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党参多糖单糖组成与其对HepG2细胞毒活性的相关分析
目的 探究党参多糖的单糖组成与其对肝癌HepG2细胞毒活性之间的相关性.方法 26批不同产地的党参样品,采用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法测多糖的量、气相色谱法和间羟基联苯法同时测定半乳糖醛酸的量、糖腈乙酸酯衍生化法分析单糖种类及量、三甲基硅醚衍生化法测果糖的量,MTT法研究党参多糖对HepG2细胞的细胞毒活性,采用聚类分析法对26批党参样品进行聚类分析,以偏小二乘法(PLS)探究样品中各单糖种类和量与其对HepG2细胞毒活性的相关性.结果 26批党参多糖样品均显示一定的HepG2细胞毒活性,且以甘肃文县的8号党参多糖的细胞毒活性强(其抑制率为36.36％).26批党参多糖中各类单糖的量存在差异.聚类分析结果表明,党参多糖的单糖种类及量不能作为党参分类的指标.党参多糖的单糖组成与HepG2细胞毒活性的相关性研究表明,半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖与HepG2细胞毒活性呈正相关,而甘露糖、木糖和葡萄糖与HepG2细胞毒活性呈负相关.结论 党参多糖对HepG2的细胞毒活性与其单糖的种类存在相关性,含有半乳糖醛酸相对较高的党参多糖的细胞毒活性较强.
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高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定多花黄精多糖的单糖组成
目的 建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定多花黄精多糖的单糖组成.方法 多花黄精多糖经提取后,用硫酸水解,用CarboPac PA1色谱柱(250 mm×4 mm,10.0 μm)进行分离,采用梯度洗脱,HPAEC-PAD测定多花黄精多糖中单糖的组成.结果 测得各单糖在1～100mg/L线性关系良好(r＞0.999),低检出限为0.015～0.025 mg/L,RSD为1.35％～2.80％,加样回收率为88.36％～111.3％.结果表明不同产地的多花黄精多糖均由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖组成.结论 本实验所建立的方法分离效果好,灵敏度高,可用于多花黄精多糖的单糖组成和测定的分析研究.
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金水宝胶囊中发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱研究
目的 建立金水宝胶囊发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱.方法 沸水回流提取金水宝胶囊中的发酵虫草菌粉多糖,经酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后采用HPLC法分析,色谱条件为Phenomenex OOG-4252-EO C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.05 mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱,体积流量1 mL/min,进样量20μL,检测波长250 nm,柱温30℃.结果 对组成发酵虫草菌粉多糖的11种单糖成分进行鉴别,并建立了发酵虫草菌粉多糖指纹图谱.通过指纹图谱分析10批金水宝胶囊中各单糖成分,相似度均大于0.999,无显著性差异.结论 建立的发酵虫草菌粉多糖指纹图谱操作简单,专属性强,重复性好,能够客观评价金水宝胶囊的质量.
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急性呼吸道感染与幼年时缺乏甘露糖结合的植物血凝素有关
一项研究表明，某些感染与等位基因改变引起的血清甘露糖结合植物血凝素(MBL)水平降低有关。但MBL缺乏与儿童常见感染的关系还不清楚。为此，研究人员在3年内共随机选择了252例2岁以下儿童，观察每周急性呼吸道感染的发生率和预后，并研究了病史、临床检查以及血样本MBL的等位基因，经过统计分析发现，在MBL缺乏儿童（n=13），急性呼吸道感染的相对危险指数（RR）比不伴有MBL缺乏的儿童 (n=239)增加了20.8%，95%可信限（CI）为1.41～3.06。其中相对危险高的是6～17个月的婴儿(RR：2.92;95% CI：1.78～4.79)，其次为0～5个月的婴儿(RR：1.47;95% CI：0.45～4.82)，低的为18～23个月的婴儿(RR：1.00;95% CI：0.42～2.37)。研究人员认为，儿童2岁以前机体免疫系统还未发育成熟，MBL基因缺陷在机体防御反应中起重要的作用，特别是在6～17个月儿童易受伤害的时期。检测血清MBL水平，对于判断婴幼儿是否容易发生急性呼吸道感染具有一定的价值。
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不同多羟基化合物对小鼠胚胎干细胞低温贮存的影响
目的:研究开发适用于小鼠胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell, ES 细胞)的低温贮存试剂.方法:以DMSO为主要低温贮存保护剂检测不同多羟基化合物对小鼠胚胎干细胞低温贮存后存活率和多向分化能力的影响.结果:在含有DMEM(高糖)、10%DMSO、10%FBS、10mg/mL抗坏血酸、0.18mg/mL肌醇、0.44mg/mL叶酸的低温保护剂中补充34.23mg/mL海藻糖能够有效维持小鼠胚胎干细胞的自我更新能力和多向分化能力.结论:本研究以DMSO和海藻糖为主要试剂开发了一种适用于小鼠胚胎干细胞的低温贮存试剂.
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系统性红斑狼疮病人甘露糖结合凝集素基因多态性和血清水平的研究
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)病人甘露糖结合凝集素(MBL)基因多态性及血清水平与疾病的关系.方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测44例SLE病人和45名正常人MBL外显子1的第54密码子的多态性(GGC/GAC),同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中MBL的含量.结果 S比病人GGC/GGC型71%(31/44),GGC/GAC型27%(12/44),GAC/GAC型2%(1/44);正常人MBL基因型分布频率GGC/GAC型78%(35/45),GGC/GAC型22%(10/45);两组相比,分布差异无显著性.不同基因型S比病人血清MBL水平分别为(1.8±0.6)mg/L(31例),(1.5±0.6)mg/L(12例),1例GAG/GAC型血清M肌水平为1.17 mg/L;正常人血清MBL水平分别为(3.0±1.0)mg/L(35例),(2.2±1.0)mg/L(10例).正常人GGC/GGC型和GGC/GAC型血清MBL水平均明显高于SLE病人组(P<0.01,P<0.05).结论 SLE病人的血清MBL水平明显减低,但似与基因第54号密码子变异无相关性.
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甘露糖结合凝集素血清浓度在慢性风湿性心脏病发病中的临床意义
目的 建立人甘露糖结合凝集素血清浓度的检测方法 ,探讨慢性风湿性心脏病与甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)血清浓度之间的关系.方法 采用亲和色谱法提取纯化人MBL蛋白,免疫新西兰兔获取兔抗人MBL抗血清,ELISA方法 和Western blot方法 鉴定其效价和特异性.ELISA方法 检测65例慢性风湿性心脏病病人和51名正常人的血清MBL浓度,进行统计学分析.结果 抗血清效价为1∶3 200,Western blot方法 鉴定该抗血清能特异性识别人血浆中MBL蛋白,在相对分子质量为32 000处显示单一条带.慢性风湿性心脏病病人和正常人血清MBL浓度分别为(1.2±0.7) mg/L和(1.5±0.9) mg/L,(P＜0.05).以平均症状出现年龄为界(34.0岁)分为大小两个症状出现年龄组,其血清MBL浓度分别为(1.5±0.8) mg/L和(0.8±0.5) mg/L,(P＜0.01).结论 血清MBL水平低下可能是风湿性心脏病的一个易感因素,同时也可能是病情发展的促进因素.
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铁皮石斛与市场上常见的几种伪品含糖量的测定
目的:分析比较铁皮石斛及常见伪品中多糖和甘露糖的含量.方法:采用高效液相色谱法测定石斛中甘露糖的含量,紫外-可见分光光度法测定多糖含量.结果:分析表明,各个不同的石斛药材多糖和甘露糖含量存在较大的差异.多糖含量高的是齿瓣石斛,含量为44.43％；其次是报春石斛,含量为41.08％；含量低的为细茎石斛,含量20.23％.甘露糖含量中,钩状石斛居首位,含量为34.17％；其次是齿瓣石斛,含量为32.96％；含量低的为细茎石斛,含量为17.60％.结论:不同来源的铁皮石斛多糖和甘露糖含量均能达到2010年版《中国药典》要求,因此,传统以多糖和甘露糖为指标评价石斛质量是否合理有待进一步深入研究.
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红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎不同部位主要有效成分含量测定
目的:比较西双版纳地区红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎上、中、下3个部位的多糖含量、甘露糖含量、甘露糖与葡萄糖峰面积比的差异.方法:采用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量,柱前衍生化HPLC法测定甘露糖含量及甘露糖与葡萄糖峰面积比.结果:多糖含量,红杆铁皮石斛茎上、中部明显高于青杆铁皮石斛茎上、中部,而红杆铁皮石斛茎下部明显低于青杆铁皮石斛茎下部;甘露糖含量,红杆铁皮石斛上、中、下3个部位均明显高于青杆铁皮石斛;甘露糖与葡萄糖峰面积比,红杆铁皮石斛上、中、下3个部位均明显低于青杆铁皮石斛.红杆铁皮石斛的多糖含量、甘露糖含量及甘露糖与葡萄糖峰面积比均达到2015版《中华人民共和国药典》标准,青杆铁皮石斛仅多糖含量达到2015版《中华人民共和国药典》标准.结论:同一地区的红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛茎上、中、下3个部位主要有效成分含量有明显的差异,建议在临床用药过程中将红杆铁皮石斛与青杆铁皮石斛分开使用,同时将铁皮石斛按其茎上、中、下3个部位进行分级,为铁皮石斛种质资源品质评价及临床用药提供实验基础.
关键词： 红杆铁皮石斛 青杆铁皮石斛 多糖 甘露糖 甘露糖与葡萄糖峰面积比值 -
不同种植年限铁皮石斛多糖、甘露糖含量的测定及其它化学成分比较研究
目的:比较不同种植年限铁皮石斛的多糖及甘露糖含量,并对其正丁醇部位及乙醚部位化学成分进行比较研究,为铁皮石斛种植年限的确定提供参考.方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,柱前衍生化HPLC法测定甘露糖的含量,RP-HPLC结合二极管阵列检测器(DAD)法分析铁皮石斛正丁醇部位(360 nm)及乙醚部位(280 nm)分别随不同种植年限的变化情况.结果:铁皮石斛多糖含量随种植年限不同而变化,2年生＞3年生＞4年生,2～4年生铁皮石斛随种植年限增加,多糖含量减少.甘露糖含量随种植年限的变化也呈现与多糖相同的变化趋势.铁皮石斛正丁醇部位中黄酮类成分在360 nm下随种植年限变化有一定的变化,2年生中黄酮类化合物相对极性较小,且较集中.3年生极性分布较广,且含量相对较大.4年生主要分布在极性大的黄酮类化合物,含量相对较低.铁皮石斛乙醚部位在280 nm下随着种植年限增加,色谱图峰强度增加明显.结论:从多糖及甘露糖含量考虑,以2年生铁皮石斛含量高,宜以两年生为用;而结合酚类及黄酮类成分却与此有所背离,具体有待进一步深入研究.
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棘阿米巴角膜炎1例报告
棘阿米巴广泛生活在自然界,其形态、感染途径和致病方式与溶组织阿米巴不同.棘阿米巴角膜炎(acanthamoebakeratitis,AK)为严重的眼感染性疾病,常导致视力丧失,多继发于角膜损伤.Nagington等[1](1974)首次报道2例AK,1例为眼被树枝致伤1年后出现,另1例是眼与鸟接触后发生.实验发现[2],即使是角膜细微的损伤,也能暴露甘露糖一糖蛋白(mannose gIycoproteins,M-GPs)位点,而新鲜暴露的GPs可以为棘阿米巴提供良好的附着点.AK与戴角膜接触镜密切相关.1984年第l例AK出现在戴角膜接触镜患者[3].
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体检人员血清癌胚抗原RIA检测分析
癌胚抗原(CEA)是一种分子量约为150,000～200,000的糖蛋白,它含有岩藻糖、甘露糖、半乳糖和唾液酸.通过测定血液中CEA水平,可作为癌症病人的监测,并可确定治疗效果好坏和判断愈后的良好指标.
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复方葡甘聚糖减肥片质量标准研究
目的:研究复方葡甘聚糖减肥片的质量标准.方法:将原料及片剂样品用60%乙醇超声洗涤再用2.0 mol/L硫酸将葡甘聚檐水解成葡萄糖和甘露糖后用1-苯基-3-甲基-5吡唑啉酮(PMP)衍生化,采用反相高效液相色谱法分段梯度洗脱,检测波长250 nm,通过内标法对单糖定量进行了方法学的研究,同时测定原料及片剂中葡甘聚精的含.结果:甘露糖和葡萄糖在浓度0.05～0.5 mmol/L之间线性关系良好(r=0.994 3,0.999 8),平均回收率分别为100.67%和98.34%,RSD分别为2.74%和3.22%(n=5),葡甘聚糖中单糖组成为Glc:Man=2:3,原料中葡甘聚糖含量为88.2%,片剂中葡甘聚糖平均含量为354 mg,/片.测定葡甘聚檐的溶出度符合均一性要求.结论:所建立的质量标准简便可行、重复性好,可以用来评价复方葡甘聚糖减肥片的质量.
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冠状病毒受体
冠状病毒科病毒与细胞种特异性氨肽酶-N的黏附受体、癌胚抗原相关细胞黏附分子、血管紧张素转换酶2、细胞膜上含9-0-乙酰-甘露糖胺丙酮酸的分子相互作用,导致脊椎动物呼吸道、消化道和神经系统疾病.
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白念珠菌粘附上皮细胞的机制
本文总结了近年来白念珠菌细胞表面疏水性、侵蚀性酶，以及表面甘露糖、蛋白质等对上皮细胞粘附的研究进展，提出了阻断白念珠菌粘附的方式。
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甘露糖结合凝集素基因多态性与隐球菌病易感性的遗传关联研究
目的 分析我国非AIDS隐球菌病患者甘露糖结合凝集素(MBL)基因多态性分布情况,并探讨其与隐球菌病易感性的关系.方法 采用病例一对照遗传关联研究,病例组为非AIDS相关隐球菌病患者167例,包括隐球菌脑膜炎103例和肺隐球菌感染64例,健康对照组为体检者208例.提取受试者外周血标本基因组DNA,PCR特异性扩增MBL基因DNA片段,对扩增产物进行序列分析,以检测MBL单核苷酸多态性(SNP),进一步探讨MBL基因多态性与隐球菌病易感性的遗传关联性.病例组与对照组比较采用χ2检验或Fisher确切概率检验,MBL基因型各组血浆MBL差异比较采用单因素方差分析.结果 167例隐球菌病患者MBL各等位基因、单倍型、基因型所占比例与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).但是,隐球菌脑膜炎患者MBL基因型缺陷组的构成比(16.5%)显著高于健康对照组(8.7%,χ2=4.25,P=0.0392,OR=2.09),在免疫正常隐球菌脑膜炎患者中(21.4%)差异更为显著(χ2=7.15,P=0.0075,OR=2.88).此外,隐球菌脑膜炎患者MBL基因型缺陷组的构成比显著高于非中枢神经系统感染患者(3.1%,Fisher确切概率检验,P=0.010,OR=6.13),在免疫正常患者中(分别为21.4%和4.0%)差异更为显著(P=0.009,OR=6.55).结论 MBL基因型缺陷是隐球菌脑膜炎的遗传易感因素,MBL缺陷的隐球菌病患者中枢神经系统更易受累.
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甘露糖结合凝集素与病毒性肝炎相关性的研究进展
甘露糖结合凝集素(mannan binding lectin.MBL)是一种由肝脏合成、存在于血清中的C型凝集素.MBL通过结合病原微生物表面的甘露糖等糖基受体,直接介导调理吞噬作用和(或)通过MBL途径激活补体,在机体的天然免疫防御中发挥重要作用.研究发现,血清中MBL水平与病毒性肝炎,特别是与乙型肝炎和丙型肝炎的疾病进展、抗病毒治疗的应答相关,明确MBL在病毒性肝炎中的具体作用机制、筛选MBL水平异常者、MBL的临床治疗是目前的研究方向.近年来,对MBL,与成人肝炎病毒感染、肝炎疾病进展及治疗应答的关系进行了一些研究.取得了一些进展,现综述如下.
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胃肠道特异性生物黏附给药系统的研究进展
胃肠道特异性生物黏附给药系统是一类兼具靶向特异性和生物黏附功能的新型口服给药制剂,通过以配体修饰载药微粒,实现特异性生物黏附功能.介绍了4种不同配体材料(凝集素、维生素B_(12)和B_1、甘露糖和鞭毛蛋白)介导的 胃肠道特异性生物黏附给药制剂及其作用机制的研究进展.
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2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-溴-1-氯-β-D-甘露糖的合成
2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-溴-1-氯-β-D-甘露糖(1)是合成β-不饱和甘露糖苷的关键中间体[1],后者可进而获得具有抗炎作用的Sialyl Lewis X类似物[2]、生化试剂伴刀豆球蛋白A的糖配体[3]以及"分子标志"等糖药物或糖生化试剂[4].本研究以文献[5～8]为基础制得1(图1),并进行了工艺改进.文献[5]用β-D-甘露糖室温与乙酸酐、乙酸钠反应48h,得到α-和β-型的乙酰化甘露糖混合物,再用43%溴化氢乙酸溶液溴化12h得2,收率55%～75%.
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三种糖类对新生隐球菌荚膜相关基因CAP10启动活性的影响
目的:研究葡萄糖、甘露糖、半乳糖对新生隐球菌荚膜相关基因CAP10启动活性的影响.方法:用含CAP10编码区上游5′侧翼序列(-951～0 bp)和报告基因的重组体转化酵母,分别用不同浓度(10、20、40、60、80 mg/ml)的葡萄糖、甘露糖、半乳糖对其进行干预,用ELISA方法检测CAT表达值,比较各组间CAT表达活性的不同.结果:不同浓度的葡萄糖和甘露糖对CAT的表达强弱无明显的影响;而不同浓度的半乳糖对CAT的表达强弱有明显的影响,而且这种正向诱导作用在实验所用的剂量范围内具有剂量依赖关系.结论:葡萄糖和甘露糖对CAP10启动活性无明显影响;半乳糖对CAP10的启动活性有明显的诱导作用,推测CAP10基因可能与新生隐球菌中半乳糖的代谢有关.
