大鼠热休克蛋白47真核表达载体的体外构建

目的:体外构建大鼠热休克蛋白47(47 kDa heat shock protein,HSP47)的荧光真核表达载体,并检测其在鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3中的表达.方法:应用RT-PCR方法从大鼠肝脏中分离、扩增目的片断,双酶切定向克隆到真核表达载体pTracer-CMV中,构成重组质粒pTracer-CMV-HSP47,测序验证.通过脂质体介导质粒瞬时转染NIH/3T3细胞,Western b1otting和免疫细胞化学检测HSP47及Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的表达变化.结果:通过RT-PCR获得1.3kb的cDNA片断,测序发现除个别碱基差异外,其余cDNA序列与基因库(Genebank)中序列一致,且编码的氨基酸序列完全一致.转染后经Western blotting和免疫细胞化学检测证实HSP47和collagen Ⅰ表达明显增强.结论:本研究成功构建了大鼠HSP47荧光真核表达载体pTracer-CMV-HSP47,并能在NIH/3T3细胞中表达,同时证实HSP47能促进collagen Ⅰ的表达.

p75NTR对小鼠面神经损伤轴突再生影响的实验研究

目的:探讨p75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)在面神经损伤再生修复中的作用.方法:p75NTR基因敲除小鼠和野生型小鼠的面神经总干损伤后第4天,在损伤的近中侧注射霍乱毒素B(cholera toxin B,CTB)进行示踪,对再生神经纤维进行免疫组化染色,然后计数进行统计分析.结果:p75NTR基因敲除小鼠再生的神经纤维,明显较野生型小鼠的短,差异有显著性(P＜0.01).结论:p75NTR可以增强面神经的再生.

下颌骨牵引成骨过程中VEGF及其受体的表达

目的:通过建立兔下颌骨牵引成骨实验动物模型,研究下颌骨牵引成骨过程中血管内皮生长因子(vasclar endothelial growth factor,VEGF)及其受体的表达及意义.方法:选用新西兰白兔30只,随机选取6只动物作空白对照组,24只动物右侧下颌骨植入外置式颌骨牵引器.经7 d延迟期后,按1 mm/d速率延长下颌骨7 d,固定期8周.在延迟期第7 d,牵引期第2、4、7 d,固定期第1、3、6、8周分别处死3只动物,采用免疫组化方法,检测VEGF及其受体FLT-1(fms-like tyrosine kinase-1)、FKK-1(fetal liver kinese-1)的表达变化.结果:VEGF及其受体FLT-1、FLK-1的表达贯穿下颌骨牵引成骨全过程.下颌骨牵引成骨过程中不同时相多种组织细胞参与表达vEGF及其受体FLT-1、FLK-1,但在表达的变化上存在一定的差异.结论:vEGF通过与其受体特异性结合,在下颌骨牵引成骨血运重建及新骨生成过程中发挥重要作用.

PLGA/HA支架材料生物相容性的动物实验研究

目的:通过动物实验评价新型多孔聚乳酸乙醇酸/羟基磷灰石(polyaiticglycolic acid/hydroxyapatite,PLGA/HA)支架材料的生物相容性.方法:分别将5%和10%HA掺量的PLGA/HA支架材料注射到昆明小鼠腹腔内、植入到新西兰大白兔体内,选择全身毒性试验、亚急性毒性试验、血液相容性试验、肌肉刺激试验等,对其生物相容性进行评价.结果:全身急慢性毒性试验显示材料种植到小鼠及兔子体内后,动物一般情况良好,2周后体重、红细胞计数、白细胞计数等生理参数未见明显变化:实验显示两种材料对兔混合血浆凝血功能无影响;溶血试验结果显示5%和10%的PLGA/HA的溶血率分别为2.67%和3.62%,均小于5%,完全符合医用材料对溶血试验的要求;肌肉刺激试验结果显示两种材料埋植后局部未见红肿,4周时部分PLGA/HA材料开始降解,降解部分有大量的纤维结缔组织生长;HE染色结果显示PLGA/HA基本不存在抗原性,植入机体4周后,材料周围未见明显炎症细胞浸润.结论:5%和10%HA掺量的PLGA/HA均具有良好的生物相容性和体内安全性.

人乳牙牙髓干细胞的体外培养观察

目的:体外分离、培养人乳牙牙髓干细胞.方法:采用酶消化法将人乳牙牙髓分离培养,以获得人乳牙牙髓干细胞.有限稀释法分离纯化,测定细胞克隆形成率,细胞计数法测生长曲线,细胞爬片行HE染色、碱性磷酸酶染色、抗波形蛋白(vimentin)免疫组化染色.结果:通过有限稀释法获得了克隆形成率为11～24个/103,细胞群体倍增时间为39.84h,HE染色细胞形态为梭形、细胞体小、胞核大的干细胞.且碱性磷酸酶染色阳性,抗波形蛋白(vimentin)免疫组化染色阳性.结论:人乳牙牙髓中可分离培养出牙髓干细胞.

热休克蛋白47在糖尿病大鼠皮肤创口愈合过程中的表达

目的:使用糖尿病大鼠模型探讨热休克蛋白47(47kDa heat shock protein,HSP47)在糖尿病大鼠皮肤创口愈合过程中的表达水平.方法:在距正常大鼠和糖尿病大鼠头部1 cm的背部做一直径1 cm的圆形全层皮肤创口,糖尿病大鼠分为不注射组、注射空质粒组和注射重组质粒组,在创口愈合的第3、5、7天分别取对照组和实验组大鼠的创周皮肤,应用免疫组织化学和Western免疫印记法(Western blotting)检测HSP47在各组大鼠皮肤创口愈合过程中的表达水平.结果:正常大鼠皮肤创周组织中HSP47的表达,在愈合过程中呈明显增高的趋势.同正常大鼠相比,糖尿病大鼠皮肤创口愈合缓慢,皮肤创口组织中HSP47的表达明显减少.注射重组质粒pTracer-CMV-HSP47的糖尿病大鼠皮肤创周组织中HSP47的表达增强.结论:HSP47在糖尿病大鼠皮肤创口组织中的低表达与糖尿病大鼠皮肤创口愈合缓慢密切相关.通过体外构建HSP47的重组质粒再注入糖尿病大鼠皮肤创周组织中的方法,可以增强HSP47在体内的表达.

氯化镧对体外培养的犬骨髓基质细胞增殖的影响

目的:观察3种浓度的氯化镧(LaCl3,La3+)对体外培养的犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的影响.方法:用5.564×102、5.564、5.564×10-2μg/mL 3种浓度的La3+干预第3代BMSCs,设空白对照组和50 ng/mLBMP-2干预的阳性对照组.通过MTr法、碱性磷酸酶半定量检测分析La3+对BMSCs的影响.结果:5.564μg/mL La3+干预组BMSCs在第6、7天表现出较高的生长趋势;碱性磷酸酶半定量检测发现5.564μg/mL La3+干预组0D值均数明显高于另两个实验组均数(P＜0.05).结论:5.564μg/mL浓度的La3+可促进BMSCs增殖.

富含血小板血浆诱导口腔种植体周围骨再生的实验研究

目的:通过犬下颌骨种植周围缺损模型,探讨与评估富含血小板血浆与磷酸三钙联合应用后,对种植体骨结合的效应.方法:采用自身对照,在6只成年杂种犬双侧下颌骨下缘各植入2颗纯钛种植体(共24颗)并在种植体周围造成缺损.右下颌2颗为对照组,在缺损处填入磷酸三钙和生理盐水的混合物,左下颌2颗为实验组,在缺损处填入磷酸三钙和富血小板血浆的混合物;术后4、8、12周分别处死2只犬,先后行大体观察、电镜观测和组织学观察.结果:大体观察实验组比对照组缺损处愈合更平整且种植体更稳定;4、8、12周电镜观测时均示实验组和对照组有显著性差异,实验组种植体骨结合率高;组织学观察在实验组可见大量成骨细胞、骨细胞及新生骨小梁,新生骨组织较成熟,而对照组成骨细胞少、骨小梁细而少、纤维组织多见.结论:富含血小板血浆可能具有促进新骨形成及种植体骨结合的效应.

岩黄连总碱抑制Tca8113细胞及其端粒酶活性的实验研究

目的:研究中草药岩黄连总碱(yanhuanglian total alkalions,YHL-TA)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响及其抗癌机制.方法:采用噻唑蓝比色法(MTT法)检测YHL-TA浓度分别为0.200、0.100、0.050、0.025 g/L和空白对照组Tca-8113细胞增殖的情况,同时用以PCR为基础的TRAP-ELISA法检测Tca8113细胞端粒酶活性的改变.所有数据采用SPSS13.0进行统计学分析.结果:岩黄连总碱能明显抑制Tca8113细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性.72 h时,0.200、0.100、0.050、0.025 g/L岩黄连总碱组细胞增殖抑制率分别为(66.0±4.0)%、(57.5±3.2)%、(45.3±3.3)%、(37.9±5.5)%.72 h时,0.100、0.050 g/L组端粒酶活性低于空白对照组(P＜0.05).结论:岩黄连总碱可以明显抑制Tca8113细胞株的增殖及其端粒酶活性,抑制端粒酶活性可能是岩黄连总碱抗舌癌的机制之一.

RGD-PLGA/HA膜材料的细胞亲和性实验研究

目的:研究将RGD肽结合至聚乳酸基复合材料-聚乙交脂丙交脂与羟基磷灰石的复合物,形成的新型RGDPLGA/HA(RGD peptide modified poly lactic-glycolic acid/hydroxyapatite)膜材料的细胞亲和性.方法:以RGD-PLGA/HA膜和作为对照的未结合RGD肽的PLGA/HA材料为实验对象,取第二代兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)接种到材料上,培养4、12、24 h后,细胞计数仪计数定量检测粘附的细胞数,得到粘附率;培养4、24、96 h后环境扫描电镜比较粘附细胞的形态和质量.结果:实验组材料与BMSCs复合培养4、12 h后,测定细胞粘附率分别为(40.5±1)%、(46.5±0.5)%,均高于同期对照组(P＜0.05);24 h后实验组材料的细胞粘附率(57.3±0.5)%,也较对照组(47.5±0.5)%高(P＜0.01);环境扫描电镜观察BMSCs与实验组材料的细胞形态和质量明显优于对照组.结论:与PLGA/HA相比,新型RGD-PLGA/HA膜材料能提高其对BMSCs的亲和性.

唇腭裂178例临床总结

目的:回顾性分析178例唇腭裂患者临床资料,为唇腭裂的临床诊断和治疗提供理论支持.方法:对178例唇腭裂患者的一般情况、手术途径及疗效、中耳功能、免疫功能的改变等进行比较分析.结果:178例患者术后均顺利恢复.其中,21例腭裂患者术后体液免疫指标有显著提高:并且多数腭裂患者伴发传导性耳聋.结论:肌功能的修复对恢复唇腭裂患者外形及功能效果好.腭裂修复术能改善患者体液免疫.

腮腺部分切除术治疗腮腺浅叶良性肿瘤(附41例临床病例)

目的:探讨保留腮腺导管的腮腺部分切除术的可行性.方法:对41例诊断为腮腺浅叶良性肿瘤,且肿瘤直径小于2.0 cm的病例,作保留腮腺导管的腮腺部分切除术,于肿瘤外5～10 mm处切除肿瘤与周边正常腺体组织.结果:41例患者术后经随访2～3年,未见肿瘤复发及涎瘘,患侧腮腺有分泌功能,面部畸形小.结论:保留腮腺导管的腮腺部分切除术是治疗体积较小(直径＜2.0 cm)的腮腺良性肿瘤的有效术式,有利于保持剩余腺体功能及面部美观.

髁突多发性骨折微型钛板内固定的近期观察

目的:观察髁突多发性骨折后,微型钛板内固定的疗效.方法:8例11侧髁突多发性骨折病例,术中将多发性骨折的髁突1.0 cm以上的骨折片复位,微型钛板固定,基本恢复解剖形态.结果:本组病例术后张口度基本正常,前伸运动、侧向运动无障碍,咬合关系基本正常.结论:微型钛板内固定可有效的治疗髁突多发性骨折.

局部组织瓣整复鼻缺损的临床经验

目的:探索修复鼻翼缺损简单易行、形态效果佳的治疗方法.方法:自1995年以来共收治30例鼻缺损患者,其中额部中央皮瓣3例,以一侧滑车上血管蒂经鼻根皮下隧道穿行到鼻部缺损区;鼻唇沟组织瓣者17例19侧,均设计蒂在上的组织瓣;耳廓全厚三明治式游离瓣10例11侧.结果:额部中央皮瓣3例,鼻唇沟组织瓣17例全部成活;耳廓全厚三明治式游离瓣10例,其中1例首次移植坏死,第2次手术成功.结论:扩张增容后的中央额瓣是全鼻缺损再造的首选治疗方案;整复鼻翼、鼻尖缺损,单侧鼻唇沟皮瓣长度在4～5 cm,宽度在1.2～1.5 cm为佳.耳廓全厚三明治式游离瓣,宽度在1.8 cm以内较安全.

颌面部铁金属异物磁铁吸取15例报告

目的:总结运用电磁吸铁器吸取颌面部铁金属异物的体会.方法:对1998年以来我院采用电磁吸铁器吸取颌面部铁金属异物15例资料进行回顾性分析.结果:15例铁金属异物经X线头颅正侧位片定位后,用吸铁器全部取出,长时间20 min,短时间3 min,创口均Ⅰ期愈合.结论:电磁吸铁器吸取铁金属异物,具有快速、操作简便、损伤小等优点,能取出深度＜4 em的金属异物,是一种值得推广的方法.

骨诱导术在牙种植骨量不足病例的临床应用

目的:探讨应用诱导骨组织再生技术在种植牙时颌骨骨量不足的临床应用研究.方法:选择35例在种植手术时,种植体周围骨量不足的患者,采用可吸收胶原膜(Bio-Gide)和骨粉(Bio-Oss)行诱导骨组织再生,观察其促进颌骨再生和种植体骨整合的临床效果.结果:经6～18个月的临床观察和放射X线片检查,种植体周围骨缺损区骨组织再生情况良好,种植体稳定.结论:采用可吸收胶原膜(Bio-Gide)和骨粉(Bio-Oss)诱导再生技术用于种植牙术骨量不足的患者,可成功诱导骨组织再生、重建缺损的骨组织,促进种植体与新生骨组织形成良好的骨性结合.

介入治疗在下颌骨动静脉畸形的临床应用

目的:总结下颌骨动静脉畸形的诊断与综合治疗经验.方法:回顾性分析本科1998-2004年临床资料完整的下颌骨动静脉畸形5例.患者均经过数字减影血管造影和术前超选择性动脉栓塞治疗,采用的栓塞材料主要为明胶海绵、聚乙烯醇泡沫、附凝血棉纤毛的弹簧圈.1周内手术:2例行下颌骨部分切除术,3例行颌骨病灶搔刮术+自体髂骨松质骨植入术.结果:5例患者经综合治疗后随访1～5年,植骨患者随访X线片显示植骨区有新骨形成.结论:下颌骨动静脉畸形的X线表现不典型,数字减影血管造影具有特异性诊断价值.治疗应采取综合治疗模式.

血管化腓骨瓣修复涉及髁突下颌骨缺损的临床应用

目的:对累及髁突的不同类型下颌骨缺损采用游离腓骨瓣修复的方法、经验进行总结.方法:2001年10月-2004年10月,53例累及下颌升支上部的颌骨良性病损,行下颌骨切除后采用游离腓骨瓣进行下颌骨重建,分别采用了腓骨代替髁突法(30例)、游离髁突法(7例)及保留髁突法(16例)3种方法进行下颌骨缺损修复重建.分析总结临床方法经验,并对患者术后外形和功能进行临床评价.结果:本组血管化游离腓骨瓣移植成活率98.1%(52/53);41例患者术后随访,进行了临床检查及外形、功能评价,经Fisher检验,腓骨替代髁突组、游离髁突组及保留髁突组患者在术后外形和进食、语音功能上无显著差别.结论:3种不同髁突处理方法进行游离腓骨瓣下颌骨缺损重建,在临床上实用可行,可依据患者病损的具体情况选用.

CD105和MMP-2在腺样囊性癌中表达及预后判断的临床意义

目的:探讨微血管密度(microvessel density,MVD)的标记物CD105(endoglin)和金属基质蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)与腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)临床病理参数及预后的相关性.方法:免疫组织化学SP法分别测定ACC 41例、涎腺良性病变27例、正常涎腺组织块23例中CD105和MMP-2表达值,并结合ACC相关临床、病理因素和术后生存状况,分析二者表达的临床意义.结果:正常涎腺组织中无MVD和MMP-2的阳性表达.ACC组MVD和MMP-2的表达明显高于涎腺良性病变组(P=0.027);CD105标记的MVD值与TNM分期和组织学分型相关,MMP-2仅与TNM分期相关;Cox回归显示CD105标记的MVD可作为ACC的独立预后因素,MMP-2未得出同样结论;CD105标记的MVD高/低表达组复发率有明显差异;MVD和MMP-2表达呈正相关.结论:CD105与ACC复发转移密切相关,可望作为ACC有价值的预后指标.MMP-2表达和ACC的局部侵袭相关,但根据本研究还不能认为其是独立预后因素.

儿童上颌前牙区埋伏多生牙的临床分型与治疗

目的:探讨儿童上颌前牙区埋伏多生牙的临床分型及手术处理.方法:根据93例儿童114颗上颌前牙区埋伏牙的临床特点、X线检查结果进行临床分型,并选择合适的埋伏多生牙的处理方法.按照患者的年龄分为3组,＜8岁为A组,8～12岁为B组,12岁以上为C组.比较不同年龄组的临床类型差异以及手术所需时间.结果:不同年龄段的儿童,上颌埋伏多生牙的类型明显不同;不同年龄段的儿童,手术拔除埋伏多生牙所用时间存在明显差异,以A组所需时间为短.结论:年龄是儿童上颌前牙区埋伏多生牙临床分型及手术治疗时机选择的重要参考因素.

口腔内入路行髁突高位骨折复位固定的临床治疗

目的:探讨应用定量截骨锯,行口腔内入路髁突高位骨折手术治疗的效果.方法:对13例14侧下颌骨髁突颈骨折患者采用口腔内入路,用定量截骨锯将下颌骨升支后缘垂直截骨,取出升支后缘骨块,将骨折的髁突游离后取出,体外直视下将骨折片与升支后缘骨块复位固定后再从口腔内原切口回植,行颞下颌关节重建.结果:术后6、12、24月复查全部患者的开口范围25～40 mm,平均为37.2 mm.除1例患侧后牙早接触,下切牙中线偏斜1 mm;另1例张口约25 mm,轻度受限外,其余患者咬合关系良好,无其他并发症.结论:口腔内入路具有无外部皮肤瘢痕,且不损伤面神经的优点.但操作视野较小,增加了操作的难度.

骨髓基质细胞软骨向分化调控的研究进展

骨髓基质细胞(bone marrow stroma cells或bone marrow mesenchvmal stem cells,BMSCs)是指骨髓基质内含有能分化成为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞或肌细胞的前体细胞群.以往,在软骨组织工程中,所用的种子细胞为成体软骨细胞,但其存在体外培养中增殖能力有限,且扩增后细胞容易老化的缺点,从而限制了该细胞的进一步应用.

颈清患者保留及重建肩功能的研究进展

1906年,Crile等人针对头颈部恶性肿瘤易发生颈淋巴结转移的情况提出了根治性颈淋巴清扫术(radical neck dissection,RND),这一术式在后来的很多年里,挽救了许多患者的生命.

上下颌骨位置改变对上气道的影响

正颌外科学是20世纪60年代在西方技术发达国家兴起,20世纪80年代逐步发展成熟起来的新的临床分支学科.它的发展与成熟使先天性、后天获得性的颅颌面畸形患者容貌改变,呼吸、咀嚼、语音等功能的恢复已成为现实,也极大的推动了口腔颌面外科学、整形外科学的发展.

唾液检测对干燥综合征的诊断意义

干燥综合征(Sj(o)gren's syndrome,SS)是一种自身免疫性疾病,主要侵犯外分泌腺(泪腺、唾液腺为主),导致腺体破坏和分泌减少,其诊断除临床表现、腮腺造影外,常通过测自身抗体及唇腺活检来确定[1,2],操作复杂,有一定创伤性,且对SS的早期诊断有一定困难.

Bio-Oss参与天然骨重建机制研究进展及应用现状

牙齿因牙周病、先天畸形、外伤、炎症、肿瘤等原因缺失后,常伴随牙槽骨过度吸收,造成种植区的骨量不足,导致植牙受到极大限制.选择合适的骨代用品材料,重建牙槽骨缺损就成为研究的重点.

非综合征唇腭裂的候选基因位点

唇腭裂的遗传模式主要有2种观点:多因素阈点模式和主要致病基因遗传模式.20世纪90年代以来,国内外一些学者开始从基因定位的角度做了大量的临床和实验研究,希望筛选出可能的唇腭裂易感基因并进行基因定位.

《口腔颌面外科杂志》投稿须知

牙颌面畸形的外科治疗:回顾与展望

1 牙颌面畸形外科矫治的发展与回顾采用骨切开术矫治骨性牙颌面畸形,系由Hullihen 1848年创用,并于1849年首次报告采用下颌前部骨切开术,成功地矫治一例因儿时面颈部烧伤后,瘢痕挛缩,继发下颌骨前部前突伴开(牙合)的病例.

口底蜂窝织炎三例治疗体会

口底多间隙感染又称口底蜂窝织炎,随着医疗卫生事业的发展以及人们健康意识的增强,近年来该病已不多见.我科自2003年7月-2005年11月共收治3例,报告如下.

腮腺脂肪瘤病1例

1 临床资料患者,女性,49岁.无明显诱因右耳垂下无痛性肿物四月余,渐进性缓慢增大.于2005年10月24日收治入院.既往病史:7年前患"子宫肌瘤",行"全子宫及双侧卵巢切除术".查体:右侧耳垂下范围3.0 cm×2.0 cm实性包块,质地中等,边界欠清,活动度较差,无明显触压痛,右腮腺涎液分泌量少,质清.

含牙囊肿与上颌窦相通1例

含牙囊肿发生于牙冠或牙根形成之后,因在缩余釉上皮与牙面之间出现液体渗出而形成.含牙囊肿可来自一个牙胚,也可来自多个牙胚.而上颌骨含牙囊肿伴(8)移位于上颌窦内侧上方,并与上颌窦相通实属罕见,我科收治1例,现报告如下.