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姜黄素对Raji细胞凋亡及bFGF表达影响的观察
目的:探讨抗血管生成药物姜黄素对人非霍奇金淋巴瘤(NHL) Raji细胞凋亡及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,为临床抗血管新生治疗NHL提供理论依据.方法:不同浓度(5、10、25和50 μmol/L)姜黄素作用Raji细胞不同时间后,倒置相差显微镜下观察Raji细胞形态及生长情况；Annexin V-FITC双标流式细胞术检测姜黄素对细胞凋亡的作用；ELISA检测姜黄素对Raji细胞上清中bFGF含量的影响.结果:显微镜下可见,随姜黄素浓度的增加,Raji细胞由成团生长变为单个散在,细胞数明显减少,细胞体积变小,折光性减弱,有的细胞膜破裂,可见细胞碎片；流式细胞术检测结果显示,作用24、48和72 h后10 μmol/L姜黄素组细胞凋亡率分别为(11.12±1.05)％、(14.74±0.46)％和(25.11±1.43)％,25 μmol/L姜黄素组分别为(25.07±5.40)％、(33.50±5.89)％和(55.98±7.41)％,均高于对照组凋亡率(1.75±0.28)％、(2.25±0.29)％和(2.77±0.61)％,差异有统计学意义,P＜0.01.ELISA法检测结果显示,作用24、48和72 h对照组上清液中bFGF浓度分别为(643.41±57.12)、(732.26±60.19)和(931.27±81.04) ρg/mL;10 μmol/L姜黄素处理组分别为(212.76±20.07)、(173.23±14.76)和(107.21±12.37) ρg/mL;25 μmol/L姜黄素处理组分别为(95.32±11.59)、(71.24±10.03)和(36.41±7.58) ρg/mL;Raji细胞经10、25 μmol/L姜黄素作用24、48和72 h后,bFGF表达水平明显低于对照组,在3个时间点的表达量与对照组相比,差异有统计学意义,P＜0.01；不同浓度姜黄素处理组上清液中bFGF含量差异亦有统计学意义,P＜0.05.结论:姜黄素对Raji细胞凋亡具有促进作用,能够抑制Raji细胞分泌bFGF,其抑制作用具有浓度、时间依赖性,提示姜黄素可能有抑制血管新生的作用.
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姜黄素抗肿瘤作用试验观察
目的:观察姜黄素是否具有抗癌活性.方法:体外采用药物直接与肿瘤细胞接触,检测细胞存活率;体内试验以口服给药观察该药对几种小鼠移植性肿瘤的抑瘤作用.结果:姜黄素对肿瘤细胞具有细胞毒作用,对人白血病细胞HL60、人红白血病细胞K562、人胃腺癌细胞SGC7901、人肝癌细胞Bel7402的IC50分别为0.56～4.15 μg/mL;以150～300 mg/kg剂量给药对小鼠S180肉瘤、艾氏实体瘤的抑瘤率分别为23.3%～49.1%.结论:姜黄素具有明显的抗肿瘤作用.
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姜黄素对Hela细胞周期各时相的影响
目的:探讨姜黄素对Hela细胞(人宫颈癌细胞)增殖周期各时相的影响,为宫颈癌化疗寻求有效药物.方法:应用MTT比色法和流式细胞术测定不同浓度姜黄素(0、10、20和40 mg·L-1)对Hela细胞增殖的抑制率和细胞周期各时相的变化,并应用电子显微镜观察Hela细胞的亚细胞改变.结果:0、10、20和40 mg·L-1姜黄素对Hela细胞增殖的抑制率分别为3.0%、21.4%、32.8%和49.2%,且呈剂量依赖性;流式细胞术显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多;细胞结构显示,细胞空化、染色质凝集、凋亡小体增多.结论:姜黄素能够抑制HeLa细胞增殖,阻止G1期细胞向S期转化的进程,促进Hela细胞凋亡.
关键词： 姜黄素/药理学 Hela细胞/药物作用 细胞周期/药物作用 -
姜黄素对人胃腺癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨姜黄素对人胃腺癌SGE-7901细胞增殖的影响及作用机制.方法:应用MTT试验现察不同浓度姜黄素作用后人胃腺癌SGC-7901细胞增殖的改变;应用HE染色光镜及电子显微镜下观察姜黄素作用36小时后SGC-7901细胞形态改变;流式细胞仪检测姜黄素作用12、24、36小时后SGC-7901细胞凋亡情况.结果:不同浓度姜黄素对人胃腺癌SGC-7901细胞增殖均有抑制作用,且其抑制作用在其实验浓度范围内随着浓度增加而增强.姜黄素能明显诱导SGC-7901细胞凋亡,镜下可见肿瘤细胞典型的凋亡改变,流式细胞仪分析可见典型的凋亡峰.结论:姜黄素对人胃腺癌SGC-7901细胞增殖有抑制和诱导其凋亡的作用.
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姜黄素活化caspase-3诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的研究
目的 探讨姜黄素活化caspase-3诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的作用机制.方法 20、40、80 mmol/L姜黄素作用于食管癌Ec-109细胞,流式细胞仪检测细胞亚二倍体凋亡峰变化及线粒体膜电位变化;Western-blot检测细胞色素C释放及caspase-3表达.结果 姜黄素呈剂量依赖性诱导食管癌Ec-109细胞凋亡,20、40、80 mmol/L姜黄素作用后,细胞亚二倍体凋亡峰分别为(16.07±1.71)%、(25.54±1.25)%、(37.67±1.09)%,对照组为(3.65%±0.56)%,比较有统计学意义(F＝6.14,P＜0.01).上述浓度姜黄素作用6小时后线粒体膜电位出现降低,比较均有统计学意义(F＝5.37,P＜0.05);12 小时出现细胞色素C表达,24小时检测到caspase-3表达,且姜黄素浓度越高,细胞色素C及caspase-3表达越明显.结论 姜黄素通过损伤细胞线粒体,使之释放出细胞色素C,激活caspase-3,而且其呈剂量依赖性诱导食管癌细胞凋亡.
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姜黄素联合木黄酮对人胰腺癌细胞株BXPC-3的作用
目的体外观察姜黄素及木黄酮对人胰腺癌细胞株(BXPC-3)增殖的抑制作用及两者联合应用时的抑制率及相互作用.方法采用MTT法测定两者对人胰腺癌细胞株(BXPC-3)的增殖抑制率,利用中效原理判定两药合用的效果.结果两种药单独应用时随着药物剂量增加,其效应也增加,它们的相关系数分别为0.953和0.998,姜黄素的中效浓度为289.16 μmol/L,木黄酮的中效浓度为107.55 μmol/L;两药合用时它们的相关系数为0.987,中效浓度为225.20(171.60+53.60) μmol/L.大剂量(大于中效剂量)合用时是协同作用(CI<1),小剂量(小于中效剂量)合用时是拮抗作用(CI>1).结论姜黄素联合木黄酮对人胰腺癌细胞株BXPC-3的生长有抑制作用,它们合用时大剂量是协同,而小剂量则拮抗.
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姜黄素保护帕金森病多巴胺能神经元的机制研究
目的:观察姜黄素对帕金森病细胞模型中多巴胺能神经元的保护作用并探讨其作用机制.方法:人神经母细胞瘤SH-SY5 Y细胞采用1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子(MPTP)处理建立帕金森病细胞模型,进一步设立姜黄素干预、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预以及姜黄素和3-MA同时干预组.各组细胞在药物处理48 h后分别进行酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光染色观察多巴胺能神经元存活数;蛋白质印迹法检测α-突触核蛋白(α-Syn)、转录因子EB(TFEB)、自噬相关蛋白多克隆抗溶酶体相关膜蛋白2 A(LAMP2 A)和微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)的蛋白表达;RT-PCR检测α-Syn的mRNA表达.结果:与模型对照组比较,姜黄素组多巴胺能神经元存活数增加(P<0.01),α-Syn蛋白及mRNA表达减少(均P<0.01),TFEB以及自噬蛋白LAMP2A和LC3-Ⅱ表达上调(均P<0.01);3-MA和姜黄素同时干预组多巴胺能神经元存活数增加(P<0.05),α-Syn蛋白及mRNA表达减少(P<0.05或P<0.01),TFEB、LAMP2 A和LC3-Ⅱ蛋白表达上调(均P<0.01).与姜黄素组比较,姜黄素和3-MA同时干预组多巴胺能神经元存活数减少,LC3-Ⅱ和LAMP2A蛋白表达减少(均P<0.05).结论:姜黄素可激活细胞自噬功能促进α-Syn自噬性清除,从而减轻MPTP所致的多巴胺能神经元损伤.
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机体炎症因子和氧化应激标志物介导姜黄素抑制骨性关节炎的作用机制
目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（ MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（ AOPP ）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方法：建立C57BL／6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手术对照组、模型对照组、Cur25组和 Cur50组（术后分别每日接受25μmol／L和50μmol／L浓度姜黄素腹腔注射）。4周后取材，采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化，电子显微镜下观察软骨组织超微结构；培养各组软骨细胞，运用蛋白质印迹法检测各组MMP-2、MCP-1和CD47表达， ELISA和分光光度法检测L-选择素水平及AOPP浓度变化。结果：软骨组织标本形态学变化模型对照组明显， Cur25组次之；与手术对照组比较，模型对照组、Cur25组、Cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1表达均增多（均P＜0.05），CD47表达均下降（均P＜0.05），L-选择素水平及AOPP浓度均增加（均P＜0.05）；与模型对照组比较， Cur25组和Cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1、L-选择素及AOPP的表达下降（均P＜0.05），CD47的表达上升（均P＜0.05），且与Cur25组比较，Cur50组的上述变化更为显著（均P＜0.05）。结论：MMP-2、MCP-1、CD47、L-选择素及AOPP的异常表达与OA软骨退变的病理过程相关。姜黄素可缓解关节软骨的退变，减轻软骨炎症，提高软骨细胞的代谢活性，且此作用与姜黄素的浓度有关。
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姜黄素对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺动脉平滑肌细胞的作用及其机制研究
目的：探讨姜黄素对慢性阻塞性肺疾病（ COPD ）模型大鼠肺动脉平滑肌细胞的作用及其分子生物学机制。方法：将75只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组，模型对照组，姜黄素小剂量组、中剂量组和大剂量组，采用HE染色法观察肺动脉管组织学形态，免疫组织化学染色检测增殖细胞核抗原（ PCNA）、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax ，TUNEL法检测姜黄素对平滑肌细胞凋亡的影响，蛋白质印迹法检测肺组织SOCS-3／JAK2／STAT通路相关蛋白表达情况。结果：模型对照组右心室收缩压（RVSP）、右心室肥大指数（RVMI）均高于正常对照组（均P＜0.05），姜黄素大剂量组和中剂量组RVSP、RVMI均低于模型对照组（均P＜0.05）；模型对照组肺动脉管增厚、平滑肌细胞数量显著增多，而姜黄素中剂量组和大剂量组肺动脉管变薄、平滑肌细胞固缩、变形；模型对照组PCNA、Bcl-2相对表达量高于正常对照组（均P＜0.05），Bax相对表达量低于正常对照组（ P＜0.05）；姜黄素中剂量组和大剂量组PCNA相对表达量低于模型对照组（均 P＜0.05）， Bax相对表达量高于模型对照组（均 P ＜0.05）；模型对照组 SOCS-3蛋白减少、而磷酸化 JAK2、STAT1、STAT3增多，姜黄素中剂量组和大剂量组SOCS-3蛋白增多，磷酸化JAK2、RVMI STAT3减少。结论：姜黄素可促进COPD大鼠平滑肌细胞凋亡，改善平均肺动脉压以及RVMI ，这一作用可能与刺激SOCS-3／JAK2／STAT信号途径有关。
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姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞中核因子-κB相关炎性因子表达的抑制作用
背景 白细胞介素-1β(IL-1β)是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)早期释放的重要炎性因子,研究证实姜黄素能抑制IL-1β诱导的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生,但其是否能够对PVR发挥抗炎作用尚不清楚. 目的 观察姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞移行的影响,探讨姜黄素对IL-1β诱导的RPE细胞中炎性因子表达的影响.方法 采用对数生长期原代培养的第4代兔RPE细胞进行实验,在无血清DMEM培养基中分别添加0、0.1、1.0和10.0 μg/L的IL-1β作用于细胞24 h,分别采用Western blot和逆转录PCR法检测细胞中环氧合酶-2(COX-2)蛋白和mRNA的表达以筛选IL-1β佳质量浓度.将培养的RPE细胞分为IL-1β组和姜黄素+IL-1β组,分别在无血清培养基中添加1.0 μg/L IL-1β和1.0μg/L IL-1β联合10 μg/ml姜黄素作用于细胞24、48和72 h,仅用无血清培养基培养的细胞作为对照组.培养的细胞行苏木精-伊红染色,于光学显微镜下计算进入损伤区的细胞数,比较各组细胞的移行能力;分别采用Western blot法和逆转录PCR法检测各组RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量,采用Western blot法检测并比较各组细胞中核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白和核因子κB抑制蛋白-α(IκB-α)的相对表达量;采用免疫化学染色法检测NF-κBp65、IκB-α和COX-2在各组RPE细胞中的表达和定位. 结果 初分离的兔RPE细胞呈球形,细胞中可见大量黑色素颗粒;第4代细胞色素颗粒明显减少,接近融合的细胞形态为长梭形,呈拉网状分布.免疫细胞化学染色法结果显示,细胞角蛋白(AE1/AE3)在细胞质呈阳性表达.对照组在培养24、48和72 h移行的细胞数分别为(31.93±1.21)、(36.27±2.50)和(38.33±2.40)个,IL-1β组分别为(45.73±2.30)、(71.13±1.92)和(80.60±1.71)个,而姜黄素+IL-1β组分别为(13.13±2.20)、(14.93±1.10)和(12.60±1.51)个,各时间点IL-1β组细胞移行细胞数均明显高于对照组,而姜黄素+IL-1β组移行细胞数均明显低于对照组和IL-1β组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).IL-1β质量浓度为1.0 μg/L时,RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量达峰,以1.0 μg/L IL-1β的剂量进行后续实验.细胞培养后24、48和72 h,姜黄素+IL-1β组细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量均明显低于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).IL-1β作用于细胞后48 h,细胞中NF-κBp65蛋白的相对表达量高,与IL-1β组相比,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中NF-κBp65蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).IL-1β组药物作用于细胞后48 h细胞中IκB-α降至低,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α值均明显高于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫细胞染色结果显示,IL-1β组RPE细胞的细胞核及细胞质中NF-κBp65呈强阳性表达,对照组表达较弱,姜黄素+ IL-1β组细胞中NF-κBp65的表达强度较IL-1β组明显降低;与对照组相比,IL-1β组细胞的细胞质中IκB-α表达强度明显减弱,而COX-2表达明显增强;与IL-1β组比较,姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α表达明显增强,而COX-2表达明显减弱.结论 姜黄素可抑制IL-1β引起的兔RPE细胞的移行,IL-1β通过激活NF-κB信号通路刺激细胞中COX-2的表达,姜黄素可通过阻断这一途径而抑制炎性因子的表达,从而发挥抗炎作用.
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姜黄素对角质形成细胞增殖、周期及相关分子表达的影响
[目的]探讨姜黄素对人角质形成细胞(HaCaT细胞)增殖、周期及其相关分子表达的影响.[方法]MTT法检测姜黄素不同药物浓度和作用时间对HaCaT细胞增殖的影响；用流式细胞仪检测姜黄素作用24 h后细胞周期变化情况；荧光定量PCR检测姜黄素作用24 h后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)的mRNA的表达情况,并与未加入姜黄素的对照组比较.[结果]姜黄素随着浓度增加对HaCaT细胞增殖的抑制作用逐渐增强(P＜0.05)；随着作用时间的延长,对细胞增殖的抑制作用也逐渐增强(P＜0.05)；姜黄素处理24 h后,细胞G1期比例与对照纽相比显著增加(P＜0.05)；姜黄素各浓度组的PC-NA、CyclinD1的mRNA的表达与对照组相比均下降(P＜0.05).[结论]姜黄素能够抑制HaCaT细胞增殖,引起细胞周期阻滞于G1期,以上作用与其能够下调PCNA、Cyclin D1的表达有关.
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姜黄素对胃癌SGC7901细胞生长及survivin蛋白表达的影响
[目的]研究姜黄素对胃癌SGC7901细胞的生长抑制作用,并探讨其可能的作用机制.[方法]MTT比色法测定细胞增殖抑制率;Hoechst33342荧光染色及电镜观察细胞形态及结构变化;免疫细胞化学染色法观察survivin蛋白表达的改变.[结果]一定浓度姜黄素作用SGC7901细胞后,细胞生长受到明显抑制,且抑制率呈浓度和时间依赖性;荧光显微镜下可见核浓缩,聚集,碎裂等典型的凋亡特征;电镜下可见到凋亡小体形成;免疫细胞化学染色法显示随着姜黄素作用浓度增加,survivin蛋白表达降低.[结论]姜黄素在一定浓度范围内可以明显抑制胃癌SGC7901细胞增殖,并下调抗凋亡基因survivin的表达.
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姜黄素对宫颈癌Hela细胞株放疗增敏的机制研究
目的 探讨姜黄素对宫颈癌Hela细胞放疗增敏作用的可能机制.方法 采用Western-blot法检测姜黄素和放射线单独作用以及放射线与姜黄素联合应用后宫颈癌Hela细胞中p53、p21、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况.结果 25μmol/L姜黄素与4Gy的X-射线均能升高p53、p21、Bax蛋白的表达,降低Bcl-2蛋白的表达(P＜0.05),两者联合作用比单独作用变化更加显著(P＜0.01).结论 姜黄素对人宫颈癌Hela细胞的放疗增敏作用可能与其上调p53、p21蛋白及下调Bcl2/Bax比例有关.
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姜黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖及MMP-9、COX-2mRNA表达的影响
目的 研究姜黄素在体外对人胃癌细胞BGC-823生长增殖的影响及其抗肿瘤的相关分子机制.方法 体外培养人胃癌BGC-823,MTT法检测姜黄素在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算IC50值；RT-PCR法检测其对COX-2、MMP-9 mRNA表达的影响.结果 MTF结果显示:相同干预浓度姜黄素抑制人胃癌细胞增殖,其24、48、72 h的IC50分别为:(62.192±7.802) μmol/L、(46.365±8.991) μmol/L和(45.503±9.126) μmol/L; RT-PCR结果显示:正常对照组及姜黄素干预组的人胃癌细胞BGC-823MMP-9 mRNA灰度值分别为:0.704±0.045,0.147 ±0.052(P＜0.05)；COX-2 mRNA灰度值分别为:0.721 ±0.060,0.190±0.027(P＜0.05).结论 姜黄素抗肿瘤机制可能通过抑制COX-2及MMP-9 mRNA的表达来抑制胃癌细胞增殖.
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姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1与HGF表达的影响
目的 探讨TGF-β1与HGF在肺纤维化中的作用及不同浓度姜黄素对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织中HGF及TGF-β1表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠90只,随机分为6组.分别为空白对照组(A组)、模型组(B组)、泼尼松治疗组(C组)、姜黄素50组(D组)、姜黄素100组(E组)、姜黄素200组(F组),应用气管内给予博莱霉素制作肺纤维化动物模型.造模7、14、28 d时分三次取材.用RT-PCR,Westem blot检测各组肺组织中HGF及TGF-β1 mRNA及蛋白的表达.结果 A组28 d TGF-β1的光密度值(0.693±0.028)及灰度值(0.96±0.10)低.B组28 dTGF-β1光密度值(1.586±0.020)及灰度值(1.77±0.15)高、F组28 d TGF-β1光密度值(0.881±0.032)及灰度值(1.19±0.12)与B组比较低.而HGF的光密度值及灰度值的检测正好相反.F组28 d HGF的光密度值及厌度值高.B组与D组的HGF和TGF-β1光密度值及灰度值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 姜黄素抑制肺纤维化的机制之一可通过增高HGF的活性同时减低TGF-β1的活性来实现,这种作用有一定的剂量依赖性.
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姜黄素对大鼠早期肝缺血再灌注损伤肺的保护作用
目的 探讨姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤(再灌注1、3 h)肺的保护作用.方法 将大鼠随机分为假手术组(A组)、对照组(B组)和实验组(C组).通过检测再灌注早期肺组织病理学的改变及肺组织中SOD、CAT、MDA、MPO的含量来评价姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤肺的保护作用.结果 姜黄素可减少大鼠肝缺血再灌注损伤肺间隔的水肿和肺泡中红细胞和白细胞的渗出.姜黄素提高了早期缺血再灌注后肺组织中SOD、CAT含量,降低了肺组织中MDA、MPO含量.结论 姜黄素通过抑制肺组织中的氧自由基的生成及中性粒细胞的浸润,从而在早期大鼠肝缺血再灌注损伤中起到了对肺的保护.
关键词： 姜黄素/药理学 再灌注损伤/预防和控制 肝疾病/药物疗法 肺/药物作用 -
姜黄素对前列腺癌细胞C-erbB-2,Bax和Survivin表达的影响
目的 探讨姜黄素对前列腺癌DU145细胞株C-erbB-2,Survivin和Box的影响.方法 利用细胞培养和SP免疫组织化学技术观察了前列腺癌细胞C-erbB-2,Survivin和Box表达及姜黄素对它们的干预作用.结果 对照组DU145细胞质中Survivin和C-erbB-2有较高表达,Box表达很弱.姜黄素加入(浓度50 μmol/m)后培养6 h,12 h,24 h和48 h,DU145细胞中Survivin,C-erbB-2表达逐渐减弱,而Bax逐渐增加,12～24 h达高峰.结论 姜黄素能够上调促凋亡基因Bax表达和下调Survivin和C-erbB-2表达,姜黄素抗肿瘤的途径之一干扰DU145细胞基因蛋白表达.
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姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF和HIF-1α表达通过PI3K/AKT/FRAP信号传导通路
目的 探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用.方法 分别加入LY29400225 μmol/L、50 μmol/L,U0126 10 μmol/L、20 μmol/L,rapamycin 5 ng/ml、10 ng/ml处理人肝癌细胞BEL-7402,30 min后加入姜黄素10 μmol/L,对照组单独加入0、10 μmol/L姜黄素,缺氧环境中培养6 h后,行RT-PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达;分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol/L处理人肝癌细胞BEL-7402,缺氧环境中培养6 h后,行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达.结果 姜黄素10 μmol/L+LY294002 25 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+LY294002 50 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 5 ng/ml组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 10 ng/ml组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比降低,差异有统计学意义(P＜0.01);而姜黄素10 μmol/L+U0126 10 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+U0126 20 μmol/L组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比差异无统计学意义(P＞0.05);不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol/L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6 h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低,LY294002 25 μmol/L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达,而对总AKT蛋白表达无明显变化.结论 姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过PI3K/AKT/FRAP信号传导通路.
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三种抗纤维化药物对大鼠肺纤维化模型的疗效观察
目的 筛选强有力的抗肺纤维化药物,为临床治疗提供理论依据.方法 SD大鼠90只分为6组,正常对照组,模型组,姜黄素组,卡介菌多糖核酸组,地塞米松组,联合用药组.除正常对照组气管内灌注0.2 ml生理盐水,其余各组一次性气管内灌注博来霉素生理盐水0.2 ml(5 mg/kg),术后当日给药,正常对照组,模型组1 ml·kg-1·d-1生理盐水,姜黄素组:姜黄素50 mg·kg-1·d-1卡介菌多糖核酸组:卡介菌多糖核酸2.5 mg·kg-1·d-1地塞米松组:地塞米松2.5 mg·kg-1·d-1.联合用药组:地塞米松2.5 mg·kg-1·d-1加卡介菌多糖核酸2.5 mg·kg-1·d-1腹腔注射.用药至处死动物的前一天.于造模后的7、21和28 d各组处死5只大鼠,作HE和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化程度,并测肺组织羟脯氨酸含量.结果 三种药物对肺泡炎和肺纤维化均有抑制作用,以联合用药组效果佳(P＞0.05).结论 肺纤维化的发病机制复杂,联合用药可能取得佳疗效.
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姜黄素通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进软骨细胞增殖的研究
[目的]探讨姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路对软骨细胞增殖的影响.[方法]取4周龄雌雄新西兰大白兔各1只,采用酶消化法构建体外软骨细胞培养体系;应用形态学观察、甲苯胺蓝染色方法进行细胞形态学鉴定;采用细胞计数试剂盒法(CCK-8法)检测不同浓度姜黄素给药24 h后对软骨细胞增殖的影响;将终浓度为5μmol/L、10 μmol/L的姜黄素分别作用于软骨细胞12h、24 h后,采用Western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路中Wnt 2、GSK-3β、β-catenin蛋白表达情况.[结果]当姜黄素的浓度为10 μmol/L时,姜黄素对软骨细胞的促增殖作用为明显.姜黄素能够促进Wnt/β-catenin信号通路中Wnt 2及β-catenin蛋白表达量,且10 μmol/L组较5μmol/L组、24 h组较12 h组的表达量更高,24 h两浓度组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),但12 h的两浓度组与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而GSK-3β结果则正好与上述2种蛋白表达结果相反.[结论]姜黄素对软骨细胞具有一定的保护作用,是中药姜黄发挥抗骨关节炎作用的有效成分之一.
