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细胞外信号调节激酶1/2表达与HPV16感染及其交互效应在子宫颈癌变中的作用
目的 探讨细胞外信号调节激酶(p-ERK)1/2表达与HPV16感染在子宫颈癌变中的作用及其交互效应.方法 选取2013年9月至2014年3月在山西省肿瘤医院、山西省妇幼保健院、山西省晋煤集团总医院经组织病理学确诊的正常子宫颈(NC)女性34例、低度子宫颈上皮内瘤变(GIN Ⅰ)患者26例、高度子宫颈上皮内瘤变(CINⅡ/Ⅲ)患者57例和子宫颈鳞状细胞癌(SCC)患者59例为研究对象.采用调查问卷收集研究对象的人口学特征和子宫颈癌相关因素等资料,并采集子宫颈组织标本.采用PCR法检测HPV16感染状况,应用免疫组化法检测子宫颈组织中磷酸化ERK 1/2 (p-ERK1/2)蛋白的表达情况.同时使用ERK抑制剂U0126对子宫颈癌细胞Siha(HPV 16阳性)和C33A(HPV阴性)进行抑制,比较抑制前后细胞的增殖、凋亡情况.结果 随着子宫颈癌变的进展,HPV16感染率(趋势x2=17.99,P＜0.001)和p-ERK 1/2的表达率(趋势x2=10.58,P=0.001)均逐渐升高,HPV 16感染与p-ERK1/2蛋白表达在CIN Ⅰ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组中均存在正相加交互作用.细胞实验结果显示,ERK抑制后,Siha和C33A细胞均表现为增殖能力降低(Siha:t=6.863,P＜0.001;C33A:t=7.092,P＜0.001)、凋亡率增高(Siha:t=-5.201,P=0.006;C33A:t=-4.335,P=0.005).ERK抑制后HPV16阳性Siha细胞较HPV阴性C33A细胞增殖指数高(t=7.066,P＜0.001)、凋亡率低(t=-2.431,P=0.057).结论 p-ERK1/2高表达和HPV16感染均可增加子宫颈癌变风险,两者在子宫颈癌变中存在正相加交互作用.在子宫颈癌细胞增殖凋亡过程中,ERK1/2的活化可能对HPV16感染细胞的作用更为显著.
关键词： 宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒16 细胞外信号调节激酶1/2 交互作用 -
益气补肾活血方对佐剂关节炎大鼠滑膜ERK1/2的影响
目的：以益气补肾活血方治疗佐剂关节炎( adjuvant arthritis, AA)大鼠,通过观测该中药复方对AA大鼠滑膜(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)表达水平的影响,探讨该中药复方对类风湿关节炎的治疗机制。方法以雷公藤多苷作为对照,采用AA大鼠模型,用益气补肾活血方对AA大鼠进行灌胃治疗。通过动态观测SD大鼠关节肿胀度及滑膜ERK1/2的磷酸化表达结果,并以灰度扫描软件分析结果,以观测该中药复方对AA大鼠滑膜ERK1/2表达的影响。结果益气补肾活血方既能明显降低AA大鼠的关节肿胀度,又能明显降低AA大鼠滑膜ERK1/2的磷酸化表达水平。结论滑膜ERK1/2的磷酸化表达水平在类风湿关节炎发病机制中具有重要作用,而益气补肾活血方能显著降低滑膜ERK1/2的磷酸化表达水平,可能是该方治疗类风湿关节炎的作用机制之一。
关键词： 类风湿关节 细胞外信号调节激酶1/2 佐剂关节炎大鼠 益气补肾活血方 雷公藤多苷 -
艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体、磷酸化细胞外信号调节激酶的影响
目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达的影响,初步探讨其作用机制.方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,每组10只.采用大黄浓缩液灌胃法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃法制备脾虚胃溃疡大鼠模型.四君子汤组予以四君子汤灌胃,艾灸组大鼠隔日交替灸“足三里”“中脘”或“脾俞”“胃俞”,艾灸非穴位组灸艾灸组穴位的对照点,每日1次,共治疗8d.按脾虚动物模型标准观察大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃组织EGFR的表达和蛋白质印迹法检测p-ERK1/2蛋白的水平.结果:与空白组比较,其余各组造模大鼠脾虚症状明显,模型组大鼠胃黏膜损伤指数显著增加(P＜0.01),光镜下胃黏膜损伤严重,胃组织EGFR、p-ERK1/2蛋白表达升高(P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组胃黏膜损伤指数显著降低(P＜0.01,P＜0.05),光镜下胃黏膜损伤改善,且胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P＜0.01);与艾灸非穴位组相比,四君子汤组和艾灸组胃黏膜损伤指数呈降低趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05),而光镜下胃黏膜损伤恢复较艾灸非穴位组好,胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P＜0.01,P＜0.05).结论:激活EGFR/ERK信号转导通路是艾灸启动机体的内源性保护机制之一,艾灸治疗脾虚胃溃疡可能是通过提高胃组织表皮生长因子、转化生长因子的表达,两者均结合并激活EGFR,激活后的EGFR介导ERK磷酸化从而激活EGFR/ERK信号转导通路,因而起到保护胃黏膜、促进胃黏膜增殖修复的作用.
关键词： 艾灸 脾虚胃溃疡 表皮生长因子受体 细胞外信号调节激酶1/2 -
隐丹参酮对IGF-1促PC12细胞存活的作用及机制探讨
目的:研究隐丹参酮对类胰岛素样生长因子-1(IGF-1)促进PC12细胞存活的影响及可能机制.方法:首先采用剥夺血清造成细胞损伤模型确定IGF-1发挥促存活作用的剂量,然后不同剂量的隐丹参酮预先作用PC12细胞,再加入IGF-1处理,MTT检测隐丹参酮对IGF-1促PC12细胞存活的影响；Western blot检测隐丹参酮对IGF-t诱导其受体(1GF-IR)磷酸化及下游信号通路磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)及细胞外信号调节激酶(ERK) 1/2的影响.结果:MTT显示隐丹参酮能剂量依赖性地阻断IGF-1的促存活作用,抑制PC12细胞的增殖；Western blot结果显示IGF-1能明显诱导其受体(IGF-1R)磷酸化,而隐丹参酮则起抑制作用,并使下游Akt及ERK1/2的磷酸化水平下调,呈明显的剂量依赖性.结论:隐丹参酮可通过抑制IGF-1R及其下游信号分子Akt和ERK1/2的磷酸化,从而抑制IGF-1的促存活功能,发挥其自身抑制细胞存活,促使细胞凋亡的作用.
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痹肿消汤拆方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜ERK1/2、ERK5表达及其转导通路的影响
目的:检测痹肿消汤按湿、热、毒、瘀拆方对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、细胞外信号调节激酶5(ERK5)表达的影响,从湿、热、毒、瘀探讨类风湿性关节炎(RA)的作用机制.方法:采用皮下注射牛Ⅱ型胶原蛋白与完全弗氏佐剂诱导SD大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,并设立正常组.采用免疫印迹法( Western blot)同步检测正常组、模型组、痹肿消汤组、清热解毒组(拆方Ⅰ组)、祛湿组(拆方Ⅱ组)、活血组(拆方Ⅲ组)大鼠在不同时间点滑膜ERK1/2、ERK5的磷酸化水平,运用灰度扫描软件对结果进行半定量分析.结果:造模14d后,模型组滑膜ERK1/2、ERK5表达高于正常组(P＜0.05).随着免疫时间延长,模型组ERK1/2、ERK5表达于21、28d呈递增趋势(P＜0.05),28d达到高.4用药组治疗后,ERK1/2、ERK5的磷酸化表达水平均低于同期模型组(P＜0.05).在21、28d水平,表达呈递减趋势(P＜0.05).痹肿消汤组的ERK1/2、ERK5各时间点的表达水平比拆方3组更低,拆方Ⅱ组的ERK1/2表达的下降幅度比拆方Ⅰ组、拆方Ⅲ组更明显(P＜0.05).而拆方Ⅰ组的ERK5表达的下降幅度比拆方Ⅱ组、拆方Ⅲ组更显著(P＜0.05).结论:拆方各组可有效地抑制ERK1/2、ERK5转导通路的活化,达到阻抑关节滑膜增殖、骨质侵蚀的作用.但清热解毒、祛湿通络、活血祛瘀各治法对上述通路调节作用优势有不同.
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益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠细胞外信号调剂激酶1/2通路的影响
目的:研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠ERK1/2通路的影响.方法:将60只雌性SJL小鼠随机分为5组,即正常组、模型组、中药组、西药组和PD98059组,每组各12只.模型组、中药组、西药组和P D98059组分两点皮下注射抗原乳剂共200μL(含PLP139-151150μg、H37Ra 400μg);分别在造模第1天、第3天再给予每只小鼠尾静脉注射百日咳杆菌液100μL(含百日咳杆菌0.6×106个).造模第7天给予相应药物治疗,共干预15d,免疫后每天记录各组小鼠的神经功能评分.用Western blot法测定EAE小鼠脑组织内Ras、p-c-Raf、c-Raf、p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2和ERK1/2的表达.结果:与模型组比较,中药组、西药组和 PD98059组EAE/小鼠第21天的神经功能评分显著降低(P＜0.05).模型组p-c-Raf、p-MEK 1/2和p-ERK1/2的表达水平显著高于正常组(P＜0.05);中药组、西药组和PD98059组p-c-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达水平显著低于模型组(P＜0.05).名组Ras、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2的表达水平无显著差异.结论:益肾达络饮可通过降低p-MEK 1/2和p-ERK1/2的表达抑制ERK1/2通路的激活,从而降低EAE小鼠的神经功能评分,延迟发病时间,但益肾达络饮抑制ERK 1/2通路后引起的下游生物学效应尚不明确,需进一步研究.
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siRNA沉默细胞外信号调节激酶1/2基因协同甲亢宁胶囊对大鼠甲状腺细胞-5细胞增殖的影响
目的：通过甲亢宁胶囊（以下简称“甲亢宁”）协同siRNA干扰大鼠甲状腺细胞-5（fisher rat thyroid cell line-5，FRTL-5）中细胞外信号调节激酶（ERK）1/2基因，观察并探讨甲亢宁对FRTL-5细胞RNA干扰ERK1/2基因表达及对FRTL-5细胞增殖的影响。方法将生长状态良好的FRTL-5细胞分为空白组、阴性对照组、甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组。利用siRNA沉默及甲亢宁协同干扰FRTL-5细胞的ERK1/2基因， RT-PCR检测ERK1/2 mRNA表达，Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达，CCK8法检测细胞增殖。结果 RT-PCR检测结果显示，空白组和阴性对照组ERK1/2的mRNA表达无明显差异（P＞0.05）；与空白组比较，siRNA组和甲亢宁组FRTL-5细胞ERK1/2 mRNA表达明显下降（P＜0.01）；与空白组、阴性对照组比较，甲亢宁协同组ERK1/2 mRNA表达明显下降（P＜0.01）；Western blott检测结果显示，与空白组、阴性对照组比较，甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达相对量明显下降（P＜0.01）。转染24、48 h后，CCK8法检测结果显示，甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组细胞增殖受抑制，与空白组、阴性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论甲亢宁对 ERK1/2磷酸化起阻断作用，ERK1/2基因被沉默后，对甲状腺细胞增殖有抑制作用，甲亢宁可协同ERK1/2-siRNA抑制FRTL-5细胞增殖。
关键词： 甲状腺细胞 细胞外信号调节激酶1/2 甲亢宁胶囊 RNA干扰 增殖 -
健步通络熏蒸液对兔膝骨关节炎关节软骨中细胞外信号调节激酶1/2表达的影响
目的 观察健步通络熏蒸液对兔膝骨关节炎关节软骨中细胞外信号调节激酶1/2(ERKl/2)表达的影响,探讨其关节软骨保护作用机制.方法 26只新西兰大白兔,随机抽取6只作为空白组,余20只采用改良Hulth法制作骨关节炎模型,术后4周随机抽取2只验证造模是否成功,18只随机分为模型组、熏洗组和降钙素组.模型组采用自来水熏洗,熏洗组采用健步通络熏蒸液熏洗,每次30 min,每日1次;降钙素组给予降钙素5 U/kg肌肉注射,每日1次,疗程20d.疗程结束后行空气栓塞致死,取关节软骨观察其大体形态,PCR检测软骨中ERKl/2含量.结果 与空白组比较,模型组关节面损伤严重,ERKl/2含量显著升高;熏洗组和降钙素组关节面损害较轻,且ERKl/2表达降低;熏洗组与降钙素组比较,2组关节面损害及ERKl/2表达无明显差异.结论 健步通络熏蒸液对膝骨关节炎关节软骨具有保护、抑制软骨退变的作用,其机制可能与抑制ERKl/2表达有关.
关键词： 健步通络熏蒸液 骨关节炎 关节软骨 细胞外信号调节激酶1/2 兔 -
养肺活血方对肺纤维化大鼠细胞外信号调节激酶1/2和核因子κ-B信号通路的影响
目的 探讨养肺活血方对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和核因子κ-B(NF κ-B)表达的影响.方法 大鼠麻醉后,经气管软骨环间隙向心端穿刺,气管内注入博莱霉素A5(5 mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型,假手术组大鼠在同样麻醉条件下气管内注入等量生理盐水.术后第2日开始每日灌胃给药,假手术组和模型组予5‰羧甲基纤维素钠(CMC钠)溶液,地塞米松组予等容积地塞米松蒸馏水溶液,各中药治疗组予等容积相应中药合剂,灌胃28 d,麻醉处死大鼠,将左肺固定,包埋切片,常规脱蜡.用免疫组化SABC法检测ERK1/2和NF κ-B的表达;采用光学显微镜和全自动图像获取系统随机测量并计算平均光密度(10D)值.结果 模型组大鼠肺组织ERK1/2和NF κ-B的表达明显高于假手术组(P<0.01).各中药治疗组肺组织ERK1/2和NF κ-B的表达明显低于模型组(P<0.01).结论 影响ERK1/2和NF κ-B信号通路可能是中药养肺活血方治疗肺纤维化的机制之一.
关键词： 肺纤维化 养肺活血方 细胞外信号调节激酶1/2 核因子κ-B 大鼠 -
MAPK信号通路在复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞AQP3表达中的作用研究
目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)—细胞外信号调节激酶1和2(extracellular signal regulated kinase1/2,ERK1/2)信号转导通路在复方丹参注射液对人足月妊娠羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达调节中的作用.方法 原代培养足月妊娠羊水量正常与羊水过少人羊膜上皮细胞,将人羊膜上皮细胞均分为4组:分别为空白对照组、U0126组、复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组.采用免疫印迹技术检测人羊膜上皮细胞中磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)和AQP3的表达.结果 (1)在羊水量正常和羊水过少人羊膜上皮细胞中,均发现p-ERK 1/2表达水平在U0126组较空白对照组明显下降(P＜0.05),而复方丹参注射液组可以明显上调p-ERK1/2表达水平(P＜0.05),U0126加复方丹参注射液组人羊膜上皮细胞中p-ERK1/2表达水平高于U0126组,但低于复方丹参注射液组(P＜0.05).(2)在羊水量正常的人羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达与空白对照组比较无明显变化(P＞0.05)；复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平均高于空白对照组(P＜0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)在羊水过少羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达较空白对照组下降(P＜0.05)；复方丹参注射液组可以明显上调AQP3的表达水平(P＜0.05),而U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平低于复方丹参注射液组(P＜ 0.05),但高于U0126组(P＜0.05).结论 羊水过少时,复方丹参注射液通过激活MAPK-ERK1/2信号转导通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3的表达水平.
关键词： 水通道蛋白3 细胞外信号调节激酶1/2 复方丹参注射液 人羊膜上皮细胞 羊水过少 -
活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α诱导人内皮细胞与中性粒细胞黏附及相关通路蛋白表达的影响
目的 探讨活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(H UVECs)与外周血中性粒细胞(PMN)黏附、炎症反应及相关通路蛋白的影响.方法 采用随机数字表法将32只大鼠分为空白对照组、芎芍胶囊组、黄连胶囊组及芎芍胶囊加黄连胶囊组,每组8只,各给药组按临床等效剂量灌胃,采血制备含药血清.空白对照组予等体积蒸馏水作对照.常规方法培养HUVECs,以TNF-α(100 ng/mL)为刺激物,制备HUVECs细胞损伤模型.细胞分为5组:空白对照组、模型组、活血组、解毒组及活血解毒组.空白对照组及模型组给予正常大鼠血清,其他3组以10％含药血清干预24 h后收集细胞,应用孟加拉玫瑰红染色法观察HUVECs与PMN发生病理性黏附情况;酶联免疫法检测细胞上清液相关炎症因子E选择素(E-selectin)、细胞黏附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量;Western blot法检测丝裂素活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)蛋白磷酸化水平.结果 与空白对照组比较,模型组细胞出现明显的氧化损伤,PMN黏附数量明显增加,IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平升高,且HUVEC上清p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达增加(均P＜0.01).与模型组比较,活血组、解毒组及活血解毒组HUVECs与PMN黏附数量减少(P＜0.05),细胞培养上清液IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平降低(P ＜0.05,P＜0.01),且内皮细胞p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达降低(P＜0.01).结论 活血及活血解毒含药血清能减轻TNF-α诱导的HUVECs损伤,抑制HUVECs-PMN黏附和黏附因子释放.其机制可能与调节内皮细胞MAPK通路p38MAPK、ERK 1/2蛋白磷酸化水平有关.
关键词： 活血解毒 内皮细胞 细胞黏附 丝裂素活化蛋白激酶p38 细胞外信号调节激酶1/2 -
低氧预适应小鼠脑海马组织内与cPKCγ相互作用的ERK1/2磷酸化水平降低
目的 探讨与经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)相互作用的细胞外信号调节激酶1//2(ERK1/2)的磷酸化水平在小鼠脑低氧预适应形成过程中的变化.方法 用成年雄性BalB/c小鼠制备整体低氧预适应模型,将小鼠随机分为正常对照(H0)、早期低氧预适应(H3)和延迟性低氧预适应(H6)3组.应用免疫共沉淀,Western blot等方法检测胞质和膜相关成分中与cPKCγ相互作用的ERK1/2的磷酸化水平.结果 小鼠海马组织中ERK1/2能与cPKCγ免疫共沉淀,且与HO组相比,H3及H6组ERK1/2的204位酪氨酸磷酸化水平明显降低(P<0.05).结论 小鼠海马组织中,cPKCγ与ERK1/2存在相互作用,且可能参与了脑低氧预适应的发生和发展.
关键词： 脑低氧预适应 蛋白激酶C 细胞外信号调节激酶1/2 免疫共沉淀 -
睾酮诱导大鼠心肌细胞肥大反应并上调ERK1/2蛋白表达
目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2蛋白)在睾酮对大鼠心肌肥大中的作用.方法 用差速贴壁法分离及纯化培养新生SD大鼠心肌细胞,以Bradford法测定心肌细胞蛋白质含量,同位素法分析~3H-亮氨酸(~3H-Leu)掺入,IBAS图像分析心肌细胞表面积,以免疫印迹法检测心肌细胞ERK1/2蛋白表达水平.结果 生理浓度的T作用于大鼠心肌细胞24 h后,细胞蛋白质含量、3~H-Leu掺入和细胞表面积均增加,其中以10~(-8) mol/L作用强.雄激素受体拮抗剂氟他胺(Flu)10~(-5) mol/L预处理2 h可抑制T诱导的心肌细胞蛋白质含虽的增加,而Flu单独作用对心肌细胞蛋白质含量无影响.ERK1/2信号通路的特异性抑制剂PD98059 50μmol/L预处理2 h,可抑制T诱导的心肌细胞~3H-Leu掺入的增加;10~(-8) mol/L T作用24 h使心肌细胞的ERK1/2的蛋白表达显著增加;10~(-5) mol/L Flu预处理2 h可逆转T诱导的心肌细胞ERK1/2蛋白表达的增加.结论 生理浓度的T可以诱导心肌细胞肥大反应,该作用可能由ERK1/2信号通路介导.T通过雄激素受体(AR)上调ERK1/2蛋白表达.
关键词： 睾酮 心肌细胞肥大 细胞外信号调节激酶1/2 信号传导 -
Edaravone对大鼠脑创伤后ERK1/2信号通路及神经细胞凋亡的影响
L-2蛋白的表达;TUNEL法标记神经细胞凋亡数.计算机图像分析系统进行定量分析.结果 与假手术组比较,创伤组中MDA含量(伤后6～72 h)、ERK1/2(p-ERK1/2)活性(伤后1～48 h)、BAX/BCL-2比值(伤后6～48 h)及凋亡的神经细胞数目(伤后6～72 h)显著增高(P<0.05);Edaravone干预显著缓解上述改变(P<0.05).结论 Edaravone可减少脑创伤后的神经细胞凋亡,其机制与其可清除氧自由基、抑制ERK1/2通路活化有关.
关键词： 脑创伤 依达拉奉 细胞外信号调节激酶1/2 细胞凋亡 -
ERK1/2和TGF-β1在自发性高血压大鼠心脏中的表达上调
目的 探讨自发性高血压大鼠(SHR)心脏细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的意义.方法 采用免疫组化和Western blot方法检测心脏ERK1/2和TGF-β1的表达.结果 在SHR8、SHR16、SHR20三个周龄组中,心肌间小动脉内皮细胞中的ERK1/2阳性率分别为15.38%、76.97%和72.72%,SHR16和SHR20组心肌间血管平滑肌细胞(VSMC)ERK1/2染色阳性率为5.49%和6.83%,均显著高于对照组(P＜0.05).在SHR16和SHR20组中ERK1/2蛋白含量明显高于对照组(P＜0.05);心脏中TGF-β1含量明显高于同周龄的SD大鼠(P＜0.05).心脏中ERK1/2和TGF-β1表达量与平均动脉血压正相关(P＜0.05).结论 在SHR心脏组织中TGF-β1表达增加并与ERK1/2相互作用,可能参与了心脏病变的形成.
关键词： 高血压 心脏 细胞外信号调节激酶1/2 转化生长因子β1 血管平滑肌细胞 -
Grp78表达对人肝细胞癌细胞外信号调节激酶1/2活性和表达的影响
目的 通过检测葡萄糖调节蛋白78(Grp78)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2在肝细胞癌手术切除组织中的表达,并在SMMC-7721细胞中干预Grp78的表达,探讨Grp78对ERK1/2激酶的调控作用. 方法 应用免疫组织化学方法(IHC)和免疫印迹法检测47例肝细胞癌手术切除组织样本中Grp78,ERK1/2的表达和ERK1/2磷酸化水平;在高表达Grp78的肝细胞癌细胞系SMMC-7721中,通过用小RNA干扰Grp78的表达来探讨Grp78表达水平,改变对ERK1/2活性及表达的影响. 结果 在肝细胞癌组织样本中,Grp78的表达情况与ERK1/2和磷酸化ERK1/2的表达明显呈正相关.在SMMC-7721细胞中Grp78高表达促进ERK1/2的磷酸化,应用RNA干扰特异性下调Grp78高表达细胞中Grp78水平可以抑制ERK1/2的磷酸化. 结论 Grp78参与调解ERK1/2信号通路,并且在肝细胞癌临床治疗方面可能成为潜在的治疗靶点.
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胰岛素样生长因子-1通过细胞外信号调节激酶1/2通路下调转录因子基本转录元件结合蛋白表达抗心肌细胞凋亡
目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠心肌细胞凋亡保护作用的基因调控机制.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,10nmol/L IGF-1刺激的同时,分别加入磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、细胞外信号调节激酶(ERK) 1/2和Raf-1 3条通路抑制剂(20 μmol/L),通过RT-PCR及Western blotting方法观察IGF-1调节基本转录元件结合蛋白(BTEB)的基因表达及其通路调控.100μmol/L H2O2处理诱导心肌细胞凋亡,通过DNA梯度分析、Annexin V-FITC/PI双染色法、Caspase-3活性测定、Hoechest33258染色法观察用BTEB特异性siRNA人为下调BTEB基因表达后对心肌细胞凋亡的影响.结果 大鼠心肌细胞经IGF-1刺激60min后,BTEB mRNA和蛋白表达均明显下降;与对照组相比,加入ERK1/2通路抑制剂PD98059组BTEB的mRNA和蛋白表达均明显增高(P＜0.01);H2O2诱导的大鼠心肌细胞于下调BTEB表达后,DNA片段化改善,心肌细胞凋亡率下降(P＜0.05),Caspase-3活性降低(P＜0.05),凋亡小体减少,与IGF-1的抗心肌细胞凋亡效果相似.结论 IGF-1可以通过ERK 1/2通路下调转录因子BTEB基因表达而发挥抗心肌细胞凋亡的作用.
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葡萄籽原花青素通过细胞外信号调节激酶1/2途径对放射性脑损伤大鼠海马区生长相关蛋白-43活性的影响
目的：观察葡萄籽原花青素(GSPE)对放射性脑损伤大鼠的防治作用，并分析可能的保护机制。方法72只3月龄雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(n=18)、模型组(n=18)、低剂量GSPE组(n=18)和高剂量GSPE组(n=18)。用直线加速器进行脑部照射22 Gy制作放射性脑损伤模型。采用穿梭箱实验检测大鼠学习能力；HE染色观察海马区神经细胞组织形态变化；RT-PCR法检测生长相关蛋白-43(GAP-43) mRNA表达，Western blotting检测磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达。结果与模型组比较，各GSPE组动物穿梭箱主动回避反应率显著升高(P<0.001)，被动回避潜伏期显著缩短(P<0.001)；海马区神经细胞结构损伤减轻；GAP-43 mRNA和磷酸化ERK1/2表达水平增高(P<0.001)。且高剂量GSPE组显著优于低剂量GSPE组(P<0.001)。模型组中GAP-43 mRNA表达水平与磷酸化ERK1/2水平呈正相关(r=0.764, P<0.001)；低剂量GSPE组和高剂量GSPE组中GAP-43 mRNA表达水平与磷酸化ERK1/2水平呈正相关(r=0.814,0.822, P<0.001)。结论 GSPE通过ERK1/2途径提高大鼠海马区GAP-43表达，发挥防治放射性脑损伤作用。
关键词： 放射性脑损伤 学习 生长相关蛋白-43 细胞外信号调节激酶1/2 大鼠 -
针康法对脑缺血大鼠神经功能和细胞外信号调节激酶1/2信号通路的影响
目的 探讨针康法对脑缺血大鼠神经功能预后和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响.方法 90只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入假手术组(n=18)、模型组(n=18)、针刺组(n=18)、康复组(n=18)及针康组(n=18),再分为术后3 d、7 d、14 d三个亚组(n=6).线栓法制备永久性局灶性脑缺血模型.假手术组和模型组不进行治疗,针刺组采用头穴丛刺针法治疗,康复组给予电动跑台训练,针康组采用针康法治疗.各时间点,采用改良神经损害严重程度评分进行评定,Western blotting法检测缺血半暗区皮层ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达.结果 术后各时间点,与模型组比较,各治疗组神经缺损评分降低(P<0.05);术后7 d、14 d,与针刺组、康复组比较,针康组评分降低(P<0.05).术后各时间点,与模型组比较,各治疗组p-ERK1/2蛋白表达增加(P<0.05),(p-ERK1/2)/(ERK1/2)增加(P<0.05);与针刺组、康复组比较,针康组p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),(p-ERK1/2)/(ERK1/2)增加(P<0.05).结论 针康法治疗可进一步改善脑缺血大鼠神经行为,可能与ERK1/2信号通路激活有关.
关键词： 脑缺血 针康法 神经功能 细胞外信号调节激酶1/2 大鼠 -
细胞外信号调节激酶在增生性瘢痕中表达与细胞增值的关系
目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1、2)传导通路对增生性瘢痕的影响.方法用免疫组化方法检测p-ERK和pCNA在增生瘢痕中的表达变化规律.结果 p-ERK和PCNA蛋白在病理性瘢痕中与非病理瘢痕、正常皮肤差异有显著性(P＜0.05).相关性分析有显著性(P＜0.05).结论病理性瘢痕的形成可能与激活ERK1/2信号传导通路,促进成纤维细胞增殖有关.
关键词： 瘢痕 细胞外信号调节激酶1/2 皮肤组织
