首页 > 文献资料
-
蛋白酶体抑制剂硼替佐米联合顺铂对宫颈癌细胞增殖的影响
目的 观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米(BTZ)联合顺铂(CIS)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响并研究其相关机制.方法 将Hela细胞分为NC组、CIS组、BTZ组、C&B组,分别以DMEM培养液、含CIS的培养液、含BTZ的培养液、含CIS及BTZ的培养液培养.以CCK-8法检测各组细胞的增殖抑制率,Western blotting法检测各组细胞中p53与Rb蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率.组间比较采用析因设计资料的方差分析.结果C&B组细胞增殖抑制率高于其他各组(P<0.05).CIS组及C&B组中p53表达量较高(P<0.05),BTZ组与NC组相比差异无统计学意义.与NC组相比,BTZ组Rb表达量较高(P<0.05),CIS组、C&B组与NC组相比,差异无统计学意义.流式结果示CIS和BTZ在诱导细胞凋亡方面具有交互作用.结论 CIS可能通过调控p53通路对宫颈癌HeLa细胞增殖产生抑制作用,而BTZ可能通过调控Rb通路对宫颈癌HeLa细胞增殖产生抑制作用,且BTZ与CIS联用在抑制HeLa细胞增殖方面具有协同交互作用.
-
硼替佐米、地塞米松、沙利度胺联合治疗多发性骨髓瘤合并肾功能衰竭2例分析
2008年1～8月,我们应用蛋白酶体抑制剂硼替佐米联合地塞米松、沙利度胺(BTD)方案治疗多发性骨髓瘤肾功能衰竭2例.现报告如下.
-
Lactacystin对大鼠行为学及黑质区TH、COX-2表达的影响
目的 观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin对大鼠行为学及黑质区酪氨酸羟化酶(TH)和环氧化酶2(COX-2)表达的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为两组各15只,水合氯醛腹腔注射麻醉后,采用立体定向技术在观察组和对照组大鼠一侧黑质区分别注射蛋白酶体抑制剂Lactacystin10μg、等体积生理盐水,观察大鼠自主行为和阿扑吗啡诱导的旋转行为,应用免疫组化染色检测黑质区TH、COX-2.结果 对照组大鼠未见行为异常；观察组大鼠出现进行性的运动迟缓、少动、震颤,注射阿朴吗啡后出现向健侧旋转运动.术后6周观察组黑质区TH蛋白表达较对照组明显减少(P＜0.05),COX-2蛋白表达较对照组明显增强(P＜0.05).结论 Lactacystin能引起大鼠发生帕金森病样行为学改变,与其降低大鼠黑质区TH表达、诱导炎性介质COX-2表达有关.
-
蛋白酶体抑制剂制备帕金森病模型的研究进展
帕金森病(PD)是一种中老年人常见的神经系统变性疾病,以黑质多巴胺(DA)能神经元的变性缺失和残存的神经元胞质内Lewy小体形成为病理特征.由于发病率的增加及其不可根治性等特点,PD已成为神经领域的研究热点,而制备稳定的疾病模型成为研究的主要手段.近年来蛋白酶体抑制剂成为制备PD模型的新型药物,下面就该药物在PD模型中的研究进展作一综述.
-
复发难治性MM的治疗
随人口老龄化及免疫固定电泳等检查手段的逐渐普及,越来越多的MM患者得以早期诊断、早期治疗,进而生存期延长、并发症减少、预后改善.随包括蛋白酶体抑制剂在内的化疗及造血干细胞移植逐渐成为不同年龄段的一线治疗方案,越来越多的MM患者缓解率提高、生存期延长,但目前仍不能治愈,几乎所有患者终发展成为复发难治性MM,即经多次常规化疗或大剂量化疗仍未缓解,或化疗甚至造血干细胞移植缓解后又复发.故缓解后复发成为目前MM治疗的难点.
-
多发性骨髓瘤患者血清维生素D3水平变化及其临床意义
目的 探讨血清维生素D3水平在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的变化及其临床意义.方法 选择76例初治MM患者(MM组)及同期体检科的18例健康志愿者(对照组)作为研究对象,检测血清维生素D3水平,并结合患者的β2微球蛋白(β2-MG)、血浆白蛋白、肌酐、乳酸脱氢酶等疾病活动相关指标进行分析.结果 MM组患者血清维生素D3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);Ⅲ期β2-MG患者血清维生素D3水平明显低于Ⅰ、Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P均＜0.05),而Ⅰ、Ⅱ期患者血清维生素D3水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);血清维生素D3水平与β2-MG患者β2-MG、肌酐、浆细胞比例、血红蛋白、血清白蛋白有关(P均＜0.05).结论 MM患者血清维生素D3水平明显降低,血清维生素D3可以反映MM患者疾病的严重程度,对MM患者辅助诊断及预后分析有一定的价值.
-
视网膜色素上皮细胞中蛋白酶体活性的下降促进IL-6表达的研究
目的 探讨当视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的蛋白酶体活性下降时促进白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的机制.方法 将人RPE细胞系分成两组培养,第一组只加DMEM,第二组加入DMEM(内合成分同上)和10 μmol·L-1的蛋白酶体抑制剂MG132,首先收集1h、4h、8h等时间点的RPE细胞,测IL-6 mRNA含量.再分别在2h、4h、6h、8h、10 h、12 h等时间点,收集上清液,测IL-6和单核细胞趋化蛋白-1(mono-cyte chemo-attractant protein-1,MCP-1)的含量.然后测定MG132是否可以激活调控IL-6分泌的两条主要细胞信号通路——P38-丝裂原激活的蛋白激酶(P38 mitogen-acti-vated protein kinase,P38 MAPK)途径和c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)途径.再在细胞培养液中加入这些细胞信号通路的抑制剂,测上清中IL-6的含量,观察哪个信号通路的抑制剂可以抵消MG132促进IL-6分泌的作用.结果 MG132增加了RPE细胞IL-6的mRNA水平和蛋白质水平的表达,却降低了MCP-1的分泌.MG132可以激活调控IL-6分泌的两条主要细胞信号通路——P38 MAPK和JNK.P38 MAPK的抑制剂SB203580加入RPE培养液后不仅可以降低RPE细胞产生IL-6的基础分泌,而且可以抵消MG132促进IL-6分泌的作用;而当加入JNK的抑制剂SP600125后,虽然也可以降低IL-6的基础分泌,但却不能抵消MG132促进IL-6分泌的作用.结论 在RPE中,蛋白酶体活性的下降可以激活P38 MAPK细胞信号通路,从而促进IL-6的产生.
-
MG132对人晶状体上皮细胞增生、移行和上皮-间充质转化的抑制作用
背景 晶状体后囊膜混浊(PCO)发生的主要病理机制是白内障术后后囊膜残留的晶状体上皮细胞(LECs)的增生、移行和分化,研究发现蛋白酶体抑制剂MG132可抑制牛LECs的增生,但对人LECs的生物学影响尚不明确. 目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132对体外培养的人LECs增生、移行和上皮-间充质转化(EMT)的抑制作用.方法 收集白内障超声乳化摘出术中连续环形撕囊的囊膜片用组织块培养法进行原代培养并传代,取第2代或第3代LECs进行常规消化,调整细胞密度至5×105个/ml,以200 μl/孔接种至96孔板常规培养24 h,分别加入成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、MG132或MG132+FGF-2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,培养24 h后用MTT法测定吸光度(A490)值,计算LECs的增生率.在移行能力测定中,应用传代的人LECs分别加入FGF-2、MG132或MG132+FGF-2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,用无菌棉棒在细胞层中划出细胞裸露区,继续培养24 h,计数移行至裸露区的细胞,评估细胞移行率.在传代的人LECs培养液中分别加入转化生长因子-β2(TGF-β2)、MG132或MG132+TGF-β2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,培养24 h后用免疫组织化学法检测细胞质中纤维连接蛋白(FN)的表达. 结果 对照组、FGF-2组、MG132组和MG132+FGF-2组的LECs增生值(A490)分别为0.582±0.020、0.723 ±0.010、0.434±0.011和0.465±0.008,总体差异有统计学意义(F=110.482,P＜0.01),FGF-2组LECs增生值明显高于对照组,MG132组和MG132+FGF-2组的LECs增生值明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组、FGF-2组、MG132组和MG132+FGF-2组LECs移行数目分别为8.67±1.08、11.58±1.59、2.67±0.09和2.75±0.09,差异有统计学意义(F=34.301,P＜0.01),其中FGF-2组LECs的移行数明显多于对照组,而MG132组和MG132+FGF-2组LECs移行数明显少于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,MG132组LECs的增生率和移行率分别降低25.4％和75.0％,FGF-2组LECs增生率和移行率分别增加24.2％和33.6％,MG132+FGF-2组LECs的增生率和移行率分别下降20.1％和68.3％.对照组、TGF-β2组、MG132组和MG132+TGF-β2组LECs中FN表达量(A值)分别为1.242±0.023、2.329±0.113、1.043±0.021和1.163±0.018,差异有统计学意义(F=113.752,P＜0.01),TGF-β2组LECs中FN表达量明显高于对照组,而MG132组和MG132+TGF-β2组明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).TGF-β2可以诱导人LECs转分化,FN表达增强;MG132与TGF-β2同时存在时可以减弱人LECs转分化,FN表达下降. 结论 MG132抑制体外培养的人LECs的增生与移行,并可阻止TGF-β2诱导的人LECs的EMT.
-
蛋白酶体抑制剂MG132诱导牛晶状体上皮细胞凋亡的观察
目的 观察蛋白酶体抑制剂MG132对晶状体上皮细胞(LECs)凋亡的诱导作用.方法 用不同浓度的MG132分别处理牛LECs 12、24、36h,通过MTT法检测细胞活力,流式细胞术(FCM)检测MG132对牛LECs凋亡的影响.结果 在作用时间相同的条件下,随着MG132浓度的增高(0、2、5、10μmol/L),对牛LECs增生的抑制作用逐渐增强(P＜0.01).当作用时间达36h时,半效抑制浓度IC50为2.03μmol/L.同时,MG132能够明显诱导牛LECs凋亡:FCM分析结果表明,浓度为2μmol/L的MG132作用12h,细胞早期凋亡率为20.24%±1.51%,对照组为0.98%±0.20%(P＜0.01,n=3).结论 蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导牛LECs凋亡,蛋白酶体活性的丧失可能在白内障的形成中起重要作用.
-
蛋白酶体抑制剂MG132诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展
MG132(Z-Leu-Leu-Leu-CHO)是一种蛋白酶体抑制剂,能进入细胞中可逆性地抑制蛋白酶体的活性,从而抑制泛素一蛋白酶体通路所介导蛋白质的降解,进而影响细胞周期进程和诱导细胞凋亡.目前,许多文献报道MG132能够诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,是一种潜在的抗肿瘤药物.
-
硼替佐米和3-甲基腺嘌呤对人乳腺癌细胞株MCF-7的抑瘤效应
蛋白质的降解对维持细胞正常功能至关重要,泛素-蛋白酶体和溶酶体自噬是细胞内蛋白质降解的两条主要通路[1,2].近年来,抑制肿瘤细胞蛋白酶体活性已成为一种新的化学治疗方法,一些化合物已被证实可以通过抑制蛋白酶体活性而诱导肿瘤细胞死亡[3,4].肿瘤自噬存在双重效应,一方面由于肿瘤组织的微环境乏氧且缺乏营养而有利于诱导肿瘤细胞自噬[5],另一方面,肿瘤细胞中又常常出现促自噬基因的失活性突变及抗自噬基因的活化[5,6],而不利于肿瘤细胞自噬.本研究观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)对乳腺癌MCF-7细胞增殖和自噬的影响和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)抑制Bortezomib诱导自噬、增强Bortezomib抑制MCF-7细胞增殖的作用.
-
多发性骨髓瘤药物治疗进展
Multiple myeloma (MM) is the second most common malignancy in blood system,with the indepth study of the etiology and pathogenesis of MM,targeted therapy for myeloma cell signaling pathway and bone marrow microenvironment is developing rapidly.The advent of many new drugs provides a new hope for the treatment of MM.In spite of this,MM is still not curable and there is a potential for recurrence.
-
泛素蛋白酶体与心肌细胞凋亡研究进展
细胞凋亡可导致细胞缺失,进而促使心血管疾病的发生.泛素蛋白酶体途径作为细胞内蛋白质选择性降解途径之一,可通过死亡受体调节通路、线粒体凋亡通路、细胞周期调节通路和抗凋亡调节通路等多种通路参与调控细胞凋亡.以泛素蛋白酶体系统为靶点防治心血管疾病具有较好的前景.
-
蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的作用
目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注(IR)损伤的作用及其机制.方法 采用随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、IR组和MG132组,IR组和MG132组建立同系大鼠胰腺十二指肠移植模型.分别于再灌注后1、3、6h,检测受鼠血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺组织病理变化,采用蛋白质印迹法测定胰腺组织中核因子-κB(NF-κB) P65蛋白的水平,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应法分别检测胰腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的表达情况.结果 与假手术组比较,IR组再灌注后相同时点的组织病理损伤明显较重,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平以及TNF-α和ICAM-1水平均明显上升；与IR组比较,MG132组相同时点的组织损伤减轻,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平及TNF-α和ICAM-1水平均明显降低.结论 MG132能够减轻大鼠移植胰腺的IR损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化,从而下调TNF-α和ICAM-1的表达.
-
硼替佐米在器官移植中的应用进展
近年来,越来越多的研究结果显示,体液免疫在移植免疫及实体器官移植后的急性排斥反应和慢性排斥反应中发挥重要作用.然而,现有的针对体液免疫的各种治疗措施(如血浆置换、静脉注射用人免疫球蛋白、多克隆及单克隆抗淋巴细胞抗体,包括利妥昔单抗等)由于对成熟浆细胞缺乏作用而具有局限性[1].硼替佐米作为首个被美国国家食品药品管理局(FDA)批准用于临床的蛋白酶体抑制剂,不仅在其已批准的适应证如多发性骨髓瘤的治疗方面取得了较好疗效,而且在移植免疫中也具有多效的调节效应.本文就硼替佐米在器官移植中的应用进展作如下综述.
-
蛋白酶体抑制剂MG132增加顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用
目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用及其机制.方法 分别以顺铂(100 mg/L)、MG132(5μmol/L)及顺铂+MG132处理食管鳞癌EC9706细胞24h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)细胞凋亡检测试剂盒定量检测细胞凋亡率,Westem blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8、Caspase-3和核转录因子(NF)-κB的表达.结果 MG132可以抑制肿瘤细胞的增殖,增强顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用,使细胞存活率从(68.19±3.41)％降低至(29.37±4.16)％(P＜0.05).MG132联合顺铂处理组的细胞凋亡率为(68.45±2.58)％,明显高于单独处理组的(23.55±1.23)％和(25.87±2.07)％(P＜0.01).联合用药组细胞Caspase-8、Caspase-3的表达水平高于顺铂处理组,但NF-κB较单独顺铂处理组明显下降(P＜0.05).结论 MG132通过抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡,提高顺铂对食管鳞癌细胞的杀伤作用.
-
硼替佐米调控泛素蛋白酶活性治疗小鼠重症急性胰腺炎的作用及其机制
目的 探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米调控泛素蛋白酶活性治疗小鼠重症急性胰腺炎的作用机制.方法 采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1h)及脂多糖制作小鼠重症急性胰腺炎模型,将60只TCR雌性小鼠随机分为PS-341治疗组(注射脂多糖前0.5h腹内注射0.5 mg/kgPS-341)、模型对照组[注射脂多糖前0.5h腹内注射50％二甲基亚砜(DMSO)]、空白对照组(生理盐水制模).后1次注射雨蛙素后2h麻醉小鼠,自右颈静脉取血检测血淀粉酶、白细胞介素(IL)-1β和IL-6.光镜下观察小鼠胰腺、肺脏的病理形态,应用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫印迹法(Western blot)检测胰腺组织中IKBα的表达,电泳迁移率实验(EMSA)测定核因子(NF)-KB活性.结果 雨蛙素联合脂多糖小鼠腹腔内注射后,小鼠胰腺呈现典型的出血、坏死病理表现,血清淀粉酶、IL-1β、IL-6的表达值分别为:7663.0±559.0、229.6 -41.0、51.6±10.3,都较空白对照组(1732.0±540.0、9.3±1.8、4.3±1.0)明显升高(P＜0.05).PS-341治疗后,胰腺组织中I-κB降解自3.37±0.46减少至2.48±0.57,NF-κB活性自7.82±0.45下降至2.13±0.26,胰腺和肺脏出血、坏死和炎细胞浸润明显减轻；血清淀粉酶、IL-1β、IL-6的表达(2927.0±524.0、153.3±30.4、37.9±7.5)都较对照组显著下降；而胰腺组织中细胞凋亡明显增多(4.35±0.19增至7.91±0.26,P＜0.05).结论 PS-341可以抑制胰腺内NF-KB活化、促进细胞凋亡,从而减轻胰腺损伤,对小鼠重症胰腺炎有一定的治疗作用.
-
泛素-蛋白酶体系统及蛋白酶体抑制剂在实体瘤治疗中作用的研究进展
泛素-蛋白酶体系统(UPS)是人体内蛋白降解的主要途径之一,主要负责细胞内蛋白的降解.UPS参与人体内多种生物学活动,包括调控细胞周期、细胞凋亡等过程.肿瘤细胞的生长特别依赖UPS的功能,因此这一途径有可能成为抗肿瘤治疗的一个潜在靶点.本文拟对现有的抗实体肿瘤的蛋白酶体抑制剂进行一个概述,希望能够为今后新的蛋白酶体抑制剂的研发提供思路.
-
18F标记脱氧葡萄糖-正电子发射扫描成像在小鼠重症急性胰腺炎早期诊断和疗效评价中的应用
目的 评价18F标记脱氧葡萄糖-正电子发射扫描成像(18 F-FDG-PET)在小鼠重症急性胰腺炎早期诊断和疗效评价中的应用价值.方法 采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1 h)及脂多糖制作小鼠重症急性胰腺炎模型,57只雌性ICR小鼠随机分为硼替佐米(PS-341)治疗组(注射脂多糖前0.5h腹内注射0.5 mg/kg PS-341),模型对照组[注射脂多糖前0.5h腹内注射50％二甲基亚砜(DMSO)],空白对照组(生理盐水制模).首次注射雨蛙素后8h将小鼠处死,每组3只行PET胰腺扫描,8只取胰腺组织测髓过氧化物酶(MPO),另外8只光学显微镜下观察小鼠胰腺的病理形态.结果 正常对照组PET扫描时胰腺不显影,与模型对照组比较,治疗组小鼠胰腺18F-FDG的吸收率(5.27±0.35,3.48±0.49)、胰腺MPO活性(3.46±0.28、1.82±0.54)均显著降低,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05)；胰腺组织的病理学也得到明显改善,进一步验证了18FFDG-PET在重症急性胰腺炎诊断和疗效评价中的应用价值.结论 18 F-FDG-PET能够动态监测重症急性胰腺炎的发展和转归,评价治疗效果.
-
硼替佐米治疗小鼠重症急性胰腺炎
目的 观察硼替佐米(PS-341)对小鼠重症急性胰腺炎(SAP)的治疗作用.方法 将40只ICR雌性小鼠随机分为PS-341治疗组(注射脂多糖前0.5 h腹内注射0.5 mg/kg PS-341)、模型对照组(注射脂多糖前0.5 h腹内注射50%DMSO)、空白对照组(生理盐水制模),采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1 h)及脂多糖制作小鼠SAP模型.后一次注射雨蛙素后2 h麻醉小鼠,自右颈静脉取血检测血淀粉酶(Amy)、乳酸脱氢酶(LDH)、C-反应蛋白(CRP);光镜下观察小鼠胰腺的病理形态,测定胰腺组织中髓过氧化物酶水平(MPO),实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定胰腺组织中黏附分子(ICAM-1、P-selectin、E-selectin)的含量.结果 与模型对组比较,治疗组小鼠Amy、LDH、CRP明显下降(P<0.05);治疗组小鼠胰腺的病理结果显示组织的炎细胞浸润及出血明显减少,胰腺组织中MPO和黏附分子的含量明显下降,两者之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 PS-341对小鼠SAP有一定的治疗作用,可望给临床上治疗SAP带来希望和前景.
