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基于等温滴定量热技术探究黄芩质量表征新方法
黄芩黄连药对水煎自沉淀现象已被广泛关注,产生自沉淀现象的本质是药对中酸碱性活性成分相互作用形成难溶性分子复合物,本试验设计基于中药配伍后有效成分间的相互作用,探索将等温滴定量热技术(isothermal titration calorimetry,ITC)应用于表征黄芩药材质量的可行性,建立以活性成分群为指标衡量药材质量的新方法.以不同批次黄芩药材(包括市售的3批黄芩药材和市场上常用做以次充好的黄芩苗)作为研究对象,应用ITC分别测定黄连中代表性功效成分小檗碱(2.5mmol·L-1)与不同批次黄芩水煎液间相互作用能量值,将小檗碱滴定空白水溶液的能量变化(2.51 μJ)作为空白对照,结果显示以小檗碱为标准物质,滴定不同批次黄芩水煎液中黄芩苷类成分的热量变化由高到低依次为黄芩A(-317.20 μJ)、黄芩B(-292.83 μJ)、黄芩C(-208.95 μJ)、黄芩苗(-21.53 μJ).其中小檗碱滴定黄芩苗的热量变化显著低于3批黄芩药材.应用紫外分光光度法以黄芩苷计测定不同批次黄芩水煎液在大吸收波长处的吸光度值.紫外测定结果显示,相同稀释条件的不同批次药材吸光度由高到低依次为黄芩A(0.372)、黄芩B(0.333)、黄芩C(0.272)、黄芩苗(0.124),且黄芩苗吸光度显著低于前三组.ITC滴定与紫外测定结果相吻合,证明ITC能用于表征黄芩药材质量,基于ITC建立的以一类活性成分为指标评价黄芩药材质量的方法是简便、科学且可行的,此试验为构建更加全面、系统地表征药材质量提供了新思路.
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核酸适体的研究进展
目录一、指数富集配体系统进化(SELEX)技术的基本原理及技术路线二、核酸适体的特点及优势三、核酸适体的应用(一)基础研究方面(二)诊断学方面(三)药物研制方面四、结语与展望近年的研究表明,DNA和RNA不仅起遗传信息储存和传递的作用,还可以藉自身形成的空间结构与其它类型的分子相互作用,以此为基础建立随机寡核苷酸文库,施加选择压力(结合靶目标),淘选与靶目标高度特异结合片段的过程,被称为指数富集的配体系统进化(Systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术.筛选出的分子被称为核酸适体(aptamer).Aptamer源于拉定语aptus,即配对、适应之意.自1990年Tuerk等首次利用SELEX技术成功筛选到噬菌体T4DNA聚合酶的RNA型适体[1]以来,截止到2004年6月8日,据Aptamer Database网站[2]报道,各个实验室通过该技术已成功筛选出了2882种核酸适体,许多申请专利保护的适体序列还未计其中.核酸适体的靶分子广、亲和力高、特异性强、易改造修饰等特点令其在基础研究、临床诊断、药物研制方面得以广泛应用.
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淋巴细胞膜分子CD160结构与功能的研究进展
T细胞活化需要两个信号:一是T细胞抗原受体(TCR)与抗原肽-MHC Ⅰ/Ⅱ类分子复合物相互作用的第一信号,决定了T细胞应答的特异性;二是T细胞表面辅助受体与抗原提呈细胞(APC)的共刺激分子相互作用传递的辅助或协同信号,加强或抑制了第一信号的刺激[1.2].
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KIR配体不合在主要组织相容性复合物不合造血干细胞移植中的作用
自然杀伤(NK)细胞功能受细胞表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)和靶细胞上主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类分子相互作用的调节.
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酵母三杂交系统研究进展
许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白,核酸-蛋白的相互作用来实现的,对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制.酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具,随着该系统的广泛应用,在此基础上发展了三杂交系统,研究包括三种成分在内的更为复杂的大分子相互作用,为蛋白-蛋白、RNA-蛋白和小分子-蛋白相互作用的研究提供了新的手段.
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清开灵有效组份对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞间黏附分子表达的影响
脑缺血后脑组织的炎症损伤反应因其预后差,死亡率高,而且益受到人们的关注,已成为该领域的研究热点.此炎症反应是以脑微血管内白细胞聚集并穿越血管壁,浸润脑组织,同时伴有微血管功能紊乱,局部脑组织中液体和血浆蛋白积聚为标志的急性炎症.白细胞转化为病源性细胞之前,必须与内皮紧密相连,只有当白细胞表面糖蛋白与内皮表面黏附分子相互作用后,方可与内皮紧密结合,快速进入脑实质.
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β-内酰胺酶抑制剂
过去的40多年是β-内酰胺抗生素类发展取得空前成就的时期.天然、半合成和新合成的药物不断涌现.同时,为了寻找新的和改进的β-内酰胺抗生素,已开展了酶与这些分子相互作用的研究.70年代开发成功的酶抑制剂已在临床上应用.
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基因微阵列技术和炎症性关节炎
基因微阵列(microarray)检测技术伴随着对人类基因组及其编码的蛋白的相关结构和功能的深入研究,从初基因的cDNA微阵列,到蛋白微阵列技术等正在迅速发展和广泛应用.我们知道,大多数生物学过程是一个涉及疾病相关基因的识别、量化和蛋白质分子相互作用的复杂网络[1,2],关于基因功能分类的研究也已经存在,如在组织相容性抗原(MHC)和免疫球蛋白系列已较系统和深入.
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非常规分割放射治疗的理论依据
任何射线(X线、γ线、带电或不带电粒子)对肿瘤的放射生物效应主要是:一方面通过照射的"直接作用"对肿瘤细胞关键的靶(DNA)起作用,靶的原子被电离或激发导致生物的改变;另一方面射线在细胞内(细胞的80%是水)和另一个原子或分子相互作用(尤其在水中)产生自由基(OH)再间接对DNA造成损伤.
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Caveolae、Caveolin-1与肿瘤的研究进展
Caveolae是细胞膜内陷形成的烧瓶状的特殊膜结构,参与包括细胞的分子运输、细胞粘附和信号转导在内的多种细胞活动.Caveolin-1是Caveolae中重要的结构蛋白,抑制细胞生长,与多种人类肿瘤发生发展相关的信号分子相互作用,如G蛋白、Src家族激酶、Ras、蛋白激酶C、内皮生长因子(EGF)受体、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)及整合素等.因此,Caveolin-1是细胞生长相关信号途径及肿瘤发生发展过程中重要的抑制因子.
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冠状病毒受体
冠状病毒科病毒与细胞种特异性氨肽酶-N的黏附受体、癌胚抗原相关细胞黏附分子、血管紧张素转换酶2、细胞膜上含9-0-乙酰-甘露糖胺丙酮酸的分子相互作用,导致脊椎动物呼吸道、消化道和神经系统疾病.
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Rab5在胰岛素抵抗机制中的作用
糖尿病是以胰岛素抵抗(IR)为特征的代谢紊乱性疾病,其发病机制十分复杂,多环境因素和大量易感基因共同参与其致病过程,对IR的研究是探索糖尿病发病机制的重要切入点之一.Rab5为一种调节胞吞作用的小GTP酶,近的研究发现其不仅参与调节细胞膜上葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的转运上膜,与胰岛素信号通路中多种分子相互作用,还与肥胖的发生相关.此外,Rab5 还参与自噬体的形成,而肝细胞自噬作用的缺陷将促进内质网应激和IR[1-2].这些结果均提示Rab5可能是机体IR发生分子机制中的一个重要环节.
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bFGF的生物作用分子机制研究进展
碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种作用广泛的细胞因子,它的书写形式有bFGF和FGF-2两种.bFGF是成纤维细胞生长因子家族中的一员.早在1940年,Hoftman等在脑和垂体的抽提物中发现一种能够促进成纤维细胞生长的物质.
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胃癌组织中Syndecan-1的表达变化
Syndecan-1是一类细胞表面跨膜糖蛋白,可通过胞外区与细胞外基质成分及其他细胞表面分子相互作用,在肿瘤生长、分化、转移中起重要作用.本研究观察了胃癌及癌旁组织中Syndecan-1的表达变化.
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子宫内膜癌患者新辅助化疗前后血清核小体水平的变化
研究表明,许多抗肿瘤药物包括紫杉醇、顺铂等在杀伤肿瘤细胞的过程中是先与特异的靶分子相互作用,导致其损伤或机能障碍,通过信号的传递,终诱导细胞凋亡.细胞发生凋亡时, 形成凋亡核小体,导致循环中核小体浓度升高.我们采用ELISA法检测了30例子宫内膜癌患者的血清核小体,了解核小体水平与子宫内膜癌化疗疗效的关系.现报告如下.
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构筑肝炎病毒与肝细胞相互作用的分子生物学理论体系
既往的研究业已提示多种由肝炎病毒引起的肝病都是肝炎病毒与肝细胞之间生物大分子相互作用的终结果.笔者据此认为构筑相应的分子生物学理论体系有助于终解决病毒性肝炎的治疗问题.
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胚胎胃肠上皮增殖与分化中的相关细胞因子
从被发现到能够得到大量天然或基因重组产物,细胞因子在多种生物学过程中所扮演的重要的调节分子的角色正日益引起人们的重视.消化管,如同机体的其他器官,其发生是一个复杂而有序的过程,但具体机制至今尚未明了.已有文献报道胚胎期胃肠的发生与间充质的作用有关[1],并认为这种相互作用除了上皮细胞与间充质细胞直接作用外,也与基膜成分、激素、多种生长因子有关[1],是一个细胞与细胞、细胞与分子、分子与分子相互作用的复杂网络调节过程.因此,对各种绌胞因子在胃肠发生过程中定位与表达时相的研究,对绌胞因子与受体相互关系的研究,将有助于阐明胃肠发育的机理.本文现就胃肠上皮增殖与分化过程中的主要相关细胞因子的研究进展综述如下.
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细胞凋亡机理的研究进展
细胞凋亡,亦称程序化细胞死亡.近年来在生物学、医学等领域备受关注,细胞凋亡机理的研究日新月异.现认为细胞凋亡过程大体可分为3个阶段;诱导期(induction phase)、效应期(effector phase)和降解期(degradation phase).各种不同的内、外界刺激经相应受体或目前尚未清楚的途径激发凋亡信号传导,通过效应分子相互作用引起caspase家族的级联反应,降解各种细胞内底物,随之出现细胞凋亡现象,见图1.我们就近两年来有关细胞调亡过程中蛋白酶级联反应,线粒体在细胞凋亡过程中的调控作用等凋亡机理研究的进展综述如下.
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浅谈神经系统胞内信号转导机制
神经活性物质或激素与受体相结合而产生的神经元功能调节,首先是由跨膜信号转导机制导致胞内信号或第二信使产生,再与特异的靶分子相互作用而引发生物化学事件的级联而发动.