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顺铂对肺癌细胞耐药基因表达水平的影响
目的: 研究顺铂(DDP)对肺癌细胞耐药基因MRP1,MGMT,XPA和XPB表达水平的影响,探讨不同耐药机制在肺癌耐药过程中的作用.方法: 以噻唑蓝还原法(MTT)检测DDP对肺癌细胞A549生存率的影响,实时荧光定量PCR技术检测DDP处理前后肺癌细胞MRP1,MGMT,XPA和XPB mRNA的表达水平.结果: 不同浓度DDP(1.25~40 μg/ml)处理肺癌细胞48 h,细胞的生存率从74.7%降至17.4%.4 μg/ml DDP处理肺癌细胞12, 24和48 h后,细胞生存率分别为96.1%,73%和48.5%.DDP处理引起细胞的MRP1 mRNA表达水平先下降后上升;MGMT mRNA表达水平下降;XPB和XPA mRNA表达水平均增高.结论: DDP可以导致肺癌细胞耐药基因MRP1,MGMT,XPA和XPB mRNA表达水平的改变,提示多种耐药机制参与了DDP引起的肺癌细胞耐药.
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改良多重实时荧光定量PCR法测定抑癌基因MGMT、p16、CDH13和RASSF1A甲基化 在肺癌早期诊断中的作用
目的:建立改良多重实时荧光定量PCR法,检测抑癌基因MGMR、p16、CDH13和RASSF1A基因甲基化,探讨其在肺癌早期诊断中的应用.方法:选取30例病理确诊为肺癌的患者作为肺癌组,30例病理确诊为良性病变的患者作为对照组.建立改良实时荧光定量PCR体系.检测受试者血清MGMT、p16、CDH13和RASSF1A基因甲基化,对比两组基因甲基化阳性率,计算四项基因甲基化单独及联合用于肺癌早期诊断的敏感度和特异度.结果:肺癌组受试者血清MGMT、p16、CDH13和RASSF1A显著高于对照组(P<0.05);MGMT、p16、CDH13和RASSF1A四项基因甲基化联合检测用于肺癌早期诊断的敏感度和特异度显著高于单项指标检测(P<0.05).结论:建立了多重实时荧光定量PCR法用于MGMT、p16、CDH13和RASSF1A基因甲基化检测,联合检测用于肺癌早期诊断具有较高的敏感度和特异度.
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大肠癌CD133(+)、Musashi-1(+)干细胞与临床病理学因及MGMT、ERCC1、TS关系的研究
目的 探讨大肠癌CD133(+)、Musashi-1(+)干细胞与临床病理因素及MGMT、ERCC1、TS的关系.方法 应用免疫组织化学方法(SP法)检测42例大肠癌组织的CD133、CD138、Musashi-1、MGMT、ERCC1、TS蛋白,对各指标之间的相关关系及其与临床病理学因素之间的关系进行分析.结果 ①CD133与组织类型、Dukes分级、静脉侵袭、远处转移及毛细血管密度(MVD)等有关(P<0.05);CD138、Musachi-1与组织类型、浆膜侵犯、静脉侵袭、淋巴管侵袭、淋巴结转移、远处转移及MVD等有关(P<0.05),CD138并与神经纤维间隙侵袭(NI)有关(P<0.05);CD133与CD138的表达呈负相关(P<0.01),与Musashi-1的表达呈正相关(P<0.01).②MGMT、ERCC1与组织类型有关(P<0.05);TS与组织类型、Dukes分级、淋巴管侵袭、淋巴结转移有关(P<0.05);MGMT表达与ERCC1、TS表达呈负相关(P<0.01),ERCC1表达与TS表达呈正相关(P<0.01).③ CD133、Musashi-1的表达均与MGMT的表达呈负相关(P<0.01),与TS、ERCC1的表达呈正相关(P<0.01).结论 ① CD133(+)、Musashi-1(+)细胞在大肠癌的浸润与转移中起重要协同作用.② CD133(+)、Musashi-1(+)细胞与MGMT、TS、ERCC1耐药基因蛋白的表达具有密切关系,后者在大肠癌的侵袭中也具重要作用.
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人脑胶质瘤中MGMT、erbB2的表达及其意义
目的 探讨脑胶质瘤组织中耐药相关基因MGMT、erbB2的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR法对42例脑胶质瘤标本中MGMT、erbB2 mRNA进行测定.结果 MGMT和erbB2在脑胶质瘤标本中的阳性表达率分别为45.2%和61.9%,两者有极显著相关性(P<0.01).结论 MGMT和erbB2在脑胶质瘤中均有较高表达,对合理选择胶质瘤化疗药物有一定临床意义.
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肿瘤耐药性相关的MGMT分析方法
O6-甲基鸟嘌呤- DNA基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase gene,MGMT)活性是衡量肿瘤细胞耐药性的重要因子.多种方法被用于MGMT分析,文章概述现已报道过临床上常用的多种从蛋白质水平、核酸水平以及酶活三方面检测肿瘤中MGMT的方法.几种方法都存在不足之处,都处于实验研究阶段,仍不能广泛用于临床检测.快速适用的MGMT临床检测方法,有待于研究.
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乳腺癌中DNA修复基因MGMT和抑癌基因p53表达的相关性
[目的]探讨乳腺癌组织中,修复基因MGMT与抑癌基因p53蛋白表达的相关性.[方法]应用免疫组化方法同时检测40例乳腺癌和10例良性乳腺疾病组织中MGMT和p53蛋白表达.[结果]良性乳腺疾病组织MGMT蛋白表达均为阳性,p53蛋白表达均为阴性.乳腺癌22.5%丧失表达MGMT蛋白,55.0%p53蛋白表达阳性.乳腺癌组织MGMT阴性表达患者5年生存率(33.3%)明显低于MGMT阳性(80.6%)表达患者(P＜0.05).[结论]p53基因表达对MGMT基因表达起负性调节作用.MGMT蛋白表达丧失可作为判断乳腺癌患者预后的指标之一.
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miR-181家族在胶质母细胞瘤中的表达及其临床意义
目的 探讨miR-181家族在人多形性脑胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用茎环实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测40例胶质母细胞瘤中miR-181a、miR-181b、miR-181c、miR-181d的表达水平,并分析其与胶质母细胞瘤临床病理特征的关系.采用慢病毒转染上调胶质瘤细胞系U251 miR-181a的表达,分析miR-181a对U251克隆形成、细胞增殖和凋亡的影响.结果 miR-181a高表达的GBM患者生存预期明显延长(P＜0.05);且miR-181a表达水平越高,GBM瘤周水肿越明显(P＜0.05).06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)阳性组的GBM miR-181a表达明显高于阴性组(P＜o.05).上调miR-181a的表达后,U251胶质瘤细胞克隆形成数明显少于对照组(P＜0.05),且细胞生长抑制在第5天明显,差异有统计学意义(P＜0.01);对细胞凋亡起促进作用(P＜0.05).结论 miR-181a表达水平与GBM患者的临床预后相关.miR-181a表达减少与GBM的发生密切相关.
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星形细胞瘤中MGMT甲基化与IDH1突变的相关性
目的 检测星形细胞瘤中DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)的甲基化状态,分析其与IDH1突变的关系并评估二者对患者预后的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测176例星形细胞瘤中MGMT的甲基化状态;采用直接测序法和免疫组化法检测IDH1突变,并应用Log-rank检验比较不同分子标记对患者生存曲线的影响.结果 138例星形细胞瘤进行MGMT基因甲基化检测,72.46％ (100/138)病例检测结果有效,57％肿瘤发生MGMT高甲基化.Ⅱ、Ⅲ级星形细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中MGMT的甲基化率显著高于原发性GBM(P=0.023 2).伴有IDH1突变的星形细胞瘤中MGMT的高甲基化率(29/37)显著高于无IDH1基因突变(28/63)病例(P=0.000 9).MGMT甲基化结合IDH1突变是患者预后较好的分子标记(P=0.000 0).结论 星形细胞瘤中MGMT的高甲基化状态与IDH1突变呈明显正相关;IDH1突变结合MGMT甲基化状态检测能更好地预测胶质瘤患者的预后.
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胰腺神经内分泌肿瘤中MGMT的研究进展
O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(06-methylguanine-DNA-methyltransferse,MGMT)是普遍存在的 DNA修复酶,与多种肿瘤的发生、发展密切相关.近年来,MGMT在胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasms, pNENs)的预后判断和个性化治疗中的作用备受关注.该文将对MGMT的生物学特性、与pNENs的关系,以及对其状态的不同检测方法在pNENs中的应用价值等方面的研究进展作一综述.
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不同放化疗敏感性的食管癌细胞株中MGMT和Survivin的表达
目的 比较3株食管鳞癌细胞株对放化疗的敏感性,并检测O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和生存蛋白(Survivin)在其中的表达情况.方法 MTT实验检测3株细胞系在不同浓度顺铂和氟尿嘧啶药物中的存活分数,并利用半数抑制浓度(IC50)值评估细胞株对化疗药物的耐受性;克隆形成实验检测3株细胞系在不同剂量照射后的存活分数, 并利用单击多靶模型拟合剂量存活曲线计算放射生物学参数D0、Dq、N、SF2以评价3株细胞系对放射线的敏感性;Western blot和qRT-PCR检测3株细胞系中MGMT和Survivin的表达.结果 TE-1在顺铂和氟尿嘧啶中的IC50值高于KYSE-70;TE-1 较KYSE-70对放射线耐受(P<0.05).Western blot和qRT-PCR显示MGMT和Survivin的表达在TE-1中均高于KYSE-70,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MGMT和Survivin在对化疗和放疗耐受的细胞株中表达水平较高,在对化疗和放疗敏感的细胞株中表达较低,这为更好地研究食管鳞癌放化疗耐受机制提供了实验依据.
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脑胶质瘤分子标志物IDH1R132突变、MGMT和Ki-67与病理分级及预后关系的研究
目的 联合检测脑胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1R132位点核苷酸突变(IDH1R132突变)、O.6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和Ki-67蛋白的表达,探讨其表达与胶质瘤病理分级的相关性及对预后的影响.方法 收集脑胶质瘤病理标本135例,采用免疫组织化学方法检测病理标本中IDH1R132突变、MGMT和Ki-67蛋白的表达情况,并对此部分患者进行长期随访,从而分析这3种分子标志物的表达与病理分级及预后的相关性.结果 135例脑胶质瘤标本中IDH1R132突变总阳性表达率为31.1%(42/135),Ⅱ级、Ⅲ级及Ⅳ级脑胶质瘤标本中IDH1R132突变阳性表达率分别为49.1%、22.2%、11.8%,三者间表达差异有统计学意义(P<0.01);IDH1R132突变阳性表达者中位生存时间明显高于阴性表达者,分别为27个月和13个月(P<0.01).MGMT总体阳性表达率为42.2%,不同级别的胶质瘤之间MGMT阳性表达率差异无统计学意义;MGMT阳性表达者中位生存时间(12个月)低于阴性者(23个月)(P<0.01).所有患者Ki-67呈阳性表达,Ⅱ-Ⅳ级胶质瘤中Ki-67的表达率呈上升趋势,不同级别的胶质瘤之间Ki-67阳性表达程度差异有统计学意义(P<0.001);Ki-67表达程度与患者中位生存时间无显著差异.结论 IDH1R132突变、Ki-67的表达水平与肿瘤的恶性程度密切相关,IDH1R132突变、MGMT在不同级别胶质瘤的预后评价中具有重要意义,可作为预后的独立预测指标.
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人脑胶质瘤耐药基因ERCC2、MGMT表达之间的相关性及其与预后的关系研究
目的探讨人脑胶质瘤组织中两种耐药基因ERCC2、MGMT表达之间的相关性及其与预后的关系.方法采用双管RT-PCR方法检测19例人脑胶质瘤组织中ERCC2和MGMT mRNA水平,并分析它们的相关性及其与患者生存时间的关系.结果 ERCC2、MGMT的表达量分别为(1.42±0.93),(2.89±1.82),ERCC2与MGMT之间具有极显著的相关性(P＜0.01).与患者的生存时间具有显著的相关性(P＜0.05).结论 ERCC2、MGMT基因表达之间具有内在的联系,共同参与细胞对DNA损伤的修复,并形成肿瘤耐药;与肿瘤的预后具有明显的相关性.
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MGMT基因在乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨MGMT基因在乳腺癌中的甲基化状态、蛋白表达情况及其与临床病理特征的关系.方法 应用甲基化特异性的聚合酶链反应检测40例乳腺癌中MGMT基因甲基化状态、用免疫组化检测MGMT基因的蛋白表达情况.结果 MGMT基因在乳腺癌中甲基化率为7.5％(3/40);有淋巴结转移的病例甲基化率10％(2/20)；免疫组化显示MGMT蛋白表达率87.5％(35/40).结论 MGMT基因甲基化在乳腺癌中不是频发事件；MGMT蛋白表达与其甲基化无相关性；MGMT基因甲基化参与乳腺癌的发展过程.
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子宫内膜癌中MGMT的表达及其意义
目的 探讨DNA损伤修复基因产物-MGMT在及子宫内膜癌前病变中的表达及其意义.方法 采用免疫组化SP法检测MGMT在38例子宫内膜癌、25例子宫内膜不典型增生组织和正常子宫内膜32例中的表达.结果 MGMT蛋白在正常子宫内膜中的表达率分别为(+++)40.6％(13/32),(++)56.2％(18/32),(+)3.1％(1/32),MGMT蛋白在不典型增生子宫内膜中的表达率(+++)20％(5/25),(++)80％(20/25)、MGMT蛋白在子宫内膜癌中的表达率分别为:(++)44.7％(17/38),(+)55.2％(21/38).MGMT蛋白在子宫内膜不典型增生组的表达率明显高于子宫内膜癌(P＜0.05);正常子宫内膜组明显高于子宫内膜不典型增生组(P＜0.05).结论 MGMT基因可能在子宫内膜癌发生中起重要的作用,可能成为指标子宫内膜癌肿瘤标志物.
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MGMT、K-ras在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究
目的探讨DNA修复酶 O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)及癌基因K-ras在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与肺癌发生、发展的关系.方法采用免疫组化SABC法,检测60例手术切除、病理证实的非小细胞肺癌病人癌及癌旁组织中MGMT、K-ras的表达.结果 60例外科手术切除的非小细胞肺癌组织中,MGMT蛋白的阳性表达率为33%,明显低于(P﹤0.05)其在癌旁组织中的表达率( 63%);K-ras蛋白的阳性表达率63%,明显高于(P﹤0.05)其在癌旁组织中的表达率( 30%).MGMT蛋白在NSCLC中的阳性表达率与肿瘤的P-TNM分期、淋巴结转移、吸烟史有关(P﹤0.05);与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度及肿瘤的大小无关(P>0.05).K-ras蛋白在NSCLC中的阳性表达率与肺癌的组织学类型、肿瘤的大小、淋巴结转移、吸烟史有关;与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度及P-TNM分期无关(P>0.05).结论在NSCLC中,MGMT蛋白的表达与K-ras蛋白的表达呈负相关,提示MGMT表达缺失可能导致癌基因K-ras激活,并与肺癌的发生、发展相关.K-ras蛋白表达与吸烟有关,并在腺癌中高表达,提示K-ras可能为烟草致癌的靶基因及肺腺癌癌变的关键基因.联合监测两种蛋白可能对肺癌的辅助诊断有一定意义.
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不同级别脑胶质瘤及正常脑组织中MGMT与XRCC1基因的表达及相关性分析
目的 分析不同级别脑胶质瘤及正常脑组织中MGMT与XRCC1基因的表达及相关性.方法 选取我院2012-06-2013-06收治的65例脑胶质瘤患者为研究对象,设为胶质瘤组,另选取脑组织正常的颅内高压患者40例,设为对照组.实验室检查切除的脑组织,比较MGMT、XRCC1在胶质瘤与正常脑组织中的表达情况,MGMT、XRCC1在不同级别脑胶质瘤的分布,并分析MGMT与XRCC1表达的关系.结果 胶质瘤组MGMT表达阳性率(46.15％)高于对照组(2.50％),差异有统计学意义(P＜0.05).MGMT在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的分布比较差异无统计学意义(P＞0.05).胶质瘤组XRCC1表达阳性率(38.46％)高于对照组(5.00％),差异有统计学意义(P＜0.05).XRCC1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的分布比较差异无统计学意义(P＞0.05).相关性分析结果显示,MGMT与XRCC1在胶质瘤中的表达无相关性(r=0.897,P=0.346).结论 脑胶质瘤患者MGMT与XRCC1表达阳性率较正常脑组织高,MGMT与XRCC1在不同级别脑胶质瘤中分布无显著差异,且表达无显著相关性.
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MGMTVEGF在脑胶质瘤中的表达及临床意义分析
目的：分析 MGMT、VEGF 在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法270例脑胶质瘤患者为肿瘤组,行颅脑外伤手术治疗的250例患者为对照组。取肿瘤组患者脑胶质瘤标本及对照组正常脑组织标本,检测 MGMT、VEGF 的阳性表达率。同时,统计并对比分析肿瘤组患者不同病理分级、肿瘤类型生存质量及预后下 MGMT 和 VEGF 的阳性表达率。结果肿瘤组患者 MGMT 和 VEGF 的阳性表达率依次为68.52%、77.78%,对照组依次为12%、28%,2组比较差异具有统计学意义(P <0.05)。肿瘤组患者在 MGMT 和 VEGF 的阳性表达率上,高级别胶质瘤组患者高于低级别胶质瘤组(P <0.05)；KPS≤70分组患者高于 KPS≤70分组(P <0.05)；术后12个月内死亡组患者高于术后12个月后存活组(P <0.05)。而不同类型胶质瘤组患者中,MGMT 和 VEGF 的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P >0.05)。结论MGMT、VEGF的表达与脑胶质瘤的发生、发展密切相关,可作为脑胶质瘤治疗效果评价、病情判断及生存质量、预后评估的重要参考依据。
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食管癌MGMT、survivin蛋白的表达及其临床意义
目的 研究食管癌MGMT、survivin蛋白的表达及其临床意义.方法应用免疫组化(EnVision二步法)检测56例食管鳞状细胞癌、20例腺样结构食管癌和9例小细胞癌组织中MGMT、survivin蛋白的表达,并分析其与临床病理诸因素之间的关系.结果小细胞癌与鳞状细胞癌及腺样结构食管癌的MGMT蛋白表达比较均有显著性差异(P＜0.01);低分化鳞癌MGMT蛋白阳性表达率为45.45%,低于高、中分化鳞癌的阳性率(84.44%,P＜0.05).食管鳞状细胞癌survivin阳性表达率明显高于腺样结构食管癌(P＜0.05).结论 MGMT、survivin蛋白表达与食管癌的组织学类型有密切关系,可作为食管癌预后判断的参考指标.
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乳腺癌组织和癌旁组织MGMT和GST-π蛋白表达的流式细胞术分析
目的 研究乳腺癌组织和癌旁组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和谷胱苷肽S-转移酶-π(GST-π)蛋白表达的临床意义.方法 应用流式细胞术(FCM)分析MGMT和GST-π蛋白表达.结果 乳腺癌组织MGMT和GST-π表达显著高于癌旁组织(P＜0.05).2种耐药相关蛋白在不同年龄、不同肿瘤大小、不同病理类型、不同临床分期和雌、孕激素受体阴性与阳性患者间的表达均无显著差异(P＞0.05).有淋巴结转移组患者MGMT与无淋巴结转移组患者比较无显著差异(P＞0.05).但GST-π表达在有淋巴结转移组患者显著高于无淋巴结转移组患者(P＜0.05).相关分析显示,MGMT与GST-π表达间无显著相关性(P＞0.05).结论 初步研究结果提示,MGMT蛋白表达可能与乳腺癌预后无关,不能作为乳腺癌的一个预后指标.GSTπ表达与淋巴结转移状况有关,有可能成为预测乳腺癌预后的指标之一.
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少突胶质细胞瘤中染色体1p/19q联合缺失与MGMT基因启动子甲基化的相关性
目的 研究少突胶质细胞瘤染色体1p/19q联合缺失与MGMT基因启动子甲基化的相关性.方法 选取少突胶质细胞瘤35例、间变型少突胶质细胞瘤32例标本作为实验组,星形细胞瘤20例及瘤旁正常脑组织标本20例作为对照组,荧光原位杂交方法检测染色体1p/19q联合缺失情况,巢式甲基化特异性PCR技术检测MGMT基因启动子甲基化情况.结果 少突胶质细胞瘤和间变型少突胶质细胞瘤1 p/19q联合缺失率分别为85.71％、75.00％,均显著高于星形细胞瘤及正常脑组织(P＜0.05);少突胶质细胞瘤、间变型少突胶质细胞瘤、星形细胞瘤的MGMT基因启动子甲基化率均显著高于正常脑组织(P＜0.05),但三者组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);少突胶质细胞瘤1p/19q联合缺失与MGMT基因启动子甲基化呈正相关性,并且均与患者3年生存率相关(P＜0.05).结论 少突胶质细胞瘤中1p/19q联合缺失与MGMT基因启动子甲基化状态密切相关,联合检测有助于提高临床病理诊断的精确性,更好地评估预后.
关键词： 胶质瘤少突胶质细胞瘤 1p/19q联合缺失 MGMT 甲基化
