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微波消解-原子荧光光谱法测定生物样品中微量汞
目的 建立生物样品中微量汞的原子荧光光谱测定方法.方法 采取微波消解,氢化物发生-原子荧光光谱对生物样品中汞进行测定.结果 线性范围为0~2.00 μg/L,相关系数为0.999 8,方法检出限为0.023 μg/L,平均回收率在96.40%~99.82%,相对标准偏差为1.23%~1.59%.结论 本测定方法具有检出限低、灵敏度高、简便、快速、准确、线性范围宽等优点,能满足职业中毒调查中准确测定生物样品中微量汞的要求.
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生物样品前处理技术在药动学研究中的应用进展
生物样品前处理技术是药动学研究过程中重要、 困难和繁琐的步骤,选择合适的样品前处理技术是进行药动学研究的关键环节.本文综述了近年来药动学研究中广泛使用的样品前处理技术及其特点,包括蛋白沉淀、 液液萃取、 液相微萃取、 固相萃取、 固相微萃取、 微透析、 分子印迹、 柱切换、 超临界流体萃取.目前,样品前处理的新方法及新技术不断出现,而且正向着简便化、 自动化、 超灵敏化以及样品、 试剂微量化发展.
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微阵列技术(基因芯片)在毒理学研究中的应用
1 概述微阵列技术(Microarray Technologies)属于生物芯片的范畴.生物芯片是20世纪90年代中期发展起来的一项尖端技术,该技术采用光导原位合成或微量点样等方法,将大量生物大分子如cDNA、蛋白、多肽、组织、细胞等生物样品有序地固化在玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体的表面,组成密集的二维分子阵列,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定的仪器比如激光共聚焦扫描或电荷偶联摄影像机对杂交信号的强度进行快速分析,通过检测杂交信号的强弱来判断样品中靶分子的数量.由于常用玻片/硅片作为固相支持物,且在制备过程模拟计算机芯片的制备技术,所以又称之为生物芯片技术.
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儿科临床药师在治疗药物监测中的作用
治疗药物监测(Therapeutic Drug Monitoring,TDM)是近30年来形成的一门临床医学分支学科,也是临床药理学研究的重要内容之一.其通过运用各种灵敏的现代分析测定手段,定量分析生物样品(特别是患者用药后血浆或其它体液)中药物或其代谢产物的浓度.
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固相萃取技术在核苷类逆转录酶抑制剂定量分析研究中的应用概况
固相萃取(Solid-phase extraction,SPE)是近20年来迅速发展起来的一种生物样本预处理技术,是以液相色谱分离机制为基础建立的分离纯化方法.由于生物样品干扰成分较多且其中药物浓度多数较低,应用高效液相色谱(HPLC)和液相色谱/质谱联用(LC/MS)法往往无法实现样品的直接测定分析.
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痕量砷的检测方法
近年来,痕量元素的检测被广泛应用于生物样品(血液、组织等)、环境(大气、水样等)、矿产、农业(土壤、农作物等)及植物中药等的研究中,其中也包括与人类密切相关的砷( As)及其化合物的定量检测.砷是生物体的必需微量元素之一,微量有抑制氧化、促进同化的作用;摄入过量则会导致中毒.以 As2O3为例,其毒性主要表现在通过与细胞内- SH结合而抑制酶的活性. 本文将着重报道近几年来痕量砷的检测方法的进展.
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毛细管电泳应用于体内药物分析的富集技术
近几年来,毛细管电泳(CE)得到了快速发展,几乎已包括了板电泳与高效液相色谱的所有分离对象,这主要归功于它可提供比高效液相色谱高两三个数量级的分离效率,尤其是分析复杂的生物样品或样品量有限时。但 100μ m内径以下的毛细管柱的采用却使其浓度检测灵敏度受到限制,采用通用型紫外线检测器时一般仅可达 10-6mol/L,比高效液相色谱低一两个数量级,使其在许多实际应用特别是在体内药物分析中远远不能满足要求。由于样品负荷小,进样量一般只有几十纳升,所以对检测器的灵敏度要求较高。
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基因芯片及应用前景
1 基本概念基因芯片(gene chip)也叫DNA芯片、DNA微阵列(DNAmicroarray),是指采用原位合成(in situ synthesis)或显微打印手段,将数以万计的DNA探针固化于支持物表面上,产生二维DNA探针阵列,然后与标记的样品进行杂交,通过检测交信号来实现对生物样品快速、并行、高效地检测或医学诊断,由于常用硅芯片作为固相支持物,且在制备过程运用了计算机芯片的制备技术,所以称之为基因芯片技术.
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基于修饰碳量子点的铜离子荧光生物传感平台构建
目的 构建基于氨基硫脲修饰碳量子点测定生物样品中铜离子的荧光探针.方法 通过化学反应将氨基硫脲修饰到碳量子点表面,修饰后的碳量子点其荧光可以被铜离子猝灭,根据加入铜离子前后碳量子点荧光强度的变化可测定样品中的铜离子.结果 相对于其他金属离子,该探针对Cu2+有特殊选择性,Cu2+可使其荧光大猝灭率达68.7%.且当Cu2+浓度在0~0.40μmol/L范围内时,浓度与荧光强度的变化值呈良好线性关系,检测限为3.47 nmol/L.将其用于人发及血液中铜离子检测,测定结果和原子吸收分光光度法结果差异无统计学意义.加标回收率为94.7%~ 103.7%,RSD <2.9%.结论 该方法具有绿色、操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、无需大型仪器等优点,适用于生物样品中铜离子的测定.
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固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法测定生物样品中8种杀鼠剂
目的 建立生物样品中鼠立死、杀鼠酮、杀鼠醚、杀鼠灵、氯杀鼠灵、鼠得克、溴敌隆和溴鼠灵8种杀鼠剂的固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱测定方法.方法 血样经乙腈提取,尿样加水稀释后,采用MAX固相萃取柱进行净化,以BEH C18 (2.1 mm× 100 mm,1.7 μm)色谱柱分离,在电喷雾离子化多反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法定量.结果 8种杀鼠剂在0.5-50.0 μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.999,定量下限为0.18-1.00 μg/L.低、中、高3个加标水平下,全血和尿液中8种杀鼠剂的平均回收率分别在73.3%-106.5%和70.7% ~112.5%之间,相对标准偏差分别为0.8%~4.9%和0.8% ~8.5%.结论 该方法简便、灵敏度高、定量准确,适用于中毒生物样品中杀鼠剂的定性定量分析.
关键词: 超高效液相色谱-串联质谱法 杀鼠剂 生物样品 固相萃取 -
气相色谱法测定生物样品中的甲醇
目的 建立生物样品中甲醇的气相色谱测定方法.方法 取生物样品于顶空瓶中,加入氯化钠、水,在60℃水浴气-液平衡20 min后,气相色谱法测定,外标法定量.结果 在0.10 mg~1.00 mg样品添加水平范围内,方法的回收率在94.7% ~ 102%,在不同样品测定中,方法的相对标准偏差为3.5% ~6.3%.结论 该方法操作简便,稳定可靠,定量准确,适用于生物样品中甲醇的测定.
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蛋白酶活性检定及其在特定基质1D与2D凝胶中的特性:一种生物样品中分离、鉴定新的活性型蛋白酶的方法
The emergence of bacterial pathogen resistance to common antibiotics strongly supports the necessity to develop alternative mechanisms for combating drug-resistant forms of these infective organisms. Currently, few pharmaceutical companies have attempted to investigate the possibility of interrupting metabolic pathways other than those that are known to be involved in cell wall biosynthesis. Bacterial proteases have been showed to play an important role during infection and their inhibitors can retard the growth, proliferation and invasion of bacterial pathogens. To separate and identify these proteases, we have developed a specific, sensitive assay in SDS-polyacrylamide gels after 2D electrophoresis. This method allows simultaneous determination of protease cleavage specificity, molecular weight, isoelectric point, and if necessary, amino acid sequencing.
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生物样品中普鲁托品的HPLC测定方法和普鲁托品在大鼠体内药代动力学
本文建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定大鼠血浆、尿、粪、肝组织匀浆中药物浓度的方法.流动相为甲醇、水和10%冰醋酸,以C18柱分离,紫外检测波长为285nm,生物样品在碱性条件下经两次乙醚处理可获得良好分离.血浆样品低检测浓度为
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群体病例管理数据库的开发研究——含样品管理的新型医学病例信息管理系统
针对当前病例临床信息与样品管理存在交叉需求的空缺,开发一种将临床信息与样品管理相结合的医学病例信息管理系统.以MS SQL Server 2000建立数据库,以Visual C++ 6.0开发基于Client/Server模式的客户端应用程序,以实现对病例资料及相关样品信息的录入、浏览、查询选择、分级统计、样品管理及自动生成病例信息综合文档等功能,从而达到按科研所需对群体病例资料及其样品的管理.该系统有助于提高临床科研工作的效率、质量及管理水平,为医学病例及样品信息的综合动态管理提供了新的技术平台.
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原子力显微术中的生物样品自组装方法
原子力显微成像技术作为研究蛋白质、核酸、细胞等生物样品的有效手段,已被广泛应用于生命科学的各个领域.原子力显微成像前,在基底上成功地制备生物样品自组装层是其研究能否顺利进行的首要前提.本文系统地综述了原子力显微镜(AFM)基底的选择以及蛋白质、脂质膜、DNA、细胞等生物样品成像前常用的自组装方法,着重阐述样品与基底的固定方式,并展望了其发展趋势.
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HPLC测定大鼠血浆中的莽草酸
目的 采用HPLC法测定大鼠血浆中莽草酸的含量.方法 大鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用HPLC法测定血浆中莽草酸的含量.色谱柱为WondaCract ODS-2 (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(3 mmol·L-1四庚基溴化铵)-5mmol· L-1磷酸(用1 mol· L-1 NaOH调pH5.8)(60∶40),检测波长220 nm,流速0.8 mL· min-1,柱温35℃.结果 血浆中莽草酸的线性范围为0.525 ~ 10.50 μg· mL-(r=0.9998),平均回收率为97.7% ~ 101.6%,日内、日间RSD均<15%.结论 所用方法简便、灵敏、结果准确,适用于测定生物样品中莽草酸的浓度.
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RP-HPLC测定犬血浆中的喹诺酮类先导化合物14a
目的 采用HPLC法测定犬血浆中喹诺酮类先导化合物14a的浓度.方法 以莫西沙星作为内标,血浆样品经二氯甲烷萃取后,采用HPLC法进行测定,色谱柱为Welchrom DOS-C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(22∶78,磷酸调pH2.6),检测波长273 nm,流速1 mL· min-1.结果 血浆中14a的线性范围为0.5~10.0 μg·mL-1(r =0.9989),平均提取回收率为98.27%,日内RSD≤5.10%,日间RSD< 15%.结论 所用方法的专属性强、准确、灵敏、简便,适用于测定生物样品中14a的浓度.
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HPLC测定醋酸地塞米松在生物样品中的含量
目的 建立测定小鼠血浆、心、肝、脾、肺、肾、脑中醋酸地塞米松含量的方法.方法 色谱柱为Shimpack C18柱,流动相为甲醇-水(65:35),流速为1 ml·min-1,内标为甲睾酮,检测波长为240 nm.结果 在生物样品中,醋酸地塞米松浓度1~100 μg·g-1与峰面积比呈良好的线性关系,低检测限为40 ng·g-1;方法同收率和RSD值均符合生物样品测定的要求.结论 所建方法的线性、精密度、回收率均良好,且简便灵敏,可用于醋酸地塞米松制剂的药物动力学研究.
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HPLC测定人血浆中伊曲康唑的浓度
目的建立测定人血浆中伊曲康唑的浓度的方法.方法采用HPLC法.血浆样品以正庚烷-异戊醇(98:2)萃取.以Dikma C18(4.6 mm× 150 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-水(65:35)为流动相,在263 nm处检测.结果血浆ITR线性范围为5~400ng·ml-1,方法回收率为106.1%~109.8%,日内、日间RSD分别为5.5%~7.8%、6.6%~11.1%.结论所用方法简便,准确可靠,适用于伊曲康唑人体药动学中血药浓度测定.
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生物样品中微量元素测定全程质量控制
目的:建立生物样品中微量元素测定的全程质量控制的方法.方法:应用统计学知识及管理学知识制定分析前、分析中及分析后三个阶段的质量控制措施.结果:制定了质量控制措施及绘制了室内质控图.结论:该全程质量控制措施切实可行,体现了统计学及现代实验室管理学观点.