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HPLC法测定增食颗粒中柚皮苷和橙皮苷的含量
目的 建立增食颗粒中柚皮苷和橙皮苷的含量测定方法.方法 采用HPLC法,Kromasil c18柱,以乙腈-水-磷酸(20:80:0.02)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长283 nm,柱温35℃,进样量20μL.结果 柚皮苷回归方程为:Y= 1.989 6 × 106X-1.243 × 103,r=0.999 9,线性范围为0.178 5～0.892 5μg.橙皮苷回归方程为:Y=1.964 9× 106X-1.015×104,r=0.999 9,线性范围为0.0736 8～0.368 4 μg.柚皮苷平均回收率为97.24%,,RSD-1.21%.橙皮苷平均回收率为96.95%,RSD=1.49%.结论 方法简便、准确,重复性好,可作为增食颗粒的质量控制方法.
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高效液相色谱法测定术后饮中橙皮苷的含量
目的 建立术后饮中橙皮苷含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为CenturySILC18-AQ(250mm×4.6mm,5μn),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(21:79),流速为0.8 mL/min,检测波长为284 nm,柱温为室温,进样量为20μL.结果 橙皮苷浓度在1.00～10.04μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.59%,RSD=0.72%.结论 方法简便、准确、重复性好,可作为术后饮中橙皮苷的含量测定方法.
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HPLC法测定恒古骨伤愈片中橙皮苷的含量
目的 建立恒古骨伤愈片中橙皮苷含量的检测方法.方法 采用高效液相色谱法,Shim-pack-C18色谱柱(150mm×4.6mm,5mm),以乙腈-0.4%磷酸水(20:80)为流动相,检测波长283 mm.结果 橙皮苷线性范围为0.194-0.970 μg,r=0.999 9,橙皮苷的平均回收率为98.50%,RSD-0.63%.结论 该方法用于测定恒古骨伤愈片中橙皮苷的含量,具有简便、准确、灵敏的特点,可作为该制剂质量控制的指标.
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痛泻要方水提取工艺的正交试验研究
目的采用正交试验法,对痛泻要方的水提取工艺进行优选.方法采用高效液相色谱法测定橙皮苷的含量,结合100mL水中浸膏密度两个指标优选痛泻要方的提取工艺.结果提取次数对提取效率有非常显著影响(P＜0.01),加水量、提取时间对提取效率没有显著影响(P＞0.05).结合生产实际、综合考察,选定佳工艺为A1B1C3,即加8倍量水,提取3次,每次1 h.结论优选工艺可行,含量测定方法准确可靠.
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正交试验法优选通络颗粒剂的提取工艺
目的 优选通络颗粒剂的提取工艺.方法 采用正交试验法,分别对水提部分和醇提部分进行提取工艺考察.水提部分,以提取次数、加水量、提取时间为考察因素,以芍药苷含量和浸出物重量为指标;醇提部分,以乙醇浓度、提取次数、溶剂用量、提取时间为考察因素,以橙皮苷含量和浸出物重量为指标,对提取工艺方案进行优选.结果 优选的提取工艺为:水提部分,处方药材用12倍药材量的水煮提3次,每次1.5 h;醇提部分,加10倍药材量的60%乙醇回流提取2次,每次1.5 h.结论 佳提取工艺的确立为通络颗粒剂的生产提供了理论上的依据.
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高效液相色谱法测定蕾香正气片中陈皮的含量
目的 建立藿香正气片中陈皮的含量测定方法.方法 液相色谱法.色谱柱:Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.05mol·L(-1)磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节PH值为3.0)(20:80);流速1.0ml·min(-1);柱温:30℃;检测波长:284nm.结果 陈皮中橙皮苷在0.2403～1.1214μ·ml(-1)范围内呈线性关系(r=1.000O,n=6),平均加样回收率为98.08% RSD为0.68%(n=9).结论 该方法 操作简便,结果 可靠,可用于藿香正气片的含量测定.
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茉莉根化学成分的研究
目的:分离鉴定茉莉根化学成分.方法:用乙醇提取,经硅胶、大孔树脂和ODS柱色谱分离,通过IR,NMR及MS波谱分析法确定结构.结果:分得5个化合物,分别鉴定为正三十二碳酸(Ⅰ),正三十二烷醇(Ⅱ),齐墩果酸(Ⅲ),胡萝卜苷(Ⅳ),橙皮苷(Ⅴ).结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到.
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缬草属药用植物极性成分的HPLC指纹图谱研究
目的:研究缬草属药用植物中极性成分HPLC指纹图谱及测定方法.方法:采用HPLC/UV测定缬草属药用植物甲醇提取液的指纹图谱.结果:建立了缬草属药用植物极性成分的HPLC指纹图谱,发现了12个色谱峰为共有峰,确定了其相对保留时间和峰面积比值的范围.结论:利用缬草属药用植物极性成分的指纹图谱可以对不同种缬草属植物进行鉴别,并可在一定程度上进行质量控制.
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枳实饮片中3类化学成分含量测定
目的:测定枳实饮片中3类成分含量.方法:HPLC测定黄酮类成分橙皮苷和柚皮苷含量、生物碱类辛弗林含量,药典法测定挥发油含量.结果:10个批次的饮片中橙皮苷含量为1.25%～16.6%,柚皮苷含量为0%～13.9%,相差很大.其中有3个批次的饮片中不含有柚皮苷,而橙皮苷含量却很高.柚皮苷与橙皮苷的含量之和相差不大,为10.8%～16.6%;辛弗林含量为0.058 5%～0.676%;挥发油含量为0.1%～2.2%,差异较大.结论:枳实饮片3类化学成分含量差别很大.
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高效液相色谱法测定加味保和冲剂中橙皮苷的含量
目的: 建立一种测定加味保和冲剂中橙皮苷含量的方法。方法:高效液相色谱外标法, 采用YWG-C18(10 μm, 4.6 mm id×250 mm), 甲醇-水-醋酸(30∶70∶4)为流动相, 紫外检测波长283 nm。结果:线性范围为0.08～0.40 μg,r=0.9994, 回收率99.2%, RSD 1.3%(n＝6)。结论：本法测定加味保和冲剂中橙皮苷的含量,操作简便,结果准确。
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橙皮苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及HPA轴的影响
目的:观察橙皮苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响.方法:采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制备大鼠抑郁模型,60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、橙皮苷(40,80,160 mg· kg-1)组及阳性药氟西汀(10mg.kg-1)组.连续灌胃给药3周,糖水偏爱实验和强迫游泳实验测定动物行为学,检测血清皮质酮(CORT)、肾上腺指数、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRF) mRNA以及下丘脑室旁核糖皮质激素受体(GR)蛋白,探讨橙皮苷的抗抑郁作用及机制.结果:与模型组相比,橙皮苷(40,80,160 mg·kg-1)治疗组大鼠的糖水消耗量均明显增加、强迫游泳不动时间有不同程度的减少.同时,橙皮苷能逆转CUMS大鼠过高的血清CORT水平和肾上腺指数,并能抑制CUMS大鼠下丘脑CRF mRNA表达、上调室旁核GR蛋白表达.结论:橙皮苷能有效改善CUMS大鼠行为学,表现出抗抑郁作用,其机制可能与调节HPA轴的功能有关.
关键词： 橙皮苷 慢性轻度不可预见性应激 抗抑郁 下丘脑-垂体-肾上腺轴 -
橙皮苷对肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响
肝纤维化是不同致病因素引起的肝脏慢性损伤的共同病理过程,是向肝硬化发展的必然阶段.课题组前期研究发现,橙皮苷(HDN)对四氯化碳诱导的化学性肝纤维大鼠具有很好的保护作用.该实验在前期研究的基础上,通过建立体外血小板衍生生长因子(PDGF)诱导的肝星状细胞(HSC)-T6模型,观察HDN对HSC-T6增殖的抑制作用,ELISA法检测HSC-T6上清液中Ⅰ型胶原(Collagen)的含量,RT-PCR技术测定HSC-T6中转化生长因子(TGF)-β1,Smad2,Smad3,Smad7,结缔组织生长因子(CTGF) mRNA的表达,Western blot技术检测HSC-T6中TGF-β1,CTGF蛋白的表达,探讨HDN对HSC中TGF-β1/Smad信号通路的影响及其可能的作用机制.结果显示,PDGF不仅可明显促进HSC-T6增殖与Collagen Ⅰ的生成,还可显著增加TGF-β1,Smad2,Smad3,CTGF mRNA和TGF-β1,CTGF蛋白的表达;给予HDN干预后,可显著抑制HSC-T6增殖与Collagen Ⅰ的生成,降低TGF-β1,Smad2,Smad3,CTGF mRNA和TGF-β1,CT-GF蛋白的表达,升高Smad7 mRNA的表达.表明HDN抗肝纤维化作用可能与其调控TGF-β1/Smad信号通路,从而抑制HSC的活化、增殖有关.
关键词： 橙皮苷 肝星状细胞 TGF-β1/Smad信号通路 -
橙皮苷改善肥胖小鼠糖脂代谢的机制研究
该研究阐明橙皮苷对高脂饮食诱导的肥胖小鼠糖脂代谢紊乱的干预机制.40只雄性C57小鼠,根据饮食随机分为对照组、肥胖组、橙皮苷低剂量组及高剂量组,每组各10只.喂养16周后检测各组小鼠体重、肝指数、内脏脂肪指数,评价糖代谢状况(葡萄糖糖耐量、血糖、胰岛素水平及HOMA-IR)及血脂情况;Real-time PCR法检测肝脏胰岛素信号通路(IR,IRS1,Glut2,Glut4)、脂代谢途径(SREBP-1c,FAS,ACC,PPARα)关键基因及AMPK表达水平.经过16周喂养,肥胖组小鼠明显肥胖,体脂沉积显著(P＜0.01),葡萄糖耐量降低(P＜0.05).血糖、血脂、胰岛素水平及HOMA-IR指数均高于对照组(P＜0.05).橙皮苷干预后,无论低剂量组还是高剂量组小鼠体重、血糖、血脂均较肥胖组明显降低(P＜0.05),血清胰岛素水平及HOMA-IR亦显著下降(P＜0.05).其中大剂量组获益明显(P＜0.05).橙皮苷能够上调AMPK mRNA(P＜0.05),继而影响胰岛素信号通路中IR,IRS1,Glut2/4的mRNA表达(P＜0.05),同时降低脂代谢相关基因(SREBP-1c,FAS,ACC)的表达(P＜0.05),并升高PPARα mRNA水平(P＜0.05).大剂量组变化尤为明显(P＜0.05).橙皮苷降低了肥胖、高血糖、高血脂,缓解了胰岛素抵抗,这一作用可能与其活化AMPK继而调控胰岛素信号通路及脂质代谢信号通路等密切相关.
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橙皮苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡及滑膜组织Bcl-2/Bax表达的影响
目的:研究橙皮苷(HDN)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞的凋亡诱导作用及滑膜组织Bcl-2/Bax表达的影响.方法:60只SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、HDN(40,80,160 mg·kg-1)剂量组和雷公藤多苷组;用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型;DNA琼脂糖凝胶电泳观察滑膜组织凋亡情况;原位末端标记检测(TUNEL)法检测滑膜组织中滑膜细胞凋亡及凋亡指数;免疫组化法检测滑膜组织Bcl-2和Bax表达变化.结果:HDN(80,160 mg·kg-1)治疗组大鼠滑膜组织DNA经电泳分析可见凋亡细胞DNA梯状条带;HDN(80,160 mg·kg-1)组大鼠滑膜细胞凋亡指数较模型组显著升高;与模型组比较,HDN(80,160 mg·kg-1)组大鼠滑膜组织Bcl-2表达明显降低而Bax表达明显升高,各剂量HDN均可显著降低Bcl-2/Bax.结论:HDN能通过抑制滑膜组织Bcl-2和促进Bax的表达、降低Bcl-2/Bax,诱导从大鼠滑膜细胞凋亡,这可能是其治疗AA的作用机制之一.
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柑橘类黄酮对Neuromedin U2受体的激活效应及siRNA干扰分析
目的:利用NMU2R稳定细胞株和阴性细胞株并通过siRNA干扰分析筛选柑橘类黄酮中对NMU2R有激活效应的物质.方法:利用NMU2R细胞考察9种柑橘黄酮对NMU2R的激活效应,然后针对激活效应较高的柑橘类黄酮,分别用阴性细胞和NMU2R的siRNA干扰分析来排除假阳性干扰.结果:柑橘类黄酮中的橙皮苷和川陈皮素能有效激活NMU2R,橙皮苷和川陈皮素的效能、半效浓度、效价强度分别为4.688,318.970 μmol·L-1,200.933 μmol·L-1和4.758,5.832 μmol·L-1,3.124μmol·L-1.结论:柑橘类黄酮中的橙皮苷和川陈皮素都对NMU2R有激活效应.川陈皮素的半效浓度较低,具有药用开发价值.
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薄荷茎、叶中黄酮类成分在不同采收期的含量差异性研究
为考察不同采收期薄荷茎、叶中有效成分的动态变化规律,探讨薄荷药材的适宜采收期,该研究以橙皮苷、香叶木苷、香蜂草苷、蒙花苷为黄酮类指标性成分,采用已建立的薄荷中黄酮类成分含量一测多评法,测定了3个产地不同采收期的薄荷中4种黄酮苷类成分分别在茎、叶样品中的含量,并运用统计图和主成分分析法对这些数据进行统计整理和综合评价.这4种成分在3个产地不同采收期的薄荷叶中的含量普遍高于茎,而同一产地不同采收期薄荷中各成分含量呈动态变化;就江苏产区而言,4月中旬、9月中旬以及10月下旬采收的薄荷中4种成分综合评价得分较高.结合药材产量与有效成分含量,江苏产区薄荷适合的采收期应为9月中旬与10月下旬,与当地传统采收期基本一致.
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HPLC测定橘络中橙皮苷的含量
橘络为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种干燥成熟果实中果皮与内果皮之间的维管束群,具有理气化痰、活血通络的功效[1].据调查目前中药材市场上的橘络主要是在橘瓣罐头的罐装工艺中经热烫剥皮分瓣去络收集而来的[2],并且存在着杂质多、色泽差的问题.文献报道,橘络含黄酮类化合物多,主要为橙皮苷[3].
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郁枢达片中橙皮苷的含量测定
郁枢达片是中国中医科学院中药所根据王永炎院士多年临床经验方而研制成的中药制剂,由广藿香、陈皮、草豆蔻和苍术等中草药组成,具有醒脾化湿,理气解郁之功.
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HPLC测定荆芥中橙皮苷的含量
荆芥为唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia Briq.的干燥地上部分[1].主要化学成分为挥发油、多种黄酮类化合物、单萜苷、荆芥苷[2]等.荆芥常用的质量控制方法有挥发油测定法[2]、总黄酮测定法[3]、气相色谱法[4],其中历版药典均以测定挥发油含量为质量控制指标.但若单以挥发油的量为其质量控制的唯一指标,市售的药材中至少有50%以上不合格[5];因此有必要对荆芥的质量控制指标进行补充.故作者采用HPLC测定了荆芥中所含橙皮苷的含量,同时为荆芥的质量控制提供更多依据.
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RP-HPLC测定保和丸中齐墩果酸、熊果酸的含量
保和丸是一通治食郁(积)的著名方剂,目前国内已有多家药厂生产.虽然《中国药典》已有其标准,但定性质量检测是以连翘为对照药材,而定量检测则以陈皮中的橙皮苷为对照成分,检测对象缺乏统一性也比较单一[1].仅见有保和丸中橙皮苷含量测定的报导[2],未见齐墩果酸、熊果酸同时测定的报道.为了进一步完善保和丸的质量标准,作者建立了保和丸复方制剂中有效成分齐墩果酸和熊果酸(来源于山楂、连翘)[3-6]的RP-HPLC定量测定方法,该方法简单、准确、重复性好.
