首页 > 文献资料
-
益气通络解毒汤对博来霉素致大鼠肺纤维化模型肺内Ⅰ型胶原蛋白的表达影响
以中医药治疗特发性肺纤维化(IPF)的实验研究方兴未艾,但在实验方法上,都是从复制模型开始即予以治疗.以往的实验证实[1],IPF复制成功后,沉积的基质蛋白主要为Ⅰ型胶原.本实验在肺纤维化模型复制成功之后再行治疗,观察湖北中医学院邱幸凡教授经验方益气通络解毒汤对IPF大鼠模型肺内Ⅰ型胶原蛋白的表达影响,现介绍如下.
-
异槲皮苷对成骨细胞分化及HDAC1和Runx2表达的影响
目的:探讨异槲皮苷对成骨细胞分化及对HDAC1和Runx2表达情况的影响.方法:不同浓度梯度异槲皮苷(1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5 mol/L)连续处理MC3T3-E1细胞系,在作用第3天,借助qRT-PCR技术对MC3T3-E1细胞系中Ⅰ型胶原蛋白(type 1 collagen,Col 1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达进行检测,并对骨细胞分化关键酶ALP的活性和骨钙的形成进行检测,以评估成骨细胞的分化程度.通过qRT-PCR技术检测MC3T3-E1细胞中HDAC1及Runx2的表达水平.结果:异槲皮苷能促进成骨细胞MC3T3-E1中Col 1,ALP及OPN的上调表达,且差异具有统计学意义(P＜0.05),并且呈现出一定的剂量效应.异槲皮苷诱导时,成骨细胞分化过程中ALP活性显著增强,骨钙形成明显增加.在1×10-6mol/L异槲皮苷作用下,成骨细胞系中HDAC1 mRNA和蛋白水平均显著下调(P＜0.05),而Runx2 mRNA和蛋白水平均明显上调(P＜0.05).结论:异槲皮苷可能通过下调HDAC1表达、促进Runx2表达,有效地促进成骨细胞分化,为异槲皮苷应用于治疗骨质损伤类疾病提供新的依据.
-
曲尼司特抑制病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的作用
目的 探讨曲尼司特对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌纤维化的作用.方法 72只BALB/C小鼠完全随机分为对照组、模型组和干预组(n=24),对照组小鼠腹腔内注射Eagle's培养液,模型组和干预组腹腔注射科萨奇病毒B3建立VMC模型,干预组建模后予曲尼司特灌胃(每日200 mg/kg),维持给药到取材前一天.分别在造模后7、14、28 d三个时间点每组各取8只小鼠心肌组织,行苏木精-伊红染色和Masson染色观察病理改变;甲苯胺蓝和硫瑾染色观察肥大细胞(MC)计数;RT-PCR及Westem blot检测结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)的mRNA及蛋白表达量;并分别对CTGF mRNA与MC计数和Col Ⅰ mRNA的表达进行相关性分析.结果 各时间点模型组心肌病理积分及胶原容积分数高于对照组,曲尼司特干预后降低(P＜0.05).模型组MC计数、CTGF和Col Ⅰ mRNA及蛋白的表达高于对照组,曲尼司特干预后降低,但仍高于对照组(P＜0.05).模型组7d、14d时心肌MC计数与CTGF mRNA呈正相关(r=0.439,P=0.049);模型组7d、14d时心肌组织CTGF mRNA与Col Ⅰ mRNA呈正相关(r=0.646,P=0.007),28 d时亦呈正相关(r=0.326,P=0.031).结论曲尼司特可能通过抑制MC的聚集、降低CTGF和Col Ⅰ的表达,减轻VMC小鼠心肌纤维化效应.
-
加味生脉补心丹对防治2型糖尿病大鼠心肌损害的影响
目的 观察加味生脉补心丹对2型糖尿病大鼠模型血糖及心肌组织结构的影响,初步探讨加味生脉补心丹对耱尿病心肌纤维化和肥大的防治作用.方法 40只SD大鼠随机分为空白组7只,实验组33只,通过高糖高脂饲料+小剂量STZ构建2型糖尿病大鼠模型.将成模后的实验组大鼠随机分为模型组、补心丹(BXD)组和罗格列酮(RSG)组各11只,BXD组以浓缩后加味生脉补心丹汤剂灌胃;RSG组按照罗格列酮钠溶液灌胃.给药8周后测各组大鼠空腹血糖,并处死取材,光镜观察心肌组织变化,Masson染色观察纤维沉积情况,免疫组化法观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和沉默信息调节因子3(Sirt3)蛋白的表达.结果 成模时各实验组空腹血糖(FPG)均较空白组升高(P＜0.05),造模成功.治疗完成时,RSG组、BXD组FPG均较模型组下降(P＜0.05),RSG组FPG较BXD组更低(P＜0.05).模型组心肌组织破坏严重,胶原纤维含量增多,RSG组和BXD组心肌组织破坏程度较轻,胶原纤维含量较少.模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原和Sirt3的表达明显高于其他组(P＜0.05).BXD组Ⅲ型胶原的表达明显高于空白组(P＜0.05).RSG组Sirt3的表达显著高于BXD组(P＜0.05).结论 加味生脉补心丹能够明显降低2型糖尿病大鼠的血糖,并能够明显减轻心肌纤维化、肥大的程度,延缓糖尿病所致心肌病的进程.
-
吡非尼酮对转化生长因子-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的影响
目的 探讨吡非尼酮(PFD)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的乳鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)合成的影响,探讨其抗纤维化作用机制.方法 ①体外培养CFB,不同浓度(0、100、200、400、800和1 600μg/ml)PFD加入CFB培养液中24、48和72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测CFB增殖,筛选PFD佳作用浓度范围和作用时间;②根据以上实验结果,选用400和1 600μg/ml PFD加入CFB培养液中48 h作为观察浓度和干预时间,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测PFD对TGF-β1诱导CFB增殖、Col Ⅰ mRNA和Col Ⅰ表达的影响.结果 与对照组比较,400和1 600μg/ml PFD能显著抑制TGF-β1诱导CFB增殖、Col ⅠmRNA和Col Ⅰ表达,400μg/ml即能起显著抑制作用.结论 PFD对CFB增殖和胶原蛋白合成有抑制作用,PFD的抗纤维化作用与其有关.
-
ADAMTS-1对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响
目的 探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白(COL1)表达的影响及可能的机制.方法 应用细胞培养技术进行小鼠肺成纤维细胞培养,利用ADAMTS-1为刺激因子,将培养的细胞分为空白组、低、中、高浓度组,应用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察COL1 mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA在各组中的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blotting)观察各组细胞COL1、TGF-β1的变化.结果 与空白组相比,低浓度组、中浓度组、高浓度组的COL1、TGF-β1表达水平下降,其中高浓度组表达水平低(P＜0.05).结论 ADAMTS-1能降低COL1的表达,抑制TGF-β1是其抗纤维化作用的可能潜在机制.
-
硫化氢通过p38MAPK和TGF-β1影响糖尿病小鼠心肌纤维化的研究
目的 探讨硫化氢(H2S)对糖尿病小鼠心肌组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)表达的影响,以及对糖尿病心肌纤维化的保护作用.方法 18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病对照组(ALX组)、H2S治疗组(ALX+H2S组),每组6只.采用四氧嘧啶(ALX) 200 mg/kg腹腔注射复制糖尿病小鼠模型;模型复制成功后,NC组和ALX组每天自由饮用自来水;ALX+H2S组自由饮用浓度为90μmol/L的NaHS(H2S供体)溶液.8周后取材,监测空腹血糖、血脂;苏木精-伊红染色法观察心肌组织形态学变化;采用Western blot检测p-p38MAPK、TGF-β1及Col-lagen Ⅰ蛋白表达;实时定量荧光聚合酶链反应检测p38MAPK和TGF-β1mRNA的表达.结果 与NC组比较,ALX组血糖、血脂升高(P＜0.05),心肌组织胶原表达量增加,心肌间质出现明显纤维化,p-p38MAPK、TGF-β 1及CoHagen Ⅰ蛋白表达增高(P＜0.05),p38MAPK和TGF-β 1 mRNA表达增加(P＜0.05);糖尿病小鼠经H2S干预,血糖、血脂改善(P＜0.05),心肌间质胶原纤维明显减少,p-p38MAPK、TGF-β1及CoHagen Ⅰ蛋白表达下降(P＜0.05),p38MAPK和TGF-β1mRNA表达减少(P＜0.05).结论 H2S可改善糖尿病小鼠血糖、血脂及心肌纤维化,可能与调节p38MAPK和TGF-β1的表达有关.
-
NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白
目的:研究NADPH氧化酶4(NOX-4)调控PI3K信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的作用及分子机制.方法:体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen 家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class Ⅰ催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓(DPI)预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后 collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class Ⅰ催化亚基表达和PI3K信号通路活化.结果:TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和colla-gen Ⅰ的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class Ⅰ催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化. NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen Ⅰ表达升高;抑制NOX-4 并不影响TGF-β1 诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度.结论:NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen Ⅰ的分子机制. TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen Ⅰ的表达中发挥了调控作用.
-
外源性VEGF对异位兔同种异体脱钙骨骨活性的影响
目的 探讨外源性血管内皮生长因子(VEGF)对异位兔同种异体脱钙骨骨活性的影响.方法 选用成年中国白兔140只,雌雄不限,取20只作为供体制备同种异体脱钙骨,其余按随机数字表分为实验组(同种异体脱钙骨加VEGF组)60只、对照组(同种异体脱钙骨组)60只.实验组将制备好的1.5 cm长同种异体脱钙胫骨段置于兔右大腿股直肌与股内侧肌间隙近隐动脉处,并用2根0.8 mm克氏针将其固定于股骨上,于其附近皮下植入一枚胶囊渗透压泵,泵内载有浓度为0.5 μg/ml的VEGF溶液200μl.对照组取等长同种异体脱钙骨同法置于兔右大腿相应部位.每组分别于术后0、2、4、8、10、12周处死10只白兔,通过大体标本观察、HE染色观察及I型胶蛋白荧光强度检测,分析判断两组同种异体脱钙骨骨活化程度.结果 实验组同种异体脱钙骨逐渐被结缔组织膜包裹,其表面出现大小不同的陷窝,并逐渐增多且加深,对照组陷窝相对少而浅.实验组和对照组的Ⅰ型胶原蛋白荧光强度分别在术后8周(47.57±3.50)、10周(45.07±6.02)达到峰值,两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 兔同种异体脱钙骨异位于血运丰富的肌间隙内经过10周可转变为活化骨,而施加外源性VEGF后,同种异体脱钙骨8周便可转变为活化骨,骨活化进程明显加快.证实了外源性VEGF可明显促进异位兔同种异体脱钙骨骨活化进程.
-
巨噬细胞介导的炎性微环境对牙周膜细胞增殖和成骨分化的影响
目的 研究巨噬细胞介导的炎性微环境对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)增殖和成骨分化的影响.方法 通过1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活RAW264.7巨噬细胞得到含炎性因子的条件培养基模拟体内炎性微环境,原代分离培养PDLCs,分别在条件培养基(LPS-CM组),普通培养基(Ctrl组)下培养PDLCs,MTT法检测PDLCs的增殖情况;加入成骨诱导剂共培养3d、7d,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性,Real-time PCR检测Runt相关基因2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL-Ⅰ)mRNA的表达,Western Blot检测RUNX2、OCN、COL-Ⅰ蛋白表达水平;成骨诱导14 d茜素红染色观察钙化结节.分析比较2组PDLCs增殖和成骨分化的差异.结果 MTT法检测,LPS-CM组PDLCs的OD值低于Ctrl组(P＜0.05);相同时间点LPS-CM组的RUNX2、OCN、COL-Ⅰ基因的mRNA表达均低于Ctrl组(P＜0.05),蛋白表达,除了OCN 3 d两组比较无统计学意义(t=2.75,P=0.056)外,其余显示相应的RUNX2、OCN、COL-Ⅰ的蛋白表达量LPS-CM组低于Ctrl组(P＜ 0.05);ALP活性检测,LPS-CM组ALP活性高于Ctrl组,分别是3d时1.58倍(t=5.91,P=0.030);7d时为1.29倍(t=6.01,P=0.046);14d钙化结节LPS-CM组少于Ctrl组,差异有统计学意义(t=8.63,P=0.048).结论 巨噬细胞介导的炎性微环境抑制PDLCs的增殖与成骨分化.
-
蚓激酶对UUO模型大鼠肾间质纤维化的影响
目的 研究蚓激酶对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎术的方法制备UUO大鼠模型.大鼠随机分为假手术组,模型组,蚓激酶低、中、高剂量组(0.9×105,1.8×105,3.6×105 U·kg-1),灌胃给药,连续14 d.生化指标检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学变化;采用免疫组化法检测肾脏组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠的Scr、BUN含量有不同程度升高,蚓激酶各给药组的Scr、BUN含量有不同程度降低,但各组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠梗阻侧肾脏组织部分肾小管上皮细胞空泡变性,部分管腔扩张或萎缩坏死,可见炎性细胞浸润、成纤维细胞增生和RIF,蚓激酶不同剂量干预治疗后,上皮细胞变形萎缩、炎性细胞浸润及间质纤维化程度均明显改善.与假手术组比较,模型组的TGF-β1、α-SMA及Col-Ⅰ阳性表达水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,蚓激酶各剂量组的TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ阳性表达水平明显降低(P＜0.05).结论 蚓激酶具有抗RIF的作用,可能与其抑制肾脏组织TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的表达有关.
-
罗勒多糖对TGF-β诱导A549细胞上皮间质转化的抑制作用研究
目的 研究罗勒多糖抑制转化生长因子-β(TGF-β)诱导的A549细胞上皮间质转化的作用,揭示罗勒多糖可能治疗特发性肺纤维化的机制.方法 A549细胞分为正常对照组、 模型组(TGF-β5 ng·mL-1)、 罗勒多糖组(TGF-β5 ng·mL-1+罗勒多糖200μg·mL-1),观察各组细胞形态学变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组Ⅰ型胶原蛋白(colⅠ)和上皮间质转化标志物表达;ELISA法检测各组细胞羟脯氨酸(HYP)浓度.结果与正常对照组比较,模型组细胞成纤维样变;与模型组比较,罗勒多糖组细胞维持上皮细胞形态.与正常对照组比较,模型组colⅠ基因表达明显上调(P<0.01),E-cadherin基因表达下调(P<0.01),Vimentin、 α-SMA基因表达上调(P<0.05);与模型组相比,罗勒多糖组E-cadherin基因表达上调(P<0.05),Vimentin、 α-SMA、colⅠ基因表达下调(P<0.05).与正常对照组比较,模型组HYP含量增加(P<0.05);与模型组比较,罗勒多糖组HYP含量减少(P<0.05).结论 罗勒多糖能抑制 TGF-β 诱导的 A549 细胞上皮间质转化, 其作用机制与下调colⅠ、 Vimentin、 α-SMA 基因表达, 上调 E-cadherin 基因表达, 降低 HYP 含量有关, 罗勒多糖可用于治疗特发性肺纤维化.
-
补骨脂素对人皮肤成纤维细胞衰老相关基因的调控作用
目的 研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响.方法 以雌二醇为阳性对照,采用MTF法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol· L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响.结果 补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使Col Ⅰ、ColⅢ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低.结论 补骨脂素具有促ESF-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用.
-
生物瓣材料体外人工内皮化的实验研究
目的:探索一种有效的生物瓣材料内皮化方法,延长生物瓣的使用寿命.方法:新鲜牛心包片分三组处理:Ⅰ组单纯戊二醛(GA)处理;Ⅱ组GA+2,3-丁二醇改性;Ⅲ组GA+2,3-丁二醇改性+Ⅰ型胶原蛋白预覆;空白玻片作对照(Ⅳ组).各组体外种植内皮细胞,计算种植后第1、3、5、8 d的活细胞数.种植后第8 d行第Ⅷ因子检测和扫描电镜(SEM)观察.结果:Ⅲ组牛心包片表面细胞生长为活跃,在第5、8 d的细胞数明显多于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05),细胞与基质间有微丝连接形成.结论:2,3-丁二醇改性和预覆Ⅰ型胶原蛋白是生物瓣材料体外人工内皮化的有效和可行的方法,具有潜在的临床应用前景.
-
晚孕期阴道壁结缔组织Ⅰ型胶原和TIMP-1表达分析
目的:探讨妊娠晚期妇女阴道壁结缔组织中Ⅰ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)mRNA表达改变及二者间的相关性.方法:选取20例无妊娠合并症的足月顺产产妇为晚期妊娠组.另选取未绝经、无盆底功能障碍,因患子宫肌瘤或子宫腺肌症行全子宫切术患者15例为对照组,应用免疫组化和荧光定量PCR法检测标本中Ⅰ型胶原和TIMP-1 mRNA表达水平.结果:晚期妊娠组Ⅰ型胶原蛋白和TIMP-1 mRNA表达水平均显著低于对照组(P＜0.05).结论:妊娠、分娩下调TIMP-1基因转录水平表达,促进胶原蛋白分解增加,盆底支持功能减弱,可能是妊娠晚期盆底松弛及产后盆底功能障碍的重要发病机制之一,也是妊娠、分娩作为PFD的独立危险因素的重要原因.
-
低声压级水平次声对大鼠阴道壁Ⅰ型胶原蛋白的影响
目的 研究低声压级水平次声对大鼠阴道壁Ⅰ型胶原蛋白的影响.方法 将30只雌性大鼠随机分出8只列入空白对照组(A组),剩下的22只与11只雄性大鼠按雌雄2:1进行合笼,1个月后得妊娠大鼠16只.将此16只妊娠大鼠建立产伤模型后随机分为两组:一组不做任何处理即阴性对照组(B组),一组进行低声压级水平次声处理即实验组(C组).C组按30 min/次、2次/d进行处理.20 d后,麻醉所有SD大鼠获取阴道后壁,然后进行免疫组化检测Ⅰ型胶原蛋白.结果 A组大鼠Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于B组(P<0.05);C组Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于B组(P<0.05),但明显低于A组.结论 低声压级水平次声能显著提高产伤大鼠阴道壁Ⅰ型胶原蛋白的含量;妊娠、分娩及产伤降低了大鼠阴道壁的Ⅰ型胶原蛋白水平.
-
丁苯酞延缓小鼠单侧输尿管梗阻模型纤维化的机制研究
目的：探讨丁苯酞延缓梗阻性肾病小鼠肾脏纤维化的可能机制。方法：雄性小鼠分为假手术组（Sham）、模型组（UUO）、对照组（ACEI）及治疗组（NBP）。对照组、治疗组分别给予贝那普利、丁苯酞灌胃。而假手术组、模型组则给予生理盐水灌胃。各组分别于术后第3、7、14天处死，取梗阻侧肾组织做免疫组化染色以及western blot。结果：（1）Nrf-2在正常肾组织中仅散在表达于肾小管上皮细胞中，模型组术后第3、7、14天小鼠肾组织中Nrf-2表达均增加，治疗组小鼠肾组织Nrf-2随着输尿管梗阻时间的延长，Nrf-2表达逐渐增强，至14 d时表达达到顶峰，呈时间依赖性。（2）与模型组相比，丁苯酞治疗组Nrf-2、γ-GCS明显升高、Ⅰ型胶原蛋白表达明显减少（ P ＜0．05）， Nrf-2、γ-GCS在第7、14天表达均强于贝那普利组（P ＜0．05）。相关性分析显示：Nrf-2与γ-GCS呈正相关（r ＝0．930）；与Ⅰ型胶原蛋白呈负相关（r ＝－0．859）。结论：丁苯酞可能通过激活Nrf-2通路，上调γ-GCS的表达，缓解氧化应激对肾间质的损伤，延缓肾间质纤维化进展。
-
单剂量顺铂对大鼠肾间质纤维化指标的影响
目的:探讨单剂量顺铂对大鼠肾间质纤维化指标的影响.方法:将72只SD大鼠随机分为正常组和顺铂组,每组36只.正常组与顺铂组大鼠于实验第1天分别单次腹腔注射等体积生理盐水、顺铂5 mg/kg,于实验第8、14、30、50、60、90天分别处死6只大鼠,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,检测肾小管间质损伤程度、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达情况.结果:与正常组比较,顺铂组大鼠各时间点血清BUN和Cr水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-SMA、ColⅠ、TGF-β1表达水平均明显升高(P<0. 05或P<0. 01).在顺铂组中,在第8~90天内,大鼠血清BUN水平无明显变化,血清Cr水平、肾小管间质损伤指数、肾小管间质纤维化相对面积和肾组织中α-SMA、ColⅠ、TGF-β1表达水平均呈先升高后降低趋势.结论:临床剂量的顺铂单次给药可诱导大鼠肾间质纤维化,其机制可能与其肾组织中TGF-β1表达有关.
-
成骨生长肽对大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响
目的:研究成骨生长肽OGP在体外对大鼠颅盖骨成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响.方法:在体外培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞中加入浓度为10-11～10-7mol/L的OGP,处理7天后收集细胞爬片,采用SABC法行细胞免疫化学染色,通过图像分析系统观察不同OGP作用后,成骨细胞胶原蛋白的变化情况.结果:OGP作用于成骨细胞后,Ⅰ型胶原蛋白表达明显增强,其中OGP浓度为10-9mol/L时促进作用为明显.结论:OGP可促进成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达.
-
趋化因子受体CXCR7在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化中的作用
目的 检测并研究人CXC趋化因子受体7(CXCR7)在博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化中的表达及其作用.方法 通过气管内滴注博莱霉素方法建立35只SD大鼠肺纤维化模型,利用qRT-PCR和免疫印迹的方法检测肺脏组织中CXCR7 mRNA和蛋白在处理0d、5d、10d、15d、20 d、25 d、30 d后的表达变化.将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抑制剂组,对照组气管滴注生理盐水,抑制剂组滴注博莱霉素后静脉注射CXCR7特异性抑制剂CCX771.利用迪夫快速染色计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞的数量,同时利用试剂盒检测肺脏羟脯氨酸(HYP)的含量以及免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达,并制作病理切片,HE染色观察大鼠肺纤维化.结果 博莱霉素处理后,大鼠肺脏CXCR7mRNA和蛋白表达水平显著增高,并于处理20 d后达高值.与对照组相比,模型组和抑制剂组大鼠体重显著降低、BALF细胞总数增高、淋巴细胞比例增加、肺脏HYP含量和Ⅰ型胶原蛋白水平升高、肺纤维化病变明显.与模型组相比,抑制剂组体重恢复明显、BALF细胞总数降低、淋巴细胞比例减少、肺脏HYP含量和Ⅰ型胶原蛋白水平降低、肺纤维化程度减轻.结论 博莱霉素能诱导大鼠肺脏CXCR7的表达,抑制CXCR7活性可延缓肺纤维化的发展.
