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麻黄连翘赤小豆汤血清对肥大细胞脱颗粒、组胺生成的影响
本文用含药血清体外作用于大鼠腹腔肥大细胞引起脱颗粒及组织胺释放为指标,观察了麻黄连翘赤小豆汤对Ⅰ型变态反应的影响,结果含该方大鼠血清可明显减少肥大细胞脱颗粒,减少组织胺释放.
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中药血清药理学在神经药理学研究中的应用与规范化
中药血清药理学是近年来才兴起的一门中药药理体外实验方法学,它排除了传统中药体外验中中药粗制剂本身的理化性质对实验的干扰,又能反映药物在体内的生物转化过程及其作用结果,在中药药理的实验方法上具有创新性.中枢神经系统疾病是严重威胁人类健康的疾病之一,本文探讨了中药血清药理学在中枢神经系统药物研究中的应用与技术规范化.
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银杏叶提取物血清药理学方法的建立及验证
目的:建立并验证银杏叶提取物(GBE)血清药理学研究方法.方法:MTT法确定体系中血清添加量;HPLC法结合药效法确定大鼠给药方案及采血时间;以T-SOD、MDA为指标测定该含药血清的抗氧化能力.结果:大鼠按人临床用药等效剂量的5倍,每日两次连续4天灌胃给予GBE,于末次给药后2 h采血时血清中CBE各有效成分的含量高;体系中加入20%该条件下制备的含药血清对大鼠肾小球系膜细胞(MC)正常增殖没有影响;采用该方法制备的GBE含药血清具有明显的抗氧化能力.结论:本实验条件下制备的GBE含药血清具有明显的抗氧化能力,该血清药理学方法能用于GBE含药血清药效及机制研究.
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血清药理学关键问题的存疑与讨论
中药血清药理学作为指导复杂中药成分研究、药效研究的重要实验方法需要不断完善.作者结合自身体会,对其中可能影响血清药理学研究结果的关键问题如:正常和疾病动物药物血清谁更能反映药物的真实疗效、含药血清"等浓"问题、含药血清采集时间、血清是否应该灭活和预处理四个方面进行探讨,以期为中药血清药理学的相关工作提供参考.
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中药血清药理学方法学研究——抗菌试验含药血清处理方案的研究
通过对用柴黄片制备的新鲜含药大鼠血清进行三种不同处理(灭活、未灭活、未灭活冻干)后抗菌试验结果的比较,探讨中药血清药理学抗菌试验时血清处理可选用的方法.结果发现,使用新鲜未灭活活血清直接加样结果优于经灭活及未灭活冻干处理的血清.
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芍药甘草复方效应组分对大鼠胃底环行肌条作用的研究
目的:确定芍药甘草复方效应组分对大鼠胃底肌条作用的配比关系.方法:以大鼠胃底环行肌条收缩强度为指标,运用血清药理学方法采用正交设计观察芍药甘草复方效应组分对乙酰胆碱(Ach)下的离体大鼠胃底环行肌条的影响,由结果分析得出佳配比.在此基础上进一步做确证性实验.同时,采用HPLC法测定含药血清图谱.结果:芍药甘草复方效应组分的佳配比即含芍药苷效应组分、含甘草酸效应组分与含甘草总黄酮效应组分的配比为A3B3C3,含芍药苷效应组分和含甘草总黄酮效应组分均系影响药效的主要因素.在灌胃给予芍药甘草复方效应组分后120min所采血清的指纹谱中出现一些新的峰.结论:芍药甘草复方效应组分能抑制大鼠胃底环行肌条的收缩,含芍药苷效应组分、含甘草酸效应组分与含甘草总黄酮效应组分佳组方配比为1:1:2.
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鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在中药研究中应用方法探讨
本文对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型(鸡胚CAM)进行改良,尝试用中药血清药理学方法、组织匀浆、中药多糖及生药等给药方式,将本血管活性整体模型引入中医药研究中.
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中药"益肾清火"方对骨髓基质细胞生物学活性的影响
目的 采用血清药理学方法,观察中药"益肾清火"方对骨髓基质细胞(BMSCs)生物学活性的影响,探索该方在牙周炎骨修复中的作用和机理.方法 选择12-15月龄SD大鼠,分为A、B、C、D、E共5组.A组为空白对照组,B组为牙周炎造模组,C组为造模后灌服中药高剂量组,D组为造模后灌服中药中剂量组、E组为造模后灌服中药低剂量组.牙周炎造模后灌胃10 d,采集大鼠血清作用于体外培养的BMSCs,观察BMSCs增殖活性和碱性磷酸酶产生情况的变化.结果 C组后一次灌胃后0.5 h采集的血清与A组血清作用相近,对细胞增殖作用强,与其余各组有统计学差异(P＜0.01),而B组作用差;C组后一次灌胃后1 h采集的血清对细胞碱性磷酸酶的产生及活性影响较其余各组更强(P＜0.01).结论 中药"益肾清火"方对牙周炎动物BMSCs有促增殖和诱导成骨分化的作用.
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滋肾化瘀泻浊方对实验性IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞的影响
目的探讨滋肾化瘀泻浊方对IgA肾病(IgAN)肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响.方法以牛血清白蛋白(BSA)的葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导制作大白鼠IgAN模型,采用血清药理学方法,提取各组大鼠的血清作用于体外培养的MC体系,观察其对MC增殖情况的水平.结果滋肾化瘀泻浊方具有抑制MC增殖的作用,与正常组和模型组比较有显著性差异(P＜0.01).结论滋肾化瘀泻浊方对MC增殖有明显抑制作用,这可能是该方防止IgAN的机制之一.
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灵芪蠲肝胶囊含药血清对活化大鼠肝星状细胞凋亡的影响
目的 观察灵芪蠲肝胶囊含药血清对血小板衍化生长因子(PDGF)诱导的活化大鼠肝星状细胞(HSC-T6)凋亡的作用,并观察其对凋亡基因Bcl-2 、Bax蛋白表达的影响,探讨其可能的抗肝纤维化机制.方法 首先制备含药血清:SD大鼠随机分为3组,分别用生理盐水(A组,10 mL/kg),复方鳖甲软肝片药液(B组,1.5g/kg),灵芪蠲肝胶囊药液(C组,4.25 g/kg)灌胃7d,每日1次.经腹主动脉采血,静置、离心、灭活、过滤,取得含药血清.以PDGF 10 ng/mL刺激活化HSC-T6.将各组含药血清按200 mL/L分别作用于HSC-T6.0、12、24、48 h后采用流式细胞技术检测各组HSC-T6凋亡情况以及Bcl-2、Bax的表达.结果 B、C组含药血清作用于HSC-T6细胞12、24、48 h,细胞凋亡率较A组升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而B、C组间的差异无统计学意义(P＞0.05).各组组内不同时间点比较,除A组外,B、C组在不同时间点的两两比较差异均有统计学意义,细胞凋亡率随时间的延长出现明显上升(P＜0.05).含药血清作用于HSC-T6细胞12、24、48 h,B组、C组Bcl-2的表达较A组明显下降,Bax的表达出现明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05),而B组与C组间差异均无统计学意义(P＞0.05).除A组外,B组和C组在不同时间点的两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),Bcl-2蛋白的表达在0h高,随时间的延长表现为下降趋势(P＜0.05),Bax蛋白的表达随着时间的延长,整体表现为上调趋势(P＜0.05).结论 灵芪蠲肝胶囊可以诱导活化的HSC-T6凋亡,其机制可能为影响Bcl-2/Bax表达失衡,从而发挥其抗纤维化作用.
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中药血清药理学研究初探
随着时代的进步,科学技术的发展,特别是医学模式的转变和全球疾病谱的改变,人们对卫生保健、提高生活质量的要求更加迫切,中医药由于在慢性病防治领域、养生保健方面具有明显的优势与特色而备受注目,然而受到自身体系及研究方法的制约,中医药学尚无突破性的飞跃.如何让中医药走向现代化、国际化是一项迫切的任务.1988年日本学者田代真一提出血清药理学这一概念,为中医药研究开辟了一条新途径,血清药理学引起了越来越多的重视,显示出一定的应用前景.
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灵芪蠲肝胶囊含药血清对活化大鼠肝星状细胞TIMP-1、MMP2及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响
目的:检测灵芪蠲肝胶囊含药血清对PDGF诱导活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)T6的TIMP-1、MMP2和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响.方法:30只SD大鼠随机分为3组,每组10只,用生理盐水(A组,10 mL/kg)、复方鳖甲软肝片药液(B组,1.5 g/kg)、灵芪蠲肝胶囊药液(C组,4.25 g/kg),灌胃7 d,腹主动脉采血.以PDGF 10 ng/mL活化HSC-T6,分别再用各组含药血清200 mL/L作用HSC-T6.24 h时采用ELISA和RT-PCR方法,检测各组上清液TIMP-1、MMP2和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达.结果:与A组比较,B、C组TIMP-1、Ⅰ、Ⅲ型胶原均下降,MMP2明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);B、C组间TIMP-1、Ⅰ、Ⅲ型胶原表达差异无统计学意义(P>0.05);C组MMP2表达量与B组比较,差异也无统计学意义(P>0.05).结论:灵芪蠲肝胶囊调节TIMP1及MMP2及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,减少细胞外基质分泌及增强降解,发挥其抗肝纤维化作用.
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血清药理学与膜片钳技术对川芎扩冠离子机制的探讨
目的 通过观察分析川芎灌胃动物后分离的含药血清(含川芎血清)对猪冠状动脉血管及平滑肌细胞BKCa的作用,旨在从细胞分子水平阐述其扩冠机制,也为探索建立血清药理学与膜片钳技术结合于中药研究的联合技术奠定基础.方法 用膜片钳实验及冠状动脉血管条实验观察含川芎血清、川芎主要活性成分川芎嗪(阳性对照)和空白血清(阴性对照)对BKCa的作用以及对离体猪冠状动脉血管条的影响.结果 在内面向外式和贴附式膜片上,含川芎血清和空白血清对BKCa通道无激活作用,但在内面向外式膜片上,阳性对照川芎嗪对BKCa通道具有激活作用,且川芎嗪具有对抗高钾(45mM)去极化所致的冠脉血管条收缩的作用,含川芎血清和空白血清无此作用.结论 川芎嗪对BKCa通道具有直接激活作用,含川芎血清在体外实验中对BKCa通道无明显激活作用.
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紫槁软胶囊含药血清抗流感病毒京科-68的实验研究
目的:观察紫槁软胶囊含药血清(ZQ)对亚洲甲型流感病毒京科-68(H3N2型)的作用.方法:采用细胞体外技术培养MDCK细胞,应用观察细胞病变法(CPE)与MTT法,观察紫槁软胶囊含药血清(ZQ)高、中、低剂量组对京科-68的生物合成,吸附及杀灭作用.结果:紫槁软胶囊含药血清(ZQ)高、中剂量组对京科68均有抑制作用(P<0.01):高,中剂量血清组对京科68吸附MDCK有抑制作用(P<0.05);各剂量组对京科-68没有显示直接杀灭作用(P0.05).结论:ZQ对亚洲甲型流感病毒京科-68(H3N2型)生物合成和吸附有一定抑制作用.
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用血清药理学方法观察羊蓝合剂对体外培养成骨细胞的影响
目的观察老年大鼠含羊蓝合剂(YLM)血清对体外培养成骨细胞的作用.方法用血清药理学方法,在新生大鼠头骨成骨细胞培养液中,分别加入不同浓度(72g/kg、36g/kg、18g/kg)的老年大鼠含YLM血清,观察成骨细胞的增殖功能和分化功能.结果成骨细胞增殖率,YLM-H、M、L组分别为153、123、115%,与对照组比较,P<0.001、P<0.05;成骨细胞ALP活性,YLM-H、M、L组分别为1.3460±0.1867、1.0420±0.1495、0.9600±0.1354,其中YLM-H、M组与对照组(0.8410±0.1049)比较,P<0.001、P<0.01;成骨细胞BGP分泌,YLM-H、M、L组分别为86.50±22.13、74.20±17.42、62.20±15.95,其中YLM-H、M组与对照组(53.80±16.56)比较,P<0.01、P<0.05.结论老年大鼠含YLM血清对成骨细胞的增殖和分化功能具有增强作用.
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前列通窍胶囊含药血清对家兔离体膀胱逼尿肌作用的实验研究
目的:运用血清药理学方法,观察前列通窍胶囊含药血清对家兔离体膀胱逼尿肌活动的影响,并初步探讨其作用机制.方法:制备前列通窍胶囊含药血清,将家兔离体膀胱逼尿肌置于恒温平滑肌槽中,应用Powerlab/8s生物信号采集处理系统记录肌条的活动,观察前列通窍胶囊含药血清对各标本的影响,以及加入不同阻滞剂后含药血清对各标本的作用,分析作用机制.结果:1、空白对照组、空白血清组,含药血清7组的作用差异具有统计学意义(P<0.05).2、与空白血清组相比,中、高浓度组对膀胱逼尿肌作用的差异有统计学意义(P<0.05); 3、与中浓度含药血清组相比,维拉帕米可以阻断前列通窍胶囊含药血清对膀胱逼尿肌的收缩作用,差异有统计学意义(P<0.05)结论:随着给药天数的增加,前列通窍胶囊含药血清增加膀胱逼尿肌收缩幅度、收缩频率及活动力的作用逐渐加强.不同浓度含药血清组对膀胱逼尿肌作用的差异有统计学意义.前列通窍胶囊含药血清对膀胱逼尿肌可能是通过L型钙通道来发挥作用.
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中药及其血清对神经干细胞增殖分化影响的研究进展
神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在体外的定向增殖分化一直是国内外研究的焦点,影响其分化的因素众多.以往关于中药对神经干细胞作用的研究,大多集中在体内研究或将中药直接加入反应体系内,而新近发展起来的血清药理学实验方法越来越受到研究者的重视.本文对中药及其血清在体内外影响NSCs增殖分化情况做一简要综述.
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复方黄黛片中药血清药理学研究方法的建立
目的:建立复方黄黛片(CRNIT)中药血清药理学研究方法. 方法:以兔为含药血清的供体,以NB4,K562等人白血病细胞株为研究对象,采用析因设计,观察给药与否、血清灭活与否、血清浓度及培养时间各因素对白血病细胞株抑制率的影响及四因素间的交互作用. 结果:①正常、含药兔血清砷浓度分别为(0.010±0.001) mg/L和(0.110±0.006) mg/L(P<0.01);②给药与否、血清灭活与否、血清浓度、培养时间各因素不同水平间的差异有统计学意义,且四因素间有交互作用;③不同组合的兔血清在100～400 mL/L浓度下对NB4,K562细胞株的生长均有不同的抑制作用,抑制率与浓度间呈现出良好的依赖关系. 结论:① 0.75g/(kg*d)的剂量灌服于兔并给药5 d是制备复方黄黛片含药血清较为理想的给药方案;②给药与否、血清灭活与否、血清浓度、培养时间是构建CRNIT含药兔血清反应体系的关键因素;③对正常血清进行灭活处理有助于减少因动物健康生理状态与病理状态的差异而对实验结果产生的影响;未灭活的含药兔血清可全面展示复方黄黛片的抗白血病作用;④当反应体系中血清浓度为100～400 mL/L时,实验结果稳定.
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中药制剂的疗效与血清药理学关系综述
血清药理学实验方法能以接近药物在体内的环境来进行药理作用，非常接近真实的药理过程，尤其适用于中药制剂的实验。对于一些复方制剂的药理实验用以评价其药效和了解其复杂的作用机制，还能同步研究其相应的药动力学及血清药化学作用机制。目前，而中药制剂的疗效是药学工作者一直追求的目标，更好的了解如何进行中药的制剂过程才能达更好的疗效是达到目标的前提，而血清药理学就为我们提供了更好的条件。
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瑞香狼毒分子量小于一万的醇提部位小鼠药物血清体外抗肿瘤活性
目的:研究瑞香狼毒(SC)小于10 000分子量醇提部位体外抗肿瘤活性.方法:制备SC分子量小于10 000醇提部位(SCES)制剂,小鼠口服不同剂量SCES及服药后不同时间采血,分离血清.SCES药物血清处理BEL-7402、SGC-7901和L-1210细胞,检测细胞MTT转化率.结果:SCES药物血清对BEL-7402、SGC-7901和L-1210细胞MTT formazan的形成均有显著的抑制作用; 随着给药剂量的增加, 药物血清的细胞增殖抑制作用增强.5%的3～24 gkg-1药物血清处理BEL-7402、SGC-7901和L-1210细胞48 h,抑制率分别为16.60%～56.88%,27.53%～56.11%,37.73%～67.08%;6 g*kg-1 1、2、4、8 h药物血清,抑制率分别为6.18%～29.21%,9.62%～35.13%,17.13%～45.91%.结论:SCES有明显抗肿瘤作用;对不同肿瘤细胞有明显选择性.
