组织工程与重建外科杂志
Journal of Tissue Engineering and Reconstructive Surgery 조직공정여중건외과잡지
- 主管单位： 上海交通大学
- 主办单位： 上海交通大学医学院附属第九人民医院
- 影响因子： 0.66
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-0364
- 国内刊号： 31-1946/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Cathepsin K基因siRNA的筛选及其质粒载体的构建
目的 筛选出对人Cathepsin K(CTSK)基因抑制效率高的1对siRNA,并通过质粒载体表达该siRNA,为进一步抑制去分化人软骨细胞中CTSK的表达奠定基础.方法 针对Cathepsin K基因设计4个靶位点,并根据靶位点合成4对siRNA,并转染人软骨细胞.通过Real-time PCR检测4对siRNA中抑制效率高的1对,与线性化的PGCsilencer-HI/Neo/GFP连接、转化、扩增与纯化质粒.结果 4对siRNA转染软骨细胞后72 h,通过对照FITC-siRNA的绿色荧光观察,siRNA的转染效率达到70%～80%.Real-time PCR检测每对siRNA的CTSK量与对照组比的百分率得到其抑制效率,分别为:第1对的比值大于对照组(无抑制作用),第2对47.5%.第3对53.1%,第4对67.3%(抑制效率大).成功构建出pGCsilencerTM H1/Neo/GFP/CTSK RNAi载体,经测序证实了克隆的RNAi打靶序列100%正确.结论 成功构建了CTSK基因的siRNAs表达质粒,为进一步研究抑制该基因表达对延缓软骨细胞的去分化过程并促进其成软骨能力奠定了基础.
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MesenPRO RS Medium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响
目的 探讨MesenPRO RS Medium对人脂肪干细胞增殖与分化的影响.方法 应用MesenPRO RS Medium与DMEM+10%FBS两种培养基培养人脂肪干细胞,比较两者在细胞形态、体外增殖能力、成纤维细胞集落形成(CFU-F)能力及多向分化潜能的差异.结果 MesenPRO RS Medium培养的人脂肪干细胞具有良好的细胞形态,在增殖速度、细胞集落,以及成脂、成骨及成软骨能力等方面均优于DMEM+10%FBS.结论 MesenPRO RS Medium是人脂肪干细胞优良的培养基.
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A型肉毒素注射治疗瘢痕疙瘩顽固性痛痒的临床研究
目的 探索治疗瘢痕疙瘩患者顽固性痛痒的新疗法.方法 经常规激素治疗(1～2 mL/次·月,平均5.2次)后痛痒无明显改善的瘢痕疙瘩患者35例,年龄18～55岁.随机单盲法分为A型肉毒素注射组(T组)16例,得宝松注射组(C组)19例.随访1次/月,共6个月.采用VAS量表评估痛痒症状的变化,记为V随访次数,统计分析V值,评价疗效.免疫组化检测疗程结束后,两组瘢痕内切除组织的SP表达(T组9例.C组11例).结果 除V0外,两组间各观察点V值的差异有统计学意义(P＜0.01).C组各观察点的VAS值差异无统计学意义;T组各观察点的VAS值逐步缓慢下降,其中V1 vs V0,V6 vs V5有显著差异.与C组相比,T组切除的瘢痕组织内SP阳性染色较少.结论 肉毒素A注射治疗瘢痕疙瘩患者的顽固性痛痒疗效明显并具有时间依赖性:肉毒素A可能是通过减少瘢痕内的SP含量达到治疗效果的.肉毒素注射可作为治疗瘢痕疙瘩顽固性痛痒的有效手段.
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大众健康评分下的胫骨髓内钉术后疗效
目的 使用大众健康评分及骨科专业关节评分,对单一胫骨干骨折髓内钉治疗的患者进行评分研究.比较两种方法 之间的异同.方法 选用自2005年3月至2006年3月,因胫骨干骨折在我院骨科取胫骨髓内钉的患者作为研究对象.骨折类型为单一下肢胫骨骨折及胫腓骨骨折.入选后收集其X片、了解受伤机制、骨折类型、手术切口入路、骨折愈合时间及并发症,同时对其进行临床评价,包括视觉评分法(VAS)、Iowa膝关节及踝关节评分、SF-36生活质量表,利用Spearman检验对部分变量进行相关性分析.结果 本组共162例患者,术后平均随访38个月.60例患者休息时存在膝关节周围疼痛;103例患者由于进钉点疼痛而影响膝关节活动;31例患者出现不同程度踝关节周围疼痛;19例患者仍感骨折部位疼痛.膝关节与踝关节的VAS评分存在明显相关性(r=0.38),而两者与骨折部位的VAS评分均无相关性.膝、踝关节的Iowa评分与SF-36生活质量表的躯体总分及心理总分也存在极大的相关性.结论 胫骨骨折髓内钉治疗术后,尽管医生认为手术效果较为肯定,但根据患者自身的评价,仍有较大比例的"不满意"率.
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硫酸钙人工骨对山羊下颌骨牵引成骨的影响
目的 建立山羊双侧下颌骨牵张成骨实验动物模型,探讨硫酸钙人工骨对山羊下颌骨牵引成骨区新骨生成的作用及局部使用硫酸钙对血清总钙的影响.方法 8只山羊随机分为A组(硫酸钙组)和B组(对照组),建立牵引成骨(Distraction Osteogenesis,DO)模型.A组预牵开3 mm间隙,注入硫酸钙人工骨;B组常规牵引.两组均于术后第5天开始,以0.5 mm/12 h的速度牵引,A组连续牵引7 d,B组连续牵引10 d,两组颌骨总延长距离均达到10 mm.术前及术后早期检测血清碱性磷酸酶(ALP)和血清总钙浓度.牵引结束后第6周取材,对新生骨大体标本、影像学、组织学、骨密度及生物力学等指标进行观察检测.结果 所有山羊下颌骨均延长了约10 mm,A组血清ALP浓度、新生骨小梁面积百分比、骨密度及三点弯曲断裂大载荷值均比B组高(P＜0.05),而血清总钙浓度与B组相比差别无显著性(P＞0.05).结论 动物实验表明,硫酸钙人工骨在牵引成骨的早期对新骨的形成具有促进作用,且局部应用硫酸钙对血清总钙浓度无明显影响,具有良好的生物相容性.
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转染人骨形成蛋白-7基因的骨髓基质细胞异位成骨实验研究
目的 观察转染人骨形成蛋白-7(Bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因的骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells.BMSCs)与胶原膜(BME-10X)复合培养后的异位成骨能力.方法 将hBMP-7基因转染 Beagle 犬 BMSC,与胶原膜复合培养后,植入裸鼠皮下,8周后取材,HE、Mallory染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色,观察其异位成骨能力.结果 各组均有不同程度Ⅰ型胶原的表达,转染组和未转染组显著高于单纯膜组,转染组又显著高于未转染组(P＜0.05).结论 转染了hBMP-7基因的BMSCs具有更强的异位成骨能力,有望成为牙周组织工程理想的种子细胞.
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诱导表皮干细胞向汗腺上皮细胞分化的研究
目的 通过探索体外诱导表皮干细胞向汗腺上皮分化可能性,为汗腺组织工程探索新的种子细胞来源.方法 分别收集正常皮肤表皮细胞,利用流式细胞仪多参数分选表皮干细胞;于不同时间点连续观察,不同浓度EGF(50-1000 ng/mL)作用于表皮干细胞后的细胞生长动力学变化,免疫荧光鉴定汗腺细胞表型(NHE-1,NKCC-1)流式细胞仪分析不同浓度EGF对于细胞的毒性.结果 50 ng/mL和100 ng/mL EGF对表皮细胞促增殖能力明显,且二者无显著差异(P＞0.05);500 ng/mL和1 000 ng/mL EGF抑制细胞增殖.1 000 ng/mL EGF对细胞增殖的抑制作用更明显(P＜0.05).表皮干细胞经过50 ng/mL EGF诱导后表达汗腺上皮相对特异性标记NHE-1及NKCC-1.结论 表皮干细胞可成为汗腺组织工程种子细胞的重要来源.50 ng/ml EGF可作为相对优化的表皮干细胞诱导条件.
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不同分化潜能的真皮干细胞膜蛋白初步筛选研究
目的 寻找不同分化潜能的真皮干细胞的差异膜蛋白.方法 通过选择性地抽提三向分化克隆的细胞膜蛋白,与二向分化克隆进行对比分析,以筛选出与分化能力下降有关的细胞膜相关蛋白.三向克隆与双向克隆的膜蛋白经2-D电泳、质谱分析及Westem-Blot检测,初步确认二者之间的明显差异蛋白.结果 蛋白质组学分析结果 显示,二者的差异蛋白主要有10种膜相关蛋白,其中膜表达差异较显著的蛋白质,如:Annexin A2 isoform 1(ANXA2)、Prohibitin(PHB)、Protein disulfide-isomerase A3(PDIA3),均与细胞分化有关.结论 ANXA2、PHB、PDIA3在不同分化潜能的人真皮干细胞膜上表达存在差异,提示了这几组蛋白质参与了该细胞的分化,为初步筛选多潜能真皮成纤维细胞,以及进一步研究其分化的机理提供了重要科学依据和深入探索的新方向.
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计算机辅助设计个体化塑形钛网修补颅骨缺损
目的 探讨计算机辅助设计个体化塑形钛网在颅骨修补术中的临床价值.方法 126例颅骨缺损患者,采用随机双盲法分成两组:计算机塑形组66例,每例患者术前利用CT扫描获取整个颅骨及缺损部位的三维数据,利用计算机辅助设计软件重建颅骨三维模型,根据模型计算缺损面积,设计剪切出靼形钛网、消毒备用,术中将塑形钛网根据解剖结构使用钛钉固定于缺损部位;传统手工组60例,采用术中手工塑形的方法 修补颅骨缺损.分析两组住院天数、手术时间、钛钉使用量、病人对成形术后头部外形的满意度指标.结果 计算机塑形组平均住院天数16.28±2.12 d,平均手术操作时间110.06±20.38 min,钛钉使用量6.6±0.7枚,对塑形后外观满意9.2±0.9分.传统手工组平均住院天数17.56±4.57 d.平均手术操作时间153.47±40.88 min,钛钉使用量12.78±3.69枚,对塑形后外观满意度5.8±1.6分.结论 个体化计算机三维塑型钛网修补颅骨缺损能够缩短手术时间,减少钛钉使用量和术后并发症,提高颅骨成形满意度.具有良好的推广应用价值.
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人真皮来源淋巴管内皮细胞的流式细胞仪分选和生物学特点
目的 用流式细胞仪分选培养人真皮来源淋巴管内皮细胞,研究其生物学特点.方法 采用中性蛋白酶及胶原酶消化包皮组织获得真皮细胞悬液,应用流式细胞仪检测和分选 Podoplanin+和 Podoplanin-/CD34+细胞,所获细胞进行体外培养.传代细胞进行免疫荧光及RT-PCR方法 检测LECs特异标志的表达,低密度脂蛋白吞噬、鼠尾胶原三维培养检测功能特点,MTT法及氚标记法测定细胞增殖周期和低氧条件对其增殖的影响.结果 人真皮细胞中CD31+,CD34+和 Podoplanin+细胞所占比例分别是6.0%,4.4%和1.4%.Podoplanin+和CD34+细胞在单层培养时形成内皮细胞典型的铺路石样外观,表达内皮细胞特异性标志CD31及吞噬Dil-Ac-LDL和三维培养微管形成功能.Podoplanin+细胞表达淋巴管内皮细胞特异性标志Prox-1,Ang2和VEGFR-3,和CD34+细胞间具有显著性差异.两组细胞生长曲线相似均于接种至培养板后的3～5d逐渐进入对数生长期,接种后的6～8d均进入停滞期.在缺氧环境下,氯化钴浓度为50μM和100 μM时刺激细胞增殖,当浓度大于200 μM细胞增殖明显受到抑制.结论 应用流式细胞仪可以富集人真皮来源淋巴管内皮细胞和血管内皮细胞,尽管两者表达特异性分子标志不同,其在三维培养和缺氧条件下生长特点相似.
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小干扰RNA分子对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响
目的 使用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)基因的表达,观察增生性瘢痕成纤维细胞在生物学行为上发生的变化.方法 设计特异性探针合成FAK SiRNA片段,脂质体法转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,光学显微镜观察细胞形态;MTT检测细胞活性并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期.结果 转染后的成纤维细胞呈短梭形改变,胞质、突触减少,细胞核内核仁减少.细胞生长曲线表明,转染FAK siRNA的瘢痕成纤维细胞生长明显抑制.转染后瘢痕成纤维细胞阻滞在G1期.S期和G2期细胞比例减少.结论 FAK与瘢痕增生相关密切,因此改变FAK在成纤维细胞中的表达可望调控增生性瘢痕成纤维细胞的生物活性.
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Cathepsin K基因抑制后对软骨细胞功能的影响研究
目的 研究应用RNA干扰技术早期抑制人Cathepsin K(CTSK)基因的表达对延缓软骨细胞的去分化过程及维持软骨细胞表型的影响.方法 pGCsilencerTM H1/Neo/GFP/CTSK RNAi质粒体外转染人软骨细胞,并用G418筛选3周,再通过RT-PCR检测CTSK、Ⅱ型胶原和Aggrecan cDNA转录的表达,Western-Blot、免疫荧光检测转染后软骨细胞的CTSK、Ⅱ型胶原和Aggrecan在蛋白水平的表达.结果 装入质粒载体转染第1代的软骨细胞,在体外通过细胞形态观察可发现,抑制CTSK基因后3周软骨细胞仍大多数保持多角形,而对照组则向成纤维样细胞形态变化.RT-PCR结果 显示.在mRNA水平抑制了CTSK的表达,而不影响对软骨细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan的mRNA表达.免疫荧光和Western-blot的结果 证实了在早期抑制了软骨细胞CTSK基因表达并维持3周左右,软骨细胞的特异性基质Ⅱ型胶原和Aggrecan在蛋白水平明显增加.结论 早期抑制了软骨细胞CTSK基因的表达,可使软骨细胞去分化过程中其软骨特异性基质Ⅱ型胶原和Aggrecan增加,说明可以维持软骨细胞的表型.
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1540 nm Er:glass激光治疗痤疮临床疗效观察
目的 探讨1540 nm Englass激光对痤疮的疗效及安全性.方法 应用1 540 nm Englass激光对16例中度痤疮患者进行面部治疗.光斑:4 mm;脉宽:3.3 ms;6次/疗程,每次间隔2～3周;活动性皮损:10 J/cm2×6 pulses,其他部位:10 J/cm2×(3-4)pulses.皮肤冷却:5℃,Constans手柄冷却(Quantel Medical).结果 经6次治疗后,平均疗效指数为85.9%.随访半年后降至80%;患者满意率达90%;皮脂分泌平均减少54.2%.16例患者均无不良反应.结论 1 540nmEnglass激光治疗痤疮安全而有效.
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利用永生化人脐静脉内皮细胞构建血管瘤模型的初步研究
目的 初步探讨永生化人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)构建血管瘤疾病模型的可行性.方法 永生化HUVEC与猪骨髓间充质干细胞(BMSC)分别在普通的DMEM培养液(含10%FBS)中贴壁培养至完全融合后,胰酶消化为单细胞悬液;细胞计数后按不同细胞组合分组,与Matrigel混合后分别注射至裸鼠皮下,移植后1周及5周取材,HE染色观察血管生成情况.结果 1周后HE所见:空白组与单纯注射BMSC组均无管样结构形成:单纯注射HUVEC组和注射混合细胞组均有管样结构形成.5周后HE所见:空白组被吸收;单纯注射BMSC组可见大量的脂肪组织:注射单纯HUVEC组以及混合组可见血管样结构存在.结论 HUVEC在裸鼠皮下注射具有形成血管的能力,有望构建增生期血管瘤模型.
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脂肪来源干细胞的特性鉴定
干细胞具有向多种细胞系定向分化的潜能,其中的胚胎干细胞由于伦理和取材等因素使其研究和应用受到限制.目前,用于组织修复和再生的间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)多采用成体多能干细胞.
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脂肪来源干细胞在创伤愈合方面的研究进展
干细胞是一类具有自我更新、增殖和多向分化能力的细胞,自Zuk等[1]发现脂肪组织中存在多向分化能力细胞以来,脂肪组织来源干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)已被证实具有分化成为骨骼、软骨、脂肪、心肌、神经等组织的能力,且对创伤愈合也有明显的促进作用.
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复合基因在骨缺损基因治疗中的研究进展
骨缺损愈合是一个涉及多种细胞因子的增殖,分化和细胞外基质的合成与钙化等复杂的过程,目前认为参与骨折愈合的重要细胞因子有:骨形态发生蛋白(BMP)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF),转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素样生长因子(IGFs)、血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)、骨衍生生长因子(BDGF),其他一些来自血细胞的衍生因子如白细胞溶菌素、肿瘤坏死因子(TNF)、淋巴细胞毒素、干扰素等也参与骨折的愈合.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
