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川芎嗪与人血清白蛋白结合的荧光法测定
目的研究川芎嗪与人血清白蛋白的作用.方法采用荧光法测定了川芎嗪对人血清白蛋白荧光的猝灭.结果根据荧光测定的结果,得到川芎嗪与人血清白蛋白的形成常数.结论川芎嗪与人血清白蛋白能形成复合物.
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改良反相高效液相色谱法测定血清中异丙酚浓度
目的 创建一种新型反相高效液相色谱-荧光法测定血清中异丙酚浓度,为临床上快速准确的监测异丙酚血药浓度提供科学实用的检测手段.方法 应用20%高氯酸沉淀血清样品后,混匀离心取上清液50μL进样分析.分析柱为Diamonsil(R)C18(250mm×4.6mm,5 μm),流动相为乙腈-水(90∶10)(冰醋酸调pH=4.0),流速1.0mL/min,荧光激发波长为276nm,发射波长为310nm.柱温为室温.结果 当测定浓度范围为0.05-10μg/mL时,异丙酚与内标麝香草酚的峰面积之比与浓度呈良好的线性关系(r=0.9975),低检出浓度50ng/mL,日内与日间精密度在4.78-6.59之间,明显小于15%.结论 改良反相高效液相色谱法测定人血清异丙酚浓度具有准确高效、灵敏快捷等特点,适用于科研和临床异丙酚血药浓度的监测.
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改良荧光法测定全血硒的探讨
本文介绍用荧光法在93荧光光度计上测定全血硒的探讨,此法低检测限为7.5ng.用0～0.02μg硒标准溶液做重复测定,其标准曲线的相关系数为0.9996,其检出值的变异系数为3.0～9.1%.全血中硒检出值的变异系数为14.5%,平均回收率为104.2%.本法的精密度和准确度均符合要求.
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4种检测方法在低值血小板计数中的应用比较
目的 探讨电阻法(PLT-I)、光学法测定(PLT-O)、荧光法(PLT-F)、显微镜法计数在低值血小板计数(PLT)中的应用.方法 从2014年1月至2016年7月住院的1 200例患者中,分别采集乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)静脉血,经SysmexXN-1000全自动型血细胞分析仪检测出PLT＜50×109/L的血液标本为研究标本,并根据PLT数据的差异对血液标本进行分类,即PLT为20×109/L～＜50×109/L、PLT为10×109/L～＜20×109/L和PLT＜10×109/L 3个组;继而分别通过对PLT-I、PLT-O、PLT-F、显微镜法对上述EDTA-K2标本PLT进行检测,其中以显微镜法计数结果作为金标准,使用统计学软件SPSS19.0对所有检查结果进行分析.结果 经Sysmex XN-1000全自动型血细胞分析仪检测出PLT＜ 50×109/L的血液标本共计600例;当PLT为20×109/L～＜50×109/L和PLT＜10×109/L时,PLT-I、PLT-O、PLT-F检测结果与显微镜法PLT检测结果比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);当PLT为10×109/L～＜20×109/L时,PLT-I、PLT-F与显微镜法PLT检测结果比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),然而PLT-O同显微镜法PLT检测结果比较,差异有统计学意义(P＜0.05);根据相关性分析,PLT-I、PLT-O、PLT-F与显微镜法均有相关性(P＜0.05),且PLT-F与显微镜法相关性极强.结论 当PLT为20×109/L～＜50×109/L和PLT＜ 10×109/L时,PLT-I、PLT-O、PLT-F和显微镜法均能较准确地计数低值血小板数量;当PLT为10×109/L～＜20×109/L时,因误差导致,PLT-O检测低值血小板数目明显偏低,应进行复检;在PLT＜50×109/L的情况下,PLT-F检测法表现出极强的再现性,因此其对判断是否进行血小板输注更为有利.
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某地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶筛查结果分析
目的了解广西地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD ）缺乏症的发病情况，为患该病新生儿的防治提供参考依据。方法采用荧光法对本筛查中心的30556例新生儿进行G6 PD筛查检测，对可疑患儿召回并用G6PD/6PGD比值法进行确诊。结果所有被检测的新生儿中G6PD缺乏症的初筛阳性率是7．36％，其中男性为10．89％，女性为2．86％；对民族进行分组，汉族G6PD缺乏症的初筛阳性率是5．29％，壮族为9．54％，其他少数民族为5．42％。对可疑患儿召回确诊发现荧光法与G6PD/6PGD比值法的符合率为97％，重度G6PD缺陷者符合率达100％。结论荧光法准确性高、简便、快捷、费用低廉，广西壮族自治区作为G6PD缺乏症的高发区，应常规开展新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的筛查工作，使G6PD缺乏症患者能够及时采取预防性措施。
关键词： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 荧光法 发病率 新生儿筛查 -
干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎后HBV DNA定量变化的动态观察
为提高对慢性乙型病毒性肝炎的抗病毒治疗效果，我们采用动态观察HBV DNA定量变化来指导抗病毒治疗，现将结果报告如下。1. 材料：男性48例，女性12例，年龄12～52岁，平均（38±6）岁，病程＞1年，血清HBsAg、HBeAg、抗-HBc均阳性（ELISA法，试剂由上海科华公司提供）HBV DNA基因拷贝>1×102/ul（PCR荧光法），血清谷丙转氨酶（ALT）＞100U/L。诊断均符合1995全国第五次传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案。2. 方法：HBV DNA基因拷贝定量1×102～9.9×103/μl的30例为A组。1×104～108/μl的30例为B组。两组年龄、性别具可比性。两组均采用相同治疗方案，1个月α-1b干扰素（赛若金，深圳科兴生物制品公司）3MU肌注1次/d，胸腺肽100mg（长春、长生实业有限公司提供）静滴1次/d。
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高效液相色谱荧光法测定Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度
目的:建立Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度的高效液相色谱荧光测定方法.方法:Beagle犬口服消旋体酒石酸美托洛尔100mg后取1.5h血样进样测定,手性色谱柱为Chiralcel OD-H,流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺(65:35:0.1),荧光检测波长Ex和Em分别为267 nm、290nm,柱温为25℃,流速为0.6 ml/min,内标物为(S)-阿替洛尔.结果:酒石酸美托洛尔2种对映体检测浓度在10～2000ng/ml范围内线性关系良好,平均回收率为96.12%～116.9%(RSD＜7.6%).结论:该分析方法选择性好、准确性高、重现性好,适于酒石酸美托洛尔对映体的药动学研究.
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反相高效液相色谱-荧光法测定人血浆中维库溴铵的浓度
目的:建立以反相高效液相色谱-荧光法测定人血浆中维库溴铵浓度的方法.方法:色谱柱为Shim-pak CLC-ODS,流动相为1,4-二氧六环-0.1mol/L磷酸二氢钠∶0.11mol/L庚烷磺酸钠缓冲液(20∶80),样品提取分离后用流动相溶解,在Ex/Em=380/452 nm波长处检测.结果:维库溴铵检测浓度在20～200ng/ml范围内线性关系良好(r=0.9 995),低检测浓度为10ng/ml(S/N=10),绝对回收率在98.63%～99.81%之间,方法回收率在98.83%～102.13%之间,日内、日间变异系数均小于10%.结论:本方法简便、稳定、灵敏,可满足临床药动学研究的需要.
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高效液相色谱荧光法测定替米沙坦药物浓度的方法优化
目的改进高效液相色谱荧光法测定人血浆中替米沙坦的浓度.方法用AgilentZorbaxODS色谱柱(150mm×4.6mm,5 μm),流动相为三乙胺-40%乙腈(1:1 000),流速1.0 mL/min,萘乙酸为内标.结果优检测条件为激发波长300 nm,发射波长380 nm.线性回归方程C=93.861f+9.119 9,r=0.999 8(n=5),替米沙坦浓度的线性范围是10～1 500μg/L,低检测限10 μg/L.结论该法准确、可靠,适用于替米沙坦的血药浓度测定.
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高效液相色谱荧光法测定健康人血浆中赖诺普利浓度
目的:建立测定血浆中赖诺普利浓度的方法,为临床血药浓度的测定提供快速、有效的分析手段.方法:高效液相色谱法荧光法,采用HypersilODS柱,流动相为20mmol/LKH2P04缓冲液(pH=3.0)-甲醇(35:65,V/V),流速为1.0mL/min;血浆样品经固相萃取后与荧光试剂(荧光胺)发生衍生化反应,进样量为20μL;荧光检测器的激发波长为383 nm,发射波长为477 nm.结果:赖诺普利浓度在2～200 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.997 8),平均绝对回收率为68.55%(n=15),日内与日间精密度均小于3%,低检测限为1 ng/mL;内源性物质不干扰测定.结论:高效液相色谱荧光法工作曲线稳定,灵敏度高,操作步骤简单,可以用于赖诺普利的药动学和药效学研究及临床血药浓度的监测.
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甲亢Ⅰ号口服液的制备及质量标准的研究
目的:制定甲亢Ⅰ号口服液的质量标准.方法:采用荧光法和薄层色谱法对制剂中的主药地黄、枸杞子进行定性鉴定.结果:能从样品中检出相应的斑点.结论:此法简便、灵敏、可靠,具有实用性.
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荧光法测定聚合氯化铝中硒
聚合氯化铝是我国目前应用广泛的饮用水水质净化处理剂,其所含有的硒含量高低直接关系到饮用水的卫生质量,从而影响到饮用水人群的健康.故有必要对聚合氯化铝中硒进行检测.
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荧光法测定保健食品维C蜂胶胶囊中维生素C含量
目的 建立保健食品维C蜂胶胶囊中维生素C的分析方法-荧光法.方法 样品经乙醚溶解,用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液萃取,萃取液用活性碳氧化,再与邻苯二胺(OPDA)反应生成有荧光的喹唔啉,用荧光分光光度计测定,根据其荧光强度与维C的浓度在一定条件下成正比,计算维C蜂胶胶囊中维C含量.结果 精密度:0.25％,回收率:97.60％～101.02％,线性相关系数:0.999.结论 本法具有灵敏度高,准确度好,能满足保健食品中维生素C的定量分析.
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全血保存过程中血浆中S-亚硝基硫醇的测定
目的 建立荧光法测定血浆中S-亚硝基硫醇(RSNOs)的方法 并探讨影响其测定的相关因素.方法 建立标准曲线,确定荧光法的准确性与可重复性;以检测过程中某一种影响因素(如样品制备条件、孵育时间等)为变量观察多因素对检测结果 的影响;取9份全血(400 ml/份)在保存d1、d7、d14、d21、d28和d35时分别检测血浆中RSNOs含量.结果 同一份血浆,相同实验条件下检测10次,变异系数为(CV)=3.5%;不同离心力470、734、1057、1 438 g制各的血浆,RSNOs含量分别为(9.22±0.14)、(9.97±0.11)、(10.40±0.05)、(10.91±0.01)μmol/L;铜离子浓度为100、150、200 μmol/L时的RSNOs含量分别为(13.83±0.02)、(14.23 ±0.03)、(13.22±0.01)μmol/L;在其他条件相同的情况下,孵育1、1.5、2、2.5 h样品的RSNOs含量分别为(10.34±0.04)、(10.75±0.02)、(12.31±0.09)、(10.53±0.06)μmol/L;在其他条件相同的结果 下,血浆中加入FHb为20、40、60、80、100 μl时,检测结果 为(13.58±0.02)、(13.41±0.02)、(13.10±0.01)、(12.60±0.06)、(12.17 ±0.01)μmol/L;全血保存d1、d7、d14、d21、d28和d35血浆中的RSNO含量分别为(12.94±2.92)、(10.67±2.18)、(6.87±1.24)、(7.13±1.17)、(7.01 ±1.66)和(5.80±1.55)μmol/L 结论 荧光法测定RSNOs具有良好的准确性与可重复性;不同离心力制备的样品、不同的孵育时间、不同的铜离子浓度以及血液样品中的游离血红蛋白对荧光法检测RSNOs的结果 均会有影响;全血保存过程中RSNOs含量呈下降趋势.
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福州市无偿献血者人类疱疹病毒6型感染流行病学调查
人类疱疹病毒6型(HHV-6)是1986年发现的一种新侣型疱疹病毒[1],属于疱疹病毒β亚科.人类疱疹病毒6型人群中的感染率很高,健康成人中约有60%～90%有感染HHV-6的证据[2],但是各地的感染率不尽相同.HHV-6可能与临床上多种疾病相关,如AIDS、淋巴瘤、以及各种移植患者术后感染等,因此颇受重视.为了解HHV-6在福州地区的感染情况,笔者调查了福州市无偿献血者中HHV-6感染情况.
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荧光法在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用价值
目的 探讨荧光法在乳腺癌患者前哨淋巴结活检(SLNB)中的应用价值.方法 前瞻性收集2014年5月至2015年2月期间甘肃省妇幼保健院收治的乳腺癌患者36例,通过于乳晕处皮内及皮下组织内注射吲哚菁绿(ICG)荧光示踪剂,动态引导定位寻找前哨淋巴结(SLN),分析ICG的示踪效果和SLNB对腋窝淋巴结转移状态的预测效果.结果 36例患者均成功行SLNB,SLN检出率为100％;共检出SLN 86枚,1～3枚/例,平均2.39枚/例;从皮肤切开至取出SLN的手术时间为3～22 min,平均9 min.术中冰冻病理学检查示16例有SLN癌转移,20例无SLN癌转移;1例术中冰冻病理学检查示无SLN癌转移者,术后石蜡切片病理学检查示有SLN癌转移.ICG示踪下SLNB的灵敏度为94.1％ (16/17),假阴性率为5.9％ (1/17).结论 荧光法动态引导定位用于乳腺癌SLNB,具有定位准确、检出率高及创伤小的优势,能较准确地预测乳腺癌患者腋窝淋巴结的状态.
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HPLC测定肾移植患者血浆中的霉酚酸
目的 采用HPLC法测定肾移植患者血浆中的霉酚酸酯活性代谢物霉酚酸.方法 采用Symmetry C18柱(150 mm× 3.9 mm,5μm),流动相为乙腈-32 mmol· L-1甘氨酸缓冲液(pH9.2)(17∶83),柱温30℃,流速1.0 mL· min-1,用荧光检测法,激发波长342 nm,发射波长425 nm,进样量为20 μL.结果 霉酚酸0.01 ～40.00 μg·mL-1与峰高的线性关系良好(r=0.999),低定量限为0.01μg·mL-1;提取回收率、加样回收率分别为92.29％ ～ 95.01％、100.69％ ～ 110.57％,日内、日间RSD均＜8％.结论 所用方法灵敏、快速、准确,符合生物样品分析方法的基本要求,适用于霉酚酸血药浓度的测定.
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大黄水煎液中大黄酸在急性肝损伤大鼠体内的药动学研究
目的 比较大黄水煎液中大黄酸在正常与急性肝损伤大鼠体内的药动学差异.方法 采用一次性ip D-氨基半乳糖制备大鼠急性肝损伤模型,单次ig大黄水煎液1.54 g·kg-1后,于不同时间点取血,分离血浆,用HPLC-荧光法测定大黄酸的血药浓度,以Kinetica软件计算药动学参数.结果 药动学过程均符合二室模型.正常组雌鼠体内大黄酸Cmax和AUC均显著高于雄鼠.急性肝损伤组雄鼠的Kel显著增加,MRT显著缩短,AUC显著降低.结论 大黄酸在雌性大鼠体内的生物利用度高于雄性;大黄酸在肝损伤大鼠体内消除较快,吸收量较小,其动力学改变可能是由于肝脏对大黄游离蒽醌存在明显代谢或转化作用.
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类黄酮体外抗糖尿病活性及相关性质的研究
目的 研究类黄酮的α-葡萄糖苷酶、晚期糖基化产物(AGEs)的抑制活性,并探讨抑制活性与其性质间的相关性.方法 采用紫外分光光度法和荧光法分别测定类黄酮对酶、AGEs的抑制率并计算出IC50值,推出抑制活性必需基团及数目,用HPLC法测得蛋白结合率,计算Pearson相关性.结果 酶抑制活性必需基团为B环邻二酚羟基和C环α,β-不饱和酮基,AGEs抑制活性必需基团为B环邻二酚羟基;两者抑制率与必需基团数的r分别为0.820、0.767.人血清白蛋白(HSA)、糖化人血清白蛋白(G-HSA)的结合率分别与AGEs抑制率(r=0.759)和XlogP(r=0.905)高度相关.结论 α-葡萄糖苷酶和AGEs的抑制率与必需基团数高度相关,AGEs的抑制活性还与HSA的结合率高度相关,G-HSA的结合率与酯水分配系数高度相关.
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芪参复康胶囊对衰老模型小鼠单胺类神经递质的影晌
目的 探讨中药芪参复康胶囊(QSFK)对D-半乳糖致衰老模型小鼠单胺类神经递质的影响.方法 用D-半乳糖制备小鼠衰老模型,QSFK灌服6周,用荧光法检测去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸含量的变化.结果 QSFK能明显提高D-半乳糖致衰老模型小鼠脑组织中单胺类神经递质的含量,中、大剂量组作用显著,小剂量组作用不明显.结论 QSFK具有明显的抗衰老作用.
