控作用
本研究旨在探讨E3泛素连接酶Cbl-b对滑膜细胞中白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)信号通路的影响.采用Western blot方法检测Cbl-b基因缺失小鼠滑膜细胞中Cbl-b及IL-1诱导的基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的表达水甲.胶原底物与滑膜细胞培养上清进行共孵育后通过SDS-PAGE分析胶原的降解情况.结果显示,与野生型相比,Cbl-b基因敲除的小鼠滑膜细胞在IL-1刺激条件下表达更多的MMP-13,且培养上清具有更强的降解胶原的能力.这些结果提示,Cbl-b对IL-1诱导的细胞效应具有负调控作用.
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泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA慢病毒载体构建及其对A375细胞生物学行为的影响
目的 构建人泛素连接酶Cbl-b基因短发卡RNA(shRNA)重组慢病毒载体,探讨其对人黑素瘤A375细胞生物学行为的影响.方法 设计并合成3条沉默Cbl-b基因的特异性shRNA及1条阴性对照shRNA,构建慢病毒载体.将A375细胞分成5组,即分别用3条特异性shRNA转染的CBLB-shRNA-1组、CBLB-shRNA-2组、CBLB-shRNA-3组,阴性对照组(阴性对照shRNA转染),空白对照组(转染空载体).应用实时荧光定量PCR和Western印迹检测转染后72 h各组A375细胞沉默效率;CCK8法检测转染后24、48、72及96 h细胞增殖能力;流式细胞仪检测转染后72 h细胞凋亡情况、细胞周期,Transwell法检测转染后72 h细胞侵袭能力.结果 成功构建3条Cbl-b shRNA慢病毒载体,Western印迹示CBLB-shRNA-3蛋白沉默效率高.CCK8检测表明,CBLB-shRNA-3组A375细胞增殖能力在转染后72 h和96 h较阴性对照组、空白对照组明显降低(均P＜0.01).流式细胞仪检测示,CBLB-shRNA-3组凋亡率[(22.73±6.58)％]明显高于阴性对照组[(6.08±1.35)％]和空白对照组[(6.34±1.07)％,均P＜0.01].CBLB-shRNA-3组G1期细胞比例明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜ 0.01),而S期细胞比例明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01).Transwell检测示,阴性对照组、空白对照组和CBLB-shRNA-3组转染后72 h时穿膜细胞数分别为76.60±1.82、73.20±3.83、19.60±1.14,差异有统计学意义(F=794.50,P＜0.01).结论 成功构建能高效沉默Cbl-b蛋白的CBLB-shRNA-3重组shRNA慢病毒载体,其可促进A375细胞凋亡,抑制A375细胞增殖、细胞周期进程和侵袭能力.
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Cbl-b 基因沉默对小鼠原代淋巴细胞免疫活性影响的研究
目的：体外初步研究 Cbl-b 基因经特异性 siRNA 沉默后对小鼠淋巴细胞免疫活性的影响。方法摘取 C57BL/6小鼠的脾脏，体外无菌分离小鼠脾脏淋巴细胞后进行培养。通过 EntransterTM-R4000试剂将 Cbl-b siRNA 转染入小鼠原代淋巴细胞以沉默细胞内 Cbl-b 的表达。转染72 h 后通过酶联免疫吸附实验（ELISA）检测淋巴细胞培养上清中干扰素γ（INF-γ）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达量。通过与 B16F10黑素瘤细胞共培养，研究 Cbl-b 基因沉默后的淋巴细胞对 B16F10黑素瘤细胞免疫杀伤活性的影响。结果 Cbl-b siRNA 成功转染进小鼠原代淋巴细胞并能有效沉默细胞内 Cbl-b 的表达。与阴性对照转染组及空白组相比，转染 Cbl-b siRNA 的淋巴细胞 IFN-γ、TNF-α分泌量增加（P <0.05）。共培养检测结果显示，Cbl-b siRNA 转染组比转染阴性对照组能更高效地杀伤小鼠 B16F10细胞。结论 Cbl-b 基因沉默能够促进小鼠淋巴细胞 INF-γ、TNF-α分泌能力，并能增强淋巴细胞对 B16F10黑素瘤细胞的体外免疫杀伤作用。
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泛素连接酶Cbl-b在黑素瘤组织和细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义
目的：探讨泛素连接酶Cbl?b在皮肤黑素瘤组织及黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法收集69份黑素瘤、30份色素痣组织，采用免疫组化法检测Cbl?b蛋白表达水平。实时荧光定量PCR、免疫印迹法分别检测黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞中Cbl?b mRNA及蛋白表达水平。结果69份皮肤黑素瘤标本中，52份（75.36%）表达Cbl?b；30份色素痣标本中，4份（13.33%）表达Cbl?b，两组Cbl?b蛋白表达水平差异有统计学意义（χ2=32.745，P<0.01）。黑素瘤组织中Cbl?b表达水平与肿瘤进展程度、Clark分级和Breslow厚度均呈正相关（rs分别为0.569、0.654、0.727，均P<0.01）。实时荧光定量PCR显示，A375、M14、MV3细胞Cbl?b mRNA表达差异有统计学意义（F=176.537，P<0.01）。免疫印迹法显示，A375细胞Cbl?b蛋白表达水平高，黑素细胞低。结论 Cbl?b蛋白在皮肤黑素瘤组织及其细胞株中均高表达。
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Cbl-b基因shRNA干扰载体的构建及鉴定
目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,并予以DNA测序鉴定.重组干扰质粒构建成功后,将干扰质粒与Cbl-b过表达载体共转染293T细胞,于转染后48 h,通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测各质粒对Cbl-b基因的表达抑制效应.结果 测序分析证实,4对shRNA寡核苷酸序列分别成功插入至shRNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo中,将构建成功的PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒与Cbl-b真核表达载体共转染细胞48 h后,通过荧光实时定量PCR法及Western印迹测定,发现4条shRNA序列对Cbl-b的表达均有一定的抑制效应,其中以1号shRNA序列重组质粒对Cbl-b表达的抑制程度高(P＜0.05).结论 成功构建并筛选出沉默效应高的Cbl-b shRNA真核细胞表达载体.
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cbl-b基因转导淋巴细胞对人前列腺癌细胞LNCaP杀伤作用的实验研究
目的 观察将cbl-b基因导入淋巴细胞能否增强其对人前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用.方法 cbl-b基因淋巴细胞组采用脂质体法将cbl-b基因导入淋巴细胞,在蛋白印记法证实导入基因成功表达后,再用CCK-8法检测其对前列腺癌的杀伤作用,并与正常人外周血中分离淋巴细胞组比较.结果 12 h、24 h、48 h三个时间段,转基因淋巴细胞的杀伤率在10∶1、20∶1、40∶1三种浓度与单纯淋巴细胞比较,杀伤率明显高于单纯淋巴细胞组,差异均有统计学意义(F分别=74.25、1745.90、1637.45,P均＜0.05).其中转cbl-b基因淋巴细胞组在10∶1和40∶1浓度时24 h杀伤率明显高于12 h、48 h,差异均有统计学意义(t分别=18.37、36.00、17.25、35.21,P均＜0.05),但12 h、48 h的杀伤率比较,差异无统计学意义(t分别=1.26、2.51,P均＞0.05).在20∶1时12 h杀伤率明显低于24 h、48 h,差异均有统计学意义(t分别=16.25、19.12,P均＜0.05),但24 h、48 h的杀伤率比较,差异无统计学意义(t =1.06,P＞0.05).且在40∶1 转染24 h杀伤作用强,可达(44.16±0.67)%.结论 转导入cbl-b基因可增强淋巴细胞对人前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用,且杀伤率强的比例与时间段为40∶1、24 h.
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Cbl-b基因介导T细胞免疫杀伤小鼠LA795肺腺癌细胞的实验研究
目的 利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默T细胞Cbl-b基因表达,观察转染T细胞对小鼠肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用.方法 筛选高效特异性沉默Cbl-b基因的siR-NA序列转染T739小鼠脾脏T细胞,转染72h后,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-2、INF-γ等T细胞免疫因子分泌情况,比较单纯T细胞、阴性对照T细胞及转染T细胞与小鼠肺腺癌细胞LA795混合培养肿瘤杀伤率.结果转染72h后,转染组细胞因子IL-2、INF-γ分泌水平较空转组和空白组显著增加.在体外实验中,与单纯T细胞及阴性对照T细胞相比,转染T细胞能更高效杀伤小鼠肺腺癌细胞LA795,高杀瘤率达到58.38±3.82%.结论 利用特异性siRNA技术沉默Cbl-b基因能够促进小鼠T细胞因子IL-2 和INF-γ分泌,增强T细胞对肺腺癌细胞LA795的体外免疫杀伤作用.
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慢性丙型肝炎患者外周血Cbl-b、CD28和CTLA-4的表达及其临床意义
目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血E3泛素连接酶Cbl-b及其相关信号分子CD28和CTLA-4的变化规律及其临床意义.方法 选择25例慢性丙型肝炎患者和19例健康对照者,分离外周血单个核细胞,应用RT-PCR法检测Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA相对表达水平;采用荧光定量RT-PCR检测HCV RNA;采用INNO-LiPA线性探针杂交法检测HCV基因分型.结果 Cbl-b、CD28和CTLA-4 mRNA在慢性丙型肝炎患者中表达升高,较健康对照分别升高1.38倍、1.90倍和2.68倍,其中CTLA4-4的升高表达具有统计学意义(P<0.05);在HCV 1b基因型(n=11)中,Cbl-b和CTLA-4 mRNA水平较HCV 2a基因型(n=14)显著升高,分别升高1.74倍和2.81倍,差异具有统计学意义(P<0.05),而Cbl-b、CD28和CTLA-4水平与HCV RNA和ALT水平均无显著相关性.结论 Cbl-b和CTLA-4可能参与了HCV感染所致的机体免疫耐受,在HCV感染慢性化中发挥重要作用.
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泛素连接酶Cbl－b调控p38MAPK在胰岛素与硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡中的作用
目的：初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只，随机分为空白对照组（ Control 组）、糖尿病心肌病模型组（ DCM组）、糖尿病心肌病＋胰岛素组（ DCM＋In组）、糖尿病心肌病＋硒组（ DCM＋Se组）、糖尿病心肌病＋胰岛素＋硒组（ DCM＋In＋Se组）。 TUNEL法观察心肌细胞凋亡；Western blot 观察凋亡相关蛋白Bcl－2、caspase－3和PARP剪切片段的变化，同时观察Cbl－b和p38MAPK表达变化；免疫沉淀法检测Cbl－b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用。结果胰岛素与硒协同抑制心肌细胞凋亡（ P＜0．01）；胰岛素联合硒协同，增加Cbl－b的表达，降低p38MAPK表达（P＜0．01）；两药联合协同增加Cbl－b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用（ P＜0．01）。结论胰岛素与硒通过调控Cbl－b，抑制 p38MAPK而阻止Bax转位来协同抑制心肌细胞凋亡。
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Cbl-b 基因在外周血 CD8~+T 细胞抗肿瘤免疫中的作用
Cbl-b( casitas B cell lymphoma-b )基因是cbl家族成员,其编码的蛋白与信号转导蛋白相互作用,在调节抗肿瘤免疫方面发挥着重要作用.通过基因干扰技术沉默机体外周血T细胞 Cbl-b 基因的表达从而调节机体的抗肿瘤免疫有望在肿瘤治疗上实现重大突破.
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Cbl-b-SiRNA转染淋巴细胞免疫杀伤MFC胃癌细胞的实验研究
目的 探讨cbl-b(Casitas B cell lymphoma- b)特异性小干扰RNA转染小鼠淋巴细胞后,能否增强其对MFC胃癌细胞的主动免疫杀伤作用.方法 设计筛选cbl-b-SiRNA,小鼠脾脏淋巴细胞体外培养扩增,以脂质体为载体将cbl-b-SiRNA导入淋巴细胞,Real time PCR验证对cbl-b mRNA的表达抑制效率,用CCK-8试剂盒检测转染后的淋巴细胞对MFC胃癌细胞的杀伤作用.结果 cbl-b-SiRNA转染的淋巴细胞较未转染淋巴细胞,对MFC胃癌细胞的杀伤作用明显增强,高达(74.09±1.77)％.其中混合培养48 h的淋巴细胞杀伤率较72h增强.结论 通过脂质体法可高效率将cbl-b-SiRNA转入淋巴细胞,且转染后的淋巴细胞对MFC胃癌细胞的主动免疫杀伤作用明显增强.
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Cbl-b shRNA稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建
目的 构建靶向Cbl-b基因的短发夹环RNA(shRNA)真核质粒表达载体,建立Cbl-b shRNA稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,为探讨Cbl-b的生物学功能奠定基础.方法 设计Cbl-b shRNA序列BLAST进行同源性分析.化学合成法合成shRNA序列,将配对的单链合成双链,以T4连接酶连接于pSilencerTM 4.1-CMV表达载体,加入感受态细胞.将菌液涂布于含有氨苄青霉素的LB平板,筛选阳性菌落,测序确认后进行大量复制、扩增,提取重组质粒.脂质体法将上述质粒转染至MDA-MB-231细胞中,G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.结果 DNA测序证实靶向Cbl-b基因的shRNA真核质粒表达载体构建正确,G418压力筛选出阳性克隆,Western blot检测发现MDA-MB-231/Cbl-b shRNA转染细胞株中Cbl-b蛋白表达水平明显下调.结论 成功构建了基因沉默Cbl-b的MDA-MB-231细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础.
关键词： 乳腺肿瘤 Cbl-b 短发夹环RNA MDA-MB-231 转染 -
程序性死亡受体配体1和E3泛素连接酶Cbl-b在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨程序性死亡受体配体1(PD-L1)和E3泛素连接酶Cbl-b蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义.方法 选取2004年7月至2009年6月河南省肿瘤医院保存的NSCLC组织标本及癌旁组织标本各165例,制作组织切片.采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达,并分析NSCLC组织中PD-L1与Cbl-b蛋白表达的关系,以及PD-L1、Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者预后的关系.结果 NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率分别为72.73％(120/165)、38.79％(64/165),癌旁组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率均为7.88％(13/165);NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b阳性表达率显著高于癌旁组织(χ2=5.292、3.076,P<0.05).PD-L1蛋白表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数、病理类型及病理分级无关(P>0.05).Cbl-b蛋白表达与NSCLC患者的性别及肿瘤病理类型有关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤分期、肿瘤直径、阳性淋巴结数及病理分级无关(P>0.05).NSCLC组织中PD-L1和Cbl-b蛋白表达呈直线关系(R2=0.075,P<0.01),其模型为y=21.46493+0.53265x.PD-L1蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位总生存期(OS)分别为45.0、52.0个月,PD-L1蛋白高表达与低表达NSCLC患者的中位OS比较差异无统计学意义(P>0.05).75例鳞状细胞癌患者中,PD-L1蛋白高表达和低表达患者的中位OS分别为45.0、81.0个月,PD-L1蛋白高表达的鳞状细胞癌患者的中位OS显著短于低表达患者(P<0.05).90例腺癌患者中,PD-L1高表达和低表达患者的中位OS分别为50.0、39.0个月,PD-L1高表达与低表达腺癌患者的中位OS比较差异无统计学意义(P>0.05).Cbl-b蛋白高表达和低表达NSCLC患者的中位OS分别为39.0、54.5个月,Cbl-b蛋白高表达患者的中位OS显著短于低表达患者(P<0.05).结论 Cbl-b和PD-L1蛋白在NSCLC组织中均呈高表达.PD-L1与Cbl-b蛋白表达呈直线相关.Cbl-b蛋白表达情况与NSCLC患者的性别、病理类型及OS有关.PD-L1蛋白表达与鳞状细胞癌患者的生存期有相关性,但PD-L1蛋白表达与腺癌患者的生存期无相关性.
关键词： 非小细胞肺癌 程序性死亡受体1 程序性死亡受体配体1 E3泛素连接酶 Cbl-b
