首页 > 文献资料
-
无氧运动对大鼠骨骼肌肌浆网Na+,K+-ATP酶活性的影响
[目的]研究无氧运动对大鼠骨骼肌肌浆网Na+,K+-ATP酶活性的影响.[方法]参照BEDFORD TG标准,建立跑台运动训练及运动负荷大鼠运动模型.将16只大鼠随机分为两组:正常对照组(n=8)和无氧运动组(n=8),训练周期为4周.超速离心法提取大鼠骨骼肌肌浆网,测定肌浆网Na+,K+-ATP酶的活性.[结果]无氧运动组Na+,K+-ATP酶的活性较正常对照组显著升高(P<0.05).[结论]实验结果表明,较短时间(4周)的无氧运动可保护骨骼肌肌浆网Na+,K+-ATP酶的活性.
-
急性腹膜炎对大鼠罗库溴铵腹肌松弛效应和肌浆网功能的影响
目的：评价急性腹膜炎对大鼠罗库溴铵腹肌松弛效应和肌浆网功能的影响。方法清洁级雄性SD大鼠36只，体重220～250 g。采用随机数字表法分为2组：对照组（ C组，n＝12）和急性腹膜炎组（ P组，n＝24）。 P组采用胃穿孔的方法制备大鼠急性腹膜炎模型，于术后1和2 h时测定腹腔压力随气体容积的变化情况，眼眶静脉采血，测定血清IL?6、TNF?α和IL?13浓度，随后尾静脉注射罗库溴铵3．5 mg∕kg，测定给药后1、5和10 min时腹腔压力。取腹直肌条进行匀浆，采用Fura?2荧光法测定钙离子浓度动态变化，计算肌浆网钙大摄取和释放率。结果与C组比较，P组术后2 h时血清IL?6和TNF?α浓度升高，术后1和2 h时腹腔压力升高，给予肌松药后1、5和10 min时腹腔压力升高；肌浆网钙大摄取率和摄取量降低（ P＜0．01）。结论急性腹膜炎降低大鼠罗库溴铵的腹肌松弛效应，可能与肌浆网钙的摄取功能下降有关。
-
利多卡因对大鼠顿抑心肌ATP酶活性及丙二醛含量的影响
心肌顿抑是心肌缺血再灌注损伤的一种重要表现形式,其发生与氧自由基和钙超载的产生有关.通过观察利多卡因对顿抑心肌组织丙二醛(MDA)含量、肌浆网(SR)Ca2+-ATP酶及细胞膜Na+,K+-ATP酶活性的影响,探讨利多卡因对大鼠顿抑心肌是否具有保护作用.
-
可疑恶性高热患者二例的基因表达特点
恶性高热(MH)是一种家族性显性遗传病,其发病机制与肌浆网内Ca2+过度释放有关,临床上以机体高代谢状态为主要表现,包括体温升高、高二氧化碳血症、重度酸中毒、心动过速等[1].目前对其发作时的钙离子调节及后续的病理生理改变尚不清楚,故拟采用基因芯片技术对MH进行研究,报道如下.
-
维拉帕米对静态负荷骨骼肌肌浆网功能的影响
为观察维拉帕米对静态负荷骨骼肌损伤的干预效果,选取雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组、负荷组、干预组,每组8只.大鼠经腹腔注射苯巴比妥钠麻醉,剥离其左下肢比目鱼肌,对照组不施加负荷,负荷组和干预组游离远端后施加100 g砝码,持续1.5h.干预组在实验前0.5h,左下肢肌注维拉帕米.检测血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量及骨骼肌肌浆网Ca2+浓度、Ca2+-Mg2+-ATPase活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量变化.结果显示,血清CK含量负荷组与对照组比较显著增加(P＜0.01);肌浆网Ca2+浓度、Ca2+-Mg2+-ATPase活力干预组与负荷组比较显著增加(P＜0.05,P＜0.01);肌浆网MDA含量干预组与负荷组比较显著下降(P＜0.05);血清LDH含量负荷组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).提示长时间静态负荷作用于骨骼肌,可导致骨骼肌损伤,维拉帕米可减轻肌浆网Ca2+摄入障碍及氧化损伤.
-
耐力训练后减量训练模型大鼠骨骼肌肌浆网Ca2+的转运功能
背景:运动训练对骨骼肌超微结构的影响是运动医学中定量化的细胞生物学研究热点.目的:观察大鼠耐力训练后减量训练模型骨骼肌肌浆网的钙离子转运功能的变化.设计、时间及地点:随机对照动物实验,动物训练于2006-04/07在西安体育学院进行,生化实验于2006-07在西安交通大学生物实验中心完成.材料:2月龄雄性健康SD大鼠39只,体质量(220±20)g.方法:5只SD大鼠用于预实验.其余大鼠随机分为正常对照组8只、耐力训练组8只、耐力减训组18只.耐力训练组和耐力减训组递增训练周期均为6周,6周后将耐力减训组根据减训周期随机分为耐力减训2周,4周,6周组.对训练大鼠采用小动物跑台进行递增耐力负荷训练,减训组采用逐渐减少运动强度训练.主要观察指标:使片j酶偶联法测定大鼠腓肠肌肌浆网Ca2+-ATPase的活性;采用荧光分光光度计测量肌浆网大Ca2+摄取量和释放量.结果:①肌浆网SRCa2+-ATP ase活性:耐力训练组较正常对照组显著性增加(P<0.01);耐力减训2周组与耐力训练组比较基本不变(P>0.05):耐力减训4周,6周组较耐力训练组下降(P<0.01).②肌浆网SR大Ca2+摄取和释放率:耐力训练组显著性增加(P<0.01);耐力减训2周组与耐力训练组比较差异无显著性意义(P>0.05);耐力减训4周,6周组下降显著(P<0.01).结论:耐力训练6周后,SD大鼠骨骼肌肌浆网Ca2+ATPase的活性增强,钙离子的摄取和释放率增加.减量训练2周骨骼肌肌浆网Ca2+ATPase的活性、钙离子摄取和释放率下降不明显.4周更长时间骨骼肌肌浆网Ca2+ATPase的活性及钙离子摄取和释放率下降明显.
-
钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠慢性心力衰竭
目的:观察肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心功能的影响.方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系实验室完成.选取4周龄清洁级雄性SD大鼠作为骨髓供体.雌性SD大鼠作为细胞移植、基因治疗受体,随机数字表法分为4组:肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组(n=7)、骨髓干细胞移植治疗组(n=7)、肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植组(n=8)、腺病毒空载体对照组(n=7).结扎左冠状动脉制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型,每组进行相应的基因治疗和细胞移植.治疗后21 d,采用苏木精-伊红染色和MASSON染色评价心脏形态及结构变化,组织多普勒评价各组心功能.并检测肌浆网钙离子ATP酶2a基因和蛋白在宿主心脏的表达.结果:29只雌性大鼠均进入结果分析.①与腺病毒空载体对照组大鼠相比,骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠心室腔明显减小.MASSON染色显示,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠蓝包的胶原纤维染色区域减少,红色的肌纤维染色区域增多.②肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组、骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度均较腺病毒空载体对照组显著升高l左室前壁:(0.58±0.03),(0.67±0.02),(0.78±0.05),(0.31±0.02)cm/s;(0.81±0.04),(1.26±0.04),(1.39±0.05),(0.40±0.01)cm/s;室间隔:(0.60±0.05),(1.00±0.08),(1.33±0.04),(0.40±0.01)cm/s;(0.70±0.04),(1.28±0.05),(1.57±0.03),(0.44±0.03)cm/s,P＜0.001].与肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组相比,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度升高(P＜0.001).③肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组心肌内肌浆网钙离子ATP酶2a mRNA表达强度明显高于骨髓干细胞移植治疗组和腺病毒空载体对照组.结论:肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植能显著改善慢性缺血性心力衰竭大鼠心脏的收缩和舒张功能.
-
镍钛合金丝对大鼠心肌细胞肌浆网钙泵及雷尼丁受体的影响
背景：虽然镍钛合金封堵器置入治疗先天性心脏病具有较好的临床效果，但后期发生心律失常并发症的概率较大。目的：观察镍钛合金对大鼠心肌细胞肌浆网钙泵及雷尼丁受体表达的影响。方法：取30只SD大鼠，随机均分为2组，实验组于心尖部植入镍钛合金丝，对照组不做任何处理特殊处理，术后1，3，6个月取材，采用RT-PCR检测心肌细胞肌浆网钙泵与雷尼丁受体基因的表达，采用免疫组化检测心肌细胞肌浆网钙泵及雷尼丁受体蛋白的表达，采用苏木精-伊红染色检测炎症反应情况。结果与结论：实验组镍钛合金植入大鼠心肌后，炎症细胞浸润，引发炎症反应，伴纤维组织增生，随着植入时间延长，炎症反应逐渐消失；对照组未见炎细胞浸润。两组术后不同时间点的心肌细胞肌浆网钙泵、雷尼丁受体基因表达比较差异无显著性意义，相应的蛋白表达比较差异也无显著性意义。表明镍钛合金丝不影响心肌细胞肌浆网钙泵、雷尼丁受体的表达，提示镍钛合金封堵器相关心律失常可能与肌浆网钙泵、雷尼丁受体蛋白表达异常机制关系不大。
-
静力负荷对大鼠骨骼肌线粒体及肌浆网功能的影响
目的:了解静力负荷作用下对骨骼肌线粒体及肌浆网功能的影响.方法:选择16只健康雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、负荷组,每组8只.将大鼠麻醉后游离其左下肢比目鱼肌远端,负荷组施加100 g负荷,持续时间为90 min.在4℃条件下,9 000 r/min离心20 min分离比目鱼肌线粒体;40 000 r/min离心15 min,分离肌浆网,分别检测骨骼肌线粒体及肌浆网Ca2+浓度、Ca2+ -ATPase活性和丙二醛(malondialchehyche,MDA)水平.结果:负荷组与对照组比较,线粒体Ca2+浓度增加111.11％,Ca2+ -ATPase活力下降25.88％,MDA含量增加188.57％,差异均有显著性(P＜0.01);肌浆网Ca2+浓度下降75.89％,Ca2+ -ATPase活力下降61.49％,MDA含量增加122.86％,差异均有显著性(P＜0.01);结论:静力负荷可致大鼠骨骼肌线粒体钙超载和肌浆网摄钙能力下降,肌浆网、线粒体膜Ca2+ - ATPase活力下降、MDA增多.
-
以钙调蛋白为标靶的心力衰竭分子靶向治疗
心力衰竭时,心肌细胞肌浆网中C2+循环异常.在使用心力衰竭动物模型进行的研究中,通过病毒栽体导入基因,纠正细胞内Ca2+循环异常,无论心力衰竭的病因是什么,心力衰竭都会得到明显改善.值得注意的是这种治疗的分子标靶是肌浆网上的钙调蛋白.本文以心力衰竭治疗的分子标靶--钙调蛋白为焦点进行阐述.
-
大鼠 H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型肌浆网钙调控相关蛋白表达及当归补血汤的干预作用
目的：建立缺氧/复氧大鼠 H9c2心肌细胞损伤模型，观察心肌细胞肌浆网钙调控相关蛋白表达及当归补血汤对 H9c2细胞缺氧/复氧损伤钙超载的影响。方法 JC-1染色流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位， Fluo-3 AM 钙离子荧光探针检测细胞内钙离子浓度，RT-PCR 荧光相对定量检测大鼠心肌肌浆网 Ca 转运 ATP酶（SERCA2a）、L 型钙通道（CAV1.3）、兰尼碱受体（RyR1，RyR2）、受磷蛋白（PLB）、肌集钙蛋白（ CASQ）的mRNA 表达水平。结果与正常对照组比较，模型组细胞早期凋亡显著增加（P ＜0.05），细胞内钙离子浓度增加明显（P ＜0.05），CAV1.3mRNA 表达水平显著升高（P ＜0.05），RyR1和 CASQmRNA 表达明显降低（P ＜0.05）。SERCA2a 和 PLB mRNA 表达水平亦降低但差异无统计学意义。当归补血汤干预后，与模型组比较，能够显著降低复氧损伤细胞的早期凋亡率（ P ＜0.05），细胞内钙离子浓度降低，差异具有统计学意义（P ＜0.05）。SERCA2a 和 CASQ mRNA 水平显著增加（P ＜0.05），PLB 和 RyR1 mRNA 虽有不同程度的增加， CAV1.3mRNA 水平降低，但差异均无统计学意义（P ＞0.05）。结论 H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤后出现明显的钙超载及肌浆网钙调节蛋白调节紊乱现象，当归补血汤能够通过升高肌浆网钙调节蛋白 SERCA2a 和CASQ mRNA 的表达，减轻复氧后钙超载，降低复氧损伤 H9c2心肌细胞早期凋亡率。
-
慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体及集钙蛋白的表达
目的:研究慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体(RyR2)及其调节蛋白集钙蛋白的表达,探讨心衰心肌细胞内钙容量降低的机制.方法:雄性SD大鼠被随机分为心衰组和假手术组,运用激光扫描共聚焦显微镜、透射电子显微镜、免疫印迹等方法研究2组大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量、心肌细胞超微结构及心肌细胞内肌浆网钙释放通道RyR2和其调节蛋白集钙蛋白表达的变化.结果:慢性心衰大鼠心功能左心室舒张末期压力、左室压力大上升速率均显著低于假手术组.假手术组大鼠心肌细胞的肌小节完整,肌丝排列整齐,线粒体结构正常;心衰组大鼠部分心肌细胞肌丝溶解,线粒体肿胀,嵴断裂.慢性心衰大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量显著低于假手术组.慢性心衰大鼠心肌细胞内RyR2的表达量无明显变化,集钙蛋白表达明显下降.结论:慢性心衰大鼠心肌细胞内集钙蛋白表达下调,可能是导致心肌细胞肌浆网钙容量减少的原因之一.
-
福辛普利对阿霉素中毒心肌的保护作用
目的探讨阿霉素对心肌损伤的机制及福辛普利的防治作用.方法采用大鼠慢性阿霉素中毒模型,并随机分为对照组、模型组与福辛普利组.测定心肌钙含量,心肌SRCa2+-ATP酶活性、心肌ATⅡ和脂质过氧化指标.结果阿霉素可促使心肌脂质过氧化损伤,抑制心肌SRCa2+-ATP酶活性,并激活心肌局部RAS,使ATⅡ生成增多,从而导致细胞内钙超负荷;福辛普利可拮抗上述途径介导的阿霉素心肌损伤.结论阿霉素对心肌毒害的机制与脂质过氧化损伤和细胞内钙超负荷有关;福辛普利能抗脂质过氧化损伤及提高心肌SRCa2+-ATP酶活性,对防治阿霉素诱导的心肌损伤有一定作用.
-
心力衰竭家兔心肌肌浆网钙回摄功能的异常及其影响因素
本文旨在探讨心力衰竭家兔心肌肌浆网钙回摄功能的异常及其影响因素和可能的机制.用主动脉破瓣术加腹主动脉缩窄术造心衰模型,用钙离子荧光成像仪检测心肌肌浆网钙回摄功能,用无机磷酸根法测定心肌肌浆网钙泵的活性,用Western blot检测各组心肌组织中肌浆网钙泵(SERCA2a)、受磷蛋白(PLB)、16位丝氨酸磷酸化-受磷蛋白(PLB-Ser16)、17位苏氨酸磷酸化-受磷蛋白(PLB-Thr17)、Ca2-/钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ)、蛋白激酶A(PKA)和蛋白磷脂酶(PP1α)的蛋白表达,用γ32p底物掺入法测定CaMKⅡ、PKA的活性.结果显示,与假手术组相比,心衰组钙回摄量显著下降(P＜0.01),SERCA2a在心肌中的表达量和活性均显著下降(P＜0.05),PLB的表达水平及其磷酸化位点(Ser16、Thr17)的磷酸化状态明显降低(P＜0.05),且PKA和CaMKⅡ的表达及活性均明显升高(P＜ 0.05或P＜0.01),PP1α的表达量显著升高(P＜0.05).以上结果证实心衰家兔模型心肌肌浆网钙回摄功能的异常与SERCA2a的表达活性、PLB及其磷酸化水平均显著下降有关,提示PLB的两个磷酸化位点(Ser16、Thr17)可能共同参与心衰家兔心肌肌浆网钙泵活性的调节.
-
兔收缩性和舒张性心衰模型的心功能及心肌钙调节相关蛋白表达和活性比较
本文旨在探讨兔收缩性心衰(systolic heart failure,SHF)和舒张性心衰(diastolic heart failure,DHF)模型之间的心功能及心肌钙调节相关蛋白表达和活性的差异.选取新西兰白兔,随机分为3组:DHF组(行腹主动脉缩窄术)、SHF组(行腹主动脉缩窄术联合主动脉瓣毁损术)、假手术组(行假手术).通过超声心动图和血流动力学检查心功能的改变,RT-PCR检测肌浆网钙泵(SERCA2a)和受磷蛋白(PLB)mRNA水平的表达,Western blot检测SERCA2a、PLB、16位丝氨酸磷酸化-PLB(pSer-16-PLB)、蛋白激酶A(PKA)蛋白水平的表达,并确定PLB的磷酸化水平,无机磷酸根法检测肌浆网钙泵(SERCA2a)的活性,γ-~(32)P掺入法检测PKA的活性.结果显示,与假手术组相比,DHF组左室壁厚度明显增加,舒张功能显著下降,左室舒张末压力显著升高;而SHF组左室腔明显增大,收缩功能显著下降,左室舒张末压力也显著升高(P<0.05或P<0.01).与假手术组相比,DHF组和SHF组SERCA2a的表达均明显下降(P<0.05),PKA的表达和活性均显著升高(P<0.05或P<0.01),两心衰组之间无显著差异.SHF组总PLB、pSer-16-PLB蛋白表达量及其磷酸化水平和SERCA2a活性均较假手术组和DHF组明显降低(P<0.05或P<0.01):而与假手术组相比较,DHF组总PLB、pSer-16-PLB蛋白表达量无明显差异,但其PLB的磷酸化水平和SERCA2a活性明显升高(P<0.01).以上结果表明本实验成功复制出两种不同的心衰模型,且两者的部分钙调节蛋白存在着表达和活性的差异.
-
白细胞介素-2对大鼠心肌Ca2+ATPase和Na+ /K+ATPase的影响
为了探讨IL-2对心肌细胞内钙影响的可能机制, 用光学法检测心肌肌浆网Ca2+ATPase的活性, 以及细胞膜Ca2+ATPase和Na+/K+ATPase的活性.结果: (1)用IL-2 (10、 40、 200、 800 U/ml)灌流心脏后, 其肌浆网Ca2+ ATPase的活性随IL-2浓度的升高而增强; (2)在ATP浓度为0.1～4 mmol/L时, Ca2+ATPase的活性随ATP浓度的升高而增强, 由IL-2 (200 U/ml)灌流后的心脏获得肌浆网(SR), 其Ca2+ATPase的活性对ATP的反应强于对照组; (3)在[Ca2+]为1～40 μmol/L时, 心脏SR Ca2+ATPase的活性随[Ca2+]增加而增强, 而IL-2灌流心脏后分离的SR, 其Ca2+ATPase活性在[Ca2+]升高时没有明显改变; (4)用nor-BNI (10 nmol/L) 预处理5 min后, IL-2 (200 U/ml)灌流后不再使SR Ca2+ATPase的活性增强; (5)用PTX (5 mg/L)预处理后, IL-2对SR Ca2+ATPase的影响减弱; (6)用磷脂酶C (PLC)抑制剂U73122 (5 μmol/L)处理后, IL-2不再使SR Ca2+ATPase活性增高; (7) 用IL-2直接处理从正常大鼠分离的SR后, 对SR Ca2+ATPase活性无明显影响; (8)IL-2灌流后, 对心肌细胞膜Ca2+ATPase和Na+/K+ ATPase活性没有显著影响.上述结果表明, IL-2灌流心脏后使心肌肌浆网Ca2+ATPase的活性增加, 心肌细胞膜上的κ-阿片受体及其下游的G蛋白和PLC介导了IL-2的作用.尽管IL-2提高SR Ca2+ ATPase对ATP的反应性, 但却抑制SR Ca2+ ATPase对钙离子的敏感性.IL-2对心肌细胞膜Ca2+ATPase和Na+/K+ ATPase的活性无明显影响.
-
肾上腺髓质素对大鼠损伤性心肌肌浆网功能的改善
通过观察下述五个指标, 评价肾上腺髓质素(adrenomedullin, Adm)对大鼠损伤性心肌肌浆网功能的改善程度: 左心室压力大变化速率(±dp/dtmax)、肌浆网钙摄取和释放及钙泵活性.皮下注射异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO, 69 μmol/kg体重)制备大鼠心肌损伤坏死模型.摘取心脏后用Adm 灌流, 观察左心室压力大变化速率(±dp/dtmax); 制备并提纯心肌肌浆网(sarcoplasmic reticulum, SR)膜, 测定SR Ca2+摄取和释放速率、 SR 钙泵活性和钙通道蛋白～3H-ryanodine受体的大结合量.结果发现, 5×10-5 mol/L Adm灌流能使ISO损伤的大鼠心脏左室±dp/dtmax分别增加16.9% (2?135±281 vs 1?980±302)和29.2% (1?375±267 vs 1?064±355, 均P<0.05); SR Ca2+摄取和释放率分别增加23.0% (15.0±1.4 vs 12.2±1.2)和43.5% (6.6±1.0 vs 4.6±0.6, 均P<0.01); SR Ca2+-ATPase活性和～3H-ryanodine受体大结合量(Bmax)分别增加24.2% (P<0.01) 和42.2%(P<0.05).提示Adm对ISO诱导的大鼠心肌损伤具有保护作用, 其机制可能与Adm增加SR Ca2+-ATPase活性、增加～3H-ryanodine所致SR Ca2+ 摄取和释放升高有关.外源性给予Adm对损伤心肌可能具有临床治疗作用.
关键词： 肾上腺髓质素 肌浆网 钙离子摄取 钙离子释放 ～3H-ryanodine -
败血症大鼠心肌核被膜和肌浆网ryanodine受体的变化
为观察败血症时心肌肌浆网(SR)和核被膜(NE)的ryanodine受体的变化,采用结扎及穿刺盲肠(CLP)制作败血症动物模型,用密度梯度离心分离SR和NE,用放射配体结合法研究ryanodine受体的特征.结果表明,大鼠早期败血症(CLP后9h)时,SR的ryanodine受体的大结合(Bmax)增加23%,NE的ryanodine受体的Bmax则增加1倍,二者比值降低39%(P<0.01); 在晚期败血症(CLP后18h)时,SR ryanodine受体的Bmax降低了38%,NE的ryanodine受体的Bmax增加1.6倍,二者比值降低76%; SR和NE ryanodine受体的离解常数无显著改变.败血症时,SR ryanodine受体早期上调,晚期下调,而NE ryanodine受体均上调,这些变化可能与休克时相有关.
关键词： 败血症 肌浆网 核被膜 Ryanodine受体 -
骨骼肌型ryanodine受体放射配基分析法的建立
目的探讨骨骼肌型ryanodine受体(RyR1)放射配基分析法的建立及适宜条件.方法蔗糖梯度离心提取骨骼肌肌浆网膜蛋白质组分,用3H-ryanodine进行放射配基结合实验,观察RyR1与3H-ryanodine结合的适宜条件.结果①37 ℃恒温水浴下,0～60 min内,3H-ryanodine与骨骼肌肌浆网膜蛋白质的结合量迅速增加,90 min时基本达平衡,90～120 min内无明显变化;②3H-ryanodine在1～30 nmol*L-1,匀浆蛋白质质量浓度为0.4～1.0 g*L-1范围内,3H-ryanodine与RyR1结合的效果佳.结论用3H-ryanodine在适宜的条件下可建立RyR1放射配基分析法.
-
肌浆网钙调节蛋白在心肌肥厚病理中的作用
目的:探讨心肌肌浆网钙调节蛋白功能变化在高血压左心室肥厚病理中的作用.方法:用自发性高血压大鼠(SHR)制成左心室肥厚模型,以[3H]ryanodine为放射配基、p-硝基苯酰磷酸(PNPP)为底物分别测定左心室肌浆网ryanodine受体密度及钙ATP酶活力的改变.结果:(1)SHR左心室肥厚时,ryanodine受体Bmax值比对照组(WKY组)升高(P<0.01),亲和常数(Kd)无变化;钙ATP酶活力下降(P<0.01).(2)与SHR组相比,SHR培哚普利治疗组ryanodine受体Bmax下降(P<0.05),钙ATP酶活力上升(P<0.05).结论:高血压左心室肥厚与血管紧张素Ⅱ介导的肌浆网钙调节蛋白功能变化密切相关.
