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中华实验和临床病毒学

中华实验和临床病毒学杂志

Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology 중화실험화림상병독학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 实验和临床病毒学杂志
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 0.71
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-2866/R
  • 国内刊号: 段树学
  • 发行周期: 双月刊
  • 邮发: cjecv@cmaph.org
  • 曾用名: 实验和临床病毒学杂志
  • 创刊时间: 1987
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华医学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • H1N1亚型流感病毒在A549和BEAS-2B细胞中复制情况的初步研究

    作者:邹淑梅;周剑芳;李梓;朱闻斐;张烨;温乐英;朱云;李晓丹;王伟;舒跃龙

    目的 探讨不同宿主来源的H1N1亚型流感病毒在A549和BEAS-2B细胞的复制情况.方法 用分离自人、禽、猪三种宿主的7株H1N1甲型流感病毒分别接种A549和BEAS-2B细胞,分析病毒感染细胞后不同时段的特点;应用受体类型不同的红细胞进行微量血凝试验,检测流感病毒的受体结合特性;同时检测了A549和BEAS-2B细胞表面的受体分布情况.结果 三种宿主来源的H1N1亚型流感病毒感染A549细胞,24 h后CPE十分明显,36 h病毒滴度达到高值;而感染BEAS-2B细胞后,从24 h-120 h CPE都不是很明显,且所有病毒的病毒滴度都很低.对6株H1N1流感病毒的受体结合特性进行了筛查,发现部分测试病毒具有SA a-2,6Gal受体结合特异性.而A549和BEAS-2B细胞表面均含有SA a-2,3Gal及SA a-2,6Gal受体,且A549细胞表面糖受体含量明显高于BEAS-2B细胞.结论 不同宿主来源的H1N1亚型流感病毒对A549细胞都易感并能有效增殖复制,而对具有相似受体特性、上皮组织来源的BEAS-2B细胞不易感,提示支持流感病毒有效感染、复制存在宿主内的调节机制.

  • 人巨细胞病毒对体外培养的人涎腺导管上皮细胞周期的影响及其相关机制

    作者:杨国嵘;黄高异;何晓霞;薛永杰

    目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)对人涎腺导管上皮细胞(HSG)细胞周期的影响及其相关机制.方法 体外培养HSG;用RT-PCR及nest-RT-PCR法检测感染HCMV的HSG中立即早期基因(ie1/ie2)的转录;用流式细胞仪检测HCMV对HSG细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测HCMV感染细胞中周期素D1的表达.结果 感染HCMV的HSG中可检测到HCMV ie1/ie2的转录;HCMV通过影响细胞周期的G1/S关卡,使HSG阻滞于G1期;感染HCMV的HSG周期素D1表达下调.结论 在体外HCMV通过作用于细胞周期的G1/S关卡及下调周期素D1抑制涎腺导管上皮细胞的增殖.

  • 应用抑制性消减杂交技术克隆PS1TP1的反式激活基因

    作者:黄辉煌;纪冬;王嗣予;徐婉珍;贾志远;李克

    目的 应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)前-S1蛋白(preS1)反式激活蛋白1(PS1TP1)的相关基因cDNA消减文库,克隆PS1TP1反式激活相关基因,以期发现PS1TP1蛋白反式激活作用的靶位点.方法 以PS1TP1表达质粒PcDNA3.1(-)-PS1TP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;提取mRNA并逆转录为cDNA,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库.结果 文库扩增后得到90个阳性克隆,随机挑选43个克隆测序,并进行同源性分析,获得12种编码基因,其中10个为已知功能基因,另外2个为未知功能序列.结论 成功构建PS1TP1反式激活的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制奠定基础.为进一步研究PS1TP1蛋白的功能及其在HBV感染中的分子生物学机制提供理论依据和研究方法.

  • 深圳地区肠道病毒71型VP1基因变异趋势研究

    作者:何雅青;张宏斌;姚相杰;廖玉学;杨洪;冼慧霞;阳帆;张海龙;杨小柯;许文波

    目的 研究深圳地区肠道病毒71型VP1基因变异趋势.方法 用肠道病毒71型特异性引物进行RT-PCR,并对EV71的VP1进行扩增,所得的序列与肠道病毒71型A、B、C基因型代表株的核苷酸序列比较,用DNA Star、BioEdit和Mega 3.1软件进行系统进化分析.结果 35株病毒间VP1核苷酸同源性为92.1%-100%,它们与A、B基因型代表株VP1区核苷酸同源性差异较大,为81.4%-91.1%,与C4基因型代表株接近,其核苷酸同源性在93%-97.4%之间.1998-2004年深圳地区EV71主要流行株为C4b亚型,从2003年开始逐步向C4a亚型过渡,至2006年已全部变迁为C4a亚型,且从2003年至2008年,深圳地区EV71 C4a株与安徽阜阳株FY23的核苷酸的同源性分别为:94.5%-94.7%,95.7%-95.8%,96.2%,95.4%-97.5%,96.3%-99.2%,有逐年增高的趋势.2006年两株EV71和2008年EV71代表株核苷酸序列在VP1区的第66位点,均由A→C,从而导致VP1区氨基酸的第22位点由谷酰胺变为组氨酸(Q→H).结论 深圳地区EV71流行株逐渐由C4b亚型向C4a亚型演变,2006年部分EV71及2008年EV71 VP1第66核苷酸位点发生有义突变.

  • 人源抗EV71病毒基因工程抗体的研究

    作者:孙丽娜;张黎;张福顺;李川;张全福;李德新;梁米芳

    目的 研制人源抗EV71病毒基因工程抗体.方法 采集多个患儿外周血淋巴细胞,构建人源抗EV71单链(scFv)噬菌体抗体基因文库.用纯化的EV71 VPI蛋白对抗体库进行筛选,将筛出抗体的轻链和重链通过序列测定确定抗体轻重链型别后分别克隆入全抗体表达载体pAC-LCH3R后转染昆虫Sf9细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达.结果 成功地获得了1株抗EV71病毒VPI蛋白的人源单克隆抗体,利用ELISA、IFA对所获人源单克隆抗体的功能特性进行鉴定,表达成分泌型IgG全抗体在体外与A型及C4亚型EV71病毒的中和反应结果 显示为阴性.结论 从免疫库中获得了1株人源非中和单抗,为EV71病毒引起的手足口病的鉴别诊断奠定了基础.

  • 人乳头瘤病毒2(HPV2)E2蛋白不同功能区突变对转录抑制作用影响的研究

    作者:高晨;雷艳君;姜慧英;石琦;田婵;韩俊;董小平

    目的 研究HPV2变异株上E2蛋白不同功能区域的点突变对其转录作用的影响.方法 根据HPV2突变株E2上的突变点设计引物,采用延伸法构建不同的E2突变体,并插入到真核表达质粒pcDNA3.1中.表达不同突变体E2的pcDNA3.1-E2与带有HPV原毒株LCR的CAT报道基因载体进行共转染Hela细胞.通过检测CAT的表达量对不同E2突变体的转录抑制作用进行评估.结果 与全长的原毒株E2相比较,去除N端及C端功能区的E2蛋白均降低了E2蛋白对启动子活性的抑制作用.位于E2蛋白转录激活区(nt 3037),铰链区(nt 3387)及DNA结合区(nt 3697)的点突变明显影响了其转录抑制功能.结论 HPV2 E2蛋白的转录调节功能与其转录激活区以及DNA结合区密切相关.HPV2突变株上的不同的E2的单个突变点能够明显降低E2蛋白对启动子活性的抑制作用.

  • 离子型聚丙烯纤维对病毒的吸附作用研究

    作者:宋娟;周伟;吴政;王颖;崔雨;周绍箕;李朝品;韩俊

    目的 研究新型离子型聚丙烯纤维以防止病毒感染.方法 构建四种离子型表面活性聚丙烯纤维,与表达GFP的重组腺病毒分别相互作用,通过观察GFP的表达和病毒六邻体壳粒基因的表达来判断纤维对病毒的吸附能力.结果 四种纤维对腺病毒具有一定的吸附或灭活能力.金属离子纤维和两性离子聚丙烯纤维具有更好的灭活病毒能力.结论 提示金属离子纤维和两性离子聚丙烯纤维可以作为实验室防护装备的原材料.

  • 327例输卵管性不孕患者生殖道衣原体、支原体检测及药物敏感分析

    作者:周芸;许学岚;王春平;周明;曾秀华

    目的 探讨输卵管性不孕症患者生殖道衣原体和支原体感染的状况及药物敏感性,指导临床合理用药.方法 随机选取327例输卵管性不孕症患者作为不孕组和286名健康孕妇作为对照组,采集宫颈分泌物,检测沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)和人型支原体(MH),以及UU和MH耐药性.结果 不孕组CT感染率(14.99%)、UU感染率(23.24%)、UU+MH感染率(29.05%)、CT+UU+MH感染率(9.17%)及总感染率(88.99%)均高于对照组(依次为:2.80%、6.99%、8.39%、4.55%、29.02%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);UU对罗红霉素(敏感性为96.05%)、交沙霉素(敏感性为96.05%)、四环素(敏感性为82.89%)强力霉素(敏感性为92.11%)、克拉霉素(敏感性为96.05%)敏感率较高,对环丙沙星和乙酰螺旋霉素相对耐药;MH对交沙霉素(敏感性为95.83%)、强力霉素(敏感性为91.67%)、美满霉素(敏感性为83.33%)、壮观霉素(敏感性为75.00%)较敏感,对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素不敏感,耐药性较高;UU+MH仅仅对交沙霉素(敏感性为90.52%)较敏感,对红霉素、罗红霉素、乙酰螺旋霉素、环丙沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、克拉霉素的耐药性极高(77.89%-91.58%).结论 CT、UU、MH感染与输卵管性不孕有一定相关性,输卵管性不孕患者CT、UU和MH感染率较高于能生育者;UU和MH及UU+MH对多种常见抗菌药物具有较强的耐药性,临床治疗应重视病原学检测,合理使用抗生素.

  • DTaP-sIPV联合疫苗中SabinIPV 免疫原性研究

    作者:马艳;秦敏;胡慧琼;姬光;冯玲;高娜;顾洁;谢炳锋;何继红;孙明波

    目的 探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(SabinIPV)三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的佳制备工艺及抗原剂量配比提供参考.方法 用不同配比的SabinIPV,制备两批DTaP-sIPV,进行各项指标的检定及稳定性试验,并联合单独的Sabin IPV和GSK制备的DTaP-wIPV对56只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30 d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型别的中和抗体效价.结果 两批DTaPsIPV的各项检定指标均符合<中国药典>三部(2005版)要求,且稳定性良好.大鼠经3针基础免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,3针免疫后抗体阳转率已经达到100%.结论 经此制备的DTaP-sIPV安全、稳定、有效,且DTaP-sIPV中的SabinIPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体.

  • 人巨细胞病毒Merlin株全基因组的重叠基因结构与功能分析

    作者:杨光;李月琴;邹奕;张欣;周天鸿

    目的 分析人巨细胞病毒(HCMV)merlin株全基因组存在ORF重叠的基因,揭示HCMV重叠基因的结构与功能特征.方法 应用生物信息学方法 搜索HCMV Merlin全基因组中的ORF重叠基因,分析HCMV merlin株重叠基因的编码序列CDS和ORF起止位点,计算CDS和ORF的长度,编码蛋白的相对分子质量,重叠长度,蛋白编码方向,确定重叠序列,重叠类型,分析重叠基因的表达时相和编码蛋白的功能.结果 HCMV merlin株存在39个重叠ORF的基因,占全基因总数的23%,39个ORF重叠基因之中有13个IE基因,9个E基因,17个L基因,可分为16个重叠群,2个基因重叠的有11个重叠群,3个基因相互重叠的有3个重叠群,4个基因相互重叠的有2个重叠群,重叠基因功能广泛.结论 HCMV Merlin株中存在大量的复杂的重叠基因,为进一步研究重叠基因的转录和翻译调控机制奠定了基础.

  • 乙型肝炎病毒大蛋白用于公共卫生体检领域检测意义的研究

    作者:潘国绍;蒋兴祥;陈金堃;曹栋青;赵丹燕;见明智;张屹

    目的 通过检测餐饮从业人员、学生等体检人员中乙肝病毒大蛋白(Hepatitis B virus large proteins,HBV-LP)的情况,探讨乙肝病毒大蛋白用于公共体检领域的意义.方法 分别采用酶联免疫法(ELISA)测定乙肝两对半(HBV-M)以及乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP),采用real-time PCR法检测HBV-DNA,对各类体检人员的709份标本分别进行检测.结果 (1)HBV-LP法与HBV-DNA 法检测709例中HBsAg阳性的体检人员的检测结果 差异无统计学意义,x2值和P值分别为1.47和0.23.(2)不同乙肝两对半模式中HBV-LP法与HBV-DNA法的检测结果 差异均无统计学意义,x2值和P值分别为2.67,0.60,0.00和0.10,0.44,1.00;(3)HBV-LP S/A值与HBV-DNA的拷贝数呈正相关性(r=0.959,P<0.05).结论 乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP)能够有效、真实地反映HBV病毒复制情况,可以广泛应用于公共体检领域.

  • H5N1亚型流感病毒M2与NA基因真核表达载体的构建与鉴定

    作者:郭建强;姚立红;陈爱珺;刘晓宇;付金奇;徐鹏卫;张智清

    目的 构建表达H5N1亚型流感病毒M2和NA基因的多种真核表达载体.方法 以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,PCR扩增全长M2与NA基因.将M2基因克隆入真核表达载体pStar的IRES上游或下游的MCS,构建重组pStar-M2/和pStar-/M2.将NA基因克隆人pStar载体IRES上游或下游的MCS,构建重组pStar-NA/和pStar-/NA.将M2和NA基因先后克隆到pStar载体IRES序列的上游和下游MCS,分别构建双基因共表达重组pStar-M2/NA和pStar-NA/M2.将重组质粒转染293细胞,使用IFA方法 检测各重组质粒相应外源基因的表达.结果 通过酶切鉴定,各重组质粒构建正确.将其转染293细胞后,使用IFA方法 检测到了各重组质粒中相应外源基因的表达.结论 构建了多种表达H5NI亚型流感病毒M2和(或)NA基因的真核表达载体,为研究开发流感DNA疫苗奠定了基础.

  • 乙型肝炎肝硬化患者病毒基因型与特异性、非特异性CTL的关系和意义

    作者:顾锡炳;杨小娟;王娟华;华忠;陆忠华;徐月琴;贾志远

    目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血HBV特异性、非特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的关系和意义.方法 91例乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间HBV特异性、非特异性CTL的差别,并探讨其临床意义.结果 91例乙型肝炎肝硬化患者中,C基因型55例(60.44%),B基因型35例(38.46%),B、C混合型1例(1.1%),C基因型人白细胞抗原(HLA)-A2阳性27例(49.09%),HBV特异性CTL(0.18%±0.03%),B基因型HLA-A2阳性18例(51.43%),HBV特异性CTL(0.38%±0.04%),高于C基因型,t=5.01,P<0.01,非特异性CTL:C基因型(11.87%±1.50%),B基因型(11.90%±1.51%),t=0.14,P>0.05.HBV DNA水平:C基因型[(6.01 ±0.81)log10拷贝/ml],高于B基因型[(5.01 ±0.54)log10拷贝/ml],t=5.01,P<0.01,丙氨酸转氨酶(ALT):C基因型(251.13 ±131.11)U/L,高于B基因型(121.25±63.21)U/L,t=3.61,P<0.01,血清总胆红素(TBil 45.61 ±15.11)μmoL/L,高于B基因型(28.11 ±6.25)μmol/L,t=3.05,P<0.01.结论 与乙型肝炎肝硬化B基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBV DNA水平较高,肝功能损害较重.

  • 32例慢性乙型肝炎患者HBV P区的多位点耐药突变分析

    作者:叶非;李晓鸥;过建春;武静

    目的 深入了解核苷(酸)类似物对乙型肝炎病毒基因组P区耐药性突变的影响,分析其对该区诱导耐药突变的作用.方法 对服用核苷(酸)类似物并且发生病毒学突破的患者,采用PCR产物直接测序法,进行HBV基因组P区耐药性基因测序分析.结果 发现P区可出现多点耐药突变,导致临床上发生交叉耐药和多重耐药.结论 应选用高耐药基因屏障的药物进行初始抗病毒治疗.对长期服用核苷(酸)类似物的患者,应定期监测HBV DNA,以便早期发现病毒学突破并及时干预.

  • 68例小儿难治性肺炎支原体肺炎临床分析

    作者:王雷;段建华

    目的 通过分析68例儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)病例特点,总结RMPP早期识别和综合治疗的方法.方法 2008年1月至2010年12月首都医科大学附属北京儿童医院国际部收治的资料完整的难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)病例68例.搜集总结患者支原体抗体、C-反应蛋白、白细胞、血沉、胸片等多项实验室和影像学证据.结果 100%RMPP出现高热并逐渐出现肺部体征,部分患者出现心电图异常、肝功受损、皮疹等肺外表现.诊断RMPP后应用大环内酯类治疗2-4疗程,加用甲基泼尼松龙.重症或激素无效的给予免疫球蛋白治疗.合并细菌感染的联合应用敏感抗生素.纤维支气管镜在RMPP治疗中有一定作用.结论 早期识别对RMPP的诊断尤为重要,采取综合措施才能保证RMPP治疗效果.

  • 阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎HBeAg血清学转换与基因型、HBV特异性CTL的关系

    作者:周玉麟;王学才;吴寅涛;谈永飞;赵彦平;汤俊明;潘建强;杨志贤;顾锡炳

    目的 探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者发生HBeAg血清学转换与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.方法 70例慢性乙型肝炎患者HBV DNA阳性(HBV DNA≥1×104拷贝/ml),HBeAg阳性45例,其中B基因型23例(51.11%),C基因型22例(48.89%).ALT>2×正常参考值上限(ULN)、人白细胞抗原(HLA)-A2阳性,用阿德福韦酯(正大天睛药业公司生产)10 mg,口服,每日1次.观察治疗12个月后HBeAg血清学转换与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.结果 阿德福韦酯治疗12个月后,HBV特异性CTL(0.68%±0.11%)高于治疗前(0.33%±0.11%),t=8.36 P<0.001,HBV DNA(3.01±0.2)log10拷贝/ml低于治疗前[(6.27 ±0.70)log10拷贝/ml]t=12.63 P<0.001,HBV DNA阴转(<500拷贝/ml)43例(61.43%).HBeAg阳性45例中发生HBeAg转阴13例(28.89%),HBeAg血清学转换8例(17.78%),HBeAg血清学转换者HBV特异性CTL(0.86 ±0.05%)高于无HBeAg血清学转换者(37例,82.22%)的HBV特异性CTL(0.61%±0.07%),t=7.88,P<0.001.HBeAg血清学转换8例中,B基因型7例(占B基因型30.43%),C基因型1例(占C基因型4.55%),x2=5.15,P<0.05.结论 阿德福韦酯能提高CHB患者的HBV特异性细胞免疫功能,治疗后HBeAg血清学转换的发生与HBV特异性CTL水平升高有关,并可能与基因型有关.

  • 慢性乙肝病毒感染者肝脏病理与临床特征研究

    作者:陆传统;高国生

    目的 探讨肝活检病理组织学对慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者和血清ALT轻度升高慢性乙型肝炎患者(CHB)的临床意义.方法 105例慢性HBV感染患者全部进行肝组织活检,并按血清ALT水平分为3组:ALT≤0.5×正常参考值上限(ULN)为A组,0.5×ULN<ALT≤1×ULN为B组,1×ULN<ALT<2×ULN为C组;对3组肝脏炎症程度及纤维化程度比较,并对不同肝组织炎症程度、纤维化程度与患者基本情况的关系进行分析.结果 105例患者中炎症程度≥G2者占40.95%,其中ALT正常的患者有30.43%≥G2;纤维化程度≥S2者占26.67%,其中ALT正常的患者中≥S2者占17.39%.血清ALT及透明质酸随肝脏炎症程度加重及纤维化分期的增加而增加(P<O.05).结论 密切随访血清ALT和透明质酸可协助了解肝脏病变情况,肝脏病理学依据仍然是决定是否抗病毒治疗的有力依据.

  • 继发全身强直-阵挛发作的病毒性脑炎患者的临床分析

    作者:张文洛;彭朝胜;夏菁;田力;杨璐;康怡;谢文秀;曹悦鞍

    目的 总结继发全身强直-阵挛发作(Generalized tonic clonic seizure,GTCS)的病毒性脑炎患者的临床表现、脑脊液、影像及脑电图(EEG)检查对诊断的价值.方法 回顾性分析30例继发GTCS的病毒性脑炎患者的临床表现、脑脊液、影像学特征及EEG改变.结果 30例病毒性脑炎患者,发病2周内出现GTCS者21例(70%),发病15-28 d出现GTCS者9例(30%);27例患者脑脊液检查,主要异常表现为压力、细胞数、蛋白增高,脑脊液病原学检查阳性率为12/16;19例(63.3%)头颅MR1异常;患者发病初期EEG均出现异常.结论 患者的临床表现、影像学表现及EEG检查对病毒性脑炎合并癫痫患者的诊断、继发GTCS的评估具有重要作用.

  • 手足口病与气候关系的探讨和研究

    作者:曾立华;任敏;赵培利;马建兵;孙素丽;董俊汕

    目的 探讨和研究秦皇岛市手足口病流行情况与气候的关系.方法 收集2009年秦皇岛市手足口病旬发病数,由秦皇岛市气象局提供2009年秦皇岛市旬平均气温、平均湿度.搜集秦皇岛市2009年每旬天的气象资料和手足口病的发病数,利用EXCELE软件加载宏的数据分析功能进行数据处理.结果 秦皇岛市手足口病发病呈明显的季节性分布,2009年全市发病数自3月下旬开始抬头,4月中旬明显升高,7月中旬达到全年高峰,然后开始逐渐下降,自10月上旬发病数接近3月下旬的水平,11月中旬后疫情迅速进入较低水平,发病高峰季节主要在春夏季.结论 手足口病在秦皇岛市的发病情况与气候条件有明显的相关性,与高温、高湿呈显著的正相关.

    关键词: 手足口病 气候
  • HCV免疫学诊断抗原与链亲和素融合蛋白的制备及应用研究

    作者:张庭瑛;鲁健;赵敏;赵国霞;邓瑶;毕胜利;高基民;谭文杰

    目的 制备带有链亲和素(SA)标签的丙型肝炎病毒(HCV)融合蛋白,并初步探讨其在抗-HCV ELISA检测中的应用.方法 构建了HCV诊断抗原与链亲和素融合蛋白重组表达质粒pET-11d-C44P-SA,在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,并用Western Blot进行鉴定,表达的融合蛋白经镍金属螯合(Ni-NTA)层析柱进行纯化,透析复性后分别包被生物素化以及普通酶联板,进行人血清抗-HCV检测.结果 成功构建了带有SA标签的重组表达质粒,其在大肠埃希菌BL21(DE3)中实现高效表达,制备的融合蛋白纯度可达90%以上.建立ELISA法进行人血清抗-HCV检测显示:融合蛋白包被生物素化酶联板检测灵敏度与特异性明显高于普通酶联板.结论 构建的融合蛋白作为包被抗原,结合利用SA标签与生物素化酶联板,明显提高了抗-HCV检出的灵敏度与特异性,该策略为进一步提高抗-HCV检测试剂的质量打下了基础.

  • 二代人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展

    作者:张忠献;田厚文

    人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种嗜黏膜和皮肤上皮的双链DNA病毒,与多种疾病的发生相关.根据致病性将其分为高危型和低危型2种,高危型感染与宫颈癌及癌前病变的发生密切相关,有:HPV-16、-18、-45、-31、-33、-52、-58等;其中70%的宫颈癌与HPV-16/18型有关.低危型感染与生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关,有:HPV-6、-11、-40、-42等,其中6和11型的感染与90%以上的生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关.

  • EV71病毒疫苗研究进展

    作者:张福顺;梁米芳;李德新

    肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)为二十面立体对称的球型结构,直径为24-30 nm.病毒衣壳由60个亚单位构成,每个亚单位由4种衣壳蛋白(VP1-VP4)组成[1].根据病毒衣壳蛋白VP1核苷酸序列的差异,可将EV71分为A、B、C 3个基因群和11个基因类型(A,B1-B5和C1-C5)[2].EV71引起的手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)和疱疹性咽峡炎,在世界各地均有暴发流行,是一种在儿童中常见的自限性疾病.

  • 基于微球的多重流式分析技术

    作者:芜为;梁米芳;李德新

    1 简介生化分析是生物基础研究及医学临床诊断的重要手段,其中有30多年历史的流式细胞分析技术已广泛应用于生物医学基础研究及实际应用的各个领域.尽管在流式分析技术的大多数实际应用中都以细胞作为载体或研究目标,但诸如微球之类的小固态颗粒同样也可以应用于流式分析技术.

中华实验和临床病毒学分期目录
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