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湿颗粒法与直接压片生产的盐酸左氧氟沙星薄膜衣片超微结构分析
目的 考察两种不同方法 生产的盐酸左氧氟沙星薄膜衣片的超微结构.方法 用电子显微镜观察完全符合国家药品标准的两种盐酸後左氧氟沙星薄膜衣片(乐朗与可乐必妥).结果 乐朗的超微结构中可见多种形状、粒径为1～200μm的物质组成的团状混合物.而可乐必妥的超微结构是粒径100 nm以下的疏松、细匀颗粒,两者存在巨大差异.结论 导致两种片剂的差异原因在于我国传统片剂制备工艺(湿颗粒法)与直接压片工艺的巨大差距,而缩小这个差距的根本是改进我国的传统片剂生产工艺.
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前列腺结石患者结石中纳米细菌的培养和形态学鉴定
目的 分离、培养、鉴定纳米细菌(nanobacteria, NB),探索其在前列腺结石中的分布情况,分析其在前列腺结石发病中的作用.方法 手术中无菌收集前列腺结石患者的结石标本,经过稀释、过滤、离心处理后,用细胞培养的方法进行细菌培养,观察其生长情况.运用透射电镜、钙染色和革兰染色等手段观察其形态特征,采用单克隆抗体间接免疫荧光染色进行细菌鉴定.结果 ①培养3～4周后,对前列腺结石标本进行观察,发现部分培养管底部出现紧贴管壁生长的白色沉淀物.②钙染色和革兰染色观察可发现NB成簇分布.③单克隆抗体间接免疫荧光染色鉴定发现26例标本中存在着NB,阳性率为65.0%.④免疫荧光阳性标本透射电镜下观察,NB呈球状或球杆状,大小100～500 nm.结论 前列腺结石患者的结石中存在着NB的感染,表明NB与前列腺结石发病的关系密切.
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苦参碱对人肝癌细胞HepG2的细胞形态影响和相关增殖因素的变化
目的观察苦参碱作用于HepG2细胞后,光镜和电镜下细胞形态结构改变以及AFP、PCNA和分裂指数的变化.方法倒置显微镜下观察活细胞形态;光镜下观察Wright和苏丹Ⅲ染色的细胞形态和分裂指数;扫描和透射电镜观察细胞表面和内部超微结构改变;免疫组化和图像分析,检测AFP和PCNA.结果未用药细胞具有肿瘤细胞典型的形态特征,细胞的分裂指数为53.8‰,胞浆内未见透明颗粒和空泡,苏丹Ⅲ染色为阴性.免疫组化染色AFP和PCNA为阳性.苦参碱处理细胞后,细胞数量减少,散在生长,形态呈多形性,细胞浆内充满圆形、透明的颗粒.Wright染色,细胞浆呈空泡状,细胞核变小,核浆比减小,核仁变小、数目减少,细胞的分裂指数降低.苏丹Ⅲ染色,胞浆内有阳性的颗粒.电镜下,细胞表面微绒毛变短、变粗,甚至消失.核内异染色质增多,核仁变小、甚至消失.细胞浆内滑面内质网扩张,并有脂肪空泡和自噬小体形成.胞浆局部还出现了较多的板层状排列的粗面内质网.细胞核膜和胞膜均完整.AFP和PCNA量,随用药浓度和作用时间的增加而降低.结论苦参碱对HepG2细胞的生长增殖有抑制作用,使HepG2细胞的某些恶性增殖表型减弱或消失,反应了该细胞的恶性程度和侵袭力均减弱或消失.进一步说明了苦参碱可能是一种很好的抗癌药物.
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电镜样品取材的意义与应用
电子显微镜(简称电镜)在现代生物医学研究中起着越来越重要的作用,电镜技术是医学超微结构研究的重要手段[1].生物医学研究的对象多种多样,有组织、细胞、微生物及生物大分子等.而生物样品制备的特殊性使得制样过程耗时长而复杂,对取材、固定、脱水、包埋、切片等一系列程序提出了严格的要求,每一步都要特别认真、细致,一环紧扣一环,其中任何一个环节失误都会造成制样失败.取材、固定是电镜标本制作的第一步,而且需要送样者(大多不是电镜专业人员)亲自操作,出现问题多,如果做不好,后续程序将是徒劳.为提高超微结构研究的质量,现就送样中存在的一些问题及我室的体会总结如下,供有关研究者参考.
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风心病二尖瓣置换围手术期的TNF、CGRP含量变化及心肌细胞超微结构体视学定量分析
为了客观衡量心内直视术的心肌保护作用,选用风心二尖瓣置换术病例共20例,设立浅低温不停跳组和中低温停跳组,采用电子显微镜及免疫生化技术,研究血浆及心肌中肿瘤坏死因子(TNF)、降钙素基因相关肽(CGRP),心肌细胞超微结构及线粒体体视学定量分析等.结果显示:(1)血浆TNF、CGRP,除不停跳组血浆TNF在术后48h、7d外,两组内各时点与其术前比较,均有明显升高;两组间比较,不停跳组均低于停跳组.(2)心肌组织中TNF,两组内各时点与其术前比较,不停跳组仅术后有明显升高,而停跳组术中、术后均有明显增高;两组间比较,术中、术后含量不停跳组均低于停跳组.心肌组织中CGRP,两组内各时点与其术前比较,含量均有明显下降;两组间比较,术后含量不停跳组高于停跳组.(3)不停跳组心肌超微结构术前、术后无明显变化,而停跳组术后较术前心肌损害加重I～Ⅱ级.(4)面数密度和比表面停跳组较不停跳组明显下降,而平均直径明显增大.本研究说明,由于减少了损伤性细胞因子,不停跳组具有比停跳组更好的心肌保护效果.
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多种模式相结合在电镜技术教学中的体会
电镜技术是由电子显微镜及样品制备技术组成.电子显微镜是研究物质微观世界的有力工具,利用电子显微镜对样品进行观察和研究,不仅要有先进而精密的仪器,更要有制备样品所需的各种技术技巧,两者相辅相成、缺一不可.
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淫羊藿苷对阿尔茨海默病炎症模型大鼠神经细胞的保护作用
目的:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)炎症模型大鼠,观察淫羊藿苷 (Icariin ICA)对该模型大鼠学习记忆及超微结构的影响.方法:经八臂迷宫训练成功的45只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷30mg/kg组、淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组10mg/kg组,采用侧脑室注射LPS(10μl)制作实验性AD炎症模型,并八臂迷宫测验并记录其数据.迷宫测验完成后断头取脑海马组织.应用电镜观察大鼠海马组织CA1区神经细胞超微结构变化,用SPSS统计学软件进行统计学分析.结果:(1)侧脑室注射LPS(10μl)后对大鼠一般情况观察出现了行为异常.(2)八臂迷宫测试系统分析结果:制模后与对照组相比,其它各组大鼠总记忆错误(TE)、参考记忆错误(RME)、工作记忆错误(WME)明显增多,用淫羊藿苷治疗后与模型组比较,淫羊藿苷120mg/kg组和双氯芬酸组10mg/kg组大鼠的TE、RME、WME均明显减少,淫羊藿苷30mg/kg组错误选择次数无统计学意义.超微结构观察示:对照组、海马组织线粒体比较规则,淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组线粒体轻度受损,模型组海马神经细胞核固缩,核周隙扩张,甚至核膜结构不清,核形态极不规则.结论:侧脑室注射LPS(10μl)能成功复制AD炎症动物模型;淫羊藿苷120mg/kg组显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,淫羊藿苷对炎症模型大鼠海马超微结构有保护作用.
关键词： 淫羊藿苷 阿尔茨海默病炎症模型 电子显微镜 超微结构 -
钩吻素子体外抑制人结肠腺癌细胞生长并诱导其凋亡的实验研究
目的:运用细胞生物学方法探讨钩吻素子(Koumine,Kou)对人结肠腺癌细胞生长的作用,并从细胞凋亡的角度研究钩吻素子抗肿瘤机制.方法:将Kou以不同剂量和作用时间处理体外培养的人结肠腺癌Lovo细胞,用MTT法检测各孔的OD值,以此计算Kou对肿瘤细胞的抑制率及IC50,并绘制其量效及时效曲线;并利用普通光镜、荧光显微镜、电子显微镜、DNA琼脂糖电泳检测Kou诱发Lovo细胞凋亡情况并用流式细胞仪分析细胞周期.
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原子力显微镜与电子显微镜在再生医学领域的新应用与比较
本文分别介绍了原子力显微镜(AFM)、电子显微镜(EM)的发展状况和具体应用范围,并列举了它们在再生医学所涉及的材料科学和生命科学领域的一些新应用.通过系统地比较两种显微分析技术在工作条件、制样要求、分辨力等方面的优缺点,明确了各自的适用条件,为选择合适的显微分析方法进行再生医学领域的研究工作提供了指导.
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颅脑手术中清洗后回收血液质量的研究
目的 检验颅脑手术中血液回收机处理后回收血液的质量.方法 20名颅脑疾患择期手术患者,应用自体-2000型血液回收机回收术野出血,经抗凝、过滤、离心及清洗后回输.测定血液回收机对收集血的处理过程中血小板、白细胞、K+和游离血红蛋白的清除率.用扫描电子显微镜对5份清洗后的血样及5 U库存2周的红细胞悬液进行超微形态学检验,观察红细胞的形态.结果 储血罐内收集血的溶血率达到(8.57±0.35)%, 血液回收机的离心清洗过程中血小板、白细胞、K+和游离血红蛋白的清除率分别为:(85.4±7.3)%、(38.8±17.1)%、(90.4±4.4)%及(92.7±2.9)%.扫描电子显微镜下虽然可见回收血液中含有部分变形的红细胞,但红细胞的形态正常率仍达到(58.0±8.0)%.而库存2周的红细胞悬液中含有更多变形的红细胞(P<0.01).结论 在颅脑手术中收集的血液,溶血程度较重,但经血液回收机处理后,其质量较好.
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重建犬声带的电镜观察
目的研究犬声带切除术后的重建.方法将一侧声带膜部、喉室及小部分室带前下份连同内软骨膜一起切除.将其上下残留的喉内软组织松解、拉拢、相对缝合,使修复后的喉腔仍为粘膜所覆盖.结果在电子显微镜下观察,重建的声带由大量的胶原纤维、少量的弹性纤维及萎缩的肌肉构成.结论当病损仅限于声带和喉室时,切除肿瘤后可用残留的室带修复喉内创面,以获得较好的发音功能.
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肾球旁细胞瘤的临床病理观察
目的 探讨肾球旁细胞瘤的临床病理特征、诊断与鉴别诊断.方法 对于2012年11月21日就诊的1例肾球旁细胞瘤的临床表现、病理改变和超微结构改变进行观察分析并作文献复习.结果 患者临床表现为高血压、高肾素血症、高醛固酮血症和低血钾.左肾实质内见一巨大肿瘤,行左肾切除术.光学显微镜下见形态一致的多边形或圆形肿瘤细胞呈片状、巢团状或围血管生长,可见血管外皮瘤样构像;免疫组织化学呈CD34弥漫阳性,平滑肌肌动蛋白局灶阳性,广谱细胞角蛋白、上皮细胞膜抗原、S-100、人黑色素瘤特异性抗体、嗜铬素A、突触素均阴性;透射电子显微镜下可见特征性菱形晶体(前肾素颗粒),确诊为肾球旁细胞瘤.结论 肾球旁细胞瘤是少见的肾脏肿瘤,易误诊为其他肿瘤,知晓该病并熟悉其组织病理学和超微结构特征是正确诊断的关键.
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等离子高频电凝电切术在胃肠道息肉中的应用
目的 评价在胃肠镜下对胃肠道息肉行电凝电切的疗效.方法 对99例病检排除了恶变的胃肠道息肉行镜下电凝电切术.结果 99例患者,成功97例(无出血、穿孔等并发症)I术后创面少许渗血1例,经电凝后止血;迟发性出血1例,经内科保守治疗后止血.结论 等离子高频电凝电切术是一种安全、可靠且易于操作的介入治疗方法.
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染料木黄酮通过上调血红素氧合酶-1表达减缓野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压
目的 研究染料木黄酮对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织血红素氧合酶.1(heine oxygenase-1,HO-1)表达的影响,探讨其减缓肺动脉高压的可能机制.方法 40只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(n=10)、野百合碱组(n=10)、小剂量染料木黄酮治疗组(20 μg/kg;n=10)、大剂量染料木黄酮治疗组(80 μg/kg;n=10).监测血流动力学变化及通过电子显微镜观察肺小动脉结构重塑,Westernblot检测肺组织HO-1的表达.结果 染料木黄酮治疗组较野百合碱组大鼠平均肺动脉压降低(P＜0.01),右心肥厚指数下调(P＜0.01),大剂量组更显著(P＜0.01).染料木黄嗣治疗组较野百合碱组大鼠肺组织HO-1表达上调(P＜0.01),大剂量组更显著(P＜0.01).结论 染料木黄酮能减缓野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,可能与上调大鼠肺组织HO-1表达有关.
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Ⅲ级胎盘亚分级的显微结构观察及体视学分析
目的:探讨Ⅲ级胎盘超声亚分级显微结构改变.方法:利用光镜观察各亚级胎盘的组织显微结构形态变化,并用体视学方法进行组织计量学分析.运用电子显微镜观察各亚级胎盘的组织超微结构形态变化.结果:两组胎盘显微结构形态学上有明显变化,组织计量学分析发现血管合体膜数、合体结节数、纤维素样坏死、绒毛间隙距离、绒毛血管直径等指标两组胎盘有非常显著差异,P＜0.01.结论:ⅢA亚级胎盘和ⅢB亚级胎盘在组织学改变方面有明显差异,Ⅲ级胎盘超声亚分级有足够的组织学依据支持.
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浅谈电子显微镜的维修管理
电子显微镜作为一种综合性的大型精密仪器,是当代高科技的产物,是从事物质微观结构分析的有力工具,在各学科专业的科研领域以及医疗卫生事业中正日益得到广泛的应用.
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薄基底膜肾病临床和病理的相关性研究
目的 探讨薄基底膜肾病(TBMN)的临床表现和病理特点以及二者的相关性.方法 选取42例经肾穿刺病理检查确诊为TBMN的患者,对其临床及病理资料进行分析.结果 42例患者中,28例临床表现为单纯性血尿,6例血尿合并有少量蛋白尿,4例少量血尿合并有中等量蛋白尿,4例以肾病综合征为表现.肾组织光学显微镜检:42例患者中17例表现为肾小球系膜轻度增生,11例为局灶肾小球系膜增生,5例为毛细血管内增生,8例为肾小球轻微病变,1例为肾小球局灶硬化.免疫荧光检查:26例患者免疫荧光阴性,14例IgM±～+,2例IgM++.电子显微镜下42例患者肾小球基底膜均弥漫性变薄,厚度均＜ 250 nm.血尿、蛋白尿的严重程度与肾小球基底膜厚度呈负相关(r分别为-0.92、-0.98.P＜0.01)结论 TBMN临床上多表现为单纯性血尿,也可伴蛋白尿,少数以肾病综合征为表现.确诊有赖于肾活检电镜下肾小球基底膜厚度的测定,研究TBMN的临床特点及病理改变的相关性后发现,其血尿、蛋白尿的严重程度与肾小球基底膜厚度呈负相关,而病程、红细胞变形率与肾小球基底膜厚度无明显相关关系.
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对乙型肝炎病因病机的探讨
关于肝炎病因病机的起源,远在2000多年前的<索问@六元正纪大论>中就有"湿热相交”、"民当病疸”和"木郁达之”的记载.继后张仲景在<伤寒论>、<金匮要略>著作中对病因病机又作了发挥性的补充,从此形成一套较完整的辨证治疗肝病理论,它不但对指导当代的临床起了推动作用,而且为后人治疗研究肝病也奠定了理论基础.然而历代医家对病因仍存有不同的看法,有的认为是"湿热”;有的认为是"热毒”;有的认为是"疫毒”;有的认为是"胎毒”;有的认为是"肝郁”等,总认为它有较强的传染性.随着电子显微镜和分子生物技术的发展,到了20世纪70年代,由联合国病毒性肝病专家委员会正式公布了乙型肝炎抗原、抗体的名称和书写方法:HBV-乙型肝炎病毒,直径为42nm的双壳病毒,被称为戴恩氏颗粒(Dane),并指明了它的生态规律特性和危害人体的特殊作用,确定它是致成本病的病因,从此改变了以往对病因不确切的认识,同时也为疫毒传染的理论提供了根据.
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用梯度凝胶电泳方法检测LDL质粒大小不能用LDL-胆固醇/载脂蛋白B比值作评判
LDL质粒从大小、密度和组份三个方而均显示具有异质性.LDL质粒反映在大小方面的异质性已通过超速离心、密度梯度超速离心、梯度凝胶电脉(GGE)、高性能的凝胶过滤分析、动力光散射和电子显微镜等方法得到证实.在上述方法中.尽管GGE方法的提取过程比较复杂,但它是可靠的和应用广泛的.由于新近LDL-胆固醇(LDL-Chol)浓度与LDL-载脂蛋白B(LDL-apoB)浓度的比值被视为区分高载β脂蛋白血症和小而密集的LDL血症的一种决择性指标,因此,我们对采用GGE进行LDL颗粒大小的测定和采用LDL-Chol与LDL-apoB比值对LDL颗粒大小进行评判.对这两种不同的检测方法的相关性进行了研究.
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原发性肾小细胞癌1例报告及文献复习
目的 探讨原发性肾小细胞癌的病理诊断和临床病理特点.方法 对1例肾小细胞癌进行光镜、电镜观察和免疫组化标记并行相关文献复习.结果 结节状肿瘤位于肾下部近肾门处,瘤组织由短梭形与小圆形细胞构成,呈片巢状、小梁状排列.瘤细胞胞质较少,核深染,核分裂像多见.瘤组织浸润肾皮质、肾盂和肾门周围脂肪组织.肾门处与腹主动脉旁淋巴结可见转移.电镜见瘤细胞胞质内较多神经内分泌颗粒.免疫组化示多种上皮与神经内分泌标志物表达阳性,全身其他脏器未发现肿瘤.随访21个月无复发转移.结论 肾脏小细胞癌具有小细胞癌的一般病理形态学特征.依据光镜、电镜变化和免疫组化标记并除外转移,可确诊为肾原发性小细胞癌.
