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HLA-G的免疫耐受机理和母胎免疫
人白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)是位于人6号染色体短臂的一群高度多态性的紧密连锁基因群,它所编码的主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex, MHC)在特异性免疫中处于中心地位。现已表明,HLA不仅控制同种排斥反应,并与机体免疫应答、免疫调节及某些病理状态密切相关。HLA-G因其在母胎免疫中的独特地位而引人注目。经典的HLA抗原在胎盘无表达,而HLA-G在胎盘绒毛外细胞滋养层特异表达,提示HLA-G在母胎免疫中起保护作用。近年来,学者们对HLA-G的免疫功能进行了广泛研究,初步揭示了HLA-G免疫耐受机理。
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滋养层发育和机能分化与粘附因子及细胞因子
胚泡着床后侵入蜕膜组织形成强固粘附的同时,迅速分化成绒毛并完成胎盘的组织构成.绒毛上皮由细胞滋养层、合体细胞滋养层和绒毛外细胞滋养层(extravillous cytotrophoblast)组成.在滋养层细胞增殖与分化和绒毛膜形成的过程中与性激素、生长因子、癌基因、癌抑制基因、凋亡关联因子、细胞外基质和粘附因子等多种因子的关系密切.本文仅对细胞粘附因子(adherin)及细胞因子(cytokine)与滋养层细胞的发育与机能分化进行讨论.
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胚胎干细胞诱生的胰岛素分泌细胞分泌胰岛素的研究
目的:研究小鼠胚胎干细胞ES-D3诱生的胰岛素分泌细胞(IPCs)分泌胰岛素的能力及其所分泌的胰岛素的活性.方法:将ES-D3细胞培养于经处理的鼠胚成纤维细胞滋养层上保持未分化状态扩增,对数生长期时转入无血清含bFGF的DMEM液进行诱导,隔天换液,21 d后,采用DTZ染色、免疫细胞化学染色和ELISA等方法检测胰岛素的生成与分泌情况;用RT-PCR法检测PDX-1、Insulinl、Insulin2和Glut2等胰岛素分泌细胞相关基因mRNA的表达,并通过动物实验研究生成的IPCs所分泌的胰岛素的降糖活性.结果:在诱导21 d,DTZ染色法观察到被DTZ染成洋红色的IPCs;免疫细胞化学染色法显示诱导体系中有胰岛素特异性免疫反应阳性的细胞群;ELISA法测定结果表明IPCs受高糖刺激后分泌胰岛素,动物实验证明所分泌的胰岛素具有降糖活性;RT-PCR法检测到有Insulin2和PDX-1 mRNA的表达,Insulinl呈弱表达,Glut2不表达.结论:小鼠胚胎干细胞ES-D3诱生的IPCs能够合成并分泌胰岛素,而且分泌的胰岛素具有降糖活性.
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羊膜——易于获得的器官修复与重建的生物材料
羊膜(amniotic membrand,AM)是两层胎膜的内层,从细胞滋养层衍化而来.早在20世纪初期就有用含羊膜的胎膜移植于烧伤和溃疡创面减轻疼痛、促进愈合的报道,之后羊膜在眼科、腹部外科、妇产科、泌尿外科及颅脑外科均有成功的应用报道.近年来,随着生物工程和组织工程技术的发展,羊膜的应用更加广泛,研究也更加深入.
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米非司酮对绒毛外细胞滋养层细胞人类白细胞抗原-G、E和F表达的影响
目的 探讨米非司酮对绒毛外细胞滋养层细胞(EVCT)的人类白细胞抗原(HLA)-G、E和F表达的影响.方法 选取正常妊娠6~9周的人绒毛组织,经胰蛋白酶消化、体外培养和纯化获得EVCT,采用RT-PCR方法检测孕酮、孕酮+米非司酮对体外培养的EVCT表达HLA-G、HLA-E、HLA-F mRNA水平的影响.结果 添加0.1 ng/L孕酮的EVCT其HLA-G、HLA-E、HLA-F mRNA水平明显增加,相对于无水乙醇组,分别增加3.3、1.3和1.3倍,差异有统计学意义(P<0.05);而这种作用被共培养的相应浓度的米非司酮完全抑制.结论 米非司酮可在转录水平抑制孕酮诱导的滋养层细胞HLA-Ⅰb类基因(包括HLA-G、HLA-E、HLA-F)表达的上调.
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HLA-G、IL-10在急性白血病中的表达
HLA-G为非经典的HLA Ⅰ类分子,是一种重要的免疫抑制分子,主要在人类胎盘形成过程中侵入蜕膜和螺旋动脉的绒毛外细胞滋养层表达,依据结构及分布不同分为膜结合型HLA-G (mHLA-G)和可溶性HLA-G(sHLA-G).近来研究发现HLA-G在多种肿瘤细胞中表达,它参与调控肿瘤免疫逃逸[1],与肿瘤的大小、分化程度及肿瘤转移有密切关系.
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绒毛膜癌
中枢神经系统生殖细胞肿瘤可发生于任何年龄,好发年龄<25岁,而绒毛膜癌(绒癌)发病年龄则早10年.绒癌是颅内少见的生殖细胞肿瘤,主要有两种细胞组成:合体滋养层细胞和细胞滋养层成分,这两种成分的双层排列是绒癌的重要诊断特点.
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EIF5A2基因在不同发育时期人胎盘绒毛膜中的定位表达及意义
目的 探讨EIF5A2 (eukaryotic transla-tion initiation factor 5A2)癌基因在人胎盘绒毛膜中表达及其定位. 方法 收集孕早期(8±周)绒毛膜、孕中期(20 ±周)及足月(38 ±周)胎盘组织,应用RT-PCR和Western blot及免疫组织化学等方法,从分子水平及蛋白水平检测EIF5A2在不同时段胎盘组织中的表达及定位. 结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示各期胎盘组织中均有EIF5A2 mRNA及蛋白表达,孕中期达峰值,足月胎盘EIF5A2表达显著下降(P<0.05);免疫组化结果显示孕早期绒毛膜中EIF5A2定位表达于合体滋养层及细胞滋养层细胞胞质,孕中期胎盘组织中EIF5A2主要表达于细胞滋养层,合体滋养层表达较弱,分娩期胎盘部分合体滋养层细胞内可见微弱的EIF5A2表达. 结论 EIF5A2在不同时段人绒毛膜、胎盘组织中均有表达,定位于胎盘绒毛膜合体滋养层及细胞滋养层细胞胞质,其表达丰度及优势表达细胞类别在不同孕期存在差异.
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HLA-G在肿瘤中的表达
自1987 年Geraghty等[1]同事第一次报道发现HLA-G 以来, 至今已有十余年, 人们对这个非经典HLA -I 类分子的了解逐渐深入.HLA-G(human leucocyte antigen-G) 即人类白细胞抗原系统-G 是一种非经典的HLA- I类抗原,它定位于6 号染色体短臂HLA 远端300bp以内, 并选择性的在胎盘表达,参与保护胚胎免受母体淋巴系统的攻击.1900年Kovats[2]发现它在胎盘绒毛远端的细胞滋养层特异表达.1995 年WHO 组织的HLA 命名大会上Bodmer等[3]报道,HLA-G 有17个等位基因.随着检测水平的发展, 在人类胚胎的很多器官都检测到HLA-G的表达.早发现是在母胎界面的绒毛膜滋养层细胞上分布,参与保护胚胎免受母体淋巴系统的攻击.
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米非司酮对人早孕绒毛组织核转录因子-κB表达的影响
目的 探讨米非司酮对人早孕绒毛组织中核转录因子-κB(nf-κB)表达的影响.方法 人工流产组早孕绒毛18例和药物流产组早孕绒毛22例,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术分别测定两组早孕绒毛组织中NF-κB蛋白和mRNA的分布与含量.结果 药物流产组早孕绒毛组织中NF-κB mRNA表达量与人工流产组相比下调明显(P<0.01);药物流产组早孕绒毛细胞滋养层细胞中NF-κB蛋白表达与人工流产组相比明显下调(P<0.05).结论 米非司酮引起早孕绒毛NF-κB表达降低,可能是米非司酮终止早孕的机理之一.
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HLA-G与肿瘤
HLA-G(human leucocyte antigen-G)即人类白细胞抗原系统-G是一种非经典的HLA-Ⅰb类抗原,它定位于6号染色体短臂HLA远端300 bp以内,并选择性的在胎盘表达,参与保护胚胎免受母体淋巴系统的攻击.它早于1987年被Geraghty DE克隆[1],1990年Kovats S发现它在胎盘绒毛远端的细胞滋养层特异表达[2].1995年WHO组织的HLA命名大会上Bodmer JG报道HLA-G有G·01011、G·01012、G·0102、G·0103 4个等位基因[3].
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母儿血型不合致胎儿水肿及死胎尸检1例
1案例女胎,长45cm,重2550g.全身皮肤浸软、苍白,舌突出.面部、眼睑、胸腹部皮肤及皮下显著水肿.腹腔积230ml黄红色混浊液体(利凡他试验阴性,比重1.007).胸腹腔脏器及脑无先天性畸形.胸腔积液红色透明,共45ml.心腔及大血管内血量显著减少.肺浮扬试验阴性,镜检肺不张.颅内无出血,脑重170g,淤血、水肿.胸腺缩小,脾及小肠内淋巴组织明显减少.胎盘重800g,黄白色,小叶深而明显,镜检见大多数绒毛水肿胀大,被覆发育良好的细胞滋养层,有的滋养细胞仍呈两层.脐带长48cm,显著水肿.脑、肺、胎盘绒毛及脐带小血管内见较多有核红细胞.心、肝、肾、肾上腺、脾、胃肠镜检见死后自溶,肝细胞内淤胆,肾及肾上腺内多钙盐沉着.