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开心散对Aβ25-35诱导损伤SH-N-K神经细胞的保护作用及机制
目的 观察开心散对神经毒性物质β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导损伤的SK-N-SH细胞的保护作用.方法 用Aβ25-35处理人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞),模拟阿尔茨海默病(AD)病人脑内神经元病理损伤,并以含开心散(KXS)药物血清拮抗其作用.以MTT法测定细胞存活率,酶反应法检测细胞内超氧化物歧化酶SOD水平变化,流式细胞技术检测细胞凋亡率.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、Aβ降解酶NEP基因的表达情况,Westernblots法检测APP蛋白表达.结果 试验显示暴露Aβ25-35后培养SK-N-SH细胞存活率明显下降,凋亡细胞比例增加.而含开心散药物血清处理能显著提高Aβ25-35损伤细胞的存活率,减少细胞凋亡率,同时提高细胞内SOD的活力(P＜0.01).RT-PCR结果显示开心散可降低Aβ代谢相关的APP基因的表达并提高NEP基因的表达,APP蛋白表达显著减少.结论 AD病理相关的Aβ25-35能造成神经元细胞损伤死亡,开心散对毒性Aβ25-35诱导的神经细胞损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与开心散能增加抗氧化酶SOD活力,同时下调内源性APP基因表达,上调NEP基因表达,减少内源Aβ产生,从而抑制细胞死亡有关.
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β淀粉样肽31-35和25-35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用
目的 比较β淀粉样肽(AB)25-35和31-35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用及其途径的差异,以进一步证明Aβ31-35是诱发神经细胞毒作用的有效较短片段.方法 将新生Wistar大鼠大脑皮质神经细胞分离、培养48 h后,按照完全随机设计的方法分对照组、Aβ25-35(25 μmol/L)和Aβ31-35(25 μmol/L)处理组,24 h后收集细胞.通过四甲基偶氮唑蓝比色法测定细胞的活性、激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化、单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤情况、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测神经细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax和p53)mRNA的表达.每个实验重复3次.结果 与对照组[吸光度值(A值)为1.038±0.125,荧光强度差值为4.280±0.358]相比,Aβ25_35和Aβ31-35处理组细胞的A值(分别为0.746±0.071和0.811±0.083)和荧光强度差值(分别为3.050±0.240和2.806±0.203)均显著降低(t_A值分别为4.023、5.401,t_(荧光强度差值)分别为9.524,7.589,P值均<0.01);Aβ25-35和Aβ31-35处理组彗星细胞的拖尾率分别为59.0%及48.5%,尾长分别为(57.3±4.7)μm及(54.2±6.8)μm,与对照组[拖尾率为4.5%,尾长为(5.2±1.1)μm]相比均显著增加,差异有统计学意义(χ_(拖尾率)~2值分别为99.397和137.071,t_(尾长)值分别为19.058和29.173,P值均<0.01);Aβ25-35和Aβ31-35处理组Bax/Bcl-2分别为1.2774±0.0762和1.0330±0.0683,显著高于对照组(0.2090±0.0991)(t值分别为2.429和2.356,P值均<0.05);p53/β-actin分别为2.0284±0.2223和1.9505±0.2725,高于对照组(1.6560±0.0853)(t值分别为2.366和2.503,P值均<0.05).结论 Aβ31-35同Aβ25-35一样均可引起新生大鼠大脑皮质神经细胞的损伤,其作用机制可能与AB的直接细胞毒性及其介导的细胞凋亡作用有关.
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染料木黄酮和叶酸对β淀粉样肽31-35诱导的细胞及线粒体膜损伤的拮抗作用
目的 探讨染料木黄酮(Gen)和叶酸(FA)对β淀粉样肽31-35(Aβ31-35)诱导的神经细胞膜及线粒体膜损伤的拮抗作用.方法 按照简单随机抽样的方法,将原代培养的大鼠大脑皮质神经细胞分为5组,即对照组、Aβ31-35(25μmol/L)、Gen(27μg/ml)、FA(40μg/ml)及Gen和FA(Gen 27μg/ml+FA 40μg/ml)联合干预组.各干预组预先在培养液中加入Gen和(或)FA,2 h后加入Aβ31-35,继续培养24 h后收集细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞的活性、荧光偏振法检测细胞膜流动性、激光扫描共聚焦显微镜(LCM)检测线粒体膜电位和流式细胞术(FCM)检测线粒体膜通透性转运作用.每个实验至少重复3次.结果 Gen组、FA组和Gen+FA组的A570值分别为0.982±0.110、0.947±0.061和0.996±0.090,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(t值分别为3.523、2.745和3.966,P值均＜0.01).细胞膜的黏度值与Aβ31-35组相比,Gen组(1.75±0.28,t=2.085,P＜0.05)和FA(1.66±0.37,t=2.357,P＜0.05)单独或联合(1.50±0.20,t=3.784,P＜0.05)干预后,细胞膜的黏度值显著降低,差异有统计学意义,表示细胞膜流动性升高.线粒体膜电位结果显示,Gen、FA与Gen+FA联合干预后,线粒体膜电位(荧光强度差值依次为5.286±1.792,5.884±2.022,6.120±2.124)比Aβ31-35组(3.364±1.140,F=7.585,P＜0.01;t值分别为:2.406、2.887、3.040,P值均＜0.01)显著增高.流式实验结果显示,经Aβ处理神经细胞的线粒体通透性转运孔(MPTP)开放,而此现象可经Gen和FA的干预有效逆转.结论 Gen和(或)FA对Aβ31-35引起的神经细胞膜及线粒体膜损伤具有拮抗作用.
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加味五子衍宗方有效部位对β-淀粉样肽致大鼠行为学改变的影响
目的:观察加味五子衍宗颗粒及其有效组分对β-淀粉样肽所致老年性痴呆(AD)模型鼠空间学习记忆能力的影响.方法:采用大鼠侧脑室立体定向注射Aβ25-35的方法建立AD动物模型,服用加味五子衍宗颗粒及其总黄酮、总多糖15 d后以全自动Morris水迷宫实验检测大鼠定位航行试验及空间探索试验,来评价大鼠空间学习记忆功能.结果:加味五子衍宗颗粒及其有效组分总黄酮、总多糖均能明显缩短模型大鼠在Morris水迷宫定位航行试验中的逃避潜伏期和搜索距离(P<0.05),显著增加空间探索试验中原平台所在象限搜索时间和距离占总时间和总距离的百分比(P<0.05,P<0.01).结论:加味五子衍宗颗粒及其总黄酮、总多糖能改善由β-淀粉样肽所致AD模型鼠的空间学习记忆能力.
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二苯乙烯苷对Aβ25-35致神经干细胞损伤的保护作用
目的:观察不同浓度二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽(Aβ25-35,25μmol· L-1)致损伤的神经干细胞(NSCs)生长、增殖及自我更新能力的影响,探讨TSG对Aβ25-35致NSCs损伤的保护作用.方法:从孕14 d昆明小鼠体外提取神经干细胞,以25 μmol·L-1浓度Aβ25-35诱导NSCs建立稳定的AD细胞模型,与不同浓度二苯乙烯苷共同孵育,分为对照组、模型组(Aβ25-3525 μmol· L-1)、TSG 1×10-8mol· L-1+ Aβ25-35组、TSG 1×10-7 mol·L-1+ Aβ25-35组、TSG 1×10-6mol·L-1+ Aβ25-35组,共5组,分别采用EDU化学荧光染色法检测NSCs增殖情况；采用WST-1细胞增殖及细胞毒性检测法检测不同时段NSCs的细胞活性；体外培养7d后通过神经干细胞球计数法观察NSCs的自我更新能力.结果:与模型组相比,二苯乙烯苷各剂量组均能在一定程度上抑制Aβ25-35对NSCs的损伤,细胞生长状态良好,细胞增殖率、细胞活性及神经干细胞球计数与模型组相比均有显著性差异(P＜0.01).结论:二苯乙烯苷对Aβ25-35诱导的神经干细胞损伤具有一定保护作用.
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阿尔茨海默症痰湿蕴结与β-淀粉样肽聚集及自噬相关性探讨
中医学认为痰湿蕴结是阿尔茨海默症(AD)发生发展的重要因素,而西医学则认为β-淀粉样肽(Aβ)聚集是其重要发病机制.Aβ与中医的湿、痰具有相似的特征:①两者都来源于机体正常代谢,并在一定条件下致病,②都具有易于聚集的性质,③都既是致病因素又是病理产物,提示痰湿蕴结与Aβ聚集有很强的相关性.自噬参与了AD的Aβ清除,而已有研究表明利湿化痰方药可通过调节自噬功能而发挥神经保护作用,提示中医对AD利湿化痰的治法可能与调节自噬功能密切相关.从自噬角度对湿、痰、利湿化痰等中医概念进一步深入研究,有望阐明AD利湿化痰治法的生物学机制,阐释中医理论湿、痰的现代科学意义,并为治疗AD的中药新药研发提供新的思路.
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灯盏细辛组分对脑神经细胞损伤保护作用的谱效关系研究
目的:研究灯盏细辛中各组分对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞的保护作用,探讨其在阿尔茨海默病(AD)治疗中的作用物质基础.方法:用柱色谱技术将灯盏细辛提取物划分为3个极性组分,并采用正交法将其配伍,以细胞MTT还原率、脂质过氧化产物(丙二醛,MDA)、神经型尼古丁受体α_7,蛋白表达等为活性指标,研究灯盏细辛各配伍组分对β-淀粉样肽(Aβ)损伤神经细胞的保护作用;将各配伍组分活性信息与其相应的UPLC指纹图谱化学信息进行方差分析和相关性分析研究,推测活性物质基础.结果:谱效相关性研究发现,灯盏细辛在指纹图谱中的B,C组分段具有明显活性;其中4,7～12号色谱峰与活性呈现正相关.结论:通过谱效研究,推测了灯盏细辛体外对抗Aβ神经细胞毒性的活性组分以及化学成分.为灯盏细辛深层次研究开发奠定一定的实验基础.
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复方丹参片对阿尔茨海默病转基因细胞模型Aβ表达的影响
目的 研究复方丹参片对阿尔茨海默病(AD)转基因细胞模型β-淀粉样肽(Aβ)表达的影响.方法 用前期试验已构建成功的转基因细胞模型做为AD转基因细胞模型,0.5、1、2、4倍复方丹参片饲养大鼠,取0.5、1、2、4倍浓度大鼠血清培养AD转基因细胞,并在24、48、72 h用Western blot方法检测转基因细胞Aβ的表达情况.结果 24 h,1倍剂量组量效关系佳.结论 复方丹参片能减少AD转基因细胞模型Aβ的表达.
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补肾方药对去卵巢大鼠端脑、海马晚期糖化终末产物及β-淀粉样肽含量的影响
目的探讨补肾方药对去卵巢大鼠端脑、海马晚期糖化终末产物(AGEPs)及β-淀粉样肽(AβP)含量的影响.方法将30只9月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组和补肾方药组.于卵巢切除4周后灌胃给药,连续治疗16周,分别用竞争性ELISA法、放免法检测端脑、海马AGEPs及AβP的含量;荧光法检测血清、尿可溶性AGE-肽的含量;并观察大鼠行为学及海马形态学变化.结果与假手术组比较,去卵巢组逃避正确率明显降低(P＜0.01),端脑AβP、血清可溶性AGE-肽的含量明显升高(P＜0.05);端脑、海马AGEPs含量有升高的趋势,但无统计学意义;嗜银染色可见神经纤维增粗,大脑皮质颞叶出现老年斑.补肾方药组端脑AGEPs、AβP含量及海马AβP含量明显减少(P＜0.05),尿中可溶性AGE-肽明显增加(P＜0.05),学习记忆以及神经元变性得到明显改善.结论补肾方药能降低端脑AGEPs的积累及端脑、海马组织的AβP含量,改善由雌激素缺乏所致的学习记忆下降,其机理可能是通过肾脏对AGE-肽排泄增加实现的.
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何首乌有效成分二苯乙烯苷对Aβ25-31诱导神经干细胞定向分化的影响
目的 探讨何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽(Aβ25-31)诱导神经干细胞(NSCs)定向分化的影响.方法 从孕14d昆明小鼠体外提取并培养NSCs,分别建立起两组分化系统可溶性Aβ25-31体外诱导NSCs损伤的阿尔茨海默病(AD)细胞模型:神经元细胞分化模型M1(Aβ25-312 5 μmol/L)、星形胶质细胞分化模型M2(Aβ25-3.5μmol/L).TSG低、中、高剂量组(TSG浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)分别干预模型M1和模型M2,采用WST-1细胞增殖及细胞毒性试剂盒检测各组NSCs细胞活性,采用免疫荧光法及蛋白印迹法观察各组GFAP、Tubulin阳性细胞率及其蛋白表达情况.结果 模型M1组和模型M2组细胞活性A值较相应的对照组明显降低(P＜0.05);TSG中、高剂量组A值明显高于相应的模型组(P＜0.05).与相应的对照组比较,模型M1组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显降低,模型M2组GFAP阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显升高(P＜0.05);与相应的模型组比较,TSG高剂量组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值均显著升高,GFAP阳性细胞率显著降低(P＜0.05).结论 高剂量的TSG具有促进Aβ25-31诱导的NSCs向神经元方向分化的趋势,抑制向星形胶质细胞的分化.
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高表达人淀粉样前体蛋白降低SH-SY5Y细胞M胆碱受体结合
目的 观察阿尔茨海默病致病相关基因淀粉样前体蛋白(APP)基因的高表达致高度生成,对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及M和N胆碱受体功能的影响,探讨β-淀粉样肽(Aβ)生成增加对细胞胆碱功能的作用.方法 采用Lipofectamine 2000试剂盒将携带野生型人APP基因的pCMV695质粒转染至人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中.以ELISA方法测定Aβ生成量.取稳定高表达Aβ细胞的克隆,用放射免疫法测定ChAT的活性;放射配基结合测定M、N乙酰胆碱受体结合.结果 与未转染APP的SH-SY5Y细胞相比,当Aβ生成量为对照的2～2.6倍时,SH-SY5Y-APP细胞中未观察到明确的细胞毒性形态学改变;ChAT活性无明显变化,但细胞M受体结合降低18.5%～21.8%(P＜0.05);N受体结合未出现明显变化.结论 单纯Aβ产生增加就可通过影响M受体结合功能而引起脑内胆碱能功能障碍.
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慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽的影响
目的 研究慢性脑血流低灌注对大鼠脑内β-淀粉样肽(Aβ)及淀粉样前体蛋白(APP)表达和分布的影响. 方法双侧颈总动脉结扎大鼠制作慢性脑血流低灌注动物模型,应用免疫组织化学方法检测皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40、Aβ1-42的表达与分布;刚果红染色检测血管的淀粉样变;放射免疫分析法检测手术后10d、30d、90d和180d大鼠脑皮质及海马的Aβ含量;免疫印迹法检测大脑皮质和海马的APP含量. 结果 免疫组织化学染色显示低灌注90d模型组海马CA1区APP、Aβ1-40的表达较对照组明显增加(两者均P<0.05),低灌注180d模型组皮质和海马CA1区APP、Aβ1-40和Aβ1-42的表达均增加(除皮质Aβ1-40P<0.01外,其余均P<0.05);Aβ1-40阳性反应产物均匀分布于胞质内,Aβ1-42阳性反应产物在神经元胞质内呈颗粒状聚集.刚果红染色显示,术后180d脑实质内小血管发生淀粉样改变.放射免疫分析法和免疫印迹法结果显示,大鼠术后90d海马Aβ和APP含量开始增高(两者均P<0.05),180d皮质Aβ和APP的含量增高(Aβ P<0.05,APP P<0.01). 结论 慢性脑血流低灌注可引发大鼠脑内Aβ含量的升高,可能在阿尔茨海默病(AD)早期发病过程中有重要意义.
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阿尔茨海默病大鼠海马 N-甲基天冬氨酸受体和丝裂酶原激活蛋白激酶的表达
目的探讨N-甲基天冬氨酸受体(NMDAR)及丝裂酶原激活蛋白激酶(MAPK)在阿尔茨海默病(AD)发病中的变化及其可能机制.方法将β-淀粉样肽(Aβ1～40)1μl(10 g/L)在立体定位仪下注入大鼠海马建立大鼠AD模型.2周后测水迷宫潜伏期、长时程增强(LTP)、原位杂交方法检测大鼠海马NMDAR-mRNA的表达及免疫组织化学SABC法检测MAPK的蛋白表达,并应用显微图像分析系统对两者的表达进行分析.结果AD模型组Aβ注射2周后,水迷宫潜伏期与模型组术前及对照组相比显著延长(P＜0.05);模型组刺激前后fEPSP斜率变化及高频刺激增加的幅值与对照组相比显著下降(P＜0.01);模型组海马CA1区、CA3区NMDAR-mRNA及MAPK蛋白的表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).相关性分析表明,AD模型2周后LTP检测的结果与NMDAR-mRNA的表达及MAPK的蛋白表达呈正相关.结论Aβ通过抑制MAPK信号通路和降低NMDA受体磷酸化状态,导致大鼠海马LTP降低和学习记忆功能减低,参与AD学习记忆障碍和痴呆形成.
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晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白在慢性脑血流低灌注大鼠皮层和海马的改变
目的 研究慢性脑血流低灌注对脑内受体介导的β-淀粉样肽(Aβ)转运蛋白晚期糖基化终产物受体(RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1))含量及分布的影响. 方法采用双侧颈总动脉永久性结扎大鼠模型,应用免疫组织化学和免疫印迹方法对脑内RAGE和LRP-1进行定位和定量检测. 结果 免疫组织化学结果显示,与对照组相比,RAGE在皮层及海马组织中血管内皮细胞上的表达从低灌注10d起增多,而神经元上表达从低灌注30d起减少,且这种变化一直持续到低灌注180d;LRP-1的分布变化则与之相反.免疫印迹结果显示,皮层和海马中RAGE含量在低灌注术后10d即开始明显增加,且在缺血的不同时间点与相应的对照组比较都明显增多(P<0.05);LRP-1变化较晚,在缺血180d时明显增多(P<0.05). 结论 慢性脑血流低灌注可使RAGE、LRP-1在脑组织中的表达增高,同时在神经元、血管中的分布发生改变,这种变化可导致Aβ在脑内的聚集,可能在阿尔茨海默病(AD)早期发病过程中起重要作用.
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乙酰葛根素对阿尔茨海默病大鼠蛋白激酶C-δ及白细胞介素-6表达的影响
目的 研究乙酰葛根素对β-淀粉样肽1-42(Aβ1-42)海马立体定位注射所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的药物作用和对炎症因子蛋白激酶C-δ(PKC-δ)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响.方法 将40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、乙酰葛根素低、高剂量组.用Aβ1-42双侧海马注射制备AD大鼠模型,Morris水迷宫测定不同时期各组大鼠的学习记忆能力,ELISA测定血清IL-6含量的变化,Western blotting测定PKC-δ表达的变化.结果 模型大鼠应用Aβ1-42注射14d后,Morris水迷宫逃避潜伏期与术前及对照组比较显著延长,穿越平台次数显著减少(P＜0.01)；应用乙酰葛根素10d后,血清中IL-6的表达量模型组显著高于对照组、乙酰葛根素低、高剂量组(P＜0.01)；海马匀浆中PKC-δ的表达量模型组显著高于对照组、乙酰葛根素低、高剂量组,乙酰葛根素低、高剂量组表达仍高于对照组(P＜0.05).结论 乙酰葛根素能显著改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,对阿尔茨海默病有显著的预防和保护作用,机制可能与调控PKC-δ/Caspase通路,抑制β-淀粉样肽的神经毒性,降低PKC-δ、IL-6的表达,从而发挥抗痴呆的作用.
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淫羊藿黄酮对APP695基因转染神经细胞β-淀粉样肽及β-分泌酶的影响
目的 观察淫羊藿黄酮(EF)对APP695基因转染SH-SY5Y细胞中β-淀粉样肽(Aβ)水平的影响.方法 利用免疫沉淀+Western印迹法、放射免疫法分别检测细胞培养上清液和细胞裂解液中的Aβ水平.通过测定β-分泌酶(BACE1)切割荧光底物所得的荧光值检测BACE1活性.结果 EF 2.5～25 g/ml与APP695基因转染SH-SY5Y细胞模型共孵育24 h能明显降低模型细胞培养液中的Aβ含量( P<0.05, P<0.01).体外试验中EF 50 g/ml对BACE1活性的抑制率为95.0%.结论 EF能降低APP695基因转染细胞生成和分泌Aβ.
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β-淀粉样肽对小鼠海马神经发生的影响及中药的干预作用
目的观察Aβ25-35对痴呆小鼠模型海马神经发生的影响及中药"脑复聪"的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠.用Morris 水迷宫测空间学习记忆功能;同位素配基测受体结合活性; BrdU标记的免疫组化检测神经发生.结果模型小鼠的学习记忆功能降低(P＜0.05);海马NMDA受体结合活性显著升高而胆碱能M受体结合活性显著降低(P＜0.001);海马齿状回BrdU阳性细胞减少(P＜0.05).经"脑复聪"治疗后上述变化均得到改善(P＜0.05,P＜0.001,P＜0.05).结论 Aβ25-35的神经毒机理包括对神经发生的抑制作用;提高神经发生率可能是中药治疗神经退行性疾病的重要机理之一.
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二苯乙烯苷对痴呆小鼠学习记忆及自由基代谢的影响
目的观察二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽致痴呆(AD)模型小鼠学习记忆及自由基代谢的影响.方法向小鼠右侧脑室定向注射Aβ1-40建立痴呆模型,并以TSG灌胃预防给药,各组小鼠均作Morris水迷宫及避暗测试后进行丙二醛(MDA)含量、单胺氧化酶(MAO-B)活性、总抗氧化能力(T-AOC)的测定.结果与对照组相比,模型组小鼠学习记忆能力降低(P<0.05),大脑皮层MDA含量和MAO-B活性显著升高(P<0.01);TSG能明显提高模型小鼠学习记忆能力(P<0.01),明显降低皮层MDA含量(P<0.01)和降低MAO-B活性(P<0.05),并提高皮层总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.01).结论TSG能明显提高学习记忆能力,减轻大脑脂质过氧化水平,对AD的防治具有良好的应用前景.
关键词： 二苯乙烯苷(TSG) β-淀粉样肽 痴呆 学习记忆 阿尔茨海默病 -
β-淀粉样肽损伤后小鼠脑单胺氧化酶B、白细胞介素-6的变化及中药的干预作用
目的观察β-淀粉样肽(Aβ)25-35致痴呆小鼠模型脑单胺氧化酶B(MAO-B)、白细胞介素-6(IL-6)的改变及中药脑复聪的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠,用Morris水迷宫测空间学习记忆功能;用比色法测MAO-B活性;免疫组化检测IL-6.结果模型小鼠的Morris水迷宫潜伏期(81.3±13.4)s,比对照组(34.2±10.9)s延长(P<0.05);大脑皮层和海马的MAO-B活性(120.12±10.15)、(83.60±5.29)均较对照组(93.09±10.54)、(50.39±9.16)升高(P<0.05～0.01),海马齿状回有大量IL-6免疫荧光阳性细胞.经脑复聪治疗后,水迷宫潜伏期(43.7±12.7)s缩短(P<0.05);海马的MAO-B活性(47.11±6.57)回降(P<0.01);IL-6免疫阳性神经细胞减少.结论抑制海马MAO-B的过度激活,减少自由基的产生,减少氧化应激反应,抑制小胶质细胞产生炎性因子IL-6,缓解Aβ的损伤作用,阻断AD发病的重要环节,是中药脑复聪治疗AD的重要机理之一.
关键词： β-淀粉样肽 痴呆 单胺氧化酶B(MAO-B) 白细胞介素-6(IL-6) 脑复聪 小鼠 -
参乌胶囊对APP转基因小鼠学习记忆能力及脑β-淀粉样肽含量的影响
目的观察中药参乌胶囊对APP转基因小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制.方法将APP 695V717I转基因小鼠随机分为模型组、参乌小剂量(0.4g/kgg/kg·d)组和大剂量(1.2·d)组,同月龄同背景C57BL/6J小鼠为对照组.各组老鼠从4月龄至10月龄灌胃给药或水,然后应用Morris水迷宫和物体识别实验检测小鼠的学习记忆能力;用放射免疫法检测小鼠脑皮层匀浆中β-淀粉样肽(Aβ)的含量;用刚果红染色检测皮层淀粉样斑块的数目.结果模型小鼠在Morris水迷宫实验中的游泳时间和游泳距离较对照组明显延长(P<0.01),对新物体的探索相对时间缩短,皮层可溶性Aβ含量升高(P<0.05),脑内淀粉样斑块明显增多(P<0.01).与模型组比较,参乌胶囊大剂量组游泳时间缩短(P<0.05),对新物体的探索相对时间延长(P<0.05);大、小剂量组小鼠脑内可溶性Aβ含量和脑内淀粉样斑块均明显减少(P<0.01).结论参乌胶囊可明显改善APP转基因小鼠学习记忆能力,其作用机制是通过抑制脑内Aβ的产生而实现的.
