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利用氨苄青霉素富集法获得一种新型抗菌肽
我们采用氨苄青霉素富集法,氨苄青霉素只杀死正在生长中的细菌,而对于被有毒基因抑制生长的细菌则不起作用.将合成的随机核苷酸片段与四环素载体连接和转化,加上IPTG诱导抑菌基因表达并用氨苄青霉素杀死正在生长中的细菌,过夜生长后沉淀细菌并用无菌水洗掉青霉素.细菌涂上平板,在低毒条件下生长.
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MTDH在乳腺癌中的表达
目的:研究乳腺组织中异黏蛋白(MTDH)表达水平及其临床病理意义.方法:收集山西省汾阳医院2008年6月至2010年6月外科23手术切除乳腺癌根治标本88例,乳腺良性增生组织24例,常规石蜡包埋切片.应用SP免疫组化法检测其中MTDH、ER、PR、CerbB2和P53表达水平并分析其临床意义.结果:乳腺癌组织中MTDH表达阳性率71.59％,明显高于乳腺良性增生组织33.33％,(X 2=11.89;P＜ 0.05),MTDH表达阳性率可能是与组织学分级,淋巴结转移,ER的表达有关,结论:乳腺癌组织中MTDH表达是乳腺癌发生中的早期事件,其表达可能在肿瘤的演进过程中起着重要作用.随着研究的的深入,MTDH基因有望成为乳腺癌新的基因治疗的靶点
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肝癌患者血清Bcl-2、血管内皮生长因子的表达水平及意义
目的：通过检测血清Bcl-2、血管内皮生长因子的水平，以研究其在肝癌中表达的意义。方法：选取2011年2月～2012年12月入我院经临床确诊为50例肝癌患者为观察组，50例正常者为对照组。检测两组患者血清 Bcl-2、血管内皮生长因子的含量及表达阳性率，并分析比较检测结果。结果：观察组患者血清 Bcl-2、血管内皮生长因子的表达阳性率均明显大于对照组（98%>20%、100%>30%），两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）；观察组和对照组的血清Bcl-2的水平分别为（102±40） U/L、（45±30）U/L，观察组显著高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）；观察组和对照组的血管内皮生长因子水平分别为（415.2±140.3）ng/L、（160.5±65.8）ng/L，观察组明显高于对照组，两组相比较差别具有统计学意义（P<0.05）。结论：肝癌患者的血清Bcl-2、血管内皮生长因子检出率明显高于正常者，且血清中含量多于正常者，对肝癌疾病的预后及治疗有着重要的临床意义。
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复发喉鳞状细胞癌相关基因表达谱研究
目的筛选复发喉鳞状细胞癌相关基因.方法用包含18 000个Cdna的基因芯片法检测2例复发喉鳞状细胞癌标本的癌组织及喉正常粘膜组织Mrna表达谱,通过对比分析寻找与复发喉鳞状细胞癌相关基因.结果(1)重复且相差3倍以上差异表达基因共218个,其中喉癌组织表达上调的基因137个,表达下调基因81个;(2)表达相差10倍以上的基因4个,分别为U02570、AW863712、AA523939和NM_014381.结论复发喉鳞状细胞癌的发生是一个多基因表达失调的过程,其中可能主要与GTP酶活化蛋白及DNA错配修复有关.
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细胞周期蛋白D1在食管癌中的表达和意义
目的研究人食管癌中原癌基因CCND1蛋白产物cyclin D1的表达和临床意义.方法用免疫组织化学方法(SP)检测了45例食管鳞癌,15例癌旁组织和15例正常粘膜组织中cyclin D1蛋白的表达.结果 45例食管鳞癌cyclin D1蛋白表达阳性率57.8%,明显高于癌旁组织(20%)和食管粘膜组织(13.3%),侵犯粘膜与侵及外膜组相比,有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比差异均有显著性(P＜0.05).结论 cyclin D1蛋白表达可以预测食管癌的预后,有可能作为食管癌临床分期的参考指标.
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FHIT、EGF基因表达与外阴癌发生发展的意义
目的 :探索脆性组氨酸三联体基因(FHIT)及表皮生长因子(EGF)基因表达与外阴癌的关系.方法 :分别选择正常外阴组织25例 、外阴上皮内瘤样病变(VINs)29例 、外阴癌组织40例,均采用免疫组化SP法检测其中的FHIT蛋白 、EGF蛋白表达情况.结果 :在FHIT蛋白在各类组织的阳性表达率方面,正常外阴组织 、VINs、外阴癌分别为100％(25/25),44.8％(13/29),25％(8/40),差异有统计学意义(P<0.05).另外,EGF蛋白在正常外阴组织中无表达,在外阴癌组织中阳性表达率达到了95％(38/40),差异有统计学意义(P<0.05).结论 :在外阴癌组织中,FHIT蛋白的阳性表达率明显降低,而EGF蛋白的阳性表达率明显升高,这两种基因表达与外阴癌的发生发展有密切相关性.
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可溶性髓样细胞触发受体-1与急性胰腺炎患者病情的相关性研究
目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者血浆、尿液可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)水平及其基因表达与其病情严重程度的关系.方法 收取2013年3月-2015年3月于我科治疗的30例急性出血坏死型胰腺炎(SAP)和48例急性水肿型胰腺炎(MAP)患者及12例健康志愿者纳入研究对象.分别检测患者入科后第1、3、7天血浆、尿液sTREM-1水平,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测量TREM-1基因表达水平,并对患者的病情进行APACHEⅡ与SOFA评分.结果 MAP组入科后第1、3、7天血浆sTREM-1浓度分别为(416.36±198.64)ng/L、(321.45±146.89)ng/L、(159.78±101.51)ng/L;SAP组分别为(798.31±357.59)ng/L、(651.49±305.76) ng/L、(357.61±181.26) ng/L,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).MAP组入科后第1、3、7天尿液sTREM-1浓度分别为(168.21±72.35)ng/L、(113.91±52.45) ng/L、(68.46±32.15) ng/L;SAP组分别为(356.18±162.95)ng/L、(293.45±159.67) ng/L、(157.48±62.54) ng/L,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).血浆sTREM-1水平与APACHEII评分和SOFA评分均呈正相关,相关系数分别为r=0.784,P＜0.05和r=0.729,P ＜0.05.尿液sTREM-1水平与APACHEH评分和SOFA评分均呈正相关,相关系数分别为r=0.745,P＜0.05和r=0.682,P＜0.05.SAP组TREM-1 mRNA表达量与MAP组相似,差异无统计学意义,p＞0.05.结论 血浆、尿液sTREM-1均与AP患者病情严重程度正相关,但SAP组TREM-1 mRNA基因表达未见明显增加.
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上皮性卵巢癌组织中 ATG5、PGRMC1与 P53的基因表达与术后复发的相关性研究
目的：探讨上皮性卵巢癌组织中 ATG5、PGRMC1与 P53的基因表达与术后复发的相关性。方法采用免疫组化法对我院收治的30例良性卵巢肿瘤患者和30例上皮性卵巢癌组织患者及30例正常妇女卵巢组织中的 ATG5、PGRMC1与 P53表达，结合病理因素分析造成疾病复发的原因。结果ATG5、PGRMC1表达主要在细胞质内，P53的基因表达则在细胞核内。 ATG5、PGRMC1三组患者卵巢组织中表达阳性率，比较差异有统计学意义（p ＜0．05）；良性卵巢组织与正常组织之间比较无明显差异（ p ＞0．05）。经Spearman 相关性分析显示，上皮性卵巢癌组织中的 ATG5、PGRMC1与 P53基因表达式引发癌细胞发病、进展和复发的关键因素。结论上皮性卵巢癌的发病、进展及复发可能与其基因 ATG5、PGRMC1、P53的表达有关，因此，联合检测三种基因情况可有判断疾病的进展程度，为预后、治疗提供帮助。
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p53在甲状腺癌组织中的表达及意义
目的 探讨p53的表达与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系.方法 应用免疫组化LSAB法.以单克隆抗体鼠抗人p53标记70例甲状腺癌、53例甲状腺腺瘤、36例癌旁甲状腺组织和25例正常甲状腺组织.观察不同甲状腺组织中p53的表达,并比较其阳性率.结果 p53阳性反应见于甲状腺癌、甲状腺腺瘤及癌旁甲状腺组织.在甲状腺癌组织中p53阳性率为48.6%,高于甲状腺腺瘤组织(13.2%)(P=0.000)、癌旁甲状腺组织(8.3%)(P=0.000)和正常甲状腺组织(O)(P=0.000).甲状腺未分化癌和滤泡状癌组织中p53的阳性率明显增高.存在淋巴结转移和临床Ⅲ、Ⅳ期病例中,p53的阳性率明显增高.结论 p53过量表达可能与甲状腺肿瘤的发生有关,癌组织中p53的表达可作为甲状腺癌预后的参考指标.
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星形细胞瘤中P53基因蛋白及PCNA的表达及意义
目的探讨脑星形细胞瘤中P53和PCNA在星形细胞瘤中的表达意义.方法将48例病理诊断为星形细胞瘤的实验标本制成4μm厚切片,严格按照免疫组织化学法即链菌亲合素-过氧化物酶法(S-P法)进行实验操作.结果1 PCNA阳性细胞率随星形细胞瘤病理级别的升高而增加,而且病理级别与阳性细胞增殖指数间显著正相关.2P53表达阳性的星形细胞瘸PCNA-LI高于P53表达阴性的星形细胞瘤,差异有显著性,且P53与PCNA在星形细胞瘤中的表达呈正相关.结论P53、PCNA在星形细胞瘤中的共同表达能很好地反映肿瘤恶性程度及增殖活性,可以作为判断星形细胞瘤的病理类型分级及其预后和选择治疗方法的一组有价值参考指标.
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高危型人乳头瘤病毒HPV18E6和E7基因的克隆与表达
目的:HPV18 E6和E7是两个病毒癌基因,存在于宫颈癌HeLa细胞中.采用双酶切和同源重组两种不同的策略克隆HPV18 E6、HPV18 E7和HPV18 E6-E7串联表达质粒,研究两者在细胞癌变中的作用.方法:首先,从HeLa细胞中提取RNA,RT-PCR获取E6和E7编码序列,分别用双酶切连接法或同源重组的方法连入不同载体质粒.然后,从HeLa细胞中提取DNA,PCR法扩增E6-E7编码序列,酶切连接法构建重组表达质粒.结果:经测序正确的质粒转染HeLa细胞,使用RT-PCR法或者Western-blot法检测目的基因转录与表达均显著升高.结论:HPV18 E6、E7和E6-E7三个表达质粒构建成功,均可在HeLa细胞中正确表达.
关键词： HPV18 E6、E7 基因克隆 质粒构建 基因表达 -
急性胰腺炎大鼠肺组织内TNF-αmRNA表达的实验研究
目的:了解急性胰腺炎时肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)转录水平上调在肺损伤机制中的意义.方法:作者以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了急性水肿性胰腺炎(AEP)与急性坏死性胰腺炎(ANP)两种模型的大鼠肺组织内TNF-αmRNA表达的状况,同时观察了它与内毒素(ET)血症的关系.结果:ANP组血TNF-α水平显著高于AEP组,后者义高于对照组(P<0.05).诱导AP后1小时肺组织内即出现了TNF-α mRNA的明显表达,在早期(3小时内)两组大鼠的表达水平接近,但随后ANP组TNF-α转录水平明显较AEP组高(P<0.05).ANP组ET水平也显著高于AEP组,且当ET含量明显增多时(6小时),肺内TNF-α基因表达强.结论:ANP时肺内出现TNF等细胞因子的损害性过度表达可能是发生肺损伤的重要原因,而内毒素血症的刺激是导致TNF过多生成的部分原因.
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丹地剂对去卵巢高脂雌鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响
目的:观察丹地剂对去卵巢高脂雌鼠ER(α、β)mRNA表达的影响.方法:采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高脂模型,将24只大鼠随机分为三组:去卵巢+丹地剂组(丹地组),去卵巢+苯甲酸雌二醇组(雌二醇组),去卵巢+生理盐水组(对照组),每组8只,丹地组每天每只大鼠灌饲丹地剂,含生药量6g,共6周;雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0.2mg,共12次;对照组给予生理盐水,早晚各一次灌胃,共6周.RT-PCR法分析ERα、ERβmRNA表达,应用全自动生化仪测血脂、放免法测FSH、E2,硝酸还原酶法测NO.结果:与对照组比较,丹地组能明显降低TC、TG,差异有显著性(P<0.01),升高HDL-C(P<0.05),E2上升(P<0.05),NO明显上升(P<0.01),ERα、ERβmRNA表达均明显高于对照组(P<0.01).结论:丹地剂具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉ERα、ERβmRNA的表达及升高血清NO的作用,并可改善血脂,该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据.
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子宫内膜单纯性非典型增生中错配修复基因蛋白的表达
目的 探讨子宫内膜单纯性非典型增生中错配修复基因蛋白的表达情况.方法 选取50例子宫内膜单纯性非典型增生标本,采用免疫组织化学方法检测MMR蛋白的表达情况.结果 在50例标本中,30例无MMR蛋白表达缺失,11例有1种MMR蛋白表达缺失,9例有两种及以上蛋白表达缺失.结论 子宫内膜单纯性非典型增生患者应进行MMR基因检测,为早期发现恶性潜能较高的高危人群及预后评价提供更有效的客观指标.
关键词： 子宫内膜单纯性非典型增生 错配修复蛋白 基因表达 -
氢气,一种特殊的疾病预防和治疗的气体
以往,人们认为,氢气是一种易燃气体,它无色,无味,用于物理,化学,工业等领域.现在随着人们对氢气的研究深入,逐渐发现氢气具有很多生物学效应,包括特定的清除羟基自由基活性,清除活性过氧亚硝基,改变基因的表达,信号转导活动等[1-4].现已报道氢气通过它的这些生物学效应,对很多种疾病的预防和治疗是有效的,其中包括人体神经系统,呼吸系统,循环系统,消化系统,内分泌系统等多个系统的疾病.尤为重要的是,目前尚无报道指出使用氢气疗法的过程中曾出现任何毒副作用.因此,氢分子医学很有希望成为一种新兴的全科医学治疗方法.这篇综述总结了近五年的氢分子医学研究的新进展,重点阐述了它治疗确切有效的五种疾病和需要解决的问题.
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HIF-1α 在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨HID-1α 在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义.方法:选取45例喉鳞状细胞癌患者作为研究对象,采用免疫组织化学方法检测45例喉癌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达;采用组织芯片技术研究HIF-1α 蛋白在喉癌组和癌旁黏膜组织中的表达情况.结果:45例喉癌组织中有30例发现有阳性表达,阳性表达率为66.7％;有15例喉癌组织中未见表达,阴性表达率为33.3％.且喉癌组织中HIF-1α 蛋白表达显著高于癌旁黏膜组织(P<0.05).HIF-1α 蛋白表达与临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移等临床病理特征有显著相关性.结论:WAVE2在喉鳞状细胞癌组织中高表达且与多种临床病理特征相关.
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清肝饮对肝星状细胞和成纤维细胞胶原基因表达的影响
目的：研究中药复方消肝饮对肝星状细胞和人胚肺成纤维细胞Ⅲ、Ⅳ胶原基因表达的影响。方法：采用标记Ⅲ、Ⅳ型前胶原cDNA探针与RNA斑点印迹杂交，检测清肝饮对Ⅲ、Ⅳ型前胶原mRNA水平的影响。结果：清肝饮不同程度的降低了Ⅲ、Ⅳ前胶原mRNA的水平。结论：清肝饮从分子水平上参与了胶原合成的调控。
