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10%中性缓冲福尔马林固定组织HE染色的改良方法
目前免疫组化技术和分子病理技术已被广泛应用,为确保检测结果的准确性,选用10%中性缓冲福尔马林固定病理组织1.在实际工作中,10%中性缓冲福尔马林固定的组织常规HE染色效果不如普通10%福尔马林,尤其是染液用过一段时间后现象更为明显.为提高10%中性缓冲福尔马林固定的组织HE染色的效果和延长染液的使用寿命,本科室将常规HE染色方法进行改良,取得满意的效果,现介绍如下.
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FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较
随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格.固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断.福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱[1].本实验采用FineFix固定液(以下简称FF)与福尔马林液固定的组织进行对比,经FF固定的组织形态结构完整,尤其在提取DNA和RNA的质和量上具有明显的优越性[2].
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冰醋酸在调节HE染色中的作用
随着分子生物学技术和免疫组化技术在病理诊断中的广泛开展,对组织的固定方法提出了更高的要求,目前适用于分子生物学技术和免疫组化技术的石蜡包埋组织均用10%中性福尔马林固定,效果好.但是用10%中性福尔马林固定的组织用原配方经HE染色后,效果却不如普通10%福尔马林固定的组织好.为了使10%福尔马林固定的组织达到理想的HE染色效果,我们通过对染色配方及染色时间进行改良和调整,并反复实践,取得了较好的效果.
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对福尔马林固定剂相关理论的再认识
福尔马林是组织病理学技术常规应用的组织固定剂,传统组织病理学技术理论[1-6]普遍认为:40%甲醛水溶液为福尔马林,40%甲醛水溶液是饱和溶液,40%浓度时甲醛主要由聚合形式构成,4%浓度时甲醛主要由单体形式构成,甲醛水溶液久存易自行分解形成白色副醛沉淀可过滤后使用,出现三聚甲醛沉淀物表示已变性不宜使用等.本文基于基础化学理论知识,总结了福尔马林固定剂相关理论的新认识.
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消除组织切片福尔马林色素方法的探讨
在组织病理染色过程中,福尔马林色素易与含铁血黄素和DAB显色的棕褐色颗粒混淆,可影响组织切片的回顾性研究观察,有时甚至干扰病理诊断.本研究在以往文献报道方法的基础上,用较为简便的方法做到既能有效地去除色素,同时又能对HE、含铁血黄素和免疫组化染色均无较大影响.
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重新研究TP53基因突变和免疫组化的关系--157例弥漫型胶质瘤的对照分析
p53免疫组化与TP53突变状态之间的关系一直存在争议。本组研究重新评估p53免疫组化提示TP53突变状态的价值。通过外显子测序,共检测了157例弥漫型胶质瘤( WHO Ⅱ~Ⅳ级)冷冻组织的TP53基因第4~10外显子。对应所有病例的福尔马林固定石蜡包埋组织检测p53免疫组化(克隆号DO-7),评估表达强度和比率。66例突变病例中发现72个突变,包括60个错义突变,5个无义突变,4个缺失和3个剪切位点变异。通过 ROC曲线分析发现大于10%的肿瘤细胞强阳性可大程度地提示突变。
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预防胸膜活检标本组织变形的方法探讨
目的 探讨预防胸膜活检标本组织变形的方法.方法 60例胸膜活检组织,分为两组,生理盐水浸泡组20例,先置入生理盐水中浸泡15 分钟,然后再置入10% 福尔马林液中固定;直接固定组40例,直接置入10%福尔马林液中固定.结果 生理盐水浸泡组细胞变形率10%(2/20),直接固定组细胞变形率35%(14/40),生理盐水浸泡组比直接固定组细胞变形率明显降低,两组间有显著差别(P<0.05).结论 胸膜活检标本在用福尔马林液固定前,预先用生理盐水浸泡有助于预防标本组织变形.
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食管小细胞癌临床病理分析
病例报告一、临床资料 患者男性,63岁,因进食梗咽感1月余入院.患者一月来出现进食后梗咽感,伴呕吐,偶有胸骨后疼痛,呈持续性针刺样疼痛.查胃镜示:食道中段距门齿25~27 cm处可见不规则隆起型病灶,组织脆,活检易出血.手术标本常规10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,3~4 μm厚切片,采用EnVision两步法,所有抗体均为工作液,购自北京中杉金桥公司, 染色过程按说明书进行, 用D A B 显色.
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氧化槐定碱对福尔马林致痛小鼠大脑GAT-1表达的影响
目的 观察小鼠大脑GABA转运体1(GABA transport-er-1,GAT-1)的变化对氧化槐定碱(oxysophoridine,OSR)镇痛作用的影响.方法 采用福尔马林舔足法观察小鼠静脉(intravenous injection,iv)给药后OSR的镇痛效果,免疫组织化学方法(SABC法)观察OSR对小鼠大脑皮层和丘脑GAT-1免疫阳性细胞的影响,Real time RT-PCR方法检测OSR对福尔马林致痛小鼠大脑GAT-1 mRNA表达的影响.结果iv OSR 500、250、125 mg·kg-1可延长福尔马林所致小鼠的舔足潜伏期(P<0.05,P<0.01);腹腔注射(intraperitoneal,ip)OSR 500 mg·kg-1可使小鼠丘脑和大脑皮层的GAT-1免疫阳性细胞表达明显减少(P<0.01),对小鼠大脑的GAT-1 mRNA的表达也有明显的抑制作用(P<0.05).结论 OSR有明显的镇痛作用,其镇痛作用机制与中枢GAT-1 表达的下调相关.
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不同浓度福尔马林对兔疼痛反应和定量药物脑电图α1频段的影响
目的 观察不同浓度福尔马林对兔疼痛反应和定量药物脑电图α1频段的影响.方法 成年大耳白兔18只,随机分为3组(n=6),建立肌松兔模型后分别在右前肢足底皮下注射1%福尔马林(LD组)、8%福尔马林(HD组)或生理盐水(NS组)0.5 ml.应用定量药物脑电图(quantitative pharmaco-EEG,QPEEG),采用功率谱分析技术,观察注射前后兔QPEEGα1频段功率百分比的变化.另取家兔18只,随机分为3组(n=6),清醒状态下采用上述注射方法建立炎症痛模型.观察兔伤害性行为反应并进行疼痛评分.结果 HD组和LD组对福尔马林刺激伤害反应评分均大于NS组(P<0.01,P<0.01),HD组大于LD组(P<0.01).与注射前相比, 3组兔α1频段功率百分比均增加.HD组增加幅度大(P<0.01),以左侧额、顶区变化为明显.NS组引起的α1频段功率百分比增加幅度小,且仅持续1~2 min.结论 福尔马林所致兔的疼痛反应及兔QPEEGα1频段功率百分比呈浓度依赖性增加,提示α1频段功率百分比有可能成为反映镇痛程度的指标.
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皮内注药对急性内脏炎症痛大鼠抗伤害作用的研究
目的在动物模型上研究皮内注药对内脏炎症痛的抗伤害作用及对其机制进行初步探讨.方法大鼠乙状结肠壁粘膜下定量注射福尔马林(5%,0.1 ml)制作急性内脏炎症痛模型,观察大鼠行为学表现并进行评分.分别在实验区(直肠、乙状结肠相应的脊神经体表分布区)及实验区外(远离直肠、乙状结肠相应的脊神经体表分布区)皮内多点注射0.125 %、0.25 %利多卡因或生理盐水,进行疼痛学评分;在利多卡因皮内注射组,采用高效液相色谱法测定血浆利多卡因浓度. 结果福尔马林注射组同皮内注药组在第一个时间段内疼痛分数差异无显著性(P>0.05).在实验区皮内注射0.25 %利多卡因和生理盐水均能减轻内脏痛反应(P<0.01),而0.125%利多卡因皮内注射对疼痛分数同福尔马林致炎组相比差异无显著性(P>0.05);在实验区外唯有0.25%利多卡因皮内注射有抗伤害效应.皮内注射0.25%利多卡因的血浆浓度高于0.125%利多卡因组(P<0.01).结论在内脏致痛器官的脊神经体表分布区皮内注射可降低动物的痛行为学评分,其作用可能与药物经皮内吸收入血和局部刺激激活末梢感受器有关.
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逆向电刺激大鼠单侧脊神经背根产生远距离抗炎效应
目的观察逆向电刺激(ADES)大鼠单侧脊神经背根对不同部位的远距离抗炎效应。方法选用大鼠背部皮神经交互兴奋和足底注射2%福尔马林(FM)为2个不同部位的炎症模型。以皮神经交互兴奋后神经纤维的放电频率及机械阈值变化和FM诱发脊髓背角磷酸化cAMP应答原件结合蛋白(p-CREB)表达增高为观测指标。分别观察ADES单侧脊神经背根,对上述指标的影响。结果ADES单侧脊神经背根可以使背部脊神经皮支C类和A啄纤维交互兴奋受到抑制,并抑制对侧足底FM诱发的脊髓p-CREB的表达增高。结论ADES大鼠脊神经背根具有远距离抗炎效应。
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餐馆,添加剂的『重灾区』
餐饮业使用食品添加剂的现象非常普遍,并有愈演愈烈之势,个别的甚至把苏丹红、福尔马林等违法添加物也悄悄搬上了餐桌.专家们提醒,以下6种菜品是餐馆添加剂的"重灾区".1.炒菜类:杭椒牛柳、宫保鸡丁、鱼香肉丝——嫩内粉和色素.牛肉类炒菜是嫩肉粉的消耗大户.扬州大学旅游烹饪学院主任彭景告诉记者,典型的就是杭椒牛柳和铁板牛肉.其实不仅牛肉加嫩肉粉,只要是不新鲜的肉,都可以加.一般抹过嫩肉粉的肉需要用清水再洗一遍,但现在很多餐馆怕麻烦,抹了就直接上锅.为了让肉的颜色更好看,市场上销售的嫩肉粉中都加了亚硝酸盐,如果长期过量摄入,会引起中毒,甚至癌变.
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南安市南同公路"10·11"福尔马林泄漏事故处置
2006年10月11日,一辆满载25吨福尔马林的槽车在南安市侧翻,大量福尔马林泄漏.南安市政府立即启动应急救援预案,由于处置及时,成功地排除了险情,未造成人员伤亡、环境污染.
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血液透析消耗性器材的化学消毒法及透析效果
[目的] 了解血液透析消耗性器材消毒处理后重复使用的效果.[方法] 用次氯酸钠、福尔马林、过氧乙酸与过氧化氢、酒精对血液透析消耗性器材进行综合消毒处理,按常规使用.[结果] 对56例病人用消毒后器材进行4 500次血液透析,无感染发生;消毒后的透析器材对肌酐和尿素氮的清除率均不低于合格指标.[结论] 血透消耗性器材用化学消毒剂综合消毒后复用,只要使用恰当,仍是安全有效的,可以为病人减轻费用负担.
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生殖道尖锐湿疣120例临床病理
本组资料来源于我院1990~1998年9年间的外检材料.均为活检标本,经10%福尔马林液固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜检查.
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青少年上皮性恶性肿瘤病理诊断72例分析
青少年恶性肿瘤以白血病和非上皮起源的实体性肿瘤占大多数[1,2 ],而成人类型的癌在青少年期较为罕见.我院病理科在1972~1997年的外检工作中共诊断青少年上皮性恶性肿瘤72例,现报告如下.1材料和方法本组72例青少年上皮性恶性肿瘤均选自我院病理科1972~1997年的外检档案资料,其中手术切除标本56例,活检标本16例.所有标本均用10%福尔马林固定,石蜡包埋切片,H-E染色,部分病例作网状纤维和免疫组化染色协助诊断.72例共分成5个年龄组:0~1岁为一组,其余按每5岁一个年龄段分为1~5岁、6~10岁、11~15岁、16~20岁组.
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32例同种异体肾移植手术的护理配合体会
同种异体肾移植术是肾脏疾病治疗末期的有效的疗法[1],它为慢性肾功能衰竭、尿毒症患者提供了一种新的治疗手段.现就32例同种异体肾移植手术的护理配合体会报告如下.1 一般资料本组32例,男25例,女7例;年龄16~59岁.所有病例均为慢性肾功能衰竭、尿毒症患者.供受体两者血型相符,淋巴毒<5%,热缺血时间<7min.2 术前准备2.1 手术室的准备:术前两天应清洁消毒手术间,移去无关的一切用物,用1%的过氧乙酸擦拭墙壁、门窗、地面、仪器等,然后用福尔马林40ml/m2+高锰酸钾30g/m2行蒸汽消毒.
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不同固定方法在阴道毛滴虫IFA中的实验研究
滴虫性阴道炎是国内外广泛流行的性传播疾病之一,临床上传统的生理盐水涂片法因其检出率较低、易漏诊而逐渐被其它先进方法所取代.目前,IFA为研究阴道毛滴虫的重要方法之一,有望成为诊断滴虫性阴道炎和流行病学调查滴虫感染的重要手段之一.本文选用不同的固定方法(福尔马林、甲醇、乙醇、丙酮和自然干燥)固定阴道毛滴虫,确定IFA试验的佳固定方法.同时对IFA实验条件进行研究.1 材料和方法
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高压加热组织抗原修复的免疫组化应用
免疫组化技术对病理诊断的作用越来越为大家共识,但遗憾的是,大多数抗体只适用新鲜细胞或冰冻切片,因为常规的福尔马林固定石蜡包埋组织的许多抗原决定簇被醛基交联封闭,以至于无法和抗体结合[1].