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卡马西平与牛血清白蛋白的相互作用
目的 研究卡马西平(CBZ)与牛血清白蛋白(BSA)在缓冲溶液中、不同温度下的相互作用.方法 采用荧光光谱法和紫外光谱法.结果 运用荧光猝灭双倒数图计算在不同条件下二者的结合常数KA;根据Forster非辐射能量转移理论,求出37℃时给体(BSA)和受体(CBZ)之间能量转移的效率和结合距离;并根据热力学参数确定了CBZ和BSA之间的作用力类型.结论 CBZ和BSA之间有较强的相互作用,以疏水作用力为主.同步荧光技术表明,CBZ对BSA的构象有影响.
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荧光法测定奥硝唑片的含量
目的 建立奥硝唑片的荧光分析法.方法 采用铁-冰醋酸还原体系,将奥硝唑还原后,在激发波长355 nm、发射波长412 nm处测其荧光强度.结果 奥硝唑浓度在1.0 ×10-6～2.0 ×10-4 mol·L-1范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,RSD=3.52%,检出限达1.09×10-7mol·L-1.结论 所建方法测定奥硝唑片剂的含量,结果令人满意.
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溴化十六烷基三甲基铵荧光法测定四环素
在一定的酸碱环境和溴化十六烷基三甲基铵存在下,四环素荧光强度增强.测定下限为0.001μg/ml,线性范围为0.01～12.0μg/ml.该法用于实际样品中四环素含量的测定,结果满意.
关键词： 四环素 荧光法 溴化十六烷基三甲基铵 -
血管紧张素转化酶抑制剂体外筛选模型的建立
目的:本文通过紫外法与荧光法测定血管紧张素转化酶(ACE)活性,建立血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的体外筛选模型.方法:采用紫外法和劳光法测ACE的活性.结果:两种方法均有良好的线性关系,测定卡托普利对ACE活性的抑制作用结果相符.荧光法避免了样品色素的干扰,可测定丹参提取液对ACE的抑制作用.结论:本筛选模型采用微量法,用酶标板进行测定,操作简便、快速、节约试剂和样品,具有高效、快速、可靠的特点.
关键词： 血管紧张素转化酶抑制剂 筛选模型 紫外法 荧光法 卡托普利 -
胶束增敏荧光分析法测定痕量Cu
研究发现,在pH 6.4的tris-HCl缓冲介质中,表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)对Cu与头孢羟氨苄(CFD)生成的配合物的荧光有显著的增敏作用.据此建立了SDS胶束增敏荧光分析法测定水中痕量Cu的新方法.在佳实验条件下其浓度线性范围为0.02～1.28 μg/ml,检出限为5.82×10-10g/ml.将新建方法应用于实际水样中Cu的测定,相对标准偏差为小于1.68%,样品加标回收率为94.60%～102.10%,结果满意.
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反复呼吸道感染患儿血清微量元素测定结果分析
目的:研究观察RRI患儿血中锌、铁、硒的含量与RRI患儿的关系.方法:硒用荧光法、铁、锌用火焰光度法测定.结果:RRI患儿血中硒、锌、铁的含量明显低于健康儿童(P＜0.05).结论:对于RRI患儿适当给予补充硒、锌、铁,可望恢复或提高其免疫功能,减少呼吸道感染发作的次数.
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新生儿苯丙酮尿症的筛查和随访
目的开展新生儿苯丙酮尿症的筛查,降低残疾儿童的发生率,提高我国人口素质.方法用荧光法测定新生儿滤纸干血片上的苯丙氨酸浓度以筛查苯丙酮尿症.结果筛查新生儿224 881,阳性18例,筛查阳性率为1/12493.结论苯丙酮尿症越早治疗,预后越好.荧光法具有定量、灵敏、准确、简便、快速之优点,应成为今后筛查苯丙酮尿症的主要方法.新生儿筛查是一系统工程,教育与长期随访以及各部门严把质量关均十分重要.
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四川省新生儿G6PD缺乏症筛查切值的探讨
目的 分析四川片区葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PD)的分布水平,制定适宜的切值.方法 对四川省新筛中心开展四项筛查片区的各市县2014年至2016年12月206420例新生儿G6PD水平的筛查结果进行分析,采用百分位数法确定切值.结果 新生儿筛查的G6PD检测水平呈偏态分布;不同性别、体重及孕周的G6PD亦有显著性差异(性别:χ2=253.754,P<0.05,体重:χ2=297.288,P<0.05,孕周:χ2=649.618,P<0.05);根据稳健回归统计发现,孕周与G6PD的相关性好(B= —0.883, P=0),故分析考虑增设早产儿因素,但分析表明增设早产儿切值,除增加假阳性率外,无任何意义,故仅设一个切值即可.G6PD缺乏症在四川片区的总发病率为1.20%,其中男婴为2.2%,女婴为0.17%.结论 四川地区的G6PD缺乏症发病率明显低于全国其他地区,建议筛查切值统一定为3.4IU/gHb,以减少假阳性率和召回率.
关键词： 葡萄糖—6—磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿筛查 切值 荧光法 -
荧光法测定同型半胱氨酸的方法学评价
目的 对荧光法同型半胱氨酸测定试剂盒进行初步临床应用评价.方法 依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的EP5-A,EP6-A,EP7-A 分别对杏恩公司生产的荧光法同型半胱氨酸测定试剂盒进行了精密度评价、线性评价、抗干扰试验,并依据EP9-A2与高效液相色谱法进行了对比试验.结果 高浓度水平(Hcy 20.0 μmol/L)的批内精密度和总精密度分别为1.88%和3.71%,低浓度水平(Hcy 10.0 μmol/L)的批内精密度和总精密度分别为2.76%和3.98%;在0～ 60.0 μmol/L 范围内,测定结果线性良好;胆红素在500.0 μmol/L,三酰甘油在15.0 mmol/L,维生素C在10 mmol/L以内,血红蛋白在16.0 g/L内,干扰相对偏差小于5%,对实验结果无明显干扰;荧光法与高效液相色谱法测定的同型半胱氨酸结果差异无统计学显著性意义(P>0.05),相关性良好(r2=0.976 1).结论 荧光法同型半胱氨酸检测试剂盒在测定精密度、线性范围、抗干扰等方面的性能可以满足临床检测的需要.
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应用荧光法筛查葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏
目的 建立适于葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏筛查的检测方法.方法 用荧光法对新生儿筛查滤纸干血片标本进行检测,对阳性者召回抽静脉血以G6PD/6PGD比值法进行确诊.结果 用荧光法测定7 780份新生儿筛查滤纸血片标本的G6PD活性,阳性358例,阳性率为4.6%(358/7 780),对召回的358例阳性以比值法进行确诊试验,阳性315例,阳性率为4.0%,两者符合率为87.9%(315/358).结论 荧光法是一种半定量的方法,具有较高的特异性和准确性,且操作简便、检测快速、成本低廉,适合用滤纸干血片标本进行大规模的新生儿筛查.
关键词： 新生儿筛查 葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏 荧光法 -
改良血浆皮质醇放射免疫测定法
皮质醇是糖皮质激素的主要激素,测定外周血液浓度可作为肾上腺皮质功能推断的指标,不仅如此,皮质醇浓度的测定还对恶性肿瘤的诊断有很大的帮助[1],但因其在血浆中的含量较微,定量测定困难.多年来,虽然也有用荧光法直接测定的报道,因特异干扰及需要荧光比色计设备,未能推广应用.近几十年来,普遍采用测定尿中17-羟皮质类固醇代谢产物[2],以间接推断肾上腺皮质的功能状态.
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痕量维生素B3的双水相萃取与荧光测定
本文分析了聚乙二醇6000-硫酸铵双水相体系对维生素 B3的佳萃取条件，并结合荧光法对其进行测定。且在佳萃取条件下进行荧光扫描确定佳激发/发射峰为λex /em＝319．0nm/392．0nm。聚乙二醇6000-硫酸铵双水相体系对维生素B3的一次性萃取率在91％～93％之间，线性范围8．0×10-6～2．0×10-4g/L ，检出限为1．3×10-7g/L。该方法萃取率高、线性范围宽、检出限低，可维生素B3的分析测定。
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石墨炉法测定复方氨基酸注射液中限量吕方法研究
第一章
前言
铝是一种自然界分布广泛的具有慢性蓄积性的低毒金属，人体摄入过多的Al将直接破坏神经内的遗传物质脱氧核酸的功能。注射液中的铝离子由于不经胃肠道消化吸收而直接进入血液，增加了对人体的危害。近年来，注射液引起人体功能的危害在国内外已经受到了广泛的关注和重视。美国药典明确要求做出如下说明：本制剂中含有的铝具有毒性，在全非胃肠道给药时，如果肾功能不全会达到中毒水平。研究显示肾功能不全者，在全非胃肠道给药时，如果接受铝的水平超过4－5μg／kg，累积的铝与中枢神经和骨骼的毒性水平相关。在前期研究中，我们参照日本药局方，中国饮用水标准及其它相关文献［1，2］，对紫外比色法，高效液相荧光法，ICP－OES，ICP－MS进行了考察。本文进一步对原子吸收分光光度－石墨炉法测定复方氨基酸中痕量铝方法的可行性进行了全面研究。 -
荧光法研究兔体内多潘立酮药时曲线及脏器内分布
采用荧光法测定家兔血浆及脏器中多潘立酮浓度.生物样品经二氯甲烷提取净化后,异丙醇定容,于EX＝290nm,EM＝320nm处测荧光强度.多潘立酮浓度在0.5～5.0μg/ml范围内与荧光强度线性相关,回归方程C＝0.205F-0.398,样品提取回收率为96.6%,RSD＝5.6%.
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荧光法测定氟康唑滴眼液的含量
目的:建立荧光法测定氟康唑滴眼液的含量. 方法:261 nm为激发波长,284 nm为发射波长,狭缝5 nm;光电倍增管增益:正常;时间扫描速度10 nm/min. 结果:氟康唑在0.002~0.026 g/L范围内线性关系良好. 回归方程Y=1.53+2.66X, r=0.9998. 3种浓度的平均回收率(n=9)分别为99.4%,100.6%,100.8%;相对标准偏差(RSD)分别为0.38%,0.63%和0.56%. 结论:本法专属性强,结果准确. 可用于氟康唑滴眼液的含量测定.
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荧光检测异丙酚血药浓度
目的:探讨异丙酚血药浓度测定的荧光检测方法.方法:在含异丙酚的人体血浆样品中加入磷酸缓冲液及环己烷/正丁醇,振摇、离心,取上清液测荧光强度(激发波长λex=265 nm,发射波长λem=310nm).结果:异丙酚标准液在浓度为0.1～15.0 mg/L的范围内,其荧光强度与质量浓度间具有线性关系(r=0.9997).异丙酚的平均加样回收率大于95%,日内和日间RSD均小于3%.结论:该方法简便、准确、灵敏度高,可用于临床异丙酚血药浓度检测.
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荧光法对胸水肿瘤细胞的鉴别诊断
目的:探讨荧光法检测胸水肿瘤细胞对恶性及良性肿瘤的鉴别诊断.方法:采用吖啶橙荧光法(AOF)、免疫荧光法(IGF)、血卟啉荧光法(HOF)检测胸水肿瘤细胞.结果: 11例乳腺癌中三种方法的阳性率均为100%;42例肺癌阳性率分别为95.2%、95.2%、92.8 %;68例肺结核阳性检出率分别为4.41%、2.94%、1.47%;18例肺部感染阳性检出率分别为1.11%、0.55%、0;5例自发性液气胸和5例慢性肺源性心脏病均为阴性. 结论:三种荧光法均可用于胸水肿瘤细胞的鉴别诊断.
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脂质过氧化产物--丙二醛的简便测定
目的建立一种简便测定丙二醛(MDA)的新方法.方法采用硫代巴比妥酸荧光法,正丁醇萃取静置,过夜.以520 nm为发射波长,546 nm作为激发波长,测定样品中微量MDA的含量.结果丙二醛在0.56～8.96 μmol*L-1之间线性关系良好.回归方程为:Y＝2.2204X+0.0708,r=0.9996,RSD和平均回收率分别为4.86 %和98 %.结论该法简便、易行,不需要混匀器,特别适合于MDA的微量测定.
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荧光法测定食品中氰化物含量的分析探讨
采用荧光法测定食品中氰化物含量,将荧光素钠还原无色后,在pH9.0硼酸盐缓冲液中并有铜离子存在下,荧光强度与氰化物浓度成正比.在试验条件下,若取样量10.0g,检出限0.005mg/kg,回归方程y=1.56×10-3+0.20x,r=0.9995,P＜0.01.取3份不同样品按本法测定6次,进行精密度实验相对标准偏差分别为2.5%,1.6%,0.7%,平均加标回收率分别为103.3%、96.7%、102.5%.
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荧光法和DNA杂交法检测重组技术产品中残余DNA的比较
目的:对用于检测重组技术产品中残余DNA的荧光法及DNA杂交法进行比较性评价.方法:应用地高辛标记的DNA杂交法以及PicoGreen荧光法对3批重组人干扰素α2b中外源DNA残留量进行测定.结果:荧光法检测结果显示3批重组人干扰素α2b制品中DNA残留量分别为每人份剂量(0.695±0.021)ng、(0.664±0.021)ng、(0.916±0.017)ng,而用地高辛标记的DNA杂交实验由于阳性基因组DNA灵敏度偏低以至于结果无法判断.应用琼脂糖凝胶电泳和PicoGreen荧光法测得由生产单位提供的阳性DNA浓度明显偏低,与标示量不符,这说明阳性DNA含量偏低是本次DNA杂交实验失败的主要原因.通过对该阳性DNA重新定量后冉进行DNA杂交检测,结果显示3批重组人干扰素α2b制品的DNA残留量均小于每人份剂量1 ng,该结果与PicoGreen荧光法相一致.结论:荧光法具有简便、快速,自动化程度高,不受工程菌种类限制,能够精确定量等特点,优于传统的DNA杂交法,更适于重组制品残余外源DNA含量的常规检定.
