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乙型肝炎病毒增强子的结构和调控研究
0引言HBV属嗜肝DNA病毒,其基因组为3.2kb部分双链的环状DNA.他的复制需要一个RNA中间物-前基因组RNA,经过反转录产生新的DNA分子.HBV基因组的功能单位十分密集,高度压缩,重复利用.目前已确定有四个主要的开放阅读框架,分别负责编码核心抗原(pre-C/C)、核酸聚合酶(P)、表面抗原(preS/S)和X蛋白(X).这些基因的表达受到顺式元件-启动子和增强子的调控.目前在HBV基因组已发现并鉴定的顺式元件有四个启动子(C、X、SP Ⅰ、SPⅡ)、两个增强子(Enh Ⅰ和EnhⅡ)和糖皮质激素应答元件[1-4].其中增强子的作用主要是调控HBV的转录和复制.
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肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用
目的:探讨丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用.方法:采用ELISA和反转录-聚合酶链反应的方法检测了74例非霍奇金淋巴瘤患者外周血的抗-HCV抗体和HCVRNA;同时检测了110名健康献血员中抗-HCV抗体和HCVRNA.用ELISA方法检测了74例非霍奇金氏淋巴瘤患者和110名献血员.同时采用聚合酶链反应对于非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞中Bc1-2/JH基因重排情况进行了检测.结果:在74例非霍奇金氏淋巴瘤中的抗-HCV抗体阳性的为4例,阳性率为5.3%,HCVRNA阳性者为6例,阳性率为8.1%;110名健康献血员的抗-HCV抗体的阳性率为0.9%;HCVRNA阳性率为1.8%.非霍奇金淋巴瘤中的抗-HCV抗体阳性率较健康献血员显著增高,而HCVRNA的阳性率也较健康献血员有增高.经x2检验P>0.05,无显著性差异.在74例非霍奇金淋巴瘤中HBsAg阳性者有3例(4%),而在献血员中为2名(1.7%).在74例非霍奇金淋巴瘤中有18例外周血检测出Bcl-2/JH基因重排,且转位均发生在Bcl-2的主要断裂点区域(MBR).经x2test P<0.01,在非霍奇金淋巴瘤中Bcl-2/JH基因重排和HCV感染有明显的相关性.结论:HCV和HBV的感染与非霍奇金氏淋巴瘤的发生可能不存在一定的相关关系.
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严重急性呼吸综合征患者细胞因子与趋化因子表达谱的特征
由于严重急性呼吸综合征(SARS)的免疫病理机制尚未阐明,目前尚无有效药物或治疗方法能够控制这种疾病.为了探讨SARS发病的免疫学机制,我们研究了SARS患者外周血细胞因子与趋化因子的表达谱以及肺和淋巴组织的免疫病理改变.采用液相芯片技术,动态扫描了23例诊断明确的SARS患者血中14种细胞因子与趋化因子;应用反转录PCR、免疫组化和免疫荧光技术对SARS死亡患者经尸体解剖的肺和淋巴组织进行免疫病理学观察.
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上海地区艾滋病相关性淋巴瘤11例临床分析
AIDS患者在高效抗反转录病毒治疗(HAART)前,患淋巴瘤的风险比HIV阴性人群高60~200倍[1].HAART治疗不仅减少AIDS相关性淋巴瘤(ARL)的发病率,而且也改善了淋巴瘤患者的预后.HAART被证实是治疗ARL重要组成部分[2].本研究回顾性分析上海市公共卫生临床中心从2004年11月-2008年12月收治的上海地区11例ARL的临床特点、治疗、生存情况等,以提高对之认识.
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胃癌淋巴结微转移的检测及临床意义
目前胃癌是全球高发恶性肿瘤的第4位,病死率位于恶性肿瘤的第2位,严重威胁人类的健康。胃癌的转移和复发是影响预后的主要因素[1],而胃癌细胞在胃周淋巴结、腹腔以及外周血中的微转移可能是导致转移和复发的主要原因。近些年来,随着免疫组织化学和反转录-聚合酶链反应在临床上的应用,使胃癌淋巴结微转移的检测成为可能。目前根治性手术可以有效的预防胃癌淋巴结复发率[2],随着化疗进展的提高,包括新的抗癌药物应用,使得早期胃癌5年生存率为90%,进展期胃癌5年生存率<40%。但是如何进行胃癌淋巴结微转移检测,减少复发率、提高生存率仍是我们目前面临的难题。
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外周血PSA mRNA早期诊断前列腺癌转移
用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测前列腺癌(PCa)患者外周血PSA mRNA,以早期诊断前列腺癌转移,报告如下。 资料和方法 PCa患者14例。年龄50~80岁,平均67岁。JWP分期:A 期2例,B期5例,C期3例,D期4例。对照组包括:BPH患者15例,年龄55~83岁,平均65岁;非癌患者10例,男5例,女5例,年龄28~55岁,平均37岁。PCa患者通过血清PSA测定、直肠指诊、CT、同位素骨扫描进行诊断,并在术前1周、指诊后2周采血。所有病例均经病理检查。
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p16基因逆转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞生长的抑制作用
我们构建了pLNCX-p16逆转录病毒载体,并将其转染至人未分化胃癌细胞,观察其对胃癌细胞生长的抑制作用.资料与方法1.一般资料:白细胞采自正常人外周血,人未分化胃癌细胞株HGC 27购自中科院上海细胞所,DH5α、逆转录病毒载体pLNCX为本实验室保存,PCR试剂盒、反转录PCR扩增试剂盒、DNA连接试剂盒和限制性内切酶购自宝生物工程(大连)有限公司.TRIzol Reagent、 Lipofectamine购自Invitrogen公司.
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美国DHHS成人与儿童抗反转录病毒治疗指南的修订
自1996年高效联合抗病毒治疗HIV感染的联合疗法问世,治疗药物和方法不断改善.2007年12月1日,美国DHHS(健康与人类服务部)公布了新的成人与儿童抗反转录病毒治疗指南,对2006年10月10日的版本中部分内容做了修订.现将部分修订内容摘译整理,为国内相关人员提供参考.
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建立反向PCR检测HIV-1整合位点的方法
高效抗反转录病毒治疗(highly active anti-retmviral therapy,HAART)可降低艾滋病的发病率和死亡率,使感染者血浆中HIV-1 RNA降至常规方法检测不到的水平[1-2],但用敏感度高的方法仍可检测到病毒基因和低水平的病毒复制,这是因为存在HIV-1潜伏库,含有整合HIV DNA的静止性CD4+T细胞是主要的HIV-1潜伏库[3-5].
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人类免疫缺陷病毒合并丙型肝炎病毒双重感染的研究进展
随着高效抗反转录病毒治疗(high active anti-retroviral therapy,HAART)的广泛应用,人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HTV)/丙型肝炎病毒(hepattis C virus,HCV)感染者的预后得到了显著改善,然而随着患者寿命的延长,其合并的HCV感染对患者的病死率有很大影响.
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基因治疗中反转录病毒的细胞导向性基因转移
成功的基因治疗要求将治疗基因高效、细胞特异性地传递到靶组织并稳定表达.因此需要发展细胞导向性转移基因的基因治疗载体.反转录病毒(Retrovirus,RV)是目前常用、也是成功率高的基因治疗载体,但普遍缺乏细胞导向性.RV载体靶向转移基因可以通过两种水平来实现:1.基因传递水平,利用天然或修饰RV包膜糖蛋白与细胞特异性表面蛋白的相互作用使基因定向传递到靶组织;2.基因传递水平,利用组织特异性启动子控制基因在特定组织表达.本文主要讨论RV载体在基因传递水平靶向转移基因方面的研究进展.
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实时荧光定量PCR检测HBVcccDNA临床应用研究
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)属嗜肝脱氧核糖核酸科(hepadnaviridae),不完全双链DNA病毒,是引起急慢性肝炎的主要病原之一.乙型肝炎病毒与其他DNA病毒相比,不同之处在于它特殊的反转录复制形式,以及特殊的复制中间体共价闭合环DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在.cccDNA是病毒mRNA和前基因组RNA的转录模板,cccDNA的存在是病毒复制的一个重要标志,是病毒感染得以维持的根源,抑制或清除cccDNA是治疗慢性乙型肝炎的关键.
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感染人类免疫缺陷病毒的严重脓毒症患者的特征和预后:高活性抗反转录病毒疗法后期依然持续存在的风险
虽然高活性抗反转录病毒治疗可改善人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的预后,但对脓毒症HIV感染患者采用高效抗反转录病毒治疗后的预后目前仍存在争议。同时,能否获得高活性抗反转录病毒治疗和医疗保健水平的差距继续影响着疗效。因此有学者在医疗保健水平较低且重症患者转运延迟但具备安全网络的大型医院进行了一项前瞻性观察性研究,比较了HIV感染的严重脓毒症患者与未感染HIV的脓毒症患者的预后情况。研究纳入了2006年至2010年期间在美国亚特兰大佐治亚州的雷迪纪念医院包括内科、外科、神经科在内的3个成人重症加强治疗病房(ICU)内1095例严重脓毒症患者,其中165例(15%)HIV阳性,CD4中位数为0.41(0.08~1.67)。22%的HIV感染患者在入院前进行了高效抗反转录病毒治疗,有80%的患者CD4细胞小于200。HIV感染患者有更高的院内病死率(50%比38%,P<0.01)。通过多元回归模型对年龄、肺炎、医院内获得性感染、脓毒症等既往病史进行调整后显示,HIV感染是影响病死率的独立预测因子(比值比=1.78,P=0.005)。该研究证实:在一个医疗资源缺乏的大城市医院,HIV感染的严重脓毒症患者较未感染HIV患者的严重脓毒症患者具有更差的预后结局。但还需要进一步的研究来探讨社会经济地位和减少医疗保健差异对HIV感染危重患者预后的影响。
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食管癌端粒酶活性研究的临床意义
端粒是存在于染色体末端的富含G的DNA重复序列,构成了DNA末端的保护性的帽。端粒酶是一种核糖核蛋白,具有反转录酶活性,能以自身的RNA为模板合成端粒序列。在正常体细胞中端粒酶无活性或仅表达低活性,在大多数永生细胞、恶性肿瘤细胞及生殖细胞中都存在端粒酶活性。到目前为止,有关食管癌的端粒酶活性的研究及其临床意义国内尚未见到报道。本文就这一问题进行了研究。1 材料与方法1.1 实验标本 取自天津医科大学附属肿瘤医院胸外科1996年6月至1998年1月住院患者30例(根治性手术切除),平滑肌瘤5例。
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肝癌患者外周血AFPmRNA的定量检测与肝外转移的关系
血行转移是肝癌发生转移的主要途径,肝癌细胞脱落入血是发生血行转移的前提.外周血中AFPmRNA的检测,为预测肝癌的转移提供了新的手段.本实验采用反转录竞争PCR法定量检测了人外周血AFPmRNA含量.
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mRNA差异显示反转录PCR技术的发展及其在神经科学中的应用
众所周知,控制生物性状的基本结构与功能单位是基因.不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异决定着生命活动的多样性.
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短信息提醒可提高人类免疫缺陷病毒患者抗反转录治疗的依从性
在迈阿密举行的第9届人类免疫缺陷病毒(HIV)治疗和预防依从性国际会议上公布了一项新的研究结果。如果患者不在预定时间3Omin内服用预定剂量的药物,实时监测设备会发送文本信息提醒患者。新的研究表明,这种方式可显著提高HIV患者抗反转录病毒治疗的依从性。
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广西防城港地区AIDS患者相关眼部病变一年追踪研究分析
目的通过对获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者初诊时眼部病变的损害情况,及治疗一年后眼部病变的情况进行观察比较,分析其眼部病变的主要因素,为防治AIDS眼部并发症提供依据。方法对200例(400眼)初次确诊AIDS患者进行一年定期眼部追踪检查,并对发生眼部病变患者的临床表现及CD4+T细胞计数进行描述和分析,探索AIDS患者不同时期的眼部情况,期望早期发现眼部并发症及其引起的相关因素。结果200例AIDS初诊患者中,有96例发现眼部病变,总发病率48%。初次检查眼部病变96例中,诉视力改变者41例。眼部病变主要有眼底微血管改变48例,占眼部病变的50%,其表现为视网膜棉绒斑或小片状出血斑;眼部感染35例,占眼部病变36.45%,其表现为巨细胞病毒性视网膜炎21例,葡萄膜炎10例,角膜基质炎4例;神经性眼部病变8例,占眼部病变8.33%,其表现为视神经萎缩3例,视盘乳头炎5例;眼部肿块1例占眼部病变1.04%,表现为眼部球结膜恢黑色肿块;其它4例,占眼部病变4.16%,表现为继发性青光眼4例。眼部病变在CD4+T细胞计数≤50个/μL的病人中的发病率71.43%,CD4+T细胞计数>50个/μL的病人中的发病率28.44%。经一年高效抗反转录病毒治疗及眼科对症治疗后,眼部的并发症4.5%。结论AIDS患者眼部并发症发生率48%,主要病变多在视网膜,尤其是CD4+T细胞计数≤50个/μL的病人中的发病率较高71.43%,有相当一部分病人在视力未发生改变时,其眼底已发生病变,高效抗反转录病毒治疗一年后眼部并发症发生率4.5%,因此,对AIDS初诊患者常规眼部筛查,能早发现、早诊断、早治疗眼部并发症,提高AIDS患者生活质量有重要意义。
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2014年国际抗病毒学会推荐成人 HIV 感染初始抗反转录病毒方案
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心理支持对艾滋病和结核双重感染病人高效抗反转录病毒治疗过程中毒副反应的影响
艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)自20世纪80年代被发现以来,以极其迅猛的速度蔓延,严重威胁着人类的生存与发展.而高效抗反转录病毒治疗(HAART)的出现极大地降低了AIDS相关疾病的发病率和病死率[1],给AIDS病人带来了希望.但是抗病毒药物本身有一定的不良反应,其在清除病毒的同时,也会导致不同的毒副反应的出现,严重者甚至不能继续(HAART).结核病是AIDS病人常见的机会性感染,两病互相影响,互为因果[2].AIDS合并结核病病人心理问题复杂多样,病人通常存在严重的心理问题,且发生概率显著高于一般人群[3,4].因此,2009年1月开始,在我院艾滋病科对进行HAART的病人,开展心理支持护理,取得了很好的效果,现报道如下.